MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV BIOCHEMIE. Bakalářská práce

Transkript

1 MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV BIOCHEMIE Bakalářská práce Brno 2015 Eva Gazárková

2 MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV BIOCHEMIE PROTEINOVÝ A AMINOKYSELINOVÝ DOPLNĚK VE SPORTOVNÍCH PRODUKTECH Bakalářská práce Eva Gazárková Vedoucí práce: Ing. Sylvie Hadrová, Ph.D. Brno 2015

3 Bibliografický záznam Autor: Název práce: Studijní program: Eva Gazárková Přírodovědecká fakulta, Masarykova univerzita Ústav Biochemie Proteinový a aminokyselinový doplněk ve sportovních produktech Biochemie Studijní obor: Biochemie Vedoucí práce: Ing. Sylvie Hadrová, Ph.D. Akademický rok: 2015/2016 Počet stran: Klíčová slova: Bílkoviny; Aminokyseliny; Sportovní doplňky; Proteinové sportovní doplňky; Aminokyselinové sportovní doplňky; Syrovátkový protein; Biologická hodnota; Aminokyselinové skóre;

4 Bibliographic Entry Author: Title of Thesis: Degree programme: Field of Study: Eva Gazárková Faculty of Science, Masaryk University Department of Biochemistry Protein and amino acids supplement in sport products Biochemistry Biochemistry Supervisor: Ing. Sylvie Hadrová, Ph.D. Academic Year: 2015/2016 Number of Pages: Keywords: Proteins; Aminoacids; Sport s supplements; Protein supplements; Aminoacid supplements; Whey protein; Biological value; Aminoacid score;

5 Abstrakt V této bakalářské práci se věnuji proteinovým a aminokyselinovým doplňkům stravy. V rámci zpracování bakalářské práce jsem zanalyzovala patnáct různých doplňků dostupných na českém trhu a snažila se o nich podat objektivní informace. Analýza proteinových doplňků byla provedena na aminoanalyzátoru AAA 400, který pracuje na tradičním principu Moora a Steina s ninhydrinovou detekcí. Výsledky analýzy jsem srovnala s deklarovaným množstvím proteinů, které bylo poskytnuto výrobci. Na základě výsledků analýzy jsem stanovila aminokyselinové skóre výrobků. Podle celkového kvalitativního a kvantitativního obsahu aminokyselin a vypočítaného aminokyselinového skóre jsem jednotlivé výrobky doporučila konkrétní skupině sportovců. Pro vytrvalostní sporty ( vytrvalostní běh, cyklistika apod.) jsem doporučila výrobky s nižším obsahem proteinů a nízkou energetickou hodnotou - INKOSPOR X-TREME AMINO+ (obsah proteinů: 26,15 g /100 g, aminokyselinové AMKskóre: 14,45%) a NUTREND AMINO POWER LIQUID ( obsah proteinů: 39,35 g /100 g, AMK skóre: 26,33%) Pro silové sporty ( kulturistika, vzpírání apod.) navrhuji doplňky s obsahem proteinů nad 80% a s vysokým aminokyselinovým skórem (nejlépe nad 100%) - INKOSPOR X-TREME MUSCLE GAINER JAHODA (obsah proteinů: 82,04 g /100 g, AMK skóre: 131,2%) a NUTREND LONG CORE (obsah proteinů: 81,02 g /100 g, AMK skóre: 117,07%). Pro kolektivní sporty ( fotbal, hokej, volejbal apod.) považuji za vhodné, na základě získaných výsledků, užívání většiny testovaných proteinových doplňků.

6 Abstract In this thesis I deal with protein and aminoacid dietary supplements. In order to elaborate this bachelor work, I have analyzed fifteen different supplements, that are available in czech market and I have tried to report objective information about them. The analyzis of protein supplements has been executed on aminoanalyzer AAA 400, that is based on traditional principle of Moor and Stein with ninhydrin detection. I have compared the analysis results with declared amount of proteins, that was provided to the producer. Based on analysis results I have specified amino acid score of products. According the whole quality and quantity contents of amino acids and calculated amino acid score I have recommended each single products to specific group of sportsmen. For endurance sports (endurance running, cycling, etc.) I have recommended products with lower content of proteins and with low energetic value - INKOSPOR X-TREME AMINO+ (protein content: 26,15 g /100 g, amino acid AMK- score: 14,45%) and NUTREND AMINO POWER LIQUID (protein content: 39,35 g /100 g, AMK score: 26,33%) For strenght sports (body-building, weight-lifting, etc.) I propose supplements with protein content higher then 80% and with high amino acid score (best above 100%) X-TREME MUSCLE GAINER STRAWBERRY (protein content 82,04 g /100 g, AMK score: 131,2%) and NUTREND LONG CORE (protein content: 81,02 g /100 g, AMK score: 117,07%). For team sports (football, hockey, volleyball, etc.). Based on obtained results, I consider as proper usage of most tested protein supplements.

7

8 Tato práce vznikla za podpory projektu BiochemNet - Vytvoření sítě pro podporu spolupráce biomedicínských pracovišť a zvýšení uplatnitelnosti absolventů biochemických oborů v praxi (registrační číslo CZ.1.07/2.4.00/ ). Projekt je realizován v rámci Operačního programu vzdělávání pro konkurenceschopnost, který je spolufinancovaný z Evropského sociálního fondu a státního rozpočtu ČR.

9 Poděkování Na tomto místě bych chtěla poděkovat vedoucí mé bakalářské práce Ing. Sylvii Hadrové, Ph.D. za podporu a pomoc při zpracovávání práce a zejména za trpělivost. Dále bych chtěla poděkovat Ing. Aleši Veselému za konzultaci k praktické části mé práce a za asistenci při práci na aminoanalyzátoru. Dále bych chtěla poděkovat společnostem Inkospor a Nutrend za poskytnutí vzorků k analýze. V neposlední řadě bych chtěla poděkovat svým blízkým; mé rodině, mému příteli Petru Brychtovi a mým kamarádům Tomáši Malému, Jiřímu Platovskému, Michalu Kučerovi a Daně Novákové za psychickou podporu při psaní a zpracovávání této práce. Prohlášení Prohlašuji, že jsem svoji bakalářskou/diplomovou/rigorózní práci vypracovala samostatně s využitím informačních zdrojů, které jsou v práci citovány Brno 31. prosince 2015 Jméno Příjmení

10 Obsah 1 Úvod Teoretická část BIOPOLYMERY, BÍLKOVINY, AMINOKYSELINY Biopolymery 1) Bílkoviny (Proteiny) 1) 2) 3) Významné funkce bílkovin v organismu Struktura bílkovin Vlastnosti a rozdělení bílkovin Aminokyseliny Rozdělení aminokyselin 1) 2) Vlastnosti a zdroje aminokyselin 1) 2) 4) Rozdělení aminokyselin Charakteristika vybraných aminokyselin Metabolismus bílkovin 1) 3) 4) Odbourávání proteinů Proteosyntéza AMINOKYSELINOVÉ A PROTEINOVÉ SPORTOVNÍ DOPLŇKY, VÝŽIVA VE SPORTU Nejnovější poznatky o proteinových a aminokyselinových suplementech 13) Doplňky stravy pro sportovce 5) Technologie zpracování bílkoviny Členění zdrojů bílkovin používaných při výrobě proteinových a aminokyselinových suplementů 6) Technologická výroba syrovátky 9) Bílkoviny ve výživě 1) 7) 8) Biologická hodnota 7) 12) Praktická část

11 3.1 Cíl, popis práce Používané přístroje Používané pomůcky Chemikálie Testované produkty Stanovení obsahu aminokyselin na aminoanalyzátoru AAA 400 kyselá a oxidativně kyselá hydrolýza Kyselá hydrolýza Oxidativně kyselá hydrolýza Vlastní stanovení aminokyselin v aminoanalyzátoru AAA Výsledky analýzy Aminokyselinové skóre testovaných výrobků Výsledky dotazníkové metody Diskuse Závěr Seznam literatury Seznam tabulek Seznam příloh

12 1 Úvod Téma pro svou bakalářskou práci nazvanou Proteinový a aminokyselinový doplněk ve sportovních produktech jsem zvolila z důvodu toho, že s ohledem na mé sportovní aktivity (závodní tanec) se o oblast sportovní výživy již dlouhodobě zajímám. Ve své práci jsem se zaměřila v první části teoretické části na biopolymery, bílkoviny a aminokyseliny, na jejich strukturu, složení, funkci v živých organismech a na metabolismus. Ve druhé části teoretické části jsem se zabývala novými poznatky v oblasti sportovní suplementace, sportovními produkty a jejich kvalitou a také jsem zmínila výrobu a zpracování nejběžnější suroviny pro výrobu proteinových sportovních doplňků syrovátky. V rámci praktické části jsem stanovovala množství aminokyselin ve vybraných vzorcích proteinových doplňků. Ověřovala jsem deklarované množství a stanovila jsem i jejich biologickou hodnotu. Dále jsem provedla průzkum o užívání sportovních doplňků veřejností na veletrhu Sport Life a Dance Life Expo v Brně ve dnech (viz. Příloha č. 1) Část výsledků této práce byla zveřejněna na vědecké konferenci v září (viz. Příloha č. 2)

13 2 Teoretická část 2.1 BIOPOLYMERY, BÍLKOVINY, AMINOKYSELINY Biopolymery 1) Jako biopolymery se označují vysokomolekulární složky organismů. Řadí se k nim zejména bílkoviny (proteiny) a nukleové kyseliny (NK), dále polysacharidy a někdy i lipidy. Proteiny a NK mají mezi biopolymery výjimečné postavení - jsou přítomny ve všech organismech, tvoří přes 50 % jejich sušiny. Jsou nejsložitější a nejpestřejší součástí živých systémů. Vytváří v organismech organizované systémy, které jsou stavebním materiálem buněk a jejich součástí, a současně řídí a realizují veškeré dění, které v buňkách probíhá. Mají odpovědnost za jedinečné vlastnosti života - schopnost přenosu z generace na generaci (replikace), schopnost vývoje (evoluce) a přizpůsobení se změnám okolních podmínek (adaptace). NK mají řídící funkci (nesou genetickou informaci), proteiny představují dynamický prvek organismu. Funkce proteinů a NK je důsledkem prostorové struktury (konformace), která je podmíněna pořadím stavebních jednotek v jejich molekulách. 1) Bílkoviny (Proteiny) 1) 2) 3) Název protein je odvozený z řeckého prótéo (= zaujímám první místo). Bílkoviny (proteiny) jsou biopolymery přítomné v každé buňce organismu. Jejich základními stavebními jednotkami jsou aminokyseliny. Proteiny jsou přirozenými polymery aminokyselin obsahující alespoň 100 aminokyselinových (AMK) zbytků Významné funkce bílkovin v organismu Bílkoviny mají následující funkce v organismu zajišťují enzymovou katalýzu, zajišťují pohyb svalové tkáně, vytvářejí strukturu buněk a tkání, zajišťují transport látek, zajišťují transformaci energie, regulují metabolické procesy

