IL-6. Laterální imunodifuze pro semikvantitativní měření lidského interleukinu 6 (IL- 6)

Transkript

1 IL-6 Laterální imunodifuze pro semikvantitativní měření lidského interleukinu 6 (IL- 6) Lateralní průtokový imunologický test pro kvantitativní stanovení lidského interleukinu-6 (IL-6), vyhodnocení pomocí snímače Milenia POCScan Reader nebo PicoScan. REF MQL Milenia Biotech GmbH Hohe Strasse 4-8, D Bad Nauheim, Germany Tel: , Fax: info@milenia-biotec.de, Distributor: BioVendor Laboratorní medicína a.s. Karásek 1767/1, Brno Tel: , Fax: info@biovendor.cz, MQL6 /Y /

2 Vysvětlení symbolů Symboly Význam Symboly Význam Použijte do Obsahuje In vitro diagnostické zdravotnické zařízení Výrobce Šarže Pouze pro hodnocení funkční způsobilosti IVD REF Kat. č. Nahlédněte do návodu k použití Skladovací podmínky Konzultujte s přiloženými dokumenty Poznámka: Významné změny jsou označeny tečkovanou čárou na boku. Na konci návodu k použití najdete tabulku s příčinami změn. Upozornění a bezpečnostní opatření Pečlivě čtěte tyto instrukce před provedením testu. Následujte je krok po kroku! Skladujte reagencie při 2 8 C! Nepoužívejte soupravu po uplynutí data exspirace! Nepoužívejte testovací jednotku, pokud je obal poškozený! Jednotky chraňte před vlhkostí! Nezaměňujte součásti z balení různých šarží! Se všemi vzorky, použitými jednotkami, pipetami, špičkami a dalším kontaminovaným materiál by mělo být zacházeno jako s možným infekčním materiálem. Likvidace odpadového materiálu musí být provedena v souladu se současnými nařízeními. S reagenciemi biologického původu by mělo manipulováno jako s potenciálně infekčním materiálem. Pouze pro profesionální uživatele.

3 Materiály dodávané se soupravou, uchování, stabilita Komponenty Kat. č. Obsah Příprava Skladování Exspirace Testovací jednotka: membrána pokrytá monoklonální (myší) anti-hil-6 protilátkou konjugovanou s částicemi zlata MQSL6 20 testů Připraveno k použití (2 8) C, Po otevření plastového sáčku okamžitě spotřebujte! Do uvedeného data Pufr: PBS-Pufr, ph 7,4 MQCB 1 lahvička á 2 ml Připraveno k použití (2 8) C Do uvedeného data Nezbytné pouze pro Certifikát analýzy CoA- MQL6 1 interpretaci se snímačem Milenia POCScan Reader Bezpečnostní listy k dispozici na vyžádání (viz Zamýšlené použití Test Milenia QuickLine IL-6 je navržen pro kvantitativní měření lidského interleukinu-6 (IL-6). Potřebný materiál Mikropipeta a pipetovací špičky s přesností 100 l. Získání vzorku a příprava Pro stanovení interleukinu 6 (IL-6) může být použito sérum, plazma (EDTA, heparinizovaná, citrátová), supernatant buněčných kultur, plodová voda a cerebrospinální tekutina (ne plná krev). Vzorek krve se centrifuguje do 4 hodin po odběru krve. Za předpokladu, že vzorky budou uchovány déle než 8 hodin při pokojové teplotě, měly by být alikvotovány a uchovány zmrazené při 20 C. Ke stanovení je potřeba 100 l vzorku na jeden test.

4 Metoda a princip stanovení Milenia QuickLine IL-6 je metodou zvanou laterální imunodifuze a je určená pro kvantitativní měření lidského interleukinu-6 (IL-6). Vzorky jsou napipetovány do místa určeného pro aplikaci vzorku. IL-6 obsažený ve vzorku pacienta se naváže na první monoklonální anti-il-6 protilátku konjugovanou s částicemi zlata. IL-6 navázaný na protilátku proti IL-6 konjugovanou s částicemi zlata proniká skrz membránu a prochází přes testovací pás (T) dále. Tato oblast (pás) je pokrytá druhou monoklonální protilátkou specifickou pro IL-6, která ho zachycuje. Částice zlata navázané na IL-6 první protilátkou se zde tedy stávají viditelnými jako červeno-modrý proužek. Intenzita vzniklého zabarvení je přímo úměrná koncentraci IL-6 ve vzorku a roste během inkubační doby. Přebytečné částice zlata pokračují v průniku testovacím zařízením. Konjugát specifické protilátky nanesené na membráně o něco dále jako pás (kontrolní pás, C) zachycují zbytky pronikajícího konjugátu zlata a během inkubační doby zde vznikne dobře viditelná kontrolní linie (pás). Interpretace výsledků je možná pouze se snímači Milenia POCScan nebo PicoScan, které umožňují objektivní interpretaci a dokumentaci výsledku. Koncentrace IL-6 přímo koreluje s barevnou intenzitou testovacího pásu (T). Snímač Milenia POCScan měří barevnou reflexi testovacího pásu, PicoScan barevnou intenzitu testovacího pásu. Výsledek je vypočítán podle naprogramované standardní křivky.

