Kryokonzervace bramboru (Solanum tuberosum, L.)
|
|
- Sabina Brožová
- před 8 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Kryokonzervace bramboru (Solanum tuberosum, L.) METODIKA PRO PRAXI Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. 2008
2 Metodika je výstupem řešení výzkumného záměru MZE Nové poznatky, metody a materiály pro genetické zlepšování biologického potenciálu plodin a využití agrobiodiversity pro setrvalý rozvoj zemědělství. Metodika proběhla oponentním řízením. O uplatnění metodiky byla dne uzavřena smlouva podle ustanovení 269 zákon č. 513/1991 Sb., obchodního zákoníku. Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i., Praha, 2008 ISBN
3 Autoři: Název: Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Kryokonzervace bramboru (Solanum tuberosum, L.) Vydal: Redakce: Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Drnovská 507, , Praha 6 Ruzyně Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Drnovská 507, , Praha 6 Ruzyně Metodika je veřejně přístupná na adrese Náklad: 40 výtisků Vyšlo v roce 2008, první vydání Vydáno bez jazykové úpravy Kontakt na autory: Autor fotografií: faltus@vurv.cz zamecnik@vurv.cz Miloš Faltus Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i., Praha, 2008 ISBN
4 KRYOKONZERVACE BRAMBORU (Solanum tuberosum, L.) Vydal Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i
5 Miloš Faltus, Jiří Zámečník Kryokonzervace bramboru (Solanum tuberosum, L.) METODIKA PRO PRAXI Vydal Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i
6 Kryokonzervace bramboru (Solanum tuberosum, L.) Brambor patří mezi naše významné plodiny. Uchování genetických zdrojů bramboru je možné pouze ve vegetativním stavu, což zvyšuje riziko náhodné ztráty genotypu. Riziko ztráty genotypu lze omezit využitím metody kryokonzervace, při níž jsou rostlinné vzorky uloženy při ultranízké teplotě, která zastavuje všechny biochemické procesy. Kryokonzervované vzorky tak lze uchovávat bez změny po mnoho let. Tato metodika popisuje postup přípravy materiálu, postup předkultivace rostlin, jejich dehydrataci, kryokonzervaci a regeneraci. Jsou definovány zásady bezpečného uložení genotypů, které umožňují jejich úspěšnou regeneraci. Uživatelem metodiky je MZe, která ji uplatní v rámci Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin, zvířat a mikroorganismů významných pro výživu a zemědělství. Potato cryoconservation (Solanum tuberosum, L.) Potato is important crop in the Czech Republic. Potato germplasm collection is maintained by vegetative plant parts and this fact increases risk of accidental lost of genotype. Cryoconservation decreases risks of genotype lost. Plant samples are stored at ultralow temperature that stopped all biochemical processes. The samples can be stored without any changes for many years. This methodology describes procedure of material preparation, explant preculture and dehydration, shoot tip cryopreservation and recovery. Principles of safe genotype storage and recovery are defined. The Ministry of Agriculture of the Czech Republic is the user of this methodology and it will utilize the potato cryoconservation method in the frame of National Programme on Conservation and Utilization of Plant, Animal and Microbial Genetic Resources for Food and Agriculture. Vydal Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i
7 Obsah: I. Cíl metodiky... 8 II. Vlastní popis metodiky... 8 a) Princip metody... 8 b) Materiál a metody... 8 c) Postup kryokonzervace bramboru d) Evidence a uložení vzorků při kryokonzervaci e) Kryoprotokol f) Stanovení minimálního rozsahu uložených vzorků III. Srovnání novosti postupů IV. Popis uplatnění metodiky V. Seznam použité literatury VI. Seznam publikací VII. Dedikace VIII. Jména oponentů:
8 I. Cíl metodiky Cílem metodiky je stanovit postup pro dlouhodobé uchování vzrostných vrcholů bramboru v podmínkách teploty tekutého dusíku. II. Vlastní popis metodiky a) Princip metody Podstatou metody kryokonzervace je uchování materiálu ve skelném stavu při ultranízké teplotě (bod varu tekutého dusíku, cca -196 C). Skelný stav je amorfní pevné skupenství hmoty. Výhodou je, že látka při přechodu z kapalného do skelného stavu nemění uspořádání částic. Naproti tomu v procesu krystalizace dochází k vytvoření pravidelné struktury a tím k destrukci původního uspořádání hmoty. Zachování struktury rostlinného materiálu a jeho funkcí při přechodu do skelného stavu jsou podstatou jeho stabilního uchování při ultranízké teplotě. Problém, který řeší tato metodika je skutečnost, že rostliny druhu brambor obecný (Solanum tuberosum, L.) patří mezi plodiny, které netolerují zmrznutí. Zatímco samotné uchování rostlinného materiálu ve skelném stavu je velmi bezpečné a stabilní, problémem je způsob, jak do skelného stavu rostliny bezpečně převést a poté navrátit zpět do kultivačních podmínek při zachování životnosti rostlin. Tato metodika popisuje postup přípravy rostlinného materiálu a jeho zamrazení a odmrazení takovým způsobem, který umožňuje rostlinnému materiálu překonat působení nízké teploty. b) Materiál a metody 1. Přístrojové vybavení Pro provedení metody kryokonzervace je třeba disponovat následujícím přístrojovým vybavením: Práce s tkáňovými kulturami rostlin v in vitro podmínkách: kultivační box, laminární box Vybavení pro sterilizaci materiálu a kultivačních medií: autokláv, horkovzdušný sterilizátor Přístroje pro přípravu a uchování kultivačních medií: analytické váhy, přesné váhy, ph-metr, laboratorní míchačka, chladnička Vybavení pro stanovení sušiny vzorků: analytické váhy, laboratorní sušárna Uchování tekutého dusíku a kryokonzervovaných vzorků: Dewarova nádoba na tekutý dusík, Dewarova nádoba pro uložení vzorků v tekutém dusíku Záznamy, výpočty a tisk čárového kódu: PC, tiskárna čárového kódu, tiskárna 8
9 2. Chemikálie V následujícím seznamu jsou všechny chemikálie potřebné pro metodu kryokonzervace: Kultivační media: destilovaná voda soli dusičnan amonný, dusičnan draselný, kyselina dihydrogen fosforečná, chlorid vápenatý, síran hořenatý, síran manganatý, síran zinečnatý, síran železnatý, jodid draselný, kyselina boritá, molybdenan disodný, chlorid kobaltnatý, síran měďnatý vitamíny thiamin, pyridoxin, kyselina nikotinová, glycin fytohormony kyselina indolyl octová, kinetin, kyselina giberelová sacharosa (P.A.) agar (Sigma Aldrich) Kryoprezervační roztok: sacharosa (P.A.), destilovaná voda Desikant: silikagel Chladící a skladovací medium: tekutý dusík 3. Drobné pomůcky Následující pomůcky jsou potřebné pro realizaci metody kryokonzervace bramboru: Příprava roztoků a medií: Erlenmeyerova baňka 500 ml odměrný válec 1000 ml Pasteurova pipeta 3 ml střička váženky Kultivace rostlin: kultivační zkumavky s hliníkovým uzávěrem 12 x 1,7 cm stojánek na zkumavky plastové kultivační nádoby 10 x 10 x 9 cm (Duchefa) plastové Petriho misky 6 cm skleněné Petriho misky 15 cm Předkultivace rostlin: Erlenmeyerova baňka 25 ml Izolace a dehydratace vzrostných vrcholů: injekční jehly 0,7 x 40 mm stříkačky 10 ml filtrační papír 11 cm skleněné Petriho misky 4, 12, 15 a 20 cm hliníkové plíšky 20 x 6 x 0,05 mm nádobky na silikagel 200 ml Kryokonzervace: stojánek na kryozkumavky kryozkumavky 1,8 ml (NUNC) polystyrénový džbán 1L Odtání vzorků: Erlenmeyerova baňka 100 ml nerezová miska parafilm 9