14 zajišťují vznik a přenos nervového vzruchu, zajišťují obranné funkce organismu, mají výživovou funkci Struktura bílkovin Funkce bílkovin je spojena s jejich strukturou. Strukturu bílkovin popisujeme z hlediska čtyř úrovní organizace: primární struktura dána pořadím aminokyselin jejich polypeptidových řetězců; Obrázek č. 1: primární struktura polypeptidového řetězce. Autor neznámý. [cit ] dostupné na www sekundární struktura prostorové uspořádání v určitém místě hlavního polypeptidového řetězce bez ohledu na postranní řetězce. Obrázek č. 2: sekundární struktura polypeptidového řetězce pravotočivá šroubovice. Autor neznámý. [cit ] dostupné na www

15 Obrázek č. 3: sekundární struktura polypeptidového řetězce struktura skládaného listu. Autor neznámý. [cit ] dostupné na www terciární struktura - trojrozměrná struktura celého polypeptidu. Obrázek č. 4: terciární struktura globulárního proteinu. Autor neznámý. [cit ] dostupné na www /slide1_7-319x239.jpg kvartérní struktura vztahuje se k prostorovému uspořádání proteinových podjednotek. Obrázek č. 5: Kvartérní struktura hemoglobinu. Autor neznámý. [cit ] dostupné na www

16 Určujícím faktorem pro vlastnosti proteinů je primární struktura polypeptidového řetězce. Proteiny vykonávají v živých systémech řadu funkcí, a proto nemají stejný charakter konfirmace. 1) fibrilární (vláknité) proteiny molekuly mají silně protáhlý až vláknitý tvar; plní funkce konstrukční, podpůrné a krycí, většinou jsou ve vodě nerozpustné, 2) globulární proteiny (sféroproteiny) molekuly mají oblý až kulovitý tvar, jsou dobře rozpustné ve vodě, jejich molekuly mají charakter micely uvnitř sféry jsou uzavřeny hydrofobní (nepolární) části peptidového řetězce, na povrchu jsou postranní nabité polární postranní řetězce molekuly proteinu Vlastnosti a rozdělení bílkovin Se strukturou bílkovin úzce souvisí jejich vlastnosti jako rozpustnost a změna prostorového uspořádání účinkem fyzikálních a chemických vlivů. Bílkoviny rozdělujeme na: Jednoduché Histony jsou to bazické proteiny vyskytující se v buněčných jádrech, váží se s nukleovými kyselinami. Albuminy jsou to globulární proteiny většinou kyselé povahy, rozpustné ve vodě. Asi 40% albuminu je přítomno v plazmě a tvoří hlavní část plazmatických bílkovin. Globuliny jsou to slabě kyselé globulární proteiny, ve vodě špatně rozpustné. Rozdělují se na α-,β-,γ - globuliny. Mají obrannou, transportní i enzymovou funkci. Skleroproteiny jsou to vláknité (fibrilární) proteiny, značně chemicky odolné, nerozpustné ve vodě. Patří sem kolagen a elastin, hlavní bílkoviny pojivových tkání. Složené Metaloproteiny obsahují v molekule kromě proteinové části ještě kovový iont. Např. resorbované železo se ukládá v bílkovině feritin v játrech, slezině a v kostní dřeni. Transferin transportuje ve své molekule dva ionty Fe 3+ na místo potřeby. Fosfoproteiny mají v molekule esterově vázanou kyselinu trihydrogenfosforečnou. Typickým fosfoproteinem je mléčná bílkovina kasein. Lipoproteiny tvoří velice rozsáhlou skupinu látek, vyskytujících se v krevní plazmě. Jsou transportními systémy hydrofobních lipidů. Klasifikují se podle specifické hustoty, která závisí na obsahu bílkovinné a lipidové složky. Lipoproteiny se dělí na několik frakcí o různém složení: chylomikrony, lipoproteiny o velmi nízké hustotě (VLDL), lipoproteiny o nízké hustotě (LDL), lipoproteiny o vysoké hustotě (HDL) Nukleoproteiny jsou komplexy, v nichž je proteinová složka (histony) vázána na nukleové kyseliny

17 Glykoproteiny mají na proteinovou složku vázány oligosacharidy. Některé glykoproteiny tvoří velice viskózní roztoky, které jsou základní složkou hlenů a slizů. Glykoproteiny jsou odpovědné za specifičnost krevních skupin. Glykoproteinový charakter mají některé enzymy a hormony. Chromoproteiny obsahují skupinu, která je odpovědná za výslednou barvu. Patří sem např. červený zrakový pigment rhodopsin, který umožňuje vidění ve slabém světle, nebo hemoproteiny s navázanou hemovou skupinou Aminokyseliny 1) 2) Rozdělení aminokyselin AMK (aminokarboxylové kyseliny) se významně účastní metabolických procesů v organismu. Nejvýznamnějších je 20 AMK, ze kterých jsou zbudovány molekuly všech bílkovin naší planety tzv. kódované aminokyseliny. Většina přírodních aminokyselin jsou alfa-, tj. aminová i karboxylová skupina jsou vázány na tomtéž α-atomu uhlíku. Mají proto stejný základní skelet: Obrázek č. 6: Obecný vzorec aminokyseliny, R = postranní řetězec aminokyseliny, který rozhoduje o jejím individuálním charakteru. AMK se dělí do čtyř skupin podle typu postranního řetězce a přítomnosti funkčních skupin v něm: 1) Aminokyseliny s nepolárním řetězcem R, tedy s uhlovodíkovým postranním řetězcem. Patří sem glycin, alanin, valin, leucin, isoleucin, prolin, fenylalanin. 2) Aminokyseliny s polárními skupinami -OH, -SH, -CONH 2, nebo heterocyklickou strukturou. Patří sem aminokyseliny serin, threonin, tyrosin, cystein, methionin, asparagin, glutamin, tryptofan. 3) Kyselé aminokyseliny jsou kyselina asparagová a glutamová. 4) Zásadité aminokyseliny obsahují více než jednu bazickou skupinu. Řadíme sem lysin, arginin, histidin

18 Tabulka č. 1: Přehled názvů a vzorců základních neutrálních aminokyselin: Tabulka č. 2: Přehled názvů a vzorců základních kyselých aminokyselin: Tabulka č. 3: Přehled názvů a vzorců základních zásaditých aminokyselin:

19 Tabulka č. 4: Přehled názvů a vzorců základních aminokyselin, obsahujících síru: Tabulka č. 5: Přehled názvů a vzorců základních aromatických aminokyselin: Tabulka č. 6: Přehled názvů a vzorců základních heterocyklických aminokyselin:

20 1) 2) 4) Vlastnosti a zdroje aminokyselin Aminokyseliny jsou bezbarvé krystalické látky, většinou dobře rozpustné ve vodě, nerozpustné v nepolárních rozpouštědlech. Jsou opticky aktivní s výjimkou glycinu, který nemá chirální centrum. Aminokyseliny se vyskytují vesměs v D- a L- konfiguracích. Struktura všech kódovaných aminokyselin (mimo glycin) odpovídá L- konfiguraci. Obrázek č.. 7: vzorce L- a D-alaninu, který je nejjednodušší aminokyselinou mající asymetrický uhlík. Autor neznámý [cit ], dostupné na: www Aminokyseliny obsahují vždy alespoň dvě ionizované funkční skupiny: kyselou skupinu -COOH a zásaditou skupinu -NH 2. Mají tedy vlastnost amfolytů, obě skupiny se podle koncentrace H + iontů v prostředí chovají zcela nezávisle jako kyseliny nebo zásady, mají tedy výborné pufrační vlastnosti. Reakcí dvou aminokyselin, při níž reaguje alfa-aminoskupina jedné aminokyseliny s alfa-karboxylovou skupinou druhé, vzniká dipeptid. Vazba, kterou jsou zbytky aminokyselin spojeny, se nazývá peptidová vazba. Peptidová vazba, také peptidická vazba, je druhem kovalentní chemické vazby obsahující seskupení atomů -CO NH. Obrázek č. 8: vznik peptidové vazby. NEUROtiker. [cit ], dostupné na: www Rozdělení aminokyselin Rostliny jsou schopny syntetizovat všechny AMK, jsou-li jim dodány anorganické sloučeniny dusíku. Živočichové, a tedy i člověk, jsou závislí na přívodu bílkovin nebo AMK potravou, jsou pro ně jediným zužitkovatelným zdrojem dusíku k výstavbě vlastních tělesných proteinů. Některé z AMK dokáže náš

21 organismus syntetizovat přeměnou jiných AMK, některé však ne. Ty musí být přijímány potravou v dostatečném množství, jsou pro člověka nezbytné, esenciální. U rychle rostoucích organismů se některé neesenciální aminokyseliny, které mladý organismus není schopen syntetizovat v dostatečném množství, stávají esenciálními. Říkáme jim proto semiesenciální aminokyseliny podmíněně postradatelné. Aminokyseliny rozdělujeme na tři skupiny: 5) Esenciální lidské tělo je neumí syntetizovat, musí se přijímat potravou Semiesenciální (podmíněně esenciální) lidské tělo je schopné tyto AMK za určitých okolností syntetizovat Neesenciální lidské tělo je umí syntetizovat, nemusí být součástí potravy Tabulka č. 7: Rozdělení AMK: MACH, Ivan. Doplňky stravy: jaké si vybrat při sportu i v každodenním životě. První vydání. Praha: Grada Publishing, a.s., ISBN str. 130 Esenciální Semiesenciální Neesenciální Isoleucin Arginin Alanin Leucin Cystein/Cystin Asparagin Lysin Glutamin Aspartát Methionin Histidin Citrulin Fenylalanin Prolin Glutamát Threonin Taurin Glycin Tryptofan Tyrosin Ornithin Valin Serin Charakteristika vybraných aminokyselin L-lysin 10) Má schopnost pomoci zabránit herpetické infekci. Podporuje vstřebávání vápníku a pomáhá budovat svaly. Neméně důležitý je i pro produkci tělesných hormonů. Dávkování je doporučeno 14 mg/1 kg hmotnosti. V potravě se lysin vyskytuje nejvíce v parmezánu, rybách, hovězím a vepřovém mase, sojových bobech, luštěninách a arašídech

