5. Manuál pro odběry primárních vzorků 5.1. Objednávání vyšetření 5.1.1. Požadavkové listy - žádanky Pro objednávání vyšetření v laboratořích společnosti RNDr. Zdeněk Čecháček jsou k dispozici následující typy požadavkových listů - žádanek: - žádanka o imunoanalytická vyšetření (modrá) - žádanka o HPLC vyšetření (černá) - žádanka o laboratorní vyšetření těhotných (fialová) - žádanka o sérologická vyšetření a PCR (červená) Použití jiných forem objednávání vyšetření je přípustné, pokud splňují následující kriteria: - je v nich zřetelně specifikováno, že vyšetření se mají provést v laboratořích RNDr. Z. Čecháček s.r.o. - jsou v nich vyplněny všechny povinné údaje dle následujícího článku (5.1.2.) V případě jakýchkoliv nejasností kontaktujte pracovníky laboratoří. 5.1.2. Údaje vyplňované v žádance: Povinné - kód pojišťovny pojištěnce (pacienta) - číslo pojištěnce - pacienta (rodné číslo, číslo pojistky u cizinců) - příjmení, jméno pacienta, příp. titul - základní a další diagnózy pacienta - datum a čas odběru - základní identifikace objednavatele: IČZ a odbornost - razítko a podpis objednatele - kontakt na objednavatele, tj. adresa, telefon nebo jiné spojení, pokud není uveden na razítku - požadovaná vyšetření (vázaná k dodanému vzorku nebo k dodaným vzorkům) - specifikace materiálu, je-li na žádance požadována Doplňující: - další údaje o pacientovi související s vyšetřením (léčba, datum prvních příznaků onemocnění apod.) - informace, jestli jsou vyšetření požadována u ambulantního nebo hospitalizovaného pacienta - věk v rocích a pohlaví pacienta v situacích, pokud nelze určit jednoznačně z čísla pojištěnce - objem vzorku, v případě, že je k vyšetření požadován - specifikace statimových vyšetření: označení žádanky nebo vyšetření nápisem STATIM nebo ST, nejlépe červeně - specifikace materiálu, pokud je do laboratoře zasílán sekundární vzorek. 5.1.3. Označování vzorků Vzorky musí být označeny tak, aby během jejich příjmu v laboratořích mohly být jednoznačně identifikovány k určité žádance. Údaje na štítku vzorku musí obsahovat: - příjmení a jméno pacienta, - rodné číslo nebo datum narození nebo alespoň ročník pacienta, - doplňující údaj, pokud je současně posíláno do laboratoře několik odběrů jednoho pacienta současně (datum odběru, pořadové číslo odběru apod.), potom stejný údaj musí být uveden i na žádance. 5.1.4. Ústní (telefonické) objednávání vyšetření Ze vzorků dodaných do laboratoře lze dodatečně, např. na základě telefonického doobjednání lékařem, provádět vyšetření za dodržení těchto pravidel: a) dodatečná vyšetření lze telefonicky doobjednat, ale budou provedena až po doručení dodatečného požadavkového listu do laboratoře, b) dodatečná vyšetření nebudou provedena, pokud není možné zajistit korektní dodržení podmínek pro preanalytickou fázi u analytů s určitým omezením daným jejich stabilitou v biologickém materiálu. Vzorky séra (plazmy) jsou v laboratoři standardně uchovávány po dobu 1 měsíce, pro doobjednání resp. provedení kontrolních vyšetření. Vzorky po stanovení HIV a hepatitid jsou uchovávány po dobu 6 měsíců, vzorky po vyšetření skríninku vrozených vad jsou uchovávány po dobu 6 měsíců. Platí od: 1. 8. 2014 18 DLP2-8/2014