10 4. Rostlinný materiál a kultivační podmínky Výchozím materiálem pro kryokonzervaci bramboru jsou rostliny převedené do explantátových kultur v podmínkách in vitro. Rostliny in vitro bramboru se uchovávají obvykle ve zkumavkách (12x1,7 cm) s hliníkovým víčkem. Pro lepší ventilaci kultivačních zkumavek je vhodné víčko provrtat a do otvoru umístit molitanový hranolek o velikosti (1x1x2cm). Explantáty jsou pěstovány v kultivačním boxu při teplotě 22 ± 1 C, hustotě světelného toku 80 µmol m -2 s -1 a fotoperiodě 16/8 h. Plastové krabičky o velikosti 10 x 10 x 9 cm urychlují postup multiplikace explantátů. 5. Kultivační media Pro kultivaci rostlin se používají dva typy agarových kultivačních medií. Jedno je tzv. multiplikační, které se používá pro namnožení explantátů bramboru do potřebného počtu a druhé medium je tzv. regenerační, které stimuluje regeneraci explantátů bramboru po jejich kryoprezervaci. Multiplikace in vitro rostlin probíhá na modifikovaném kultivačním mediu podle Grospietsche et al. (1999) bez kaseinu a myoinositolu a se sníženým obsahem dusíku (25 % původního obsahu NH 4 NO 3 a 50 % původního obsahu KNO 3 ve srovnání s mediem podle Murashige a Skooga, 1964), 30 g l -1 sacharosy a 7 g l -1 agaru. Regenerační medium má shodné složení jako množící medium, ale pro podporu regenerace rostlin navíc obsahuje směs fytohormonů (0,5 mg l -1 kyseliny indolyl octové, 0,5 mg l -1 kinetinu, 0,2 mg l -1 kyseliny giberelové). 6. Příprava sterilního silikagelu pro dehydrataci vzorků Dehydratace explantátů bramboru probíhá v suchém vzduchu nad sterilním silikagelem. Silikagel o hmotnosti 50 g se umístí do skleněné nádobky o objemu 200 ml se závitem a kovovým víčkem pro možnost sterilace horkým vzduchem. Vysoušení probíhá v horkovzdušném sterilizátoru s nucenou ventilací při teplotě 170 C po dobu 2 dnů. Pak se nádoby se silikagelem uzavřou víčkem a ponechají ve sterilizátoru po dobu 10 hodin, tak aby po automatickém vypnutí přístroje došlo k ochlazení silikagelu na laboratorní teplotu do doby před započetím dehydratace. c) Postup kryokonzervace bramboru Postup kryokonzervace explantátů bramboru lze rozdělit do pěti postupných kroků: Namnožení explantátů Předkultivace explantátů Izolace vzrostných vrcholů a jejich sycení sacharosou Dehydratace vzrostných vrcholů nad silikagelem Zamrazení a uložení v Dewarově nádobě Hodnocení životnosti a regenerace Postup kryokonzervace bramboru je schématicky znázorněn na obr.1. 1) Namnožení explantátů Explantáty bramboru se uchovávají v kutivačních zkumavkách s 5 ml multiplikačního media. Pro namnožení explantátů do potřebného počtu 100 rostlin se provedou dvě multiplikace při subkultivačním intervalu 3-4 týdny. Matečné rostliny se nařežou na nodální segmenty a kultivují v krabičkách se 100 ml multiplikačního media. Při první multiplikaci se vysadí jedna krabička s třiceti nodálními segmenty a dalších dvacet explantátů se vysadí do deseti zkumavek pro uchování genotypu v in vitro podmínkách. Při druhé multiplikaci se z třiceti rostlin odvodí sto nodálních segmentů a vysadí se do třech krabiček. 10
11 1. multiplikace 2. multiplikace Odvození nodálních segmentů Aplikace 2 M sacharosy Umístění vrcholů na plíšky Sycení vrcholů 0,7 M sacharosou Izolace vzrostných vrcholů Dehydratace vrcholů nad silikagelem Ponoření vrcholů do tekutého dusíku Odtátí vzorků ve vodní lázni Uložení vzorků do dewarovy nádoby Vysázení na regenerační medium Hodnocení životnosti a regenerace Obr. 1. Postup kryokonzervace explantátových kultur bramboru. 11
12 2) Předkultivace explantátů Po třech až čtyřech týdnech kultivace in vitro rostlin bramboru se z nich odvodí nodální segmenty. Ze sta explantátů se připraví tři sta nodálních segmentů a ty se vysadí po 100 kusech do třech krabiček s 50 ml multiplikačního media. Po čtyřech dnech kultivace se do každé krabičky s nodálními segmenty aplikuje 25 ml 2 M roztoku sacharosy. 3) Izolace vzrostných vrcholů a jejich sycení sacharosou Po 5 až 6 dnech kultivace nodálních segmentů zalitých roztokem 2 M sacharosy se vyizolují vzrostné vrcholy vyrostlé z nodálních pupenů. Vrcholy se vyřežou z nodálních segmentů pomocí injekční jehly, která se použije jako mikroskalpel. Vrcholy se umístí do Petriho misky (12 cm) na sterilní filtrační papír nasycený 0,7 M roztokem sacharosy (14 ml) s fytohormony shodného složení jako v regeneračním mediu (0,5 mg l -1 kyseliny indolyl octové, 0,5 mg l -1 kinetinu, 0,2 mg l -1 kyseliny giberelové). Apikální vrcholy se sytí v roztoku sacharosy po dobu 20 hodin při 22 C. 4) Dehydratace vzrostných vrcholů nad silikagelem Po nasycení vzrostných vrcholů bramboru sacharosou se explantáty umístí na hliníkové plíšky po deseti kusech, vždy dva plíšky se umístí do jedné Petriho misky (4 cm). Plíšky a malé Petriho misky usnadňují manipulaci s explantáty. Spodní část petriho misky se spolu s plíšky a explantáty vloží pomocí sterilní pinzety do nádoby se silikagelem. Dehydratace vrcholů nad silikagelem probíhá ve sterilní místnosti v laminárním boxu, při teplotě C. Doba dehydratace explantátů je přibližně 1,5 2 hodiny v závislosti na velikosti explantátů a je ukončena při dosažení vlhkosti materiálu 0,4 g vody na 1 g sušiny. V případě použití jiných nádob či jiného množství silikagelu je nezbytné odzkoušet postup dehydratace explantátů a stanovit optimální dobu dehydratace. Kontrola míry dehydratace se provádí vážením na analytických vahách s přesností 0,01 mg. Nejprve se zváží Petriho misky (4 cm) s hliníkovými plíšky bez explantátů, pak s explantáty před dehydratací a po dehydrataci. Nakonec se kontrolní vzorky dosouší 72 hodin v sušárně při 105 C pro získání hmotnosti sušiny. 5) Zamrazení a uložení v Dewarově nádobě Po vysušení jsou explantáty přilepeny k plíškům zaschlým přebytkem roztoku sacharosy. Díky tomu lze s plíšky manipulovat, aniž by došlo k náhodnému odpadnutí explantátu. Nejprve se připraví polystyrenová nádoba, která slouží jako stojánek pro kryozkumavky a zároveň jako nádoba na tekutý dusík. Tato nádoba se naplní tekutým dusíkem a pak se do ní umístí kryozkumavky a i ty se naplní tekutým dusíkem. Plíšky s explantáty se pomocí pinzety přenesou a co nejrychleji ponoří do tekutého dusíku v polystyrenové nádobě. Po ochlazení explantátů se plíšky umístí do kryozkumavky a uzavřou víčkem. Víčko kryozkumavky se nedotahuje, ale mohl tekutý dusík pronikat přes závit do kryozkumavky; čímž je zaručena stálá přítomnost tekutého dusíku v kryozkumavce při jejím umístění do Dewarovy nádoby. 6) Hodnocení životnosti a regenerace rostlin Vzorky pro kontrolu životnosti a regenerace rostlin bramboru po kryokonzervaci se připravují spolu se vzorky pro uložení do Dewarovy nádoby. Minimální doba pobytu vzorků v tekutém dusíku je 1 hodina. Samotné hodnocení se provádí po ohřevu kryoprezervovaných vzorků a po jejich vysazení na regenerační medium. Kryozkumavky se vzorky se umístí do stojánku s tekutým dusíkem. Po otevření víčka musí být kryozkumavky stále ponořeny v tekutém dusíku. Pinzetou se hliníkové plíšky rychle vytáhnou z kryozkumavek a i s vrcholy se ponoří do vodní lázně o laboratorní teplotě. Explantáty se po jejich odlepení od plíšků vyjmou 12