22 L - tryptofan 10) Tato AMK je hojně využívána při problémech se spánkem, vnitřním neklidu, úzkostech, depresích. Pracuje s hormony serotoninem a melatoninem. Zkvalitňuje a prohlubuje spánek, proto je doporučováno podávat ho zhruba 30 minut před spánkem. L - arginin 11) Arginin, který se v lidském organismu přemění na NO, umožňuje nastartovat transportní systém tak, že zaplaví svaly krví bohatou na živiny a kyslík, a tak dojde k rychlejšímu anabolickému růstu svalů. Dále má pozitivní účinky na srdeční činnost, tím, že udržuje správný cévní tonus a tlak. Má vliv také na mužskou erekci díky zvýšení NO v organismu Metabolismus bílkovin 1) 3) 4) Metabolismus proteinů se v řadě směrů liší od metabolismu sacharidů a lipidů především z těchto důvodů: Sacharidy a lipidy slouží především jako zdroj energie a mohou se vzájemně zastupovat. Proteiny tvoří hlavní stavební materiál buněk a tkání a jsou pro heterogenní organismus prakticky jediným zdrojem dusíku. Na rozdíl od sacharidů a lipidů neexistuje v organismu skladiště proteinů. Proteiny se neustále odbourávají a znovu tvoří. (Jako průměrná hodnota biologického poločasu lidských bílkovin se udává 80 dní.) Jednotlivé aminokyseliny se odbourávají zcela individuálním metabolismem, zatímco monosacharidové stavební jednotky a mastné kyseliny lipidů jsou odbourávány jednotným mechanismem. Požité bílkoviny se účastní látkové přeměny mnohem podstatněji než sacharidy a lipidy. Zejména relativně postradatelné aminokyseliny, které organismus umí připravit i z jiných látek, mají velmi pestrý metabolismus. Také biosyntéza proteinů (proteosyntéza) má zcela odlišný charakter od biosyntézy sacharidů a lipidů. Je to řazení aminokyselinových stavebních jednotek, které je řízeno předepsaným genetickým kódem Odbourávání proteinů Odbourávání bílkovin začíná hydrolytickým štěpením peptidové vazby proteolýzou tedy degradací na peptidy nebo až na AMK. Reakce je katalyzována proteolytickými enzymy (proteázami). AMK vzniklé rozštěpením proteinů se ve vnitřním prostředí setkávají s AMK, které vznikly z degradovaných bílkovin tkání vlastního těla a s AMK, které se v těle syntetizovaly. Vytvoří se tak vnitřní hotovost, neboli pool AMK. Tyto aminokyseliny slouží k anabolickým dějům tvorbě vlastních proteinů a dalších důležitých produktů, nebo se využijí jako živiny

23 Obrázek č. 9: Schéma metabolismu proteinů. LEDVINA, Miroslav, Alena STOKLASOVÁ a Jaroslav CERMAV. Biochemie pro studující medicíny I. díl. 2. vydání, Praha: Karolinum, 2009, ISBN Proteosyntéza Obecný mechanismus syntézy proteinů je společný pro všechny eukaryotické buňky, syntéza většiny proteinů trvá 20 sekund až několik minut. Dělí se na tři fáze: 1) Transkripce = přepis genetické informace z DNA do RNA (probíhá v jádře buňky). Dochází k rozpletení dvoušroubovice DNA a následnému připojením nukleotidů na základě komplementarity. Vzniknou vlákna mrna, která se odpojí. 2) Translace = překlad genetické informace z mrna do primární struktury proteinu. Vlákno mrna se naváže na ribozómy, ve kterých se uskutečňuje samotná tvorba proteinu. Tento proces probíhá čtením trojic bází v řetězci mrna. Trojice bází se nazývá kodon a kóduje určitou aminokyselinu. Vztah mezi kodonem a aminokyselinou se nazývá genetický kód. Na každý kodon se napojí aminokyselina, která se spojí s předchozí a následující aminokyselinou peptidovou vazbou. Jednotlivé aminokyseliny jsou vázány na nukleotidy trna. 3) Posttranslační modifikace = další úpravy polypeptidového řetězce, např. glykosylace, která probíhá uvnitř endoplazmatického retikula a v Golgiho aparátu. Proteiny určené na export jsou zabaleny do sekrečních váčků. Většina proteinů se začíná sbalovat do trojrozměrné struktury již během syntézy na ribozómu. Skládání proteinů do jejich nativní konformace napomáhají tzv. molekulové chaperony = proteiny, které se váží k částečně složenému řetězci syntetizované bílkoviny a udržují jej v rozvinuté formě během pohybu cytoplazmou a přes jednotlivé buněčné membrány. Chybně svinuté proteiny jsou zadržovány a následně přesunuty do cytoplazmy, kde jsou odbourány

24 Obrázek č. 10: Schéma odbourávání bílkovin. Autor neznámý. (cit ) dostupné na AMINOKYSELINOVÉ A PROTEINOVÉ SPORTOVNÍ DOPLŇKY, VÝŽIVA VE SPORTU Nejnovější poznatky o proteinových a aminokyselinových suplementech 13) Proteinové doplňky byly doporučeny pro sportovce ke zvýšení retence dusíku a zvýšení svalové hmoty, k zabránění katabolismu bílkovin při dlouhodobém cvičení, k podpoře svalového glykogenu a k zabránění sportovní anémie, protože podporují zvýšenou syntézu hemoglobinu, myoglobinu a oxidativních enzymů během aerobního tréninku. Avšak to, zda sportovci potřebují více bílkovin, nebo ne, je v současné době diskutabilní. Na základě výzkumu American College of Sports Medicine,Americké dietetické asociace a Dietitians of Canada bylo zjištěno, že požadavky na bílkoviny jsou vyšší u velmi aktivních jedinců. Naopak, ve své nedávné prezentaci o dietních referenčních příjmech (DRI) pro protein Národní akademie věd došla k závěru, že proteinové doplňky nejsou nutné. Některé látky mají schopnost zvyšovat účinek fyzické nebo duševní činnosti. Tyto látky označujeme jako látky s ergogenními nebo potenciálně ergogenními účinky. 14) Výzkum týkající se ergogenních účinků jednotlivých aminokyselin, různých kombinací aminokyselin a několika speciálních proteinových potravinových doplňků potvrdil tyto závěry: u aminokyseliny tryptofan nebyly prokázány efektivní ergogenické účinky. 24) u aminokyselin s rozvětveným řetězcem (branched chain aminoacids zkr. BCAA) jsou výsledky nejednoznačné, u jedné studie bylo potvrzeno, že BCAA suplementace snižuje duševní únavu při delším cvičení a zlepšuje kognitivní výkonnost po cvičení, a také naznačuje, že v některých situacích

25 může BCAA suplementace zlepšit fyzickou výkonnost, například při cvičení v horku nebo v reálných konkurenčních závodech, kde může být centrální únava výraznější než v laboratorních experimentech. Ale v současné době nejsou potvrzené prokazatelné ergogenické účinky BCAA. 25), 26), 27), 28), 29), 30), některé studie vykazují nižší míru výskytu infekce u sportovců, kteří konzumovali glutaminový doplněk po intenzivním tréninku. Jiné studie uvádí, že i když glutaminová suplementace pomohla udržet plazmatickou hladinu glutaminu po intenzivním cvičení, přesto nemá vliv na různé testy imunitní odpovědi. V posledním hodnocení je uvedeno, že je málo kontrolovaných studií k doporučení užívání glutaminu pro lepší imunitní funkce. Ačkoli glutamin může stimulovat svalovou syntézu glykogenu, výzkumy naznačují, že neexistuje žádná výhoda oproti požití samotného adekvátního množství sacharidů. Navíc, některé nedávné studie ukazují, že ani krátkodobé ani dlouhodobé doplňování glutaminu nemá ergogenický vliv na svalovou hmotu nebo sílu výkonu. Užití glutaminu jednu hodinu před testováním nemělo žádný vliv na únavu při silovém 20), 28), 31), 32), 33), 34), 35), 36), 37), cvičení. výzkum zahrnující nezávislý účinek argininu na aerobní vytrvalostní schopnosti zdravých sportovců 2é), 38), 39) nebyl prokázán kombinace ornithinu, lysinu a argininu byla použita při pokusech zvýšit produkci lidského růstového hormonu (HGH) pro zvýšení svalové hmoty a síly, ale tyto pokusy neprokázaly žádný účinek. 40) -42) Chromiak a Antonio (2002) ve vědecké studii nedoporučují používání zmiňovaných AMK pro stimulaci uvolňování růstového hormonu. 43) Sutton a jiní (2005) zjistili, že suplementace tyrosinu (150 mg / kg tělesné hmotnosti) konzumována 30 minut před fyzickou výkonnostní aktivitou výrazně zvýšila hladiny tyrosinu v plazmě, ale nemá žádné významné ergogenické vlivy na aerobní vytrvalost, anaerobní výkon, nebo svalovou sílu 44) taurin ovlivňuje zvýšený tepový objem v rekonvalescenci po cvičení, avšak fyzický výkon nebyl testován. Nicméně, Zhang a další (2004) uvádějí, že taurin suplementovaný 7dní vyvolává 45), 46) významné zvýšení maximální spotřeby kyslíku VO 2 max. Směsi aminokyselin Celkově lze říci, s ohledem na výše uvedené poznatky, že užívání malého množství bílkovin a sacharidů, a to buď jako bílkovino -sacharidového energetického nápoje nebo ve formě potravin, před nebo po cvičení lze 47), 48), 56) doporučit všem sportovcům

26 Syrovátkový protein a mlezivo Tipton a další (2004) uvádějí, že požití jak syrovátkové bílkoviny a kaseinu těsně po cvičení vedlo k podobnému nárůstu svalové bílkoviny. I když výsledky těchto studií naznačovaly ergogenické účinky, měly by být považovány za předběžné. 20), 51), 52), 53), 54) Doplňky stravy pro sportovce 5) Nejdůležitější součástí suplementace sportovců jsou (sacharido-) proteinové doplňky stravy. Pro každého sportovce by měl být jejich výběr individuální, záleží, zda provozuje vytrvalostní, silový či kolektivní sport. Dle zaměření sportovce se dále odvíjí podíl proteinu v (sacharido-) proteinovém doplňku. Obrázek č 11: Pyramida doporučeného užívání doplňků stravy pro sportovce. MACH, Ivan. Doplňky stravy: jaké si vybrat při sportu i v každodenním životě. První vydání. Praha: Grada Publishing, a.s., ISBN Technologie zpracování bílkoviny Členění zdrojů bílkovin používaných při výrobě proteinových a aminokyselinových suplementů 6) Členění dle kvality syrovátková, mléčná bílkovina: A) Kvalitní zdroj - nativní syrovátkový izolát B) Standardní zdroj - CFM, nebo mikro a ultrafiltrovaný syrovátkový, nebo mléčný izolát/koncentrát C) Levný zdroj - syrovátkový koncentrát, iontová výměna, sušená syrovátka, sušené mléko Členění dle kvality kasein:

