Sarkosin jako jednoduchý test na rakovinu prostaty analytická studie přednášky Natalia Cernei

HTML
DOWNLOAD

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Sarkosin jako jednoduchý test na rakovinu prostaty analytická studie přednášky Natalia Cernei"

Věra Tesařová
před 9 lety
Počet zobrazení:

Název: Školitel: Sarkosin jako jednoduchý test na rakovinu prostaty analytická studie přednášky Natalia Cernei Datum: 20.1.

1 Název: Školitel: Sarkosin jako jednoduchý test na rakovinu prostaty analytická studie přednášky Natalia Cernei Datum: Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/ Název projektu: Mezinárodní spolupráce v oblasti "in vivo" zobrazovacích technik

1.2011 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.

2 Rakovina prostaty - možnosti diagnostiky Rakovina prostaty je jedním z nejčastějších typů nádorových onemocnění u mužů. Touto chorobou ročně onemocní 5000 mužů ve věku let Více než 1000 mužů v České republice zemře na následky této nemoci Důležitá je včasná diagnóza Per rectum biopsie PSA V roce 2009 vědci prověřili látek, které by mohly v budoucnu sloužit jako spolehlivější markery této nemoci. Nejvíce vynikala látka sarkosin (Nmethylglycin), jejíž množství se ve většině vzorků úměrně zvyšovalo s pokročilostí nemoci.

je včasná diagnóza Per rectum biopsie PSA V roce 2009 vědci prověřili 1 126 látek, které by mohly v budoucnu sloužit jako

3 Cíle práce Optimalizace metody detekce sarkosinu Vliv teploty, ph, aminokyselin, albuminu, kyseliny močové a uracilu na sarkosin Detekce sarkosinu a biochemických parametrů ve vzorcích moči pacientů s karcinomem prostaty a ve vzorcích u kontrolní skupiny

sarkosin Detekce sarkosinu a biochemických parametrů ve

4 Experimentalní plán K sarkosinu (100 µm) byly přidány níže uvedené látky (koncentrace 1-10 mm) - sledování jejich vlivu na plochu píku a změnu retenčního času při měření na AAA 400 glukóza kreatinin uracil kyselina močová Sledování vlivu ph fosfátového pufru (5, 6, 7, 8) na plochu píku a změnu retenčního času při měření sarcosinu na AAA 400 Použité zdroje vzorků moči: glycin prolin 11 pacientů s diagnózou adenokarcinomu prostaty (Urologické oddělení Fakultní nemocnice sv. Anny v Brně), věk let 3 pacienti po chemoterapii, věk let albumin kontrolní skupina dobrovolníků (25) (Mendelova univerzita v Brně), věk let

měření sarcosinu na AAA 400 Použité zdroje vzorků moči: glycin prolin 11 pacientů s diagnózou adenokarcinomu prostaty (Urologické oddělení Fakultní nemocnice

Shema kapalinového chromotografu AAA 400 PC program: Chromulan Ninhydrin odpad Reakční spirála VIS detektor Pufr Průtok Chromatografická Chromatografické pumpy Nástřikový ventíl kolona v reaktor

5 Shema kapalinového chromotografu AAA 400 PC program: Chromulan Ninhydrin odpad Reakční spirála VIS detektor Pufr Průtok Chromatografická Chromatografické pumpy Nástřikový ventíl kolona v reaktor směšovací komora Plocha píku (AU.s -1) y = 0,0137x - 0,1446 R² = 0, Koncentrace (µg/ml) Ninhydrin Sarkosin Ruhemannova červeň Acetaldehyd Cernei, N. V., Zítka, O., Sochor, J., Adam, V., Kizek, R. Sarcosine as possible tumour marker of prostate tumours - analytical study. MendelNet , s ISBN

s -1) 14 12 10 8 6 4 2 0 y = 0,0137x - 0,1446 R² = 0,9996 0 500 1000 Koncentrace (µg/ml) Ninhydrin Sarkosin Ruhemannova červeň Acetaldehyd

6 Absorbance (AU) Aspartamová kyselina20.50 Sarkosin Phenylalanin Arginin Standard aminokyselin 0.50 [koncentrace soli] [570nm] Retenční čas [min.] Koncentrace soli v mobilní fázi (mol.l -1 ) Cernei, N. V., Zitka, O. Ryvolova M., Adam, V., Masarik, M., Hubalek, J., Kizek, R., Spectrometric and Electrochemical Analysis of Sarcosine as a Potential Prostate Carcinoma Marker, International Journal of Electrochemical Science, 2012, ISSN

] 8 6 4 2 Koncentrace soli v mobilní fázi (mol.l -1 ) Cernei, N. V., Zitka, O. Ryvolova M., Adam, V., Masarik, M., Hubalek, J.