13 z vody a přenesou na regenerační medium s fytohormony (0,5 mg l -1 kyseliny indolyl octové, 0,5 mg l -1 kinetinu, 0,2 mg l -1 kyseliny giberelové). Hodnocení životnosti rostlin se provede po dvou týdnech a hodnocení regenerace po osmi týdnech od vysazení. Za živé se považují explantáty, u nichž je patrný růst a nedochází u nich ke ztrátě chlorofylu. Apikální růst spojený s tvorbou stonku je známkou regenerace rostliny. d) Evidence a uložení vzorků při kryokonzervaci Každá kryozkumavka se označí specifickým čárovým kódem. Tento kód obsahuje pořadové číslo kryoprezervované položky, přesnou lokalizaci položky ve skladovacím systému a datum zamrazení položky. Označení každé zkumavky se spolu s informací o vzorku uloží do databáze zamrazených položek. Vzorky se umístí do Dewarových nádob naplněných tekutým dusíkem. Je nutné zabezpečit pravidelné doplňování těchto nádob z důvodu odparu tekutého dusíku. e) Kryoprotokol Celý postup kryokonzervace se zaznamená v kryoprotokolu, který obsahuje základní identifikační údaje o kryokonzervovaných vzorcích a o metodě kryokonzervace a jejím výsledku. Tyto informace lze v případě potřeby doplnit dalšími údaji, které přesněji definují podmínky kryokonzervace a vlastnosti kryokonzervovaných vzorků. Základní údaje: Materiál: Množství: Označení: Kryo: Výsledek: plodina, genotyp, identifikátor EVIGEZ, interní identifikátor počet kryoprezervovaných vzrostných vrcholů, počet kontrolních rostlin číslo kryoprezervované položky, pozice v kryoskladu, datum kryoprezervace metoda kryokonzervace životnost, regenerace Doplňující údaje: Dehydratace: čerstvá hmotnost vzrostných vrcholů, počáteční obsah vody, konečný obsah vody, doba dehydratace, podíl krystalické fáze, přítomnost a charakteristika skelných přechodů (teplota skelného přechodu, změna tepelné kapacity) Poznámky: odchylky od standardního postupu f) Stanovení minimálního rozsahu uložených vzorků Z hlediska konzervace genetických zdrojů rostlin, je velmi důležitá informace, zda počet vzorků uložených v tekutém dusíku umožňuje úspěšnou regeneraci daného genotypu. Pravděpodobnost regenerace rostlin je závislá na úspěšnosti regenerace a reprezentativnosti (počtu jedinců) kontrolního vzorku a na počtu vzorků uložených v tekutém dusíku. Na základě regenerace rostlin kontrolního vzorku lze stanovit minimální počet rostlin, které lze zregenerovat z rostlin uložených v tekutém dusíku (Dussert et al., 2003). V Tabulce 1 je uvedeno minimální procento regenerace kontrolních rostlin v závislosti na velikosti kontrolního souboru a na počtu uložených vzorků v Dewarově nádobě pro 95%-ní pravděpodobnost regenerace alespoň jedné rostliny. Doporučený počet vzrostných vrcholů uložených v tekutém dusíku od jednoho genotypu je 120 jedinců a velikost kontrolního vzorku je 40 jedinců. Pro 95 % pravděpodobnost, že z uložených vzorků zregeneruje alespoň jedna rostlina, je nutná desetiprocentní regenerace kontrolních rostlin, tedy čtyři rostliny ze čtyřiceti. V Tabulce 1 je uvedena minimální 13
14 regenerace kontrolního vzorku pro 95 % pravděpodobnost regenerace alespoň jedné rostliny při různém počtu uložených vzorků v kryobance a různé velikosti kontrolního vzorku. Tab. 1: Minimální procento regenerace kontrolního vzorku, která umožňuje regeneraci alespoň jedné rostliny s pravděpodobností 95 %, v závislosti na počtu kontrolních jedinců a počtu jedinců uložených v kryobance. Velikost uložené kolekce (počet uložených jedinců) Velikost kontrolního vzorku (počet jedinců) ,3 7, ,3 7, ,7 6, ,5 6,7 6, ,5 6,7 6, ,5 6,7 5 5 Pro dosažení jistoty uchování genotypu je nezbytná regenerace minimálně tří explantátů (obdobně v in vitro bance bramboru jsou použity tři zkumavky od genotypu) v kontrolním vzorku z celkového počtu uložených vzorků daného genotypu. Při 120-ti explantátech bramboru uložených v tekutém dusíku a 40-ti explantátech v kontrolním vzorku musí regenerace kontroly dosáhnout minimálně 15 %, aby s pravděpodobností minimálně 95 % došlo k regeneraci minimálně tří rostlin bramboru daného genotypu uloženého v kryobance (Tab. 2). Tab. 2: Minimální počet regenerujících rostlin z celkového počtu uložených explantátů (120 ks) v tekutém dusíku při 95 %-ní pravděpodobnosti v závislosti na procentu regenerace rostlin bramboru po kryokonzervaci v kontrolním vzorku o rozsahu 40 explantátů. Regenerace v kontrolním vzorku (%) Minimální regenerace rostlin v kryobance (počet jedinců) , , Doporučený počet 120 explantátů je uložen v 6-ti kryozkumavkách po 20-ti kusech. Při třech životaschopných explantátech v kryobance pak teoreticky po odtání dvou kryozkumavek 14
15 dojde k regeneraci jedné rostliny (obnova genotypu) a ve zbývajících čtyřech kryozkumavkách budou uloženy minimálně dva explantáty schopné regenerace do in vitro podmínek. V případě, že regenerace kontrolního vzorku je nízká, lze zvýšením rozsahu uložených vzorků (opakováním postupu kryokonzervace) docílit vyhovující pravděpodobnosti obnovení uloženého genotypu. Naopak v případě stabilně vysoké regenerace kontrolního vzorku lze omezit počet uložených vzorků, čímž lze snížit náklady na uložení genotypu. III. Srovnání novosti postupů V současné době je celá česká kolekce bramboru v rámci Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin, zvířat a mikroorganismů významných pro výživu a zemědělství uchovávána v in vitro bance ve Výzkumném ústavu bramborářském v Havlíčkově Brodě. Postup kryokonzervace navazuje metodicky na metody pěstování explantátů v aseptických podmínkách, ale navíc umožňuje kryoprezervované explantáty uchovat po velice dlouhou dobu s minimálními provozními náklady. Dlouhodobě nízké provozní náklady na uskladnění explantátů při ultranízké teplotě a stabilita vzorků jsou hlavní výhodou metody kryokonzervace v porovnání se stávající metodou uchování bramboru. Na druhou stranu není ekonomicky efektivní využívat metodu kryokonzervace pro aktivní kolekci s častým odběrem uložených položek. Proto je metoda kryokonzervace vhodnou metodou, která doplňuje stávající metodu konzervace bramboru a zvyšuje bezpečnost skladovaných vzorků. Tato metodika vznikla úpravou metodiky kryokonzervace bramboru nazývané kapková metoda (Shaefer-Menuhr et al., 1996). Tato původní metodika rovněž využívá hliníkové plíšky pro umístění vzrostných vrcholů a jejich zamrazení přímým ponořením do tekutého dusíku. Jako kryoprotektant využívá 10 % dimethylsulfoxid (DMSO), který se používá jednak pro dehydrataci izolovaných vzrostných vrcholů a pak ve formě malých kapek na hliníkové plíšky (proto kapková metoda ), do nichž se vloží vzrostné vrcholy bramboru. Hlavní odlišností nové metodiky je předkultivace explantátů se sacharosou, která zvyšuje účinnost metody, dále využití sacharosy jako přirozeného kryoprotektantu a dehydratace vzrostných vrcholů v suchém vzduchu nad silikagelem. Odlišný je i výchozí materiál pro kryokonzervaci a složení regeneračního média. Zatímco původní metodika používala jako výchozí materiál apikální vrcholy z čtyřtýdenních rostlin a pro regeneraci rostlin po kryokonzervaci tekuté medium, nová metodika využívá axilární výhony vyrostlé z nodálních segmentů a pevné agarové regenerační medium, které je odlišné i fytohormonovým složením. Výhodou nové metodiky je i skutečnost, že nový postup vyloučil použití dimethylsulfoxidu jako kryoprotektantu, který není výhodný z hlediska genotoxicity, špatné skladovatelnosti a nemožnosti autoklávování, což postup přípravy poněkud komplikuje a také prodražuje při sterilizaci roztoků filtrací přes bakteriální filtry. IV. Popis uplatnění metodiky Uživatelem metodiky kryokonzervace je MZe ČR a to prostřednictvím Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin, zvířat a mikroorganismů významných pro výživu a zemědělství. Využitím této metodiky kryokonzervace bramboru v Národním programu dojde k vytvoření bezpečnostní zálohy nejcennějších vzorků bramboru a tím dojde k eliminaci rizik ztráty cenných genotypů. Aplikací této metodiky dojde k zachycení světového trendu uchování kolekcí bramboru jako je tomu u předních pracovišť ve světě, které se zabývají konzervací bramboru CIP v Peru (Panta et al., 2006) a IPK v Německu (Keller et al., 2008). Úpravy postupů této metodiky jsou možné pouze v případech, že tyto úpravy povedou prokazatelně (na základě opakovaných pokusů) k statisticky významně vyšší regeneraci rostlin po kryokonzervaci nebo když změny metodiky povedou k úspoře 15