27 A) Kvalitní zdroj - micelární kasein B) Levný (chemicky denaturovaný) zdroj - kaseinát vápenatý, kaseinát sodný. Členění dle kvality vaječná bílkovina: A) Kvalitní zdroj - izolát vaječné bílkoviny B) Levný zdroj - sušený vaječný bílek (vysoký obsah sodíku). Členění dle kvality rostlinné bílkoviny: A) Kvalitní, plnohodnotný zdroj - proteinový izolát z hrachu, proteinový izolát ze sóji B) Levný zdroj - sója koncentrát (riziko plísně aflatoxin) Technologická výroba syrovátky 9) Na českém trhu se můžeme nejčastěji setkat se čtyřmi druhy proteinových doplňků - syrovátkové proteiny, sójové proteiny, noční proteiny a vícesložkové proteiny. 57) Syrovátkové proteiny tzv. Whey Protein jsou mezi sportovci nejoblíbenější 58), proto zmiňuji její výrobu. Syrovátková bílkovina patří mezi nejrychleji vstřebatelné zdroje bílkovin dostupných v doplňkové výživě. Je tedy ideálním řešením pro potréninkovou suplementaci a suplementaci v obdobích delšího hladovění. 58) Syrovátka se vyrábí z kravského mléka. Mléko je tvořeno z vody, laktózy, tuku, kaseinu a syrovátkového proteinu. Syrovátku získáme po odstranění kaseinu ze sraženého mléka ve formě žlutozelené tekutiny, která se ale dále musí zpracovat. Výrobci proteinů používají několik způsobů, jak z tekuté syrovátky odstranit nežádoucí složky. První způsob, který dnes již není příliš aktuální, je zahřívání až do vysoké teploty. Odstraní se tím sice velká část laktózy, ale zůstane tuk a bílkovina, která se díky tomuto procesu tzv. denaturuje znehodnocuje se. V praxi to pak znamená, že taková bílkovina je pro tělo hůře vstřebatelná a méně využitelná. Druhý způsob je tzv. ultrafiltrace s pomocí speciálních membrán. Tyto membrány oddělí jednotlivé složky v syrovátce. Vznikne velice známá forma koncentrát. Pro tento druh proteinů používáme zkratku WPC - Whey Protein Concentrate a řadíme je mezi levnější produkty na trhu. Třetím a posledním způsobem, který je nejsložitější, ale také nejkvalitnější, je tzv. mikrofiltrace nebo iontová výměna. Opět tento způsob rozdělí syrovátku na jednotlivé složky a tím se získá protein, který nese označení WPI Whey Protein Isolate. Tento druh proteinů je pro tělo snadno vstřebatelný a vysoce využitelný. Řadí se mezi ty dražší produkty na trhu. Pro výrobu žádoucího produktu se do něj přidávají trávící enzymy. Takový protein je pak pro tělo ještě více vstřebatelný a nezatěžuje příliš trávicí systém. 9)

28 Obrázek č 12: Schéma výroby syrovátkového proteinu. Archiv autora. 1) 7) 8) Bílkoviny ve výživě Proteiny jako složka výživy jsou pro tělo nezbytné. Nejdůležitější není jejich energetický obsah, tedy role živin, ale role výchozí látky k syntéze vlastních bílkovin, peptidů a dalších dusíkatých látek (nukleových kyselin, nukleotidů, pyrrolových barviv a kreatininu). Proteiny jsou hlavním zdrojem dusíku v potravě, v průměru ho obsahují 16% hmotnosti. Přinášejí do organismu hmotu potřebnou pro stavbu a obnovu tkání. Dospělý člověk potřebuje denně minimálně 0,5 0,6 g plnohodnotného proteinu na 1 kg hmotnosti těla. V lidském organismu se asi za 160 dnů vymění všechny bílkoviny. Při nižším příjmu mohou vznikat vážné poruchy, např. snížení odolnosti vůči infekcím, zhoršení hojení ran po úrazech, poruchy duševního a tělesného vývoje. Dlouhodobější nedostatek bílkovin zpomaluje růst a vývoj organismu, způsobuje poruchy ústřední nervové soustavy, atrofii svalstva, smrt. Podle WHO je běžně doporučovaná spotřeba 0,8 g na 1 kg tělesné hmotnosti, větší spotřebu proteinů mají děti v období růstu, kojící ženy, rekonvalescenti, aktivní sportovci aj. (2,4 g / kg). Příjem 15 g vysoce hodnotného proteinu denně se nazývá "absolutní proteinové minimum". Vyrovnaný příjem proteinů, tzv. "bilanční fyziologické proteinové minimum", je dvojnásobek, tj. 30 g. Při smíšené stravě se doporučuje g proteinu denně

29 Proteiny se získávají z různých druhů živin: proteiny mléčné, vaječné, pšeničné, z masa aj. Směs dvou proteinů má vždy vyšší biologickou hodnotu než protein samotný. Nadměrný příjem proteinů jako zdroj energie je nevhodný a pro organismus značně zatěžující. Při deaminaci se uvolňuje amoniak, který se přeměňuje na močovinu a je vylučován ledvinami. Tento pochod je pro organismus značně zatěžující. Bohatým zdrojem proteinů jsou hlavně potraviny živočišného původu. Z rostlinných produktů jsou dobrým zdrojem proteinů luštěniny (fazole, hrách, sója, čočka) a olejniny (ořechy, mák). Středně vysoký obsah proteinů mají obilniny a cereální výrobky. Nejnižší obsah proteinů mají ovoce, zelenina a brambory. Obrázek č.. 13: Potraviny, které jsou bohatým zdrojem bílkovin Autor neznámý: [cit ], dostupné na www: 1.jpg Tabulka č. 8: Obsah proteinů ve vybraných potravinách: ODSTRČIL, Jaroslav a Milada ODSTRČILOVÁ. Chemie potravin, 1. vydání, Brno: Národní centrum ošetřovatelství a nelékařských zdravotnických oborů, 2006, ISBN Nutričně využívané proteiny mají nestejnou biologickou hodnotu. Ta závisí především na přítomnosti všech esenciálních aminokyselin a jejich vhodném poměru

30 Proteiny živočišného původu mají složení aminokyselin téměř ve všech případech výhodnější než proteiny rostlinného původu, nejlepší jsou vaječné bílkoviny Biologická hodnota 7) 12) Biologická hodnota bílkovin se neodvíjí jen od složení aminokyselin a jejich schopnosti se vstřebat. Má souvislost s dusíkovou rovnováhou. Dusíková bilance může být pozitivní, kdy příjem dusíku je větší než jeho výdej (močí, stolicí, potem, ostříhanými nehty a vlasy, odlupující se vrstvou epidermis). Negativní dusíková bilance s převahou ztráty se objevuje ve stáří a ve stresových situacích (i úraz, operace, horečka). Důsledkem stresu je vyplavení stresových hormonů. Na metabolismu se to podepíše degradací bílkovin a menším využíváním tukových zásob. Jako zdroj energie je využívána svalová tkáň. Může dojít k obezitě, protože díky stresovým hormonům dochází k redistribuci tuku a ztrátě tělesných bílkovin. Aminokyselinové skóre (zkratka AAS, amino acid score), dříve známé též jako chemické skóre, slouží k zhodnocení kvality proteinu. Tento přístup pracuje s konceptem tzv. ideálního proteinu či referenční bílkoviny, jež obsahují optimální a vyrovnaný poměr jednotlivých esenciálních aminokyselin. Složením referenčního proteinu se zabývaly společně Světová zdravotnická organizace (World Health Organization, WHO, též SZO), Organizace pro výživu a zemědělství (Food and Agriculture Organization, FAO) a Univerzita OSN (United nations university, zkratka UNU). Tyto organizace již v roce 1985 stanovily referenční bílkovinu. V roce 2007 došlo k aktualizaci tohoto referenčního proteinu v souvislosti s měnícími se potřebami člověka a s modernizací technologií a v této podobě se používá dodnes: Tabulka č.: 9 Referenční bílkovina dle WHO/FAO/UNU z roku 2007 Aminokyselina g / 100 g čisté bílkoviny Histidin 1,5 Isoleucin 3,0 Leucin 5,9 Lysin 4,5 Methionin + Cystein 2,2 Fenylalanine + Tyrosin 3,8 Threonin 2,3 Tryptofan 0,6 Valin 3,9-29 -

31 Samotné aminokyselinové skóre pro danou bílkovinu stanovíme srovnáním poměru esenciálních aminokyselin v referenčním proteinu a esenciálních aminokyselin v testované bílkovině. Srovnání vyjadřuje následující vzorec: X - množství konkrétní aminokyseliny v testované bílkovině v g / 100 g čisté bílkoviny Y - množství stejné aminokyseliny v referenční bílkovině v g / 100 g čisté bílkoviny Z - aminokyselinové skóre

32 3 Praktická část 3.1 Cíl, popis práce Cílem praktické části bakalářské práce bylo ověření deklarovaného množství proteinů ve vybraných proteinových doplňcích, které byly poskytnuty společnostmi Inkospor, AminoStar a Nutrend. Dále bylo sledováno zastoupení jednotlivých aminokyselin a biologická využitelnost suplementů. V rámci praktické části byl také proveden průzkum užívání sportovních doplňků sportující veřejností. Průzkum byl uskutečněn na veletrhu Sport Life a Dance Life Expo, který probíhal v Brně, ve dnech 9. a 10. listopadu Používané přístroje analytické váhy, Mettler AE 2000 rotační vakuová odparka topná deska sušárna tlaková láhev s dusíkem, Linde Gas a.s., Česká republika analyzátor aminokyselin AAA 400, Ingos, Česká republika softwarové vybavení: chromatografický software ChromuLan, verze 0.82, Ingos Česká republika statistický software Statigraf 3.3 Používané pomůcky běžné laboratorní sklo hydrolyzační lahvičky zpětné chladiče

33 odpařovací baňky Erlenmayerovy baňky 3.4 Chemikálie kyselina chlorovodíková, 35 %, Penta s.r.o., Česká republika peroxid vodíku, 30 % p.a., Penta s.r.o., Česká republika kyselina mravenčí, 85 %, Lach-Ner spol. s.r.o., Česká republika kyselina citronová, monohydrát, p.a., ZMDB chemik s.r.o., Česká republika citronan sodný, dihydrát, p.a., ZMDB chemik s.r.o., Česká republika chlorid sodný, p.a., ZMDB chemik s.r.o., Česká republika hydroxid sodný, p.a., ZMDB chemik s.r.o., Česká republika kyselina boritá, ZMDB chemik s.r.o., Česká republika thiodiglykol, ZMDB chemik s.r.o., Česká republika azid sodný, p.a., ZMDB chemik s.r.o., Česká republika 2 - metoxyethanol, ZMDB chemik s.r.o., Česká republika octan sodný ledová kyselina octová

34 3.5 Testované produkty Tabulka č. 10: Přehled testovaných vzorků Společnost Název vzorku Deklarovaný obsah proteinu *%+ Typ vzorku X-treme Whey Protein Vanilka 80 pevný X-treme Whey Protein Čokoláda 80 pevný X-treme Muscle Gainer Jahoda 85 pevný Active Pro-80 Cookies and Cream 80 pevný INKOSPOR Active Soja Plus Čokoláda 80 pevný Active Balance Protein Shake 60 pevný X-treme Amino + 40,7 tekutý Protein Drink Jahoda 10 tekutý Protein Drink Vanilka 10 tekutý Protein Drink Čokoláda 10 tekutý AMINOSTAR 100% Pure Whey Star 49,5 pevný Whey Core pevný NUTREND Long Core 80 pevný Compress Iso Whey pevný Amino Power Liquid 31 tekutý

35 Inkospor X-treme Whey Protein Vanilka Složení: syrovátkový protein (emulgátor: sójový lecitin), L-glutamin, zahušťovadlo: guarová guma, příchuť, MCT olej, uhličitan hořečnatý, náhradní sladidla: aspartam a acesulfam-k, vitamin C, niacin, vitamin E, pantotenová kyselina, vitamin B6, vitamin B2, vitamin B1, kyselina listová, vitamin B12 INKOSPOR X-treme Whey Protein Vanilka 100g 30g ENERGETICKÁ HODNOTA 1501 kj (354 kcal) 450 kj (106 kcal) TUKY 1,5 g 0,5 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 1,1 g 0,3 g SACHARIDY 4,6 g 1,4 g Z TOHO CUKRY 2,0 g 0,6 g VLÁKNINA 0,34 g 0,1 g BÍLKOVINY 80 g 24 g SŮL 0,8 g 0,24 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí

36 Inkospor X-treme Whey Protein Čokoláda Složení: syrovátkový protein (emulgátor: sójový lecitin), L-glutamin, zahušťovadlo: guarová guma, příchuť, MCT olej, uhličitan hořečnatý, náhradní sladidla: aspartam a acesulfam-k, vitamin C, niacin, vitamin E, pantotenová kyselina, vitamin B6, vitamin B2, vitamin B1, kyselina listová, vitamin B12. INKOSPOR X-treme Whey Protein Čokoláda 100g 30g ENERGETICKÁ HODNOTA 1501 kj (354 kcal) 450 kj (106 kcal) TUKY 1,5 g 0,5 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 1,1 g 0,3 g SACHARIDY 4,6 g 1,4 g Z TOHO CUKRY 2,0 g 0,6 g VLÁKNINA 0,34 g 0,1 g BÍLKOVINY 80 g 24 g SŮL 0,8 g 0,24 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Inkospor X-treme Muscle Gainer Jahoda Složení: mléčná bílkovina (emulgátor: sojový lecitin), syrovátková bílkovina (laktalbuminy, laktoglobuliny), sušený vaječný bílek, příchuť, laktóza, regulátor kyselosti: kyselina citronová, sušená šťáva z červené řepy (koncentrát šťávy z červené řepy, maltodextrin, regulátor kyselosti: kyselina citronová), uhličitan hořečnatý, sladidla: aspartam a acesulfam-k, zahušťovadlo: xantan a karagenan, L- karnitin, vitamin C, niacin, vitamin E, pantotenová kyselina, vitamin B6, vitamin B2, vitamin B1, kyselina listová, barvivo: beta-karoten, vitamin B

37 INKOSPOR X-treme Muscle Gainer Jahoda 100g 30g ENERGETICKÁ HODNOTA 1534 kj (361 kcal) 460 kj (108 kcal) TUKY 1,5 g 0,5 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0,7 g 0,2 g SACHARIDY 2,0 g 0,6 g Z TOHO CUKRY 2,0 g 0,6 g VLÁKNINA 0,2 g 0,1 g BÍLKOVINY 85 g 25,5 g SŮL 0,2 g 0,1 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Inkospor Active Pro-80 Cookies and Cream Složení: mléčné bílkoviny, emulgátor: sojový lecitin, kasein, syrovátkový protein, sójové granule, maltodextrin, 2,7% nízkotučný kakaový prášek, aroma (s pšenicí), sušený vaječný bílek, uhličitan hořečnatý, sladidla (aspartam, acesulfam-k), karamel, vitamin C, niacin, vitamin E, kyselina pantotenová, vitamín B6, vitamín B2, vitamín B1, kyselina listová, vitamín B

38 INKOSPOR ACTIVE PRO-80 COOKIES AND CREAM 100g 25g ENERGETICKÁ HODNOTA 1556 kj (367 kcal) 389 kj (92kcal) TUKY 2 g 0,5 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0,8 g 0,2 g SACHARIDY 7,2 g 1,8 g Z TOHO CUKRY 1,0 g 0,3 g VLÁKNINA 0,9 g 0,2 g BÍLKOVINY 80 g 20 g SŮL 0,07 g 0,02 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Inkospor Active Soja Plus Čokoláda Složení: sójová bílkovina (78%), syrovátková bílkovina (se sójovým lecitinem), kakaový prášek odtučněný, karbonát vápenatý, zahušťovadlo: alginát sodný, aroma, prášek z vaječného bílku, sladidlo: aspartam, karbonát hořečnatý, vitamín C, amid kyseliny nikotinové, vitamín E, kyselina pantothenová, vitamín B6, vitamín B2, vitamín B1, kyselina listová, vitamín B12. INKOSPOR ACTIVE SOJA PLUS ČOKOLÁDA 100g 25g ENERGETICKÁ HODNOTA 1553 kj (366 kcal) 388 kj (92 kcal) TUKY 4,0 g 1,0 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 1,0 g 0,3 g SACHARIDY 3,5 g 0,9 g Z TOHO CUKRY 1 g 0,3 g VLÁKNINA 3,2 g 0,8 g BÍLKOVINY 80 g 20 g

39 SŮL 1,2 g 0,30 g KOLOSTRUM x x TYPICKÉ AMK SPEKTRUM L-VALIN** L-TYROSIN L-TRYPTOFAN* L-THREONIN* L-SERIN L-PROLIN L-FENYLALANIN* L-METHIONIN* L-LYSIN* L-LEUCIN** L-ISOLEUCIN** L-HISTIDIN GLYCIN L-GLUTAMOVÁ KYSELINA L-CYSTEIN L-ASPARAGOVÁ KYSELINA L-ARGININ L-ALANIN ORNITIN HYDROXYLYSIN HYDROXYPROLIN 5,7 g 3,8 g 1,6 g 4,8 g 5,9 g 6,0 g 5,6 g 1,6 g 7,5 g 9,2 g 5,4 g 2,9 g 4,7 g 20 g 1,9 g 13,2 g 7,8 g 5,0 g x x x * EAA - esenciální aminokyseliny

40 ** BCAA větvené esenciální aminokyseliny x výrobce neuvádí Inkospor Active Balance Protein Shake Složení: mléčný protein (emulgátor: sójový lecitin), inulin, syrovátkový protein, sušený vaječný bílek, příchuť, laktóza, maltodextrin, sušená šťáva z červené řepy (koncentrát šťávy z červené řepy, maltodextrin, regulátor kyselosti: kyselina citronová), fosfát vápenatý, uhličitan vápenatý, zahušťovadlo: guar guma, uhličitan hořečnatý, L-karnitin, náhradní sladidla: aspartam, acesulfam K, vitamin C, niacin, vitamin E, pantotenová kyselina, vitamin B6, vitamin B2, vitamin B1, kyselina listová, vitamin B12. INKOSPOR Balance Protein Shake 100g 25g ENERGETICKÁ HODNOTA 1345 kj (319 kcal) 336 kj (80 kcal) TUKY 1,5 g 0,4 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 1,0 g 0,3 g SACHARIDY 6,6 g 1,7 g Z TOHO CUKRY 4,9 g 1,2 g VLÁKNINA 20 g 5,0 g BÍLKOVINY 60 g 15 g SŮL 0,4 g 0,0 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Inkospor X-treme Amino+ Složení: voda, výtažek z koncentrátu jablečné šťávy, syrovátkový protein (4%), koncentrát ze šťávy z černé mrkve, okyselovadlo: kyselina fosforová a kyselina citronová, konzervant: sorbát draselný, sladidla: cyklamát sodný, acesulfam-k a sacharinát sodný, aroma

41 INKOSPOR X-treme Amino+ 100ml láhev/ 500ml ENERGETICKÁ HODNOTA 170 kj (40 kcal) 850 kj (200 kcal) TUKY < 0,1 g < 0,5 g Z TOHO NENASYCENÉ MK < 0,1 g < 0,5 g SACHARIDY 6 g 30g Z TOHO CUKRY 6 g 30g VLÁKNINA 0 g 0 g BÍLKOVINY 4 g 20 g SŮL < 0,01 g < 0,05 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Inkospor Protein Drink Jahoda Složení: nízkotučné mléko, mléčná bílkovina, voda, aroma, stabilizátor: karagenan, barvivo: karmín (beta karoten), sladidlo: sukralóza. INKOSPOR X-treme Protein Drink Jahoda 100ml láhev/ 500ml ENERGETICKÁ HODNOTA 245 kj (58 kcal) 1225 kj (290 kcal) TUKY 0,2 g 1,0 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0,1 g 0,5 g SACHARIDY 4,0 g 20,0 g Z TOHO CUKRY 4,0 g 20,0 g VLÁKNINA 0 g 0 g BÍLKOVINY 10,0 g 50 g SŮL 0,07 g 0,35 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí

42 Inkospor Protein Drink Vanilka Složení: nízkotučné mléko, mléčná bílkovina, voda, aroma, stabilizátor: carrageen, barvivo: riboflavin, sladidlo: sukralóza. INKOSPOR X-treme Protein Drink Vanilka 100ml láhev/ 500ml ENERGETICKÁ HODNOTA 245 kj (58 kcal) 1225 kj (290 kcal) TUKY 0,2 g 1,0 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0,1 g 0,5 g SACHARIDY 4,0 g 20,0 g Z TOHO CUKRY 4,0 g 20,0 g VLÁKNINA 0 g 0 g BÍLKOVINY 10,0 g 50 g SŮL 0,07 g 0,35 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Inkospor Protein Drink Čokoláda Složení: nízkotučné mléko, voda, mléčná bílkovina, nízkotučný kakaový prášek (1%), stabilzátor: carrageen, sladidlo: sukralóza. INKOSPOR X-treme Protein Drink Čokoláda 100ml láhev/ 500ml ENERGETICKÁ HODNOTA 264 kj (63 kcal) 1225 kj (290 kcal) TUKY 0,4 g 2,0 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0,2 g 1,0 g SACHARIDY 4,8 g 24,0 g Z TOHO CUKRY 4,0 g 20,0 g

43 VLÁKNINA 0,5 g 2,5 g BÍLKOVINY 10,0 g 50 g SŮL 0,07 g 0,35 g KOLOSTRUM x x x výrobce neuvádí Aminostar 100% Pure Whey Star obsahuje 100% čistý, ultrafiltrovaný syrovátkový protein, který pomáhá při nárůstu svalové hmoty. Složení: syrovátkový proteinový koncentrát (z mléka), kakao (u příchutě kokos - čokoláda), maltodextrin, emulgátor: sojový lecitin, zahušťovadlo: xanthan, aroma, regulátor kyselosti: kyselina citronová (u příchutě lesní plody), barviva (lesní plody - kakao, extrakt z červené řepy, jahoda extrakt z červené řepy), sladidlo: sukralóza.. AMINOSTAR 100% PURE WHEY STAR 100g ENERGETICKÁ HODNOTA TUKY Z TOHO NENASYCENÉ MK SACHARIDY Z TOHO CUKRY VLÁKNINA BÍLKOVINY SŮL KOLOSTRUM 375 kcal/ 1590 kj 2,7 g x 38,2 g x x 49,5 g x x TYPICKÉ AMK SPEKTRUM L-VALIN** L-TYROSIN L-TRYPTOFAN* 5700 mg 2900 mg 2400 mg

