Výskyt: MYKOTOXINY Ochratoxin A obiloviny (kukuřice, ječmen, žito), sója masné výrobky (finalizace salámů pomocí plísní!), vepř. krev (vázán na albumin) rybí polokonzervy káva, kakao rozinky
Ochratoxin A Aspergillus ochraceus Penicillium variabile
Toxické účinky ochratoxinu A: imunosupresivní teratogenní promotor karcinogeneze (tumory ledvin, varlat, močových cest, jater)
Patulin Producenti: P. expansum, P. patulum Asp. clavatus, A. terreus Byssochlamys.
Výskyt patulinu: MYKOTOXINY jablka a výrobky z jablek modrá hniloba vinných hroznů (Penic. expansum) obiloviny, siláže (P. patulum) sýry (P. claviforme)
Účinky patulinu MYKOTOXINY bakteriostatické a baktericidní (40. léta= antibiotikum) teratogenní nevolnosti a zvracení akutní otravy u dobytka (poškození plic s edémem, masové uhynutí krav v Japonsku)
Detoxikace patulinu: MYKOTOXINY reakcí s SH skupinami: stabilní netoxické adukty (např. s thioglykolátem pozor, pro člověka karcinogenní) rozklad během alkoholického kvašení Pozn.: Vit. C v ovoci brání tepel. rozkladu
Fusariové mykotoxiny 1) Fumonisiny (fusarin, moniliformin, trichothecin ) producenti: F. moniliforme, F. proliferatum výskyt: kukuřice (popcorn, cornflakes, burisony) účinky: iniciátor karcinogeneze (jícen-fumonisin B 1 ) onemocnění hosp. zvířat (fusarin C)
Fusariové mykotoxiny 2) Zearalenon producenti: F. graminearum, F. culmorum výskyt: obiloviny, vlhké krmivo (= maso jatečných zvířat a drůbeže) naklíčená semena účinky: jako steroidní hormony (potraty a dočas. sterilita) gastroenterotoxikózy u dobytka
Fusariové mykotoxiny MYKOTOXINY 3) Trichotheceny (T2, nivalenol, DON ) producenti: F. sporotrichioides, F. poae, F. graminearum, F. culmorum.. výskyt: obilí, obiloviny, zvlhlé krmivo, kulturní plodiny (=pivo) účinky: imunosupresivní, bolení hlavy, nevolnost, střevní potíže, hemoragie, nekróza kůže, poškození sliznic, kardiotonické úč., inhibitory syntézy DNA a proteosyntézy F. poae a F. culmorum(www.biolib.cz/cz/taxonimages/id346706/?type)
Kyselina cyklopiazonová Producenti: P. aurantiogriseum (dříve P. cyclopium), P. viridicatum, P. candidum (dříve P. camemberti) A. oryzae, A. flavus, A. versicolor, A. tamarii Výskyt: sýry (plísňové pod pokryvem, tav. sýry plesnivé odkrojky) drůbeží maso (plesnivé krmivo) kukuřice, obiloviny, arašídy, proso, jáhly P. aurantiogriseum a P. viridicatum
Účinky kys. cyklopiazonové: akutní otravy (postižení svalstva, křeče..) poškození jater a ledvin neurotoxické příznaky postižení trávicí trubice rizikové pro kardiologické pacienty (narušen transport Ca 2+ iontů)
Chemicky: alkaloid MYKOTOXINY Ergotamin Producent: Claviceps purpurea Účinek: může být smrtelně jedovatý (otrava námelem) mykotické onemocnění - ergotismus ( oheň sv. Antonína - poruchy prokrvení až nekróza, nesnesitelná bolest končetin, gangrény..) Obr.: Pieter Brueghel-Žebráci
Paličkovice nachová- Claviseps purpurea
Průkaz toxinogenních plísní Klasické kultivační metody identifikace dle morfologických znaků (mikroskopických a makroskopických) využití chromogenních médií AFPA (Aspergillus Flavus a Parasiticus Agar) inhibice bakterií = chloramfenikol inhibice vzduš. mycelia = dichloran kys. aspergillová a kojová = s Fe 3+ solemi tvoří žlutooranžové zbarvení
Průkaz toxinogenních plísní Molekulárně-biologické metody PCR a RT-PCR reverzní hybridizace biochipové technologie (DNA chipy)