16 finančních prostředků pro kryokonzervaci jedné položky, aniž by byla negativně ovlivněna regenerace kryokonzervovaného genotypu. V. Seznam použité literatury Dussert S, Engelmann F, Noirot M, 2003, Development of probabilistic tools to assist in the establishment and management of cryopreserved plant germplasm collections. CryoLetters 24, s Grospietsch M., Stodulková, E., Zámečník, J., 1999, Effect of osmotic stress on the dehydration tolerance of Solanum tuberosum shoot tips. CryoLetters 20, s Keller, ERJ, Kaczmarczyk, A, Senula, A, 2008, Cryopreservation for plant genebanks - A matter between high expectations and cautious reservation. CryoLetters 29, s Murashige T., Skoog F.A., 1962, A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant 15, s Panta A, Panis B, Ynouye C, Criel B, Swennen R, Roca W, 2006, Improvement of potato cryopreservation for the long-term conservation of Andean landraces at CIP. In: Abstract Book of Cryo Hamburg Schaefer-Menuhr A, Mueller E, Wagner EM, 1996, Cryopreservation: an alternative for longterm storage of old potato varieties. Potato Res. 39, s VI. Seznam publikací Zámečník J., Faltus M., Bilavčík A., 2007, Cryoprotocols used for cryopreservation of vegetatively propagated plants in the Czech cryobank, ISSN , Advances in Horticultural Science, 21(4), s Zámečník J., Bilavčík A., Faltus M., 2007, Metody dehydratace vzrostných vrcholů pro kryoprezervaci vegetativně množených plodin, ISBN , In: Vliv abiotických a biotických stresů na vlastnosti rostlin 2007, Praha , s Zámečník J., Faltus M., Bilavčík A., 2006, Conservation of biodiversity of vegetative propagated crops by cryopreservation methods, In: Plenary papers of the Conference "Biotechnology 2006", 15th-16th February 2006, University of South Bohemia, České Budějovice, s Faltus M., Zámečník J., Bilavčík A., 2006, Tolerance of potato cultivars to osmotic stress and desiccation, In: Plenary papers of the Conference "Biotechnology 2006", 15th-16th February 2006, University of South Bohemia, České Budějovice, s Faltus M., Zámečník J., Bilavčík A., 2006, Osmotic stress pretreatment and cryopreservation of potato, In: Book of Abstracts "Cryo 2006", July 24-27, 2006, Hamburg, Germany, p Faltus M., 2005, Effect of dehydration on potato cryopreservation (Solanum tuberosum, L.), In: Book of Abstracts of the "International Symposium on the Environmental Physiology of Ectotherms and Plants", July 11-16, 2005, Roskilde, Denmark, p. 23 Faltus M., Zámečník J., Grospietsch M., 2003, Comparison of encapsulation-dehydration and ultra-rapid freezing method for potatoes, In: Book of Abstracts of the Conference "CRYOBIOMOL Low Temperature Biology", September 2003, Coimbra- Portugal, p Grospietsch M., Stodulková, E., Zámečník, J., 1999, Effect of osmotic stress on the dehydration tolerance of Solanum tuberosum shoot tips, CryoLetters 20, s
17 VII. Dedikace Metodika je výstupem řešení výzkumného záměru MZE Nové poznatky, metody a materiály pro genetické zlepšování biologického potenciálu plodin a využití agrobiodiversity pro setrvalý rozvoj zemědělství. VIII. Jména oponentů: Odborný oponent: Doc. Ing. Václav Hejnák, Ph.D., Katedra botaniky a fyziologie rostlin Fakulta agrobiologie, potravinových a přírodních zdrojů Česká zemědělská univerzita v Praze Oponent ze státní správy: Ing. Ivan Branžovský, CSc. Odbor zemědělských komodit, MZe 17
Konzervace genetických zdrojů chmele (Humulus lupulus, L.) pomocí metody kryoprezervace
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Konzervace genetických zdrojů chmele (Humulus lupulus, L.) pomocí metody kryoprezervace METODIKA PRO PRAXI Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. 2008
VíceMetodika kryokonzervace citlivých genotypů bramboru
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Metodika kryokonzervace citlivých genotypů bramboru CERTIFIKOVANÁ METODIKA Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. 2016 Metodika
VíceJiří Zámečník Martin Grospietsch Renata Kotková Miloš Faltus Konzervace genetických zdrojů Allium pomocí metody kryoprezervace
Jiří Zámečník Martin Grospietsch Renata Kotková Miloš Faltus Konzervace genetických zdrojů Allium pomocí metody kryoprezervace CERTIFIKOVANÁ METODIKA Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. 2012 Autorský
VíceKryokonzervace révy vinné
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Renata Kotková RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Kryokonzervace révy vinné CERTIFIKOVANÁ METODIKA Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. 2012 Metodika
VíceMetodika kryokonzervace genetických zdrojů chmele
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Petr, Svoboda, CSc. RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. UPOZORNĚNÍ! Uvedená metodika neprošla dosud oponentním řízením a certifikací a její text není definitivní.
VíceMetodika kryokonzervace bramboru pomocí vitrifikace METODIKA. Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i.
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jaroslava Domkářová, Ph.D., MBA, LL.M. Ing. Vendulka Horáčková, CSc. RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. UPOZORNĚNÍ! Uvedená metodika neprošla dosud oponentním
VíceMetodika kryokonzervace bramboru pomocí vitrifikace METODIKA. Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i.
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jaroslava Domkářová, Ph.D., MBA, LL.M. Ing. Vendulka Horáčková, CSc. RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Metodika kryokonzervace bramboru pomocí vitrifikace
VíceMetodika kryokonzervace genetických zdrojů chmele
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Petr, Svoboda, CSc. RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Metodika kryokonzervace genetických zdrojů chmele METODIKA Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i.
VíceVyužití metody kryoterapie pro ozdravení bramboru od virových patogenů
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Ing. Petr Dědič, CSc. Ing. Vendulka Horáčková, CSc. Využití metody kryoterapie pro ozdravení bramboru od virových patogenů CERTIFIKOVANÁ METODIKA Výzkumný
VíceTkáňové kultury rostlin. Mikropropagace
Tkáňové kultury rostlin Mikropropagace IN VITRO KULTURY (EXPLANTÁTOVÉ KUTLURY, ROSTLINNÉ EXPLANTÁTY) Izolované rostliny, jejich orgány, pletiva či buňky pěstované in vitro ve sterilních podmínkách Na kultivačních
VíceROLE ETYLENU PŘI KULTIVACI ČESNEKU V PODMÍNKÁCH IN VITRO VITRO
ROLE ETYLENU PŘI KULTIVACI ČESNEKU V PODMÍNKÁCH IN VITRO ROLE ETYLENU PŘI KULTIVACI ČESNEKU V PODMÍNKÁCH IN VITRO Fišerová, H., 1 Spálovský, M., 1 Staňková, Z., 1 Kozák, V., 1 Křižan, B., 2 Havel, L. 1
Více13/sv. 8 (85/503/EHS) Tato směrnice je určena členským státům.
62 31985L0503 L 308/12 ÚŘEDNÍ VĚSTNÍK EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ 20.11.1985 PRVNÍ SMĚRNICE KOMISE ze dne 25. října 1985 o metodách pro analýzu potravinářských kaseinů a kaseinátů (85/503/EHS) KOMISE EVROPSKÝCH
VíceVyužití metody kryoterapie pro ozdravení chmele od virových patogenů
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Ing. Petr Svoboda, CSc. Využití metody kryoterapie pro ozdravení chmele od virových patogenů CERTIFIKOVANÁ METODIKA Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i.
VíceKultivace révy vinné v in vitro podmínkách
Ing. Miloš Faltus, Ph.D. RNDr. Ondřej Skala RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. Kultivace révy vinné v in vitro podmínkách CERTIFIKOVANÁ METODIKA Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i.