5.2. Odběrové materiály V laboratořích RNDr. Zdeněk Čecháček je akceptován jakýkoliv odběrový materiál, který je v souladu s požadavky na odběrový materiál resp. typ vzorku pro objednávaná vyšetření. Nicméně klientům laboratoře je poskytován na vyžádání následující odběrový materiál: 5.2.1. Odběrové soupravy srážlivá 1) Odběrový systém Vacutainer Zkumavka Vacutainer serum 6 ml, 100 x 13 mm, červený uzávěr Jehla Vacutainer 21Gx38 mm, zelená 2) Odběrový systém Sarstedt S-Monovette 4,9 ml Z S-Monovette 7,5 ml Z S-Monovette 9,0 ml Z Odběrová jehla Sarstedt 5.2.2. Odběrové soupravy nesrážlivá 1) Odběrový systém Vacutainer Zkumavka Vacutainer K2EDTA 6 ml, 100 x 13 mm, fialový uzávěr Jehla Vacutainer 21Gx38 mm, zelená 2) Odběrový systém Sarstedt S-Monovette 2,6 ml K3E S-Monovette 4,9 ml K3E Odběrová jehla Sarstedt 5.2.3. Odběrové soupravy moč 1) Zkumavka plastová, kónická, žlutý uzávěr Objem 10 ml, 16 x 103 mm 5.2.4. Ostatní odběrový materiál Pokud je na provedení vyšetření zapotřebí jiny odběrový materiál (mikrobiologická vyšetření), kontaktujte nás, prosím telefonicky nebo e-mailem, jeho dodání po konzultaci s laboratoři, která vyšetření provádí zprostředkujeme. 5.3. Obecné zásady pro odběr vzorků 5.3.1. Příprava pacienta A) Odběr na lačno 1) Pacient je poučen, že odpoledne a večer před odběrem má vynechat tučná jídla. 2) Pokud lze vynechat léky, má je pacient vynechat 3 dny před odběrem. Jinak nutno uvést podávané léky na průvodce. 3) Ráno před odběrem nemá trpět žízní. Je vhodné, napije-li se pacient před odběrem 1/4 l neslazeného čaje (vody). Pokud nebude vyšetřována glykémie a pacient nemá diabetes, může si čaj i velmi slabě osladit. 4) Před odběrem by pacient neměl být podroben enormní fyzické zátěži nebo nadměrnému stresu. B) Sběr moče 1) Pacient musí být seznámen s technickým postupem při sběru moče. 2) Během sběru moče je nutné dosáhnout dostatečného objemu moče vhodným a rovnoměrným příjmem tekutin. Za vhodný se považuje takový příjem tekutin, aby se dosáhlo 1500-2000 ml moče u dospělého za 24 hodin. To znamená, že na každých 6 hodin sběru moče (kromě noci) vypije pacient asi 3/4 litru tekutin (voda nebo minerální voda). Platí od: 1. 8. 2014 19 DLP2-8/2014
5.3.2. Zásady pro odběr vzorků žilní krve A) Postup odběru Odběr vzorků se provádí obvyklým způsobem podle použitého odběrového systému, a to tak, aby byl zajištěn dostatečný objem vzorku pro požadovaná vyšetření a nedošlo k znehodnocení vzorku (hemolýza apod.) viz. oddíl Chyby při odběru žilní krve. B) Objem vzorku krve, skladování 1) Průměrná potřeba vzorku pro 1 vyšetření představuje cca 0,5 ml krve (0,2 ml séra resp. plazmy). Při menším počtu objednávaných vyšetření - < 5 je nutné připočítat rezervu cca 1 ml krve (0,5 ml séra resp. plazmy) pro technologické objemy analyzátorů resp. pro alikvotaci. 2) V případě použití zkumavek s přísadami se vždy odebírá plná zkumavka. 3) Primární vzorky se skladují při laboratorní teplotě (18-22ºC) po dobu maximálně 24 hodin tak, aby se zabránilo jejich rozlití, kontaminaci, přímému působení slunečního světla a zdrojů tepla. 