SZPI Požadavky kladené na úřední laboratoře v oblasti kontroly potravin Petr Cuhra (VŠCHT, 1.2.2013) Státní zemědělská a potravinářská inspekce Za Opravnou 6, Praha 5, petr.cuhra@szpi.gov.cz www.szpi.gov.cz
Základní dokumenty NAŘÍZENÍ EVROPSKÉHO PARLAMENTU A RADY (ES) č. 882/2004 ze dne 29. dubna 2004 o úředních kontrolách za účelem ověření dodržování právních předpisů týkajících se krmiv a potravin a pravidel o zdraví zvířat a dobrých životních podmínkách zvířat (Článek 11 a 12, Příloha III) Nařízení: 1. specifikuje požadavky na laboratoře zapojené do úřední kontroly 2. specifikuje požadavky na metody používané v rámci úřední kontroly 3. dává právo příslušnému orgánu jmenovat laboratoře, které mohou provádět analýzy u vzorků odebraných při úředních kontrolách
Požadavky na laboratoře
Požadavky na metody
Právní předpisy týkající se metod a kvality dat NAŘÍZENÍ KOMISE (ES) č. 1883/2006 ze dne 19. prosince 2006, kterým se stanoví metody odběru vzorků a analýzy pro úřední kontrolu množství dioxinů a PCB s dioxinovým efektem v určitých potravinách NAŘÍZENÍ KOMISE (ES) č. 333/2007 ze dne 28. března 2007, kterým se stanoví metody odběru vzorků a metody analýzy pro úřední kontrolu obsahu olova, kadmia, rtuti, anorganického cínu, 3-MCPD a benzo[a]pyrenu v potravinách NAŘÍZENÍ KOMISE (ES) č. 401/2006 ze dne 23. února 2006, kterým se stanoví metody odběru vzorků a metody analýzy pro úřední kontrolu množství mykotoxinů v potravinách
Právní předpisy týkající se metod a kvality dat Závazné směrnice (guidance) pro validaci metod a vnitřní řízení kvality pro analýzu reziduí pesticidů v potravinách a krmivech METHOD VALIDATION AND QUALITY CONTROL PROCEDURES FOR PESTICIDE RESIDUES ANALYSIS IN FOOD AND FEED (Document No. SANCO/12495/2011)
Požadavky na úřední laboratoře - rezidua pesticidů Dokument SANCO/12495/2011 obsahuje specifické a velmi konkrétní požadavky na odběr, uchovávání a zpracování vzorků standardy, referenční materiály, kalibrační roztoky extrakce a příprava vzorků kontaminace a interference kalibrace a chromatografie (integrace) validace metod a parametry metod, výtěžnost zkoušení způsobilosti a analýza referenčních materiálů konfirmace, uvádění a vyjádření výsledků
Výběr laboratoří pro úřední kontrolu
Audity laboratoří - slouží k ověření / posouzení způsobilosti laboratoře k provádění analýz pro úřední kontrolu (posouzení zdroje metody, meze stanovitelnosti, referenčních materiálů, účasti ve zkoušení způsobilosti, vnitřního řízení kvality, validace metod, naplnění požadavků nařízení.) - slouží k ověření toho, jestli používané metody jsou vhodné pro zamýšlené použití (z hlediska detekčních limitů, preciznosti, pravdivosti, nejistot atd.) a odpovídají platným předpisům
Některá zjištění z auditů Volba metody Kalibrace Preciznost (opakovatelnost a reprodukovatelnost) Uvádění LOQ na protokolech Nejistoty Validace metod Interní řízení kvality / regulační diagramy
Volba metody Laboratoře používají nevhodné metody nevhodně / neúplně stanovovaný analyt (např. metoda pro stanovení amitrazu zahrnuje pouze mateřskou látku x neodpovídá definici reziduí podle MRL ( Amitraz (amitraz včetně metabolitů obsahujících 2,4-dimethylanilinovou skupinu vyjádřených jako amitraz ) minimálně 3 další sloučeniny. laboratoře používají nenormalizované metody i tam, kde existují normalizované nebo legislativně dané
Některá zjištění z auditů Volba metody Kalibrace Preciznost (opakovatelnost a reprodukovatelnost) Uvádění LOQ na protokolech Nejistoty Validace metod Interní řízení kvality / regulační diagramy
Kalibrace Často nejsou dodržena základní pravidla pro kalibraci laboratoř měří mimo rozsah kalibrace 1. u jednobodové kalibrace - odezva měřené veličiny by měla být co nejblíže kalibračnímu bodu, maximálně ± 50% od kalibračního bodu (u nevyhovujících nálezů ± 20%) 2. u vícebodové kalibrace odezva měřené veličiny by měla být mezi prvním a posledním bodem
1000 900 y = 0,8878x + 25,51 R² = 0,9966 800 700 600 500 Řady1 Lineární (Řady1) 400 300 200 100 0 0 200 400 600 800 1000 1200
Kalibrace nejnižší kalibrační bod neodpovídá mezi stanovitelnosti (LOQ) uváděné na protokolech (většinou z validace) o o o např. v rámci validace je odhadnuta mez stanovitelnosti 5 mg/kg, avšak při běžném měření kalibruje laboratoř od 50 mg/kg x na protokolech je přesto uváděno u negativních nálezů <5 mg/kg ideální situace: první kalibrační bod odpovídá mezi stanovitelnosti v případě, že se výsledek uvádí jako méně než (např. <5 mg/kg), měl by vždy 1. kalibrační bod být jako hodnota za méně než (tj. 5 mg/kg) laboratoř nepoužívá matricovou kalibraci tam, kde je to potřeba
Některá zjištění z auditů Volba metody Kalibrace Preciznost (opakovatelnost a reprodukovatelnost) Uvádění LOQ na protokolech Nejistoty Validace metod Interní řízení kvality / regulační diagramy
Nejistoty 1. Často jsou nesprávně odhadnuté a podhodnocené 2. Zahrnují pouze náhodnou (vnitrolaboratorní) složku nejistoty 3. Některé další významné složky bývají opomíjeny (nejčastěji systematická složka )
Některá zjištění z auditů Volba metody Kalibrace Preciznost (opakovatelnost a reprodukovatelnost) Uvádění LOQ na protokolech Nejistoty Validace metod Interní řízení kvality / regulační diagramy
Validace metod Laboratoř má metodu validovanou, avšak na nevhodných hladinách (případně pouze na jedné hladině), které neodpovídají reálným vzorkům /limitům a/nebo na nevhodných matricích (matrici) nikoli pro všechny analyty (např. jen pro 50%), které uvádí na protokolech / které jsou v příloze k osvědčení o akreditaci (důvod: moc pracné.) nikoli pro všechny požadované výkonnostní parametry
Interní řízení kvality Laboratoř neprovádí dostatečné kontrolní / konfirmační zkoušky, případně s nedostatečnou frekvencí * provádí kontrolní zkoušky na nevhodných hladinách a matricích vede regulační diagramy tak, že nezahrnují celý pracovní postup (např. postihují jen kalibraci.. ) žádným způsobem nevyhodnocuje výsledky regulačních diagramů * Minimální požadavek: v sérii alespoň 1 vzorek pro kontrolu výtěžnosti na hladině LCL / limitu + vedení RD
Závěr Splnit požadavky kladné na úřední laboratoře jsou poměrně náročné požadavky - jsou dány právními předpisy a - zpravidla výrazně převyšují požadavky vyplývající z akreditace