VíceNÁRODNÍ PROGRAM KONZERVACE A VYUŽÍVÁNÍ GENETICKÝCH ZDROJŮ ROSTLIN, ZVÍŘAT A MIKROORGANISMŮ VÝZNAMNÝCH PRO VÝŽIVU, ZEMĚDĚLSTVÍ A LESNÍ HOSPODÁŘSTVÍ
Ministerstvo zemědělství, Praha 1, Těšnov 17 Č.j.: 33 083/03-3000 NÁRODNÍ PROGRAM KONZERVACE A VYUŽÍVÁNÍ GENETICKÝCH ZDROJŮ ROSTLIN, ZVÍŘAT A MIKROORGANISMŮ VÝZNAMNÝCH PRO VÝŽIVU, ZEMĚDĚLSTVÍ A LESNÍ HOSPODÁŘSTVÍ
VíceN217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie
ÚSTAV TECHNOLOGIE VODY A PROSTŘEDÍ N217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie Název úlohy: Hydrobiologie: Stanovení koncentrace chlorofylu-a Vypracováno v rámci projektu: Inovace a restrukturalizace
VíceMetodika kryokonzervace dormantních pupenů jabloně
RNDr. Alois Bilavčík, Ph.D. Ing. Miloš Faltus, Ph.D. Ing. Jiří Zámečník, CSc. UPOZORNĚNÍ! Uvedená metodika neprošla dosud oponentním řízením a certifikací a její text není definitivní. Poskytovatel metodiky
VíceJednotné pracovní postupy analýza půd III TEST VLIVU CHEMIKÁLIÍ NA DÉLKU KOŘENE SALÁTU (LACTUCA SATIVA)
Národní referenční laboratoř Strana 1 TEST VLIVU CHEMIKÁLIÍ NA DÉLKU KOŘENE SALÁTU (LACTUCA SATIVA) 1 Rozsah a účel Postup je určen pro testování toxicity látek, které nemají silně těkavou povahu. Test
VíceKultivační metody stanovení mikroorganismů
Kultivační metody stanovení mikroorganismů Základní rozdělení půd Syntetická, definovaná media, jednoduché sloučeniny, známé sloţení Komplexní media, vycházejí z ţivočišných nebo rostlinných tkání a pletiv,
VíceMetodika fotoautotrofní kultivace rostlin za podmínek in vitro. Dostupný z
Ševčíková, Hana Dostupný z http://www.nusl.cz/ntk/nusl-263431 Dílo je chráněno podle autorského zákona č. 121/2000 Sb. Tento dokument byl stažen z Národního úložiště šedé literatury (NUŠL). Datum stažení:
VíceTVORBA VÝNOSŮ PŠENICE OZIMÉ A SILÁŽNÍ KUKUŘICE PŘI RŮZNÉM ZPRACOVÁNÍ PŮDY Forming of winter wheat and silage maize yields by different soil tillage
TVORBA VÝNOSŮ PŠENICE OZIMÉ A SILÁŽNÍ KUKUŘICE PŘI RŮZNÉM ZPRACOVÁNÍ PŮDY Forming of winter wheat and silage maize yields by different soil tillage Badalíková B., Bartlová J. Zemědělský výzkum, spol. s
VíceEFFECT OF FEEDING MYCOTOXIN-CONTAMINATED TRITICALE FOR HEALTH, GROWTH AND PRODUCTION PROPERTIES OF LABORATORY RATS
EFFECT OF FEEDING MYCOTOXIN-CONTAMINATED TRITICALE FOR HEALTH, GROWTH AND PRODUCTION PROPERTIES OF LABORATORY RATS Krobot R., Zeman L. Department of Animal Nutrition and Forage Production, Faculty of Agronomy,
VíceVýzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Výzkumný tým Genová banka
Strana: 1/ 23 Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Výzkumný tým Genová banka Směrnice S 2 POLNÍ POKUSY S GENETICKÝMI ZDROJI Výtisk číslo: Zpracoval za společnost: Ověřil: Schválil: Funkce: Řešitel plodinové
Více13/sv. 6 CS (80/891/EHS)
65 31980L0891 27.9.1980 ÚŘEDNÍ VĚSTNÍK EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ L 254/35 SMĚRNICE KOMISE ze dne 25. července 1980 o analytické metodě Společenství pro stanovení obsahu kyseliny erukové v olejích a tucích
VícePERSPEKTIVES OF WEGETABLE WASTE COMPOSTING PERSPEKTIVY KOMPOSTOVÁNÍ ZELENINOVÉHO ODPADU
PERSPEKTIVES OF WEGETABLE WASTE COMPOSTING PERSPEKTIVY KOMPOSTOVÁNÍ ZELENINOVÉHO ODPADU Mach P., Tesařová M., Mareček J. Department of Agriculture, Food and Environmental Engineering, Faculty of Agronomy,
VíceSada Látky kolem nás Kat. číslo 104.0020
Sada Kat. číslo 104.0020 Strana 1 z 68 Strana 2 z 68 Sada pomůcek Obsah Pokyny k uspořádání pokusu... 4 Plán uspořádání... 5 Přehled jednotlivých součástí... 6, 7 Přehled drobných součástí... 8, 9 Popisy
VíceCOMPARISON OF VOLATILE OIL CONTENT EVALUATION METHODS OF SPICE PLANTS SROVNÁNÍ METOD STANOVENÍ OBSAHU SILICE V KOŘENINOVÝCH ROSTLINÁCH
COMPARISON OF VOLATILE OIL CONTENT EVALUATION METHODS OF SPICE PLANTS SROVNÁNÍ METOD STANOVENÍ OBSAHU SILICE V KOŘENINOVÝCH ROSTLINÁCH Růžičková G. Ústav pěstování a šlechtění rostlin, Agronomická fakulta,
VíceDotační programy zemědělství pro rok 2012, poskytované podle 2 a 2d zákona č. 252/1997 Sb., o zemědělství, ve znění pozdějších předpisů
II. Dotační programy zemědělství pro rok 2012, poskytované podle 2 a 2d zákona č. 252/1997 Sb., o zemědělství, ve znění pozdějších předpisů 1.D. Podpora včelařství Účel: zabezpečení opylování zemědělských
VíceMICROBIAL CONTAMINATION OF FRUIT TEAS
MICROBIAL CONTAMINATION OF FRUIT TEAS Konečná H. 1, Kalhotka L. 2 1 Department of Food Technology, Faculty of Agronomy, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Zemedelska 1, 613 00 Brno,
VíceKLÍČIVOST A VITALITA OSIVA VYBRANÝCH DRUHŮ JARNÍCH OBILNIN VE VZTAHU K VÝNOSU V EKOLOGICKÉM ZEMĚDĚLSTVÍ
KLÍČIVOST A VITALITA OSIVA VYBRANÝCH DRUHŮ JARNÍCH OBILNIN VE VZTAHU K VÝNOSU V EKOLOGICKÉM ZEMĚDĚLSTVÍ Seed Germination and Vigor of Chosen Species of Spring Cereals in Relation to Yield in Organic Farming
VíceÚDRŽBA HNACÍCH VOZIDEL ZAMĚŘENÉ NA BEZPORUCHOVOST
ÚDRŽBA HNACÍCH VOZIDEL ZAMĚŘENÉ NA BEZPORUCHOVOST Jan FAMFULÍK Ing. Jan FAMFULÍK, Ph.D., Institut dopravy, VŠB TU Ostrava, 17. listopadu, Ostrava Poruba, Tel.: +420 59 6994553, Fax: +420 59 6916490, E-mail:
VíceLABORATORNÍ PLASTY A POMŮCKY
LABORATORNÍ PLASTY A POMŮCKY 81 Kádinka nízká PP Transparentní, s modře tištěnou stupnicí, autoklávovatelné do 120 C Katalogové číslo ks 25 920001 15,- 50 920002 17,- 100 920003 19,- 250 920004 27,- 400
VíceJednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU HYDROXYPROLINU SPEKTROFOTOMETRICKY
Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU HYDROXYPROLINU SPEKTROFOTOMETRICKY 1 Rozsah a účel Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu hydroxyprolinu v živočišných tkáních spektrofotometrickou metodou. 2 Princip
Více65. STANOVENÍ INTENZITY RESPIRACE Z MNOŽSTVÍ VYLOUČENÉHO CO 2. Princip : Metoda stanovení intenzity respirace z množství vyloučeného CO 2
65. STANOVENÍ INTENZITY RESPIRACE Z MNOŽSTVÍ VYLOUČENÉHO CO 2 úlohy 8.+9. cvičení z Botaniky pro obor ZOO a P/Ú 1/6 Princip : Metoda stanovení intenzity respirace z množství vyloučeného CO 2 je založena
VíceKAPITOLA 9 KRYTY Z DLAŽEB A DÍLCŮ
MINISTERSTVO DOPRAVY ODBOR SILNIČNÍ INFRASTRUKTURY TECHNICKÉ KVALITATIVNÍ PODMÍNKY STAVEB POZEMNÍCH KOMUNIKACÍ KAPITOLA 9 KRYTY Z DLAŽEB A DÍLCŮ Schváleno: MD-OSI č. j. 692/10-910-IPK/1 ze dne 13. srpna
VíceN217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie
ÚSTAV TECHNOLOGIE VODY A PROSTŘEDÍ N217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie Název úlohy: Kultivační stanovení: Stanovení kultivovatelných mikroorganismů při 22 C a 36 C Vypracováno v rámci projektu:
VíceJednotné pracovní postupy Analýza půd
3142.1 Stanovení bazální a substrátem Strana 1 STANOVENÍ BAZÁLNÍ A SUBSTRÁTEM INDUKOVANÉ RESPIRACE METODOU GC 1 Účel a rozsah Postup se používá pro stanovení bazální respirace (BR) a substrátem indukované
VíceCONTRIBUTION TO UNDERSTANDING OF CORRELATIVE ROLE OF COTYLEDON IN PEA (Pisum sativum L.)