44 L-THREONIN* L-SERIN L-PROLIN L-FENYLALANIN* L-METHIONIN* L-LYSIN* L-LEUCIN** L-ISOLEUCIN** L-HISTIDIN GLYCIN L-GLUTAMOVÁ KYSELINA L-CYSTEIN L-ASPARAGOVÁ KYSELINA L-ARGININ L-ALANIN ORNITIN HYDROXYLYSIN HYDROXYPROLIN 7000 mg 4800 mg 5900 mg 3100 mg 1700 mg 8700 mg mg 6400 mg 1700 mg 1800 mg mg 2300 mg mg 2300 mg 4900 mg x x x * EAA - esenciální aminokyseliny ** BCAA větvené esenciální aminokyseliny x výrobce neuvádí NUTREND WHEY CORE 100 příchuť čokoláda + kakao Složení: 64 % syrovátkový proteinový koncentrát, 26 % syrovátkový proteinový izolát (obsahuje sójový lecitin), kakao, směs palmového oleje, maltodextrinu a mléčné bílkoviny, zahušťovadlo polydextróza, protispékavé látky fosforečnan vápenatý a oxid křemičitý, sladidla sukralóza a acesulfam K. Výrobek obsahuje alergen laktózu a sóju

45 WHEY CORE 100 ČOKOLÁDA+KAKAO 100g 30g ENERGETICKÁ HODNOTA 1639 kj/388 kcal 492 kj/116 kcal TUKY 6,2 g 1,9 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 1,4 g 0,4 g SACHARIDY 7,8 g 2,3 g Z TOHO CUKRY 4,5 g 1,4 g VLÁKNINA 2 g 0,6 g BÍLKOVINY 74,2 g 22,3 g SŮL 0,6 g 0,2 g KOLOSTRUM x x TYPICKÉ AMK SPEKTRUM L-VALIN** 3824 mg 1147 mg L-TYROSIN 2495 mg 748 mg L-TRYPTOFAN* 1469 mg 441 mg L-THREONIN* 3867 mg 1160 mg L-SERIN 2972 mg 892 mg L-PROLIN 3088 mg 926 mg L-FENYLALANIN* 2541 mg 762 mg L-METHIONIN* 1561 mg 468 mg L-LYSIN* 7519 mg 2256 mg L-LEUCIN** 8645 mg 2594 mg L-ISOLEUCIN** 4338 mg 1301 mg L-HISTIDIN 1441 mg 432 mg GLYCIN 1222 mg 367 mg L-GLUTAMOVÁ KYSELINA mg 3589 mg

46 L-CYSTEIN 2498 mg 749 mg L-ASPARAGOVÁ KYSELINA 8247 mg 2474 mg L-ARGININ 1734 mg 520 mg L-ALANIN 3708 mg 1113 mg ORNITIN x x HYDROXYLYSIN x x HYDROXYPROLIN x x * EAA - esenciální aminokyseliny ** BCAA větvené esenciální aminokyseliny x výrobce neuvádí NUTREND LONG CORE 80 příchuť vanilka Složení: syrovátkový proteinový koncentrát, syrovátkový proteinový izolát (obsahuje sójový lecitin), kaseinát vápenatý, izolát mléčných bílkovin, aroma, zahušťovadlo polydextróza, L-Glutamin, L- Leucin, protispékavé přísady fosforečnan vápenatý a oxid křemičitý, L-Isoleucin, L-Valin, sladidla sukralóza a acesulfam K, barvivo ß-karoten. Výrobek obsahuje alergen laktózu a sóju. LONG CORE 80 VANILKA 100g 40g ENERGETICKÁ HODNOTA 1542 kj/364 kcal 617 kj/146 kcal TUKY 3,2 g 1,3 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0,5 g 0,2 g SACHARIDY 4,6 g 1,8 g Z TOHO CUKRY 3,4 g 1,4 g VLÁKNINA 0,6 g 0,2 g BÍLKOVINY 78,9 g 31,6 g SŮL 0,5 g 0,2 g

47 KOLOSTRUM x x TYPICKÉ AMK SPEKTRUM L-VALIN** 4497 mg 1799 mg L-TYROSIN 3107 mg 1243 mg L-TRYPTOFAN* 1294 mg 518 mg L-THREONIN* 3805 mg 1522 mg L-SERIN 3564 mg 1426 mg L-PROLIN 4956 mg 1983 mg L-FENYLALANIN* 3030 mg 1212 mg L-METHIONIN* 1814 mg 726 mg L-LYSIN* 7124 mg 2850 mg L-LEUCIN** 8420 mg 3368 mg L-ISOLEUCIN** 4441 mg 1776 mg L-HISTIDIN 1744 mg 698 mg GLYCIN 1300 mg 520 mg L-GLUTAMOVÁ KYSELINA mg 5815 mg L-CYSTEIN 1725 mg 690 mg L-ASPARAGOVÁ KYSELINA 7423 mg 2969 mg L-ARGININ 2095 mg 838 mg L-ALANIN 3297 mg 1319 mg ORNITIN x x HYDROXYLYSIN x x HYDROXYPROLIN x x * EAA - esenciální aminokyseliny ** BCAA větvené esenciální aminokyseliny x výrobce neuvádí NUTREND COMPRESS ISO WHEY 90 příchuť vanilka

48 Složení:: CFM syrovátkový proteinový izolát, aroma, kolostrum (40% imunoglobulinů), zahušťovadlo guarová guma, protispékavá látka oxid křemičitý, sladidla sukralóza a acesulfam K, barvivo beta-karoten. NUTREND COMPRESS ISO WHEY g 30g ENERGETICKÁ HODNOTA 1606 kj/378 kcal 482 kj/114 kcal TUKY 1 g 0,3 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0 g 0 g SACHARIDY 2 g 0,6 g Z TOHO CUKRY 2 g 0,6 g VLÁKNINA 0,6 g 0,2 g BÍLKOVINY 90 g 27 g SŮL 0,8 g 0,2 g KOLOSTRUM 833 mg 250 mg TYPICKÉ AMK SPEKTRUM L-VALIN** 5296 mg 1589 mg L-TYROSIN 2367 mg 710 mg L-TRYPTOFAN* 1262 mg 378 mg L-THREONIN* 6027 mg 1808 mg L-SERIN 4155 mg 1246 mg L-PROLIN 4963 mg 1488 mg L-FENYLALANIN* 2704 mg 811 mg L-METHIONIN* 2002 mg 601 mg L-LYSIN* 8623 mg 2587 mg L-LEUCIN** 9502 mg 2851 mg L-ISOLEUCIN** 5737 mg 1721 mg L-HISTIDIN 1533 mg 460 mg GLYCIN 1267 mg 380 mg

49 L-GLUTAMOVÁ KYSELINA mg 4880 mg L-CYSTEIN 1977 mg 593 mg L-ASPARAGOVÁ KYSELINA 9887 mg 2966 mg L-ARGININ 1898 mg 569 mg L-ALANIN 4494 mg 1348 mg ORNITIN x x HYDROXYLYSIN x x HYDROXYPROLIN x x * EAA - esenciální aminokyseliny ** BCAA větvené esenciální aminokyseliny x výrobce neuvádí NUTREND AMINO POWER LIQUID Složení: voda, hovězí hydrolyzát želatiny, hydrolyzát kaseinu PeptoPro, L-arginin hydrochlorid, L-ornitin hydrochlorid, regulátor kyselosti kyselina citronová, emulze tropik (slunečnicový olej, aroma, barviva E 160a a E 160e), sladidla acesulfam K a sukralóza, konzervanty kyselina sorbová a benzoan sodný, emulgátor mono- a diglyceridy mastných kyselin. NUTREND AMINO POWER LIQUID 100ml 40ml ENERGETICKÁ HODNOTA 563 kj/ 133 kcal 225 kj/ 53 kcal TUKY 0,2 g 0,06 g Z TOHO NENASYCENÉ MK 0 g 0 g SACHARIDY 0 g 0 g Z TOHO CUKRY 0 g 0 g VLÁKNINA 0 g 0 g BÍLKOVINY 31 g 12,4 g SŮL 0,3 g 0,1 g

50 KOLOSTRUM x x TYPICKÉ AMK SPEKTRUM L-VALIN** 956 mg 383 mg L-TYROSIN 626 mg 250 mg L-TRYPTOFAN* 80 mg 32 mg L-THREONIN* 643 mg 257 mg L-SERIN 987 mg 395 mg L-PROLIN 3231 mg 1292 mg L-FENYLALANIN* 761 mg 304 mg L-METHIONIN* 427 mg 171 mg L-LYSIN* 1241 mg 496 mg L-LEUCIN** 1252 mg 501 mg L-ISOLEUCIN** 659 mg 264 mg L-HISTIDIN 425 mg 170 mg GLYCIN 4046 mg 1618 mg L-GLUTAMOVÁ KYSELINA 3626 mg 1450 mg L-CYSTEIN 10 mg 4 mg L-ASPARAGOVÁ KYSELINA 1616 mg 646 mg L-ARGININ 4148 mg 1659 mg L-ALANIN 1885 mg 754 mg ORNITIN 2370 mg 948 mg HYDROXYLYSIN 279 mg 112 mg HYDROXYPROLIN 2269 mg 908 mg * EAA - esenciální aminokyseliny ** BCAA větvené esenciální aminokyseliny x výrobce neuvádí

51 Obrázek č. 14: Fotografie testovaných produktů. Archiv autora. 3.6 Stanovení obsahu aminokyselin na aminoanalyzátoru AAA 400 kyselá a oxidativně kyselá hydrolýza Kyselá hydrolýza Do reagenční lahvičky bylo přidáno stanovené množství vzorku a 25 ml 6M HCl. Směs byla probublávána dusíkem po dobu 3 min. Následně byly vzorky podrobeny hydrolýze v sušárně při teplotě 110 C po dobu 24 hodin. Po hydrolýze byl vzorek ochlazen a přefiltrován (modrý filtr) a ze vzorku odebráno množství 40 ml, které se nechalo odpařit na vakuové odparce při 50 C. Následně byla dvakrát přidána destilovaná voda, aby došlo k úplnému odstranění HCl. Odparek byl převeden do 25 ml baňky ředícím pufrem o ph 2,2 a bez dalšího ředění byl použit pro stanovení v AAA

52 Obrázek č. 15: Filtrace hydrolyzovaného vzorku. Archiv autora Oxidativně kyselá hydrolýza Nejprve bylo připraveno 100 ml oxidační směsi z 30% H 2 O 2 a 85 88% HCOOH v poměru 1:9. Směs se nechala odstát min při laboratorní teplotě a následně byla chlazena po dobu 15 min v chladničce při teplotě 0 C. Do Erlenmayerovy baňky bylo přidáno stanovené množství vzorku a 5 ml připravené oxidační směsi. Vzorek byl ve směsi opatrně rozmíchán. Nově vzniklá směs byla opět chlazena po dobu 16 hodin v chladničce při teplotě 0 4 C. Ke vzorku byl přidán 1 ml koncentrované HCl v digestoři a vzorek se nechal 15 min odstát do vyšumění. Následně bylo přidáno 80 ml 6M HCl a vzorek se nechal vařit na topné desce pod zpětným chladičem při teplotě C po dobu 23 hodin. Po ochlazení byl vzorek přefiltrován (modrý filtr) a 40 ml vzorku se nechalo odpařit na vakuové odparce při 40 C. Následně byla třikrát přidána destilovaná voda, aby došlo k úplnému odstranění HCl a oxidační směsi. Poté byl vzorek převeden do 25 ml baňky ředícím pufrem o ph 2,2 a bez dalšího ředění byl použit pro stanovení v AAA