4) Při skladování nad 24 hodin je nutné skladovat v souladu s požadavky na preanalytickou fázi objednávaných vyšetření: a) zkumavky se separačním gelem lze skladovat v chladničce, b) v případě ostatních odběrových zkumavek je nutno přenést oddělené sérum resp. plazmu do označených zkumavek, které pak lze uchovávat v chladničce (ne však déle než 72 hodin) nebo v mrazničce. C) Chyby při odběru žilní krve 1) Chyby při přípravě pacienta a) Pacient nebyl nalačno (tzn. že pacient v průběhu 10 hodin nic nejedl, nepil, byl v klidu, před odběrem nekouřil, nepil kávu a alkoholické nápoje). Požité tuky mohou způsobit přítomnost chylomiker v séru nebo v plazmě a ovlivnit výsledky některých vyšetření, případně je zcela znemožnit. b) Pacient nevysadil před odběrem léky, které nejsou naprosto nezbytné. c) Odběr nebyl proveden v optimální dobu mezi 6:00 9:00 ráno. Během dne hodnoty řady vyšetření podléhají diurnálnímu kolísání (rytmu). Proto odběry v jinou dobu než ráno jsou vhodné pouze tam, kde diurnální kolísaní nehraje roli, nebo pokud je stav pacienta natolik závažný, že diurnální kolísání nehraje při rozhodování lékaře žádnou významnou roli (nicméně lékař s ním musí počítat). d) Odběr byl proveden po velké fyzické zátěži, nebo stresu. e) Pacient před odběrem dlouho nepil (možnost ovlivnění výsledků dehydratací). 2) Chyby způsobené nesprávným použitím škrtidla a) Dlouhodobé stažení paže nebo nadměrné cvičení ( pumpování") se zataženou paží před odběrem vede ke změnám poměru tělesných tekutin v zatažené paži. 3) Chyby vedoucí k hemolýze vzorku Hemolýza ovlivňuje většinu biochemických i hematologických vyšetření zejména proto, že řada látek uniká z rozpadlých erytrocytů do séra nebo plazmy, případně tím, že červené zbarvení séra a plazmy interferuje ve vyšetřovacím postupu. Důvody hemolýzy mohou být následující: a) Znečištění jehly nebo pokožky stopami tekutého (nevysušeného) dezinfekčního roztoku. b) Znečištění odběrových nádobek stopami saponátu. c) Použití příliš úzké jehly, kterou se pak násilně nasává. d) Prudké vystříknutí krve ze stříkačky do zkumavky. e) Prudké třepání krve ve zkumavce (např. při nešetrném transportu). f) Uskladnění plné krve v chladničce okamžitě po odběru, zmrznutí vzorku krve. g) Neúměrné prodloužení doby mezi odběrem a separací séra nebo plazmy (dodáním vzorku do laboratoře). h) Použití nesprávné koncentrace protisrážlivého činidla. Platí od: 1. 8. 2014 20 DLP2-8/2014
4) Chyby při adjustaci, skladování a transportu vzorku a) Použití nevhodných zkumavek pro objednávaná vyšetření. b) Použití nesprávného protisrážlivého činidla nebo jeho nesprávné koncentrace. c) Nesprávné označení zkumavky s odebraným materiálem. d) Potřísnění zkumavek s materiálem krví. e) Překročení předepsané doby mezi odběrem a oddělením ního koláče nebo erytrocytů od séra nebo plazmy. f) Vystavení krve teplu, nebo přímému slunečnímu světlu. 