CONTRIBUTION TO UNDERSTANDING OF CORRELATIVE ROLE OF COTYLEDON IN PEA (Pisum sativum L.) PŘÍSPĚVEK K POZNÁNÍ KORLAČNÍ FUNKCE DĚLOHY U HRACHU (Pisum sativum L.) Mikušová Z., Hradilík J. Ústav Biologie rostlin,
VíceVLIV MLETÍ ÚLETOVÉHO POPÍLKU NA PRŮBĚH ALKALICKÉ AKTIVACE
VLIV MLETÍ ÚLETOVÉHO POPÍLKU NA PRŮBĚH ALKALICKÉ AKTIVACE INFLUENCE OF GRINDING OF FLY-ASH ON ALKALI ACTIVATION PROCESS Rostislav Šulc 1 Abstract This paper describes influence of grinding of fly - ash
VícePROJEKTOVÁ DOKUMENTACE
Sanace kaple Navštívení Panny Marie, Hostišová okr. Zlín ZADAVATEL ZHOTOVITEL Obecní úřad Hostišová 100 763 01 Mysločovice ING. JOSEF KOLÁŘ PRINS Havlíčkova 1289/24, 750 02 Přerov I - Město EVIDENČNÍ ÚŘAD:
VíceJednotné pracovní postupy testování odrůd STANOVENÍ OBSAHU TANINŮ V ČIROKU SPEKTROFOTOMETRICKY
5321.1 Stanovení obsahu taninů v čiroku Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU TANINŮ V ČIROKU SPEKTROFOTOMETRICKY 1 Účel a rozsah Postup je určen pro stanovení obsahu taninů v zrnech čiroku. 2 Princip Taniny se ze
VíceEFFECT OF MALTING BARLEY STEEPING TECHNOLOGY ON WATER CONTENT
EFFECT OF MALTING BARLEY STEEPING TECHNOLOGY ON WATER CONTENT Homola L., Hřivna L. Department of Food Technology, Faculty of Agronomy, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Zemedelska
VícePOVRCHOVÉ MULČOVÁNÍ BRAMBOR V RŮZNÝCH PŮDNĚ- KLIMATICKÝCH PODMÍNKÁCH
POVRCHOVÉ MULČOVÁNÍ BRAMBOR V RŮZNÝCH PŮDNĚ- KLIMATICKÝCH PODMÍNKÁCH The Mulching of Potatoes in Different Soil and Climatic Conditions Petr Dvořák, Karel Hamouz, Perla Kuchtová, Jaroslav Tomášek KRV ČZU
VíceCHEMIE. Pracovní list č. 12 žákovská verze Téma: Závislost rychlosti kvašení na teplotě. Mgr. Lenka Horutová
www.projektsako.cz CHEMIE Pracovní list č. 12 žákovská verze Téma: Závislost rychlosti kvašení na teplotě Lektor: Mgr. Lenka Horutová Projekt: Student a konkurenceschopnost Reg. číslo: CZ.1.07/1.1.07/03.0075
VíceNEW TRANSPORT TECHNOLOGY - BUSES ON CALL
NEW TRANSPORT TECHNOLOGY - BUSES ON CALL Jiří Čejka, Ladislav Bartuška 1 ABSTRACT The article deals with the provision of transport services through an alternative method - buses on call. This new technology
VícePCR IN DETECTION OF FUNGAL CONTAMINATIONS IN POWDERED PEPPER
PCR IN DETECTION OF FUNGAL CONTAMINATIONS IN POWDERED PEPPER Trojan V., Hanáček P., Havel L. Department of Plant Biology, Faculty of Agronomy, Mendel University of Agriculture and Forestry in Brno, Zemedelska
VíceLANDFILL LEACHATE PURIFICATION USING MEMBRANE SEPARATION METHODS ČIŠTĚNÍ PRŮSAKOVÝCH VOD ZE SKLÁDEK METODAMI MEMBRÁNOVÉ SEPARACE
LANDFILL LEACHATE PURIFICATION USING MEMBRANE SEPARATION METHODS ČIŠTĚNÍ PRŮSAKOVÝCH VOD ZE SKLÁDEK METODAMI MEMBRÁNOVÉ SEPARACE Pavel Kocurek, Martin Kubal Vysoká škola chemicko-technologická v Praze,
VíceSTANOVENÍ VODNÍHO POTENCIÁLU REFRAKTOMETRICKY
Úloha č. 1 Stanovení vodního potenciálu refraktometricky - 1 - STANOVENÍ VODNÍHO POTENCIÁLU REFRAKTOMETRICKY VODNÍ POTENCIÁL A JEHO SLOŽKY Termodynamický stav vody v buňce můžeme porovnávat se stavem čisté
Vícein vitro biotechnologií v ovocnářství
Metodické listy OPVK Využití moderních in vitro biotechnologií v ovocnářství 8. TEORETICKÉ ZÁKLADY IN VITRO KULTUR U OVOCNÝCH DRUHŮ Ovocné druhy lze kromě přirozených polních podmínek pěstovat také v umělých
VíceVLIV OTUŽOVÁNÍ ROSTLIN NA ZMĚNY JEJICH TERMICKÝCH VLASTNOSTÍ PŘI KRYOPREZERVACI
VLIV OTUŽOVÁNÍ ROSTLIN NA ZMĚNY JEJICH TERMICKÝCH VLASTNOSTÍ PŘI KRYOPREZERVACI Miloš Faltus A, Eva Žižková B, Alois Bilavčík A, Jiří Zámečník A A Výzkumný ústav rostlinné výroby, Praha 6 Ruzyně B Výzkumný
VíceLABORATOŘ ANALÝZY POTRAVIN A PŘÍRODNÍCH PRODUKTŮ
LABORATOŘ ANALÝZY POTRAVIN A PŘÍRODNÍCH PRODUKTŮ Stanovení tuku a hodnocení kvality tuků a olejů (Soxhletova metoda pro extrakci tuku a titrační stanovení čísla kyselosti) Garant úlohy: doc. Ing. Zuzana
Více5. Bioreaktory. Schematicky jsou jednotlivé typy bioreaktorů znázorněny na obr. 5.1. Nejpoužívanějšími bioreaktory jsou míchací tanky.
5. Bioreaktory Bioreaktor (fermentor) je nejdůležitější částí výrobní linky biotechnologického procesu. Jde o nádobu různého objemu, ve které probíhá biologický proces. Dochází zde k růstu buněk a tvorbě
VíceBIOLOGIE BA 1 419.0021
BA 1 419.0021 BIOLOGIE 90021 1 2 BIOLOGIE Seznam použitého materiálu množství popis 1 Akvárium 1,5 l 1 Skleněné míchátko 1 Petriho miska ø 80 1 Pracovní listy 1 Lepící páska 1 Sbírka mikroskopických preparátů
VíceObsah 5. Obsah. Úvod... 9
Obsah 5 Obsah Úvod... 9 1. Základy výživy rostlin... 11 1.1 Rostlinné živiny... 11 1.2 Příjem živin rostlinami... 12 1.3 Projevy nedostatku a nadbytku živin... 14 1.3.1 Dusík... 14 1.3.2 Fosfor... 14 1.3.3
VíceEuro měna v Mezinárodních účetních standardech a v českém účetnictví #
Euro měna v Mezinárodních účetních standardech a v českém účetnictví # Jaroslava Roubíčková * Měna euro je v současné době samostatnou cizí měnou obdobně jako USD, CHF a jiné cizí měny. Nejen zahraničně
VíceBILANCE DUSÍKU V ZEMĚDĚLSTVÍ
ČESKÁ ZEMĚDĚLSKÁ UNIVERZITA V PRAZE Jiří Balík, Jindřich Černý, Martin Kulhánek BILANCE DUSÍKU V ZEMĚDĚLSTVÍ CERTIFIKOVANÁ METODIKA Praha 2012 ČESKÁ ZEMĚDĚLSKÁ UNIVERZITA V PRAZE Fakulta agrobiologie,
VíceCVIČENÍ 3: VODNÍ PROVOZ (POKRAČOVÁNÍ), MINERÁLNÍ VÝŽIVA. Pokus č. 1: Stanovení celkové a kutikulární transpirace listů analýzou transpirační křivky
CVIČENÍ 3: VODNÍ PROVOZ (POKRAČOVÁNÍ), MINERÁLNÍ VÝŽIVA Pokus č. 1: Stanovení celkové a kutikulární transpirace listů analýzou transpirační křivky Analýza transpiračních křivek, založená na vážení odříznutých
VíceZměny devizového kurzu ČNB a vývoj mezd Changes in the exchange rate of the CNB and wage developments
Změny devizového kurzu ČNB a vývoj mezd Changes in the exchange rate of the CNB and wage developments Abstrakt Jaruše Krauseová Oslabení české koruny ovlivnilo pozitivní vývoj tržeb exportujících firem.