53 Obrázek č 16: Odpařování vzorku na vakuové odparce. Archiv autora Vlastní stanovení aminokyselin v aminoanalyzátoru AAA 400 Připravené hydrolyzáty byly pipetovány do plastových uzavíratelných mikrozkumavek a vkládány do dávkovacího kotouče analyzátoru. Přístroj pracuje na tradičním principu Moora a Steina s ninhydrinovou detekcí. Aminokyseliny je možno oddělovat chromatografií založenou na výměně iontu tzv. iontoměničovou chromatografií. Chromatografická kolona je naplněna pryskyřicí s negativním nábojem a aminokyseliny jsou na kolonu zaváděny při nízkém ph. Tím jsou všechny kladně nabity. Za těchto podmínek nenastane chromatografické dělení. Aminokyseliny čekají na počátku kolony na změnu podmínek. Při zvýšeném ph, zvýšené teplotě nebo vyšší iontové síle elučního roztoku dojde k dosažení izoelektrického bodu aminokyseliny. Tehdy ztrácí přitažlivost svých iontů k pryskyřici a aminokyselina je eluována z kolony. 59) Izoelektrický bod molekuly je definován jako ph, při kterém molekuly v roztoku nenesou žádný náboj. Izoelektrický bod aminokyselin je funkcí pk hodnot ionizovatelných skupin v molekule. Podmínky jsou upraveny tak, že izoelektrické body, pro všechny aminokyseliny, se dosahují v různých časech. To umožňuje provést chromatografické dělení

54 Výsledky analýzy na AAA 400 byly vyhodnoceny v programu CHROMULAN, který patří k příslušenství přístroje AAA Výsledky analýzy V následující části jsou zveřejněné výsledky mých analýz vzorků. Kromě celkového obsahu AMK uvádím ještě obsah esenciálních a semiesenciálních AMK. Zvýrazněné AMK byly použity pro výpočet AMK skóre jednotlivých vzorků

55 X-TREME WHEY PROTEIN VANILKA X-TREME WHEY PROTEIN ČOK. X-TREME MUSCLE GAINER JAHODA ACTIVE PRO-80 COOKIES AND CREAM ACTIVE SOJA PLUS ČOKOLÁDA AMK MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] Asp 84,11 78,68 59,95 53,87 77,15 Thr 42,64 37,57 32,27 29,82 26,44 Ser 29,03 26,80 38,13 36,72 30,68 Glu 134,66 130,04 139,98 147,21 113,16 Pro 45,53 42,71 112,57 91,64 46,14 Gly 12,64 12,36 17,36 12,98 24,82 Ala 38,41 35,19 24,44 22,55 27,32 Val 44,83 39,72 52,32 50,44 34,61 MetS 17,29 17,24 22,74 19,44 10,91 Ile 47,00 40,68 45,80 39,65 33,54 Leu 84,26 82,42 73,79 67,68 55,21 Tyr 23,05 21,81 35,36 35,29 23,01 Phe 25,51 23,96 38,70 36,01 33,98 His 13,75 12,71 19,68 19,74 15,53 Lys 87,91 78,41 68,88 65,03 47,65 Arg 16,98 22,63 32,07 27,59 55,16 CysH 25,59 24,68 6,35 3,66 10,44 CELKEM 773,19 727,61 820,39 759,32 665,73 z toho esenc. 349,44 319,99 334,50 308,07 242,33 z toho semiesenc. 30,73 35,34 51,75 47,33 70,69 Tabulka č. 11: Výsledky analýzy

56 ACTIVE BALANCE PROTEIN SHAKE X-TREME AMINO+ PROTEIN DRINK JAHODA PROTEIN DRINK VANILKA PROTEIN DRINK ČOKOLÁDA AMK MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] Asp 43,12 23,95 6,18 6,92 6,61 Thr 22,72 7,31 3,33 3,71 3,55 Ser 27,15 12,07 3,91 4,52 4,15 Glu 104,14 36,90 15,47 17,89 16,48 Pro 66,16 73,87 8,14 9,95 8,51 Gly 10,59 90,68 1,72 1,63 1,74 Ala 18,17 33,94 2,69 2,80 3,03 Val 36,28 12,03 5,15 5,99 6,00 MetS 15,92 15,86 3,09 2,94 2,65 Ile 28,34 7,90 4,28 4,94 4,74 Leu 50,74 15,73 7,79 10,00 8,22 Tyr 24,70 1,49 3,70 4,02 3,97 Phe 28,07 6,90 3,88 4,26 4,23 His 15,12 5,40 2,20 2,45 2,30 Lys 47,90 16,21 7,16 7,97 7,83 Arg 22,99 33,01 3,49 3,62 3,50 CysH 4,65 0,20 0,83 0,60 0,76 CELKEM 566,77 393,45 83,04 94,21 88,29 z toho esenc. 229,98 81,94 34,69 39,81 37,23 z toho semiesenc. 38,11 38,41 5,69 6,08 5,80 Tabulka č 12: Výsledky analýzy

57 100% PURE WHEY STAR AMINO POWER LIQUID WHEY CORE 100 ISO WHEY 90 LONG CORE AMK MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] MNOŽSTVÍ [g/kg] Asp 56,81 16,10 87,14 97,52 76,34 Thr 30,8 5,92 44,18 63,62 41,00 Ser 22,05 8,87 33,66 38,21 34,80 Glu 82,73 31,20 128,43 151,30 147,95 Pro 43,03 34,34 42,22 57,09 53,93 Gly 10,71 42,42 14,86 14,30 13,53 Ala 24,63 17,34 42,53 39,86 30,16 Val 29,79 8,69 47,02 53,50 49,08 MetS 7,9 2,92 20,46 18,26 20,69 Ile 33,89 5,90 48,66 60,65 48,02 Leu 60,81 12,10 88,66 87,05 85,11 Tyr 12,77 4,30 25,38 23,15 29,63 Phe 15,47 6,70 27,21 24,72 30,31 His 8,94 4,58 15,52 14,27 17,56 Lys 57,82 14,39 85,24 92,78 79,73 Arg 14,6 45,50 12,67 21,88 37,05 CysH 7,74 0,26 20,52 22,54 15,26 CELKEM 520,48 261,53 784,35 880,69 810,17 z toho esenc. 221,01 56,63 361,43 400,58 353,96 z toho semiesenc. 23,54 50,08 28,19 36,15 54,61 Tabulka č 13: Výsledky analýzy

58 3.8 Aminokyselinové skóre testovaných výrobků Tabulka č. 14: Výpočet AMK skóre Aminokyselina g / 100 g čisté referenční bílkoviny g /100 g Inkospor X- treme Whey Protein Vanilka Histidin 1,5 1,375 Isoleucin 3 4,7 Leucin 5,9 8,426 Lysin 4,5 8,791 Methionin + Cystein Fenylalanine + Tyrosin 2,2 (1, ,559) = 4,288 3,8 (2,551 +2,305) = 4,856 Threonin 2,3 4,264 Tryptofan 0,6 nebylo metodou stanovováno Valin 3,9 4,483 Z tabulky č. 14 je patrné, že limitní AMK pro výpočet AMK skóre je histidin proto výpočet dle vzorce: X - množství konkrétní aminokyseliny v testované bílkovině v g / 100 g čisté bílkoviny Y - množství stejné aminokyseliny v referenční bílkovině v g / 100 g čisté bílkoviny Z - aminokyselinové skóre Vypadá následovně: 1,375/1,5 100 = 91,67 % Stejným způsobem bylo vypočítáno AMK skóre u ostatních vzorků, výsledky jsou uvedeny níže

59 Vzorek AMK skóre * % + Inkospor X-treme Whey Protein Vanilka 91,67 Inkospor X-treme Whey Protein Čokoláda 84,73 Inkospor X-treme Musile Gainer Jahoda 131,2 Inkospor Active Pro 80 Cookies and 105 Cream Inkospor Active Soja Plus Čokoláda 88,74 Inkospor Active Balance Protein Shake 86 Inkospor X-treme Amino+ 26,33 Inkospor Protein Drink Jahoda 13,2 Inkospor Protein Drink Vanilka 13,64 Inkospor Protein Drink Čokoláda 13,93 AminoStar 100% Pure Whey Star 59,6 Nutrend Amino Power Liquid 14,45 Nutrend Whey Core ,47 Nutrend Iso Whey 90 95,13 Nutrend Long Core 117,07 Tabulka č. 15: Výsledky výpočtu AMK skóre 3.9 Výsledky dotazníkové metody Ergogenní látky využívá pravidelně necelých 20 % respondentů, nepravidelně pak něco málo nad 20 %. Proteinové nápoje pravidelně užívá taktéž necelých 20 % respondentů, nepravidelně však již 30 % dotázaných. Aminokyselinové doplňky pravidelně užívá opět necelých 20 % respondentů, nepravidelně pak něco málo přes 20 %. L-karnitin užívá pravidelně necelých 10 % dotázaných, nepravidelně potom 20 %. Iontové nápoje užívá pravidelně cca 5 % respondentů, nepravidelně však již něco přes 40 % dotázaných. Téměř 70 % dotázaných byly ženy, a proto je nejspíš procento pravidelných uživatelů proteinových a aminokyselinových doplňků tak malé, protože ženy většinou provozují sportovní aktivitu za účelem redukce hmotnosti a mají strach, že pravidelným užíváním proteinových a aminokyselinových doplňků jim narostou obrovské svaly a proto k nim chovají spíše nedůvěru a jsou v jejich konzumaci zdrženlivé

60 Překvapující je ale celkově nízká konzumace L-karnitinu známého i pod pojmem spalovač tuku. Je tu možnost nedůvěry v jeho účinek, jelikož levnější a tudíž dostupnější přípravky obsahují malé množství L- karnitinu, které pak není dostatečné pro podporu katabolismu lipidů. Co se týče iontových nápojů, většina respondentů má jejich užívání spojeno s mimořádně náročnou aktivitou (např. celodenní výlet na kole, náročná vysokohorská túra ), a proto je užívají jen příležitostně a pro běžné sportování jejich užívaní nepovažují za nutnost