5.3.3. Zásady pro odběr vzorků moče A) Sběr moče 1) Sběr moče (obvykle za 24 hodin) vyžaduje srozumitelné poučení pacienta. Obvyklý postup sběru moče se začíná obvykle v 6:00 hodin ráno, kdy se vyšetřovaný pacient vymočí naposledy do záchodu, aby pak močil po dobu následujících 24hodin do sběrové, obvykle plastové nádoby s příslušným stabilizátorem. Dbá na to, aby se vymočil před každou stolicí, aby celkový objem sbírané moče nebyl ochuzován o porce moče uniklé při stolici. Po 24 hodinách se vyšetřovaný vymočí do plastové nádoby naposledy a nestalo-li se tak přesně v 6:00 hodin ráno následujícího dne, poznamená se na žádanku s minutovou přesností doba vymočení (např. v 6:08 hodin). 2) Celý objem sbírané moči dodá pacient v původní sběrové nádobě. Změřený objem s přesností na 10 ml u dospělých a na 1 ml u dětí se zapíše do žádanky, kde se uvede i doba sběru. 3) Do laboratoře se odesílá pouze objem moči potřebný k provedení požadovaných vyšetření, obvykle cca 10 ml. B) Ranní moč 1) Do odběrové nádobky se odebírá střední proud moče po omytí zevního genitálu. 2) Do laboratoře se odesílá vzorek cca 10 ml moče. C) Manipulace se vzorkem moče, skladování 1) Vzorky lze skladovat nejdéle 24 hodin v chladničce. 2) Při delším skladování se vzorky musí. Platí od: 1. 8. 2014 21 DLP2-8/2014
5.4. Specifikace speciální preanalytické fáze pro jednotlivé laboratoře 5.4.1. Imunoanalytická laboratoř Vyšetření) Specifikace Odběrový materiál Typ vzorku Pokyny k odběru Adrenokortikotropní Odebírat do předchlazených nádobek, v v plazmě Plazma EDTA hormon ledové lázni ihned odeslat do laboratoře Moč se sbírá do nádoby s konzervačním činidlem (lze vyžádat v laboratoři): Aldosteron v moči Sbíraná moč Moč - 10 g kyseliny borité (na 1 l moči) Do laboratoře se odesílá vzorek cca 10 ml moče. Aldosteron v plazmě Nutno zaznamenat polohu pacienta - vleže, Plazma EDTA vsedě, vzpřímeně Aldosteron v séru Srážlivá Sérum Nutno zaznamenat polohu pacienta - vleže, vsedě, vzpřímeně Index aldosteron/renin Plazma EDTA Viz aldosteron a renin Anti-mullerian hormon v séru Srážlivá Sérum Do 3 hodin od odběru oddělit sérum Homocystein Plazma / (EDTA, (srážlivá) Heparin), (sérum) Kalcitonin v séru Srážlivá / (nesrážlivá) Sérum / (plazma heparin) Kortizol v moči Sbíraná moč Moč Osteokalcin Parathormon / (srážlivá) / (srážlivá) Plazma, (sérum) Plazma, (sérum) Moč se sbírá do nádoby s konzervačním činidlem (lze vyžádat v laboratoři): - 10 g kyseliny borité (na 1 l moči) Do laboratoře se odesílá vzorek cca 10 ml moče. Sérum - Do 3 hodin od odběru oddělit sérum a dát [-2]pro PSA v séru Srážlivá pouze do chladničky phi (prostate health Sérum - Do 3 hodin od odběru oddělit sérum a dát Srážlivá index) pouze do chladničky Zaznamenat polohu pacienta - vleže, přímé Renin Plazma EDTA vsedě, vzpřímeně. Neprodleně dopravit do stanovení laboratoře, nechladit! Folát Srážlivá Sérum Při skladování omezit přístup světla Vitamin B12 Srážlivá Sérum Při skladování omezit přístup světla Výtěr z Neprodleně dopravit do laboratoře, Gonorrhea kultivačně pochvy, nechladit uretry, rekta Platí od: 1. 8. 2014 22 DLP2-8/2014