7 Absorbance (AU) Absorbance (AU) Vliv teploty na sarkosin Absorbance (AU) Absorbance (AU) A Ninhydrin Sarkosin Ruhemannova červeň Acetaldehyd B 0,4 0,2 Glycin 100µM Sarkosin 100µM Ninhydrin C 0,5 0,3 5.6 mmol/l 11.2 mmol/l 16.9 mmol/l 22.5 mmol/l 28.1 mmol/l 33.7 mmol/l 39.3 mmol/l 44.9 mmol/l 50.5 mmol/l 56.1 mmol/l 61.7 mmol/l 67.4 mmol/l 73.0 mmol/l 78.9 mmol/l D 0, ,0 1,5 1,0 0,5 0.5 Vlnová délka (nm) 0, C 60 C 70 C 80 C 90 C E Vlnová délka (nm) 0,12 0,08 0,04 y = 0,0001x + 0,0047 R² = 0,994 0, Čas inkubace (min) 0, Koncentrace sarkosinu (µg.ml -1 ) Cernei, N. V., Zitka, O. Ryvolova M., Adam, V., Masarik, M., Hubalek, J., Kizek, R., Spectrometric and Electrochemical Analysis of Sarcosine as a Potential Prostate Carcinoma Marker, International Journal of Electrochemical Science, 2012, ISSN

9 mmol/l D 0,0 400 500 600 700 800 2,0 1,5 1,0 0,5 0.

8 Retenční čas (min) Retentční čas (min) Vliv různých látek na sarkosin Retenční čas (min) Retenční čas (min) A NaCl Sarkosin retence B Kyselina močova Sarkosin retence ,5 1 Koncentrace (M) Čas (min) 28 0,0 0,5 1,0 Koncentrace (M) Čas (min) C Glycin Sarkosin retence D Prolin Sarkosin retence ,5 1 Koncentrace (M) Čas (min) ,5 1 Koncentrace (M) Čas (min) Cernei, N. V., Zítka, O., Sochor, J., Adam, V., Kizek, R. Sarcosine as possible tumour marker of prostate tumours - analytical study. MendelNet , s ISBN

2 Čas (min) C 35 34 33 Glycin Sarkosin retence D 35 34 33 Prolin Sarkosin retence 32 32 31 31 30 30 29 29 28 0 0,5 1 Koncentrace (M) 31.6 33.

9 Koncentrace (µm) Koncentrace (µm) Koncentrace (µm) Koncentrace (µm) Biochemické parametry a koncentrace sarkosinu Kyselina močová Glukóza Kontroly Vyléčené Pacienti Kontroly Vyléčené Pacienti Sarkosin Močovina Kontroly Vyléčené Pacienti Kontroly Vyléčené Pacienti Cernei, N. V., Masařík, M., Gumulec, J., Zítka, O., Sochor, J., Babula, P., Kizek, R. Determination of sarcosine as possible tumour marker of prostate tumours and routine biochemical tests in urine samples, XI. pracovní setkání fyzikálních chemiků a elektrochemiků. 1. vyd. Brno: Mendelova univerzita v Brně, 2011, s ISBN

, Gumulec, J., Zítka, O., Sochor, J., Babula, P., Kizek, R.

10 Závěr Bylo zjištěno, že ionexová chromatografie je velmi vhodnou metodou pro detekci sarkosinu v moči. Výsledky potvrzují hypotézu, že koncentrace sarkosinu u pacientů s karcinomem prostaty je výrazně zvýšena. Výsledky vykazují slibný trend pro využití sarkosinu při diagnostice nádorových onemocnění prostaty

Výsledky potvrzují hypotézu, že koncentrace sarkosinu u pacientů s karcinomem

11 Výsledky naší práce byly publikovány v ISI indexovaném časopise Spectrometric and Electrochemical Analysis of Sarcosine as a Potential Prostate Carcinoma Marker Natalia Cernei, Ondrej Zitka, Marketa Ryvolova, Vojtech Adam, Michal Masarik, Jaromir Hubalek, Rene Kizek (2012) International Journal of Electrochemical Science, IF 2.808