VíceVyhodnocení cenového vývoje drahých kovů na světových burzách v období let 2005 2010
Vyhodnocení cenového vývoje drahých kovů na světových burzách v období let 2005 2010 Martin Maršík, Jitka Papáčková Vysoká škola technická a ekonomická Abstrakt V předloženém článku autoři rozebírají vývoj
VíceVliv různých druhů cytokininů na zakořeňování moruše černé in vitro
STŘEDOŠKOLSKÁ ODBORNÁ ČINNOST Vliv různých druhů cytokininů na zakořeňování moruše černé in vitro Michaela Medková Tišnov 2013 STŘEDOŠKOLSKÁ ODBORNÁ ČINNOST Obor SOČ: Zemědělství, potravinářství, lesní
VíceGenové banky (instituce pro uchování biodiversity rostlin) základní technologie a pojmy. Přednáška 3a. Pěstování pokusných rostlin ZS
Genové banky (instituce pro uchování biodiversity rostlin) základní technologie a pojmy Přednáška 3a. Pěstování pokusných rostlin ZS 2007-2008 Způsob ochrany fytogenofondu: ex situ (položky v genofondových
VíceOborový workshop pro ZŠ CHEMIE
PRAKTICKÁ VÝUKA PŘÍRODOVĚDNÝCH PŘEDMĚTŮ NA ZŠ A SŠ CZ.1.07/1.1.30/02.0024 Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. Oborový workshop pro ZŠ CHEMIE
VíceKompostování réví vinného s travní hmotou. Composting of vine cane with grass
Kompostování réví vinného s travní hmotou Composting of vine cane with grass Oldřich Mužík, Vladimír Scheufler, Petr Plíva, Amitava Roy Výzkumný ústav zemědělské techniky Praha Abstract The paper deals
Více2 MECHANICKÉ VLASTNOSTI SKLA
2 MECHANICKÉ VLASTNOSTI SKLA Pevnost skla reprezentující jeho mechanické vlastnosti nejčastěji bývá hlavním parametrem jeho využití. Nevýhodou skel je jejich poměrně nízká pevnost v tahu a rázu (pevnost
VíceOBOROVÁ SPECIFIKACE Březen 2010
OBOROVÁ SPECIFIKACE Březen 2010 Praní Hygienicko-epidemiologické kontroly v prádelně OS 80-05 Předmluva Vydávání oborových specifikací Textilním zkušebním ústavem (Centrum technické normalizace) bylo odsouhlaseno
VíceSborník vědeckých prací Vysoké školy báňské - Technické univerzity Ostrava číslo 1, rok 2008, ročník VIII, řada stavební článek č.
Sborník vědeckých prací Vysoké školy báňské - Technické univerzity Ostrava číslo 1, rok 2008, ročník VIII, řada stavební článek č. 26 Martina PEŘINKOVÁ 1 SANACE FARNÍHO KOSTELA TŘÍ KRÁLŮ V BŘIDLIČNÉ Abstrakt
VíceCR Haná LABORATORNÍ MYCÍ AUTOMAT S PŘÍSLUŠENSTVÍM 2
ODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY v souladu s 156 zákona č. 137/2006, Sb., o veřejných zakázkách, ve znění pozdějších předpisů Nadlimitní veřejná zakázka na dodávky zadávaná v otevřeném řízení v souladu s ust.
VíceSborník vědeckých prací Vysoké školy báňské - Technické univerzity Ostrava číslo 1, rok 2008, ročník VIII, řada stavební článek č.
Sborník vědeckých prací Vysoké školy báňské - Technické univerzity Ostrava číslo 1, rok 2008, ročník VIII, řada stavební článek č. 4 Antonín LOKAJ 1, Kristýna VAVRUŠOVÁ 2 DESTRUKTIVNÍ TESTOVÁNÍ VYBRANÝCH
VíceTest genotoxicity na cibuli (Allium cepa)
Test genotoxicity na cibuli (Allium cepa) 1. Účel Test na cibuli (Allium cepa) je účinným pro screening chemických látek a in situ monitoring genotoxicity kontaminantů v životním prostředí. Test se hojně
VíceSešit pro laboratorní práci z chemie
Sešit pro laboratorní práci z chemie téma: Oddělování složek směsí autor: MVDr. Alexandra Gajová vytvořeno při realizaci projektu: Inovace školního vzdělávacího programu biologie a chemie registrační číslo
VíceÚstřední komise Chemické olympiády. 48. ročník 2011/2012. ŠKOLNÍ KOLO kategorie D ŘEŠENÍ SOUTĚŽNÍCH ÚLOH
Ústřední komise Chemické olympiády 48. ročník 2011/2012 ŠKOLNÍ KOLO kategorie D ŘEŠENÍ SOUTĚŽNÍCH ÚLOH TEORETICKÁ ČÁST (70 BODŮ) Úloha 1 Neznámý prvek 16 bodů 1. A síra 0,5 bodu 2. t t = 119 C, t v = 445
VíceÚvod. Náplň práce. Úkoly
Název práce: Zkouška disoluce pevných lékových forem Vedoucí práce: Doc. Ing. Petr Zámostný, Ph.D. Jméno zástupce: Ing. Jan Patera Umístění práce: S25b Úvod Uvolňování léčiva z tuhých perorálních lékových
VíceTHE USE OF HIGH PRESSURE PROCESSING ON ELIMINATION OF MICROORGANISMS IN VEGETABLE AND FRUIT JUICES
THE USE OF HIGH PRESSURE PROCESSING ON ELIMINATION OF MICROORGANISMS IN VEGETABLE AND FRUIT JUICES VYUŽITÍ VYSOKÉHO TLAKU PRO LIKVIDACI MIKROORGANISMŮ U ZELENINOVÝCH A OVOCNÝCH ŠŤÁV Kvasničková B., Šroubková
VíceThe target was to verify hypothesis that different types of seeding machines, tires and tire pressure affect density and reduced bulk density.
INFLUENCE OF TRACTOR AND SEEDING MACHINE WEIGHT AND TIRE PRESSURE ON SOIL CHARACTERISTICS VLIV HMOTNOSTI TRAKTORU A SECÍHO STROJE A TLAKU V PNEUMATIKÁCH NA PŮDNÍ VLASTNOSTI Svoboda M., Červinka J. Department
VíceSpektrofotometrické stanovení fosforečnanů ve vodách
Spektrofotometrické stanovení fosforečnanů ve vodách Úkol: Spektrofotometricky stanovte obsah fosforečnanů ve vodě Chemikálie: 0,07165 g dihydrogenfosforečnan draselný KH 2 PO 4 75 ml kyselina sírová H
VíceVYUŽITÍ FERMENTAČNÍCH ZBYTKŮ ANAEROBNÍ DIGESCE JAKO PALIVA APPLICATION OF FERMENTED ANAEROBIC DIGESTION REMAINDERS AS FUEL
VYUŽITÍ FERMENTAČNÍCH ZBYTKŮ ANAEROBNÍ DIGESCE JAKO PALIVA APPLICATION OF FERMENTED ANAEROBIC DIGESTION REMAINDERS AS FUEL J. Kára 1 ), R. Koutný 1 ), J. Kouďa 2 ) 1 ) Výzkumný ústav zemědělské techniky,
VíceKryoprezervace a uchování genetických zdrojů 12.