5.4.2. Laboratoř HPLC A) Příprava pacienta 1) Stanovení katecholaminů a metanefrinů v plazmě Pacient před odběrem by měl být 15-30 min. v klidu na lůžku. Odběr by měl být prováděn přes zavedenou kanylu. 2) Stanovení katecholaminů a jejich metabolitů v moči a) 2 dny před zahájením sběru a v jeho průběhu je nutno dodržet dietu a nejíst, případně omezit konzumaci některých potravin: ovoce, zelenina, čokoláda, ořechy, aromatické moučníky (vanilka) nepít čaj (včetně čajů ovocných a bylinkových), mošty, šťávy, káva, kakao, alkohol a nekouřit. b) Pokud je to možné, 2 týdny před sběrem je nutno vysadit: alfa-metyldopa (Dopegyt), klonidin (Catapresan), guanfacin (Estulic) a moxonidin (Cynt). c) Alespoň dva dny před sběrem a při sběru nebrat léčiva interferující s adrenergním nebo serotoninovým systémem, např. rilmenid (Tenaxum), labetalol aj., dále theofylin, reserpin, prazosin (deprazolin), sulfonamidy, diuretika, nitroglycerin, izoprotenerol, niacin, riboflavin, chynidin, chinin, tetracyklinová a penicilinová antibiotika, erytromycin, nalidixovou kyselinu, salicyláty nebo aminosalicyláty (PAS, aspirin), bromosulphalein, glycerylguajakolát, fenazopyrin, PSO, fenothiazin, a léčiva zvyšující kyselinu 5-hydroxy-indoloctovou: acetanilid, methokarbamol, acetofenetidin, mefenesin, Lugolův roztok. d) Pro stanovení metabolitů vadí inhibitory monoaminooxidázy. e) Stanovení nelze rovněž provést bezprostředně po RTG vyšetření používajícím jodové kontrastní přípravky. 3) Pokyny pro pacienty (jsou uvedeny i na žádance) Podmínky sběru moče: 1-3 dny před zahájením sběru moče a v jeho průběhu je potřeba se vyvarovat některých potravin: banány, vanilka, čokoláda, káva, kakao, čaj (i bylinkový a ovocný), mošt, šťávy, ořechy, zelenina, ananas, rajčata, avokádo, alkohol a nekouřit. Řada léků ovlivňuje vyšetření katecholaminů. Proto je nutné před vyšetřením konzultovat s lékařem případné porušení léčby či změny v medikaci. Mezi interferující léky patří například: acetaminofen, aminofylin, amfetaminy, klonidin, dexamethazon, diuretika, epinefrin, alkohol, inzulin, imipramin, lithium, methyldopa, inhibitory MAO (monoaminooxidázy), nikotin, nitroglycerin, nosní kapky, salicyláty, teofylin, tetracyklin, tricyklická antidepresiva a betablokátory. Dále některá léčiva zvyšující VMA a HVA: aminosalicylát (PAS), anileridin, aspirin, bromsulphtalein, erytromycin, glycerol, guaiacolate, isoproterenol, mephenesin, methocarbamol, nalidixová kys., tetracyklinová a penicilinová antibiotika, phenazopyridin, PSP, phenothiazin a theophylin. Léčiva zvyšující 5-HIOK: acetanilid, acetophenetidin, mephenesin, methocarbamol, reserpin, Lugolův roztok. Vliv uvedených látek se mění individuálně a nelze ho předpovědět. B) Odběr vzorku 1) Plazma: Krev po odběru vzorků pro vyšetření katecholaminů a metanefrinů v plazmě by měla být neprodleně dopravena do laboratoře k separaci plazmy. Vzorky plazmy jsou stabilní pouze maximálně 6 hodin při 2-8 O C, déle pak zamražené při <-20 O C. 2) Sbíraná moč pro stanovení katecholaminů a metanefrinů, kys. vanilmandlové, kys. homovanilinové, kys. hydroxyindoloctové a) Moč se sbírá do nádoby s konzervačním činidlem (lze vyžádat v laboratoři): - 10 ml 6M HCl pro katecholaminy a metanefriny v moči - 10 ml 50% kyseliny octové pouze pro stanovení samotného panelu VMK, HIOK, HVK b) Nádoba na sběr moči se uchovává v chladu c) Do laboratoře se odesílá vzorek 20 ml moče. Platí od: 1. 8. 2014 23 DLP2-8/2014