5 1. Postup stanovení se snímačem Milenia POCScan Důležitá upozornění: Testovací jednotka je citlivá na vlhkost. V případě poškození obalu testovací jednotku nepoužívejte! Před otevřením nechte testovací jednotku při pokojové teplotě (18 28 C). Použijte testovací jednotku ihned po otevření. Neskladujte při pokojové teplotě! Před provedením testu si pečlivě přečtěte tyto instrukce a manuál pro snímač Milenia POCScan! Postupujte krok za krokem a dodržujte pořadí jednotlivých úkonů! Spusťte měření ihned po nepipetování vzorku do portu pro vzorek! Inkubační čas 20 minut je kontrolován přístrojem. Před měřením zkontrolujte stávající šarži použité soupravy pomocí štítku z vnější strany balení soupravy a zkontrolujte šarži soupravy s Certifikátem analýzy této soupravy (podívejte se do manuálu snímače Milenia POCScan). Krok 1. Napipetujte 100 µl vzorku do kulatého portu testovací jednotky (viz šipka na obrázku). Pozor: Pipetování pufru není nutné! 2. Zavřete zásuvku snímače Milenia POCScan! Ihned začněte s měřením. Po 20 minutách se výsledek ukáže na displeji. Výsledek nesmí být interpretován později! 3. Zobrazují se pouze platné výsledky. Pokud není výsledek platný, test musí být opakován. Pro další detaily se podívejte do kapitoly Řešení problémů v manuálu k použití snímače Milenia POCScan. Manuál si můžete stáhnout z webových stránek

6 2. Postup stanovení se snímačem Milenia PicoScan Důležitá upozornění: Test je citlivý na vlhkost. V případě poškození obalu testovací jednotku nepoužívejte! Před otevřením nechte test dosáhnout pokojové teploty (18 28 C). Použijte test ihned po otevření. Neskladujte při pokojové teplotě! Před provedením testu si pečlivě přečtěte tyto instrukce a manuál pro snímač Milenia PicoScan! Postupujte krok za krokem a dodržujte pořadí jednotlivých úkonů! Spusťte měření ihned po přidání pufru do vzorku pacienta do portu pro vzorek! Inkubační čas je 5 minut je kontrolován přístrojem. 1. Napipetujte 100 µl vzorku do aplikace vzorku testovací jednotky (viz obrázek). 2. Po 15 minutách inkubace přidejte 2 kapky pufru přímo pomocí lahve v aplikaci vzorku testovací jednotky. 3. Po dalších 5 minutách inkubace je výsledek testu interpretován pomocí systému PicoScan. Výsledek je automaticky uložen a může být přímo přečten z obrazovky počítače. Výsledky by neměly být interpretovány později! Okno vyhodnocení Aplikace vzorku

7 Interpretace výsledků Během měření software kontroluje, zda jsou výsledky platné. Pokud není výsledek platný, nezobrazí se žádný výsledek (viz Interní kontrola kvality ). Obecně: Pozitivní výsledky by měly být ověřeny, pokud se jedná o úplný klinický stav pacienta. Každé rozhodnutí o léčbě je třeba brát individuálně. Interní kontrola kvality V každém případě se vždy musí objevit kontrolní pás (C)! Je použit pouze jako funkční kontrola a nemůže být použit pro interpretaci testovacího pásu. Pokud kontrolní pás není detekovatelný po 20 minutách inkubace, výsledek je neplatný! Analýza musí být zopakována pomocí nové testovací jednotky! Platné výsledky Neplatné výsledky

8 Charakteristika metody Vzorek: Inkubační doba: Specificita: Měřicí rozsah: Senzitivita: Referenční hodnoty: Efekt vysoké koncentrace: Sérum, plazma (EDTA, heparinizovaná, citrátová), supernatant buněčných kultur, plodová voda, cerebrospinální tekutina 20 minut při pokojové teplotě (18 28 C) Vysoce specifické pro lidský IL pg/ml 50 pg/ml < 100 pg/ml u zdravých dárců krve Není detekovatelný pro vzorky pg/ml IL-6 Ovlivňující faktory: Lipémie/ bilirubin/ hemolýza - žádný vliv při hodnotách > 100 pg/ml, pokud je nutné, kontrolní hodnoty < 100 pg/ml vizuálně Kalibrace: Je kalibrována podle NIBSC WHO standard 89/548 Srovnání metod: bylo prověřeno 60 vzorků plazmy pacientů z oddělení intenzivní péče a 20 vzorků sér zdravých dárců krve; výsledky testu Milenia QuickLine IL-6 byly nezávisle interpretovány dvěma operátory; 77,7 % (62/80 vykazovaly identické výsledky v porovnání se soupravou Immulite IL-6 (DPC, Los Angeles, USA)