Kryoprezervace a uchování genetických zdrojů 12. definice, metody, použití Jaroslava Dubová Uchování genetických zdrojů ztráta genetických zdrojů je nenahraditelná uchováváme: původní rostlinné druhy výskyt
VíceIZOLACE A IDENTIFIKACE PLÍSNÍ
IZOLACE A IDENTIFIKACE PLÍSNÍ MARCELA PEJCHALOVÁ Univerzita Pardubice Fakulta chemicko-technologická Katedra biologických a biochemických věd Centralizovaný rozvojový projekt MŠMT č. C29: Integrovaný systém
VíceRESEARCH OF ANAEROBIC FERMENTATION OF ORGANIC MATERIALS IN SMALL VOLUME BIOREACTORS
RESEARCH OF ANAEROBIC FERMENTATION OF ORGANIC MATERIALS IN SMALL VOLUME BIOREACTORS Trávníček P., Vítěz T., Dundálková P., Karafiát Z. Department of Agriculture, Food and Environmental Engineering, Faculty
VíceReakce kyselin a zásad
seminář 6. 1. 2011 Chemie Reakce kyselin a zásad Známe několik teorií, které charakterizují definují kyseliny a zásady. Nejstarší je Arrheniova teorie, která je platná pro vodné prostředí, podle které
VíceLICÍ PÁNVE V OCELÁRNĚ ARCELORMITTAL OSTRAVA POUŽITÍ NOVÉ IZOLAČNÍ VRSTVY
LICÍ PÁNVE V OCELÁRNĚ ARCELORMITTAL OSTRAVA POUŽITÍ NOVÉ IZOLAČNÍ VRSTVY POURING LADLES IN ARCELORMITTAL OSTRAVA STEEL PLANT - UTILIZATION OF NEW INSULATION LAYER Dalibor Jančar a Petr Tvardek b Pavel
Vícechemie Chemické směsi Akademie věd ČR hledá mladé vědce
chemie Chemické směsi Akademie věd ČR hledá mladé vědce Úvodní list Předmět: Chemie Cílová skupina: 1. ročník SŠ Délka trvání: 90 min. (laboratorní cvičení) Název hodiny: Směsi Výukový celek: Soustavy
VíceN217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie
ÚSTAV TECHNOLOGIE VODY A PROSTŘEDÍ N217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie Název úlohy: Hydrobiologie: Biologický rozbor - Stanovení abiosestonu Vypracováno v rámci projektu: Inovace a restrukturalizace
VíceOPTIMALIZOVANÝ POSTUP PRO DETEKCI GLOMERELLA CINGULATA VE VĚTVÍCH A KMENECH JABLONÍ POMOCÍ MIKROBIOLOGICKÝCH METOD.
DAVID NOVOTNÝ, IVA KŘÍŽKOVÁ A JIŘINA KRÁTKÁ OPTIMALIZOVANÝ POSTUP PRO DETEKCI GLOMERELLA CINGULATA VE VĚTVÍCH A KMENECH JABLONÍ POMOCÍ MIKROBIOLOGICKÝCH METOD. METODIKA PRO ÚTVARY STÁTNÍ SPRÁVY Výzkumný
VíceMožnosti využití rostlinných extraktů pro snížení povrchové kontaminace chlazené drůbeže. Bc. Alena Bantová
Možnosti využití rostlinných extraktů pro snížení povrchové kontaminace chlazené drůbeže Bc. Alena Bantová Diplomová práce 2010 ABSTRAKT Rostlinné silice jsou těkavé, ve vodě nerozpustné látky s charakteristickou
VícePRAXE A PŘÍNOSY INDEXOVÉHO BENCHMARKINGU PRACTISE AND BENEFITS OF INDEX BENCHMARKING
PRAXE A PŘÍNOSY INDEXOVÉHO BENCHMARKINGU PRACTISE AND BENEFITS OF INDEX BENCHMARKING Daniel Salava 1 Anotace: Tento článek se zabývá problematikou a aspekty užití indexového benchmarkingu zejména v malých
VíceMECHANICKÁ ČÁST ČOV. Obsah 15.10.2012 OSTATNÍ PROVOZY
5.0.0 Obsah MECHANICKÁ ČÁST ČOV OSTATNÍ PROVOZY doc. Ing. Jaroslav Pollert, Ph.D. 4. hodina Mechanická část ČOV Primární sedimentační nádrž Lapáky tuků Česle Ekonomika provozu Pomocné procesy mechanickou
VíceSpeciální ZŠ a MŠ Adresa. U Červeného kostela 110, 415 01 TEPLICE Číslo op. programu CZ. 1. 07 Název op. programu
Subjekt Speciální ZŠ a MŠ Adresa U Červeného kostela 110, 415 01 TEPLICE Číslo op. programu CZ. 1. 07 Název op. programu OP Vzdělávání pro konkurenceschopnost Číslo výzvy 21 Název výzvy Žádost o fin. podporu
VíceCHANGES OF SPECIES COMPOSITION IN GRASS VEGETATION ASSOCIATION SANGUISORBA-FESTUCETUM COMUTATAE
CHANGES OF SPECIES COMPOSITION IN GRASS VEGETATION ASSOCIATION SANGUISORBA-FESTUCETUM COMUTATAE ZMĚNY DRUHOVÉ SKLADBY TRAVNÍHO POROSTU ASOCIACE SANGUISORBA-FESTUCETUM COMUTATAE Heger P., Skládanka J.,
VíceÚstřední komise Chemické olympiády. 47. ročník 2010/2011. ŠKOLNÍ KOLO kategorie B ŘEŠENÍ SOUTĚŽNÍCH ÚLOH
Ústřední komise Chemické olympiády 47. ročník 010/011 ŠKLNÍ KL kategorie B ŘEŠENÍ SUTĚŽNÍC ÚL Řešení školního kola Ch kat. B 010/011 TERETICKÁ ČÁST (60 bodů) I. Anorganická chemie Úloha 1 xidační stavy
VíceLaboratorní pomůcky, chemické nádobí
Laboratorní pomůcky, chemické nádobí Laboratorní sklo: měkké (tyčinky, spojovací trubice, kapiláry) tvrdé označení SIMAX (většina varného a odměrného skla) Zahřívání skla: Tenkostěnné nádoby (kádinky,
VíceNabídka mapových a datových produktů Limity využití
, e-mail: data@vumop.cz www.vumop.cz Nabídka mapových a datových produktů Limity využití OBSAH: Úvod... 3 Potenciální zranitelnost spodních vrstev půdy utužením... 4 Potenciální zranitelnost půd acidifikací...
VíceODPAR OVAC YANNICK-O-KM-P
ODPAR OVAC YANNICK-O-KM-P Odpařovač YANNICK-O-KM-P je technický prostředek sloužící k odpaření kyseliny mravenčí. Může být použit k odparu kyseliny mravenčí, při léčení varoózy včel. Výhody tohoto odpařovače
VíceOBSAH ODOLNOST ENERGOSÁDRY PROTI ZMRAZOVACÍM CYKLŮM THE FROST RESISTANCE OF FLUE GAS DESULFURIZATION (FGD) GYPSUM
ODOLNOST ENERGOSÁDRY PROTI ZMRAZOVACÍM CYKLŮM THE FROST RESISTANCE OF FLUE GAS DESULFURIZATION (FGD) GYPSUM Pavla Rovnaníková, Jitka Meitnerová Stavební fakulta VUT v Brně Abstract: The properties of flue
VíceBULLETIN OF THE NATIONAL GALLERY IN PRAGUE XXV / 2015 The Bulletin is published by the National Gallery in Prague, Staroměstské náměstí 12, 110 15
BULLETIN OF THE NATIONAL GALLERY IN PRAGUE XXV / 2015 The Bulletin is published by the National Gallery in Prague, Staroměstské náměstí 12, 110 15 Praha 1 (tel./fax: +420-224 301 302/235, e -mail: obchodni@ngprague.cz).
VíceChemikálie a chemické nádobí
Chemikálie a chemické nádobí Klasifikace a označování chemických látek a směsí Třída nebezpečnosti fyzikální nebezpečnost, nebezpečnost pro lidské zdraví, nebezpečnost pro životní prostředí, nebezpečí
VíceKrytosemenné rostliny pletiva, asimilační barviva (laboratorní práce)
Zvyšování kvality výuky v přírodních a technických oblastech CZ.1.07/1.1.28/02.0055 Krytosemenné rostliny pletiva, asimilační barviva (laboratorní práce) Označení: EU-Inovace-Př-7-21 Předmět: přírodopis
VíceVOJENSKÉ JAKOSTNÍ SPECIFIKACE POHONNÝCH HMOT, MAZIV A PROVOZNÍCH KAPALIN
GENERÁLNÍ ŠTÁB ARMÁDY ČESKÉ REPUBLIKY VOJENSKÉ JAKOSTNÍ SPECIFIKACE POHONNÝCH HMOT, MAZIV A PROVOZNÍCH KAPALIN 6-1 - L Inhibitor vymrzání vody z leteckého paliva DiEGME NATO Code: S-1745 Odpovídá normě:
VíceNárodní program uchování a využívání genetických zdrojů zvířat
METODIKA CHOVU GENETICKÝCH ZDROJŮ KRÁLÍKŮ První zmínky o chovu králíků na území Čech pocházejí ze 13. století, chovatelství jako takové se však začíná rozvíjet na počátku 19. století. V polovině 19. století
VíceLaboratoř růstových regulátorů Miroslav Strnad. ové kultury. Olomouc. Univerzita Palackého & Ústav experimentální botaniky AV CR
Laboratoř růstových regulátorů Miroslav Strnad Tkáňov ové kultury Olomouc Univerzita Palackého & Ústav experimentální botaniky AV CR DEFINICE - růst a vývoj rostlinných buněk, pletiv a orgánů lze účinně
Více