Metody průkazu mykotoxinů Chromatografické metody HPLC s fluorescenční detekcí aflatoxiny, ochratoxiny, patulin, zearalenon a další GC/MS trichotheceny (T2, DON..) metody vysoce specifické pro jedn. potraviny metody spec. pro určitý mykotoxin TLC nutná přít. standardů - možnost záměny
Metody průkazu mykotoxinů Imunochemické metody RIA, ELISA vysoce citlivé (nevýhoda: pozit. r. dává např. i vanilin) Biologické Testy toxicity citlivé, málo specifické stanovení poškození jater u 2 denních kuřat testy na kuřecím embryu a larvách rybiček inhibice růstu bakterií (B. megaterium, Flav. aurantiacum aflatoxin B1)
Biologické metody průkazu toxicity mykotoxinů
Dekontaminace potravin a krmiv Fyzikální metody mechanické třídění poškozených kusů podstatné snížení kontaminace (až o 32 %) zvýš. teplota ev. i tlak- závisí na typu mykotoxinu (znehodnocení potraviny) ozařování UV, γ-zářením, RTG (snížení kontaminace, ale biologické znehodnocení) adsorpční efekt - miner. jíly, aktivov. živ. uhlí, zeolity, produkty stěn buněk kvasinek.. (sníž. biol. hodn. krmiva) krmná aditiva spojení adsorpčního efektu s enzymovou degradací (půs. in vivo)
Dekontaminace potravin a krmiv Chemické metody extrakce org. rozpouštědly (hexan-aceton) úč. oxidačních látek (O 2, H 2 O 2, Cl 2..) působení par NH 3 (detox. aflatoxinů B a G v obilovinách a krmivech) vod. roztoky CaCl 2, bikarbonátu sodného Pozor na toxická rezidua a degradaci nutričních a senzorických vlastností!
Dekontaminace potravin a krmiv Biologické metody využití antagonistických MO (inaktivace nebo transformace na netoxické deriváty) Flavob. aurantiacum produkce kyseliny, konverze B 1 na B 2 (100 x méně mutagenní) Bac. subtilis, Bac. natto zearalenon Lbc. rhamnosus aflatoxiny, trichotheceny Saccharomyces cerevisiae patulin použití enzymů - degradují toxin rozštěpením esterázy zearalenon epoxidázy-trichotheceny
Dekontaminace potravin a krmiv Biologické metody: Bacillus megaterium
Maskované mykotoxiny MYKOTOXINY jsou částečně rostlinami metabolizovány některé fermentované výrobky - konjugáty mykotoxinů (např. DON-3-O-glukosid) v trávicím traktu člověka může docházet k uvolňování mykotoxinů z vazeb (zvýšení tox. zátěže) Maskované toxiny nelze zatím stanovit!
Z aktů ES v současné době závazná: MYKOTOXINY 1. Nařízení Komise č. 1126/2007 ES - stanovují se maximální hodnoty obsahu fusariových toxinů ( fumonisiny, DON, zearalenon) v kukuřici a výrobků z nich 2. Nařízení Komise č. 105/2010 ES - stanovují se maximální limity ochratoxinu 2 v koření a lékořici 3. Nařízení Komise č. 165/2010 - stanovení maximálních limitů aflatoxinů v podzemnici olejné, aj. skořápkových plodech, meruňkových jádrech, obilovinách, koření, sušeném ovoci a další na Úředním věstníku EU : eur-lex.europa.eu
Zdroje obrázků: Aspergillus: http://kacatko.files.wordpress.com/2008/11/asexual-structures-of-aspergillus-niger.jpg Mykóza: http://www.apteka24.org/wp-content/uploads/2011/02/grzybica_stop1.jpg Schizosaccharomyces pombe (pučení): http://www.sciencephoto.com/images/showfullwatermarked.html/b2501549-dividing_yeast_cells,_sem-spl.jpg?id=662501549 Kožní mykóza: http://www.stefajir.cz Miniatlas mikroorganismů VŠCHT Praha www.vscht.cz649 402Vyhledávání pomocí obrázkubyssochlamys nivea CCF 2913 mikro.jpg. F. sporotrichioides a F. poae (www.biolib.cz/cz/taxonimages/id346706/?type) Paličkovice nachová Copyright 2004 M.Sedlářová & M.Vašutová, Katedra botaniky PřF UP Olomouc Legislativa: Malíř F.: ZÚ se sídlem v Hradci Králové NRL pro biomarkery mykotoxinů a mykotoxiny v potravinách, akredit.l aboratoř č.1388