Natalia Cernei, Ondrej Zitka, Marketa Ryvolova, Vojtech Adam, Michal Masarik,

12 Výsledky publikované v konferenčních sbornících Zinc, sarcosine and prostate? Is there any relation revealed by electrochemistry? Adam, Vojtěch -- Zítka, Ondřej -- Majzlík, Petr -- Gumulec, Jaromír -- Cernei, Natalia Vladimirovna -- Křížková, Soňa -- Masařík, Michal -- Hubálek, Jaromír -- Horna, Aleš -- Eckschlager, Tomáš -- Kizek, René Zinc, sarcosine and prostate? Is there any relation revealed by electrochemistry?. In XXI. International Symposium on Bioelectrochemistry and Bioenergetics (BES). Cracow, Poland, 2011, s ISBN Determination of sarcosine as possible tumour marker of prostate tumours and routine biochemical tests in urine samples Cernei, Natalia Vladimirovna -- Masařík, Michal -- Gumulec, Jaromír -- Zítka, Ondřej -- Sochor, Jiří -- Babula, Petr -- Kizek, René In XI. pracovní setkání fyzikálních chemiků a elektrochemiků. 1. vyd. Brno: Mendelova univerzita v Brně, 2011, s ISBN Analysis of sarcosine by capillary electrophoresis Ryvolová, Markéta -- Cernei, Natalia Vladimirovna -- Masařík, Michal -- Kizek, René Analysis of sarcosine by capillary electrophoresis. In XI. pracovní setkání fyzikálních chemiků a elektrochemiků. 1. vyd. Brno: Mendelova univerzita v Brně, 2011, s ISBN Determination of sarcosine as a potential tumour marker by liquid chromatography with coulometric detection Zítka, Ondřej -- Cernei, Natalia Vladimirovna -- Masařík, Michal -- Gumulec, Jaromír -- Adam, Vojtěch -- Horna, Aleš -- Kizek, René Determination of sarcosine as a potential tumour marker by liquid chromatography with coulometric detection. In XXI. International Symposium on Bioelectrochemistry and Bioenergetics (BES). Cracow, Poland, 2011, s ISBN Stanoveni sarkosinu v moci pacientu s karcinomem prostaty Ryvolová, Markéta -- Křížková, Soňa -- Sochor, Jiří -- Cernei, Natalia Vladimirovna -- Zítka, Ondřej -- Gumulec, Jaromír -- Hlavna, M -- Provazník, Ivo -- Masařík, Michal -- Kizek, René Stanoveni sarkosinu v moci pacientu s karcinomem prostaty. In XXXV. Brněnské onkologické dny. 1. vyd. Brno: Masarykuv Onkologicky ustav v Brne, 2011, s ISBN Sarcosine as possible tumour marker of prostate tumours - analytical study Cernei, Natalia Vladimirovna -- Zítka, Ondřej -- Sochor, Jiří -- Adam, Vojtěch -- Kizek, René Sarcosine as possible tumour marker of prostate tumours - analytical study. In MendelNet , s ISBN

Kizek, René Zinc, sarcosine and prostate? Is there any relation revealed by electrochemistry?. In XXI. International Symposium on Bioelectrochemistry and Bioenergetics (BES). Cracow, Poland, 2011, s.

13 Finanční prostředky Dotace IGA Materiál Stipendia 120 tis. 102 tis. 12 tis.- Mgr. Natalia Cernei 6 tis.- Mgr. Ondřej Zítka

14 Laboratoř metalomiky a nanotechnologií Tato práce byla podpořena grantem IGA MENDELU 1/2011

15 Poděkování Doc. Ing. René Kizek, Ph.D., Ústav chemie a biochemie, laboratoř metalomiky a nanotechnologií Mgr. Ondřej Zítka Ústav chemie a biochemie, laboratoř metalomiky a nanotechnologií Ing. Jiří Sochor Ph.D. Ústav chemie a biochemie, laboratoř metalomiky a nanotechnologií Ing. Pavlina Šobrová Ústav chemie a biochemie, laboratoř metalomiky a nanotechnologií

Jiří Sochor Ph.D. Ústav chemie a biochemie, laboratoř metalomiky a nanotechnologií Ing.

16 Děkuji Vám za pozornost

Podobné dokumenty

Magnetické částice pro detekci nádorových onemocnění, založené na protilátkách Vojtěch Adam

Název: Školitel: Magnetické částice pro detekci nádorových onemocnění, založené na protilátkách Vojtěch Adam Datum: 7..203 Reg.č.projektu: CZ..07/2.4.00/3.0023 Název projektu: Partnerská síť centra excelentního