61 4 Diskuse Ve své práci jsem se zabývala složením proteinových a aminokyselinových doplňků stravy. Ověřovala jsem deklarované množství bílkovin, zastoupení jednotlivých AMK s důrazem na esenciální a semiesenciální AMK. Také jsem spočítala AMK skóre výrobků a zhodnotila tak jejich kvalitu. Ve vytrvalostním sportu, kdy sportovec potřebuje udržovat nízkou tělesnou hmotnost, je důležité, aby podíl proteinů nebyl příliš vysoký, aby nedocházelo k nežádoucímu nárůstu svalové hmoty, ale zároveň, aby byl anabolismus a katabolismus proteinů vyrovnaný a zabránilo se tak nežádoucímu úbytku svalové hmoty v důsledku vysoké energetické ztráty při náročném vytrvalostním tréninku. V tomto případě nezáleží až tolik na kvalitě a kvantitě bílkovin. Zde bych doporučila použití aminokyselinových koncentrátů, kde se zajistí dostatečný příjem bílkovin s minimem energie ze sacharidů a tuků a tudíž by nemělo docházet k nežádoucímu nárůstu hmotnosti. Z testovaných výrobků bych doporučila X-TREME AMINO+ a AMINO POWER LIQUID. Siloví sportovci, jejichž cílem je, aby nárůst svalové hmoty byl co nejvyšší, by se měli zaměřit jak na kvantitu proteinu v produktu, tak i na jeho kvalitu. Pro nárůst svalové hmoty je důležitý vyšší anabolismus bílkovin, než jejich katabolismus. Proto je vhodné vybírat produkty s vysokým obsahem bílkovin s co nejvyšším podílem esenciálních aminokyselin v produktu a vysokou biologickou hodnotou. Pro tuto kategorii sportovců bych doporučila syrovátkový proteinový doplněk s co nejvyšším podílem syrovátkového izolátu - nejlépe hydrolyzovaného, minimálním obsahem syrovátkového koncentrátu a s obsahem bílkovin minimálně 80 %. Z testovaných výrobků bych doporučila: X-TREME MUSCLE GAINER JAHODA a LONG CORE. Zvláštním případem jsou sportovci věnující se kolektivním hrám, kde je potřeba jak síla, tak i vytrvalost. Zde je důležité zajistit dostatečný energetický příjem pro náročné tréninky a také růst svalové hmoty pro výkon hráče. Zde bych doporučila syrovátkové proteinové a sacharido-proteinové doplňky. Celkový podíl bílkoviny nemusí být příliš vysoký, postačovalo by kolem %, ovšem i zde by měla být zajištěná dostatečná kvalita syrovátkové bílkoviny, tzn. co nejvyšší obsah syrovátkového izolátu (nejlépe hydrolyzovaného) a co nejnižší obsah syrovátkového koncentrátu. Z testovaných výrobků bych doporučila většinu analyzovaných produktů. Metodou analýzy AMK na aminoanalyzátoru nebyla stanovována kyselina tryptofan, proto nejspíš nesouhlasí některé mé výsledky s deklarovaným množstvím bílkovin. Navíc v některých výrobcích mohou být obsažené volné AMK, jejichž množství jsem nestanovovala

62 5 Závěr Ve své práci jsem zkoumala deklarované množství bílkovin v proteinových doplňcích stravy, protože mě zajímala kvalita proteinových a aminokyselinových doplňků, dostupných na českém trhu. Množství bílkovin jsem stanovovala na přístroji aminoanalyzátor AAA 400, který pracuje na tradičním principu Moora a Steina s ninhydrinovou detekcí. Zvlášť jsem vypočítala množství esenciálních a semiesenciálních aminokyselin, které jsou pro kvalitu proteinového doplňku stěžejní, protože mají důležité postavení ve sportovní, ale i běžné výživě, a proto je jejich příjem velmi důležitý a jedna z možností, jak je přijímat, jsou právě proteinové a aminokyselinové doplňky stravy. Výsledky analýz potvrdily u většiny vzorků deklarované množství. Rozdíly mezi deklarovaným a mnou stanoveným množstvím se můžou lišit zejména kvůli tomu, že metodou nebyla stanovována AMK tryptofan a volné AMK, které nejspíš ve výrobku byly obsaženy a výrobci je započítávají do celkového množství. U stanovování množství AMK tekutých výrobků by bylo možné optimalizovat metodu tak, že by se výrobky nejprve dehydratovaly a stanovilo by se množství sušiny, kdy už výsledky analýzy na AAA 400 vychází mnohem lépe. Z dotazníkového průzkumu vyplývá, že sportovní veřejnost se staví k využívání doplňků velmi skepticky. Pravidelně sportovní doplňky užívá zhruba každý pátý respondent. Důvodem je dle mého názoru nedostatečná informovanost o proteinových a aminokyselinových doplňcích. Ve své práci jsem uvedla dost informací o proteinových doplňcích i jednotlivých aminokyselinách, takže by mohla alespoň částečně přispět k informovanosti sportovní i nesportovní veřejnosti a zmírnit tak nedůvěru vůči suplementům. Na tuto práci bych chtěla navázat ve své diplomové práci, kde bych chtěla testovat vliv proteinových a aminokyselinových doplňků na změnu složení těla zejména na růst svalové hmoty a snížení tukové tkáně, při různých druzích sportů a různé frekvencí tréninku. Výsledky bych zaznamenávala pravidelným měřením testovaných osob na přístroji In-Body

63 6 Seznam literatury 1) VODRÁŽKA, Zdeněk. Biochemie. 2. opr. vyd. Praha: Academia, 2002,dotisk2007. ISBN ) VOET, Donald a Judith VOETOVÁ. Biochemie. 1. vydání, Praha: Victoria Publishing a. s., ISBN ) LEDVINA, Miroslav, Alena STOKLASOVÁ a Jaroslav CERMAN. Biochemie pro studující medicíny I. díl, 2. vydání, Praha: Karolinum, 2009, ISBN ) JABOR, Antonín. Encyklopedie 7 laboratorní medicíny pro klinickou praxi, Praha: SEKK s.r.o., Katedra klinické biochemie IPVZ Praha, 2007, elektronická verze, dostupné na CD, ISBN ) MACH, Ivan. Doplňky stravy: jaké si vybrat při sportu i v každodenním životě. První vydání. Praha: Grada Publishing, a.s., ISBN ) LUKÁŠ, Tomáš. JEDNODUCHÝ POSTUP PŘI VÝBĚRU GAINERU: HLEDÁTE KVALITNÍ GAINER? SLEDUJTE OBSAH LAKTÓZY A POUŽITÉ ZDROJE BÍLKOVIN. Action Fitness *online+. Praha: Copyright@ Tomáš Lukáš, 2014, [cit Dostupné z: 7) ODSTRČIL, Jaroslav a Milada ODSTRČILOVÁ. Chemie potravin, 1. vydání, Brno: Národní centrum ošetřovatelství a nelékařských zdravotnických oborů, 2006, ISBN ) Víš co jíš. [on-line], [cit dostupné na www: 9) LUKÁŠ, Tomáš. Protein = Chemie? Pojďme se podívat, jak se vyrábí. Action Fitness [online]. Praha: Copyright@ Tomáš Lukáš, 2014, [cit Dostupné z: 10) DVOŘÁK, Marek. Správná výživa pro regeneraci mozku. Vitaland ProFitness Store.Září Říjen Praha, 2015, neuvádí (MK ČR E 1451): 2. 11) NO oxid dusnatý: Zaručený úspěch napumpování vašich svalů. Vitaland ProFitness Store.Září Říjen Praha, 2015, neuvádí (MK ČR E 1451): 2. 12) Aminokyselinové skóre. Wikipedie otevřená encyklopedie *online+. Praha: Copyright@Wikipedia, není dostupný, [cit Dostupné z:

64 13) WILLIAMS, Melvin. Dietary Supplements and Sports Performance: Amino Acids. Journal of the International Society of Sports Nutrition. 2005, 2(2): ISSN ) Bezpečnost potravin A-Z. *online+. Praha: Ministerstvo zemědělství a Ústav zemědělské ekonomiky a informací, 2012, [cit Dostupné z: 15) American Dietetic Association, Dietitians of Canada. American College of Sports Medicine. Nutrition and athletic performance. Journal of the American Dietetic Association 100: , ) National Academy of Sciences. Dietary Reference Intakes for Energy, Carbohydrates, Fiber, Fat, Protein and Amino Acids. Washington, DC: National Academies Press, ) Lambert, C., et al. Macronutrient considerations for the sport of bodybuilding. Sports Medicine 34:317-27, ) Tipton, K., et al. Ingestion of casein and whey proteins result in muscle anabolism after Resistance exercise. Medicine & Science in Sports & Exercise 36: , ) Phillips, S. Protein requirements and supplementation in strength sports. Nutrition 20:689-95, ) Williams, MH Nutrition for Health, Fitness & Sports. Boston: McGraw-Hill, ) Lawrence, M., and Kirby, D. Nutrition and sports supplements: Fact or fiction. Journal of Clinical Gastroenterology 35: , ) Segura, R., and Ventura, J. Effect of L-tryptophan supplementation on exercise performance. International Journal of Sports Medicine.9: 301-5, ) Stensrud, T., et al. L-tryptophan supplementation does not improve running performance. International Journal of Sports Medicine 13: , ) Williams, M. H. Facts and fallacies of purported ergogenic amino acid supplements. Clinics in Sports Medicine18: , ) Newsholme, E., et al. Physical and mental fatigue: Metabolic mechanisms and importance of plasma amino acids. British Medical Bulletin, 48: , ) Blomstrand, E. Amino acids and central fatigue. Amino Acids 20: 25-34, ) Davis, J. M., et al Serotonin and central nervous system fatigue: Nutritional considerations. American Journal of Clinical Nutrition 72: 573S-8S, ) Hargreaves, M., and Snow, R. Amino acids and endurance exercise. International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism 11:133-45, ) Watson, P., et al. The effect of acute branched-chain amino acid supplementation on prolonged exercise capacity in a warm environment. European Journal of Applied Physiology 93:306-14,

65 30) Cheuvront, S., et al. Branched-chain amino acid supplementation and human performance when hypohydrated in the heat. Journal of Applied Physiology 97: , ) Budgett, R., et al. The overtraining syndrome. In Harries, M., et al. Oxford Textbook of Sports Medicine Oxford: Oxford University Press, ) Castell, L. Glutamine supplementation vitro and in vivo, in exercise and in immunodepression. Sports Medicine 33:323-45, Journal of the International Society of Sports Nutrition. 2(2): 63-67, ( ) Castell, L., et al. Does glutamine have a role in reducing infections in athletes. European Journal of Applied Physiology 73: , ) Rohde, T., et al. Effect of glutamine supplementation on changes in the immune system induced by repeated exercise. Medicine and Science in Sports and Exercise 30: , ) Nieman, D. Exercise immunology: Nutrition countermeasures. Canadian Journal of Applied Physiology 26:S45-55, ) Antonio, J., et al. The effects of high-dose glutamine ingestion on weightlifting performance. Journal of Strength and Conditioning Research 16:157-60, ) Candow, D., et al. Effect of glutamine supplementation combined with resistance training in young adults. European Journal of Applied Physiology 86:142-49, ) Bednarz, B., et al. L-arginine supplementation prolongs exercise capacity in congestive heart failure. Kardiologia Polska 60:348-53, ) Cheng, J., et al. L-arginine in the management of cardiovascular disease. Annals Pharmacotherapy 35: , ) Fogelholm, G. M., et al. Low-dose amino acid supplementation: No effects on serum growth hormone and insulin in male weightlifters. International Journal of Sport Nutrition 3: , ) Lambert, M., et al. Failure of commercial oral amino acid supplements to increase serum growth hormone concentrations in male body builders. International Journal of Sport Nutrition 3: , ) Suminski, R., et al. Acute effect of amino acid ingestion and resistance exercise on plasma growth hormone concentration in young men. International Journal of Sport Nutrition 7: 48-60, ) Chromiak, J., and Antonio, J. Use of amino acids as growth-hormone releasing agents by athletes. Nutrition 18: , ) Sutton, E., et al. Ingestion of tyrosine: Effects on endurance, muscle strength, and anaerobic performance. International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism 15:173-85, ) Baum, M., and Weiss, M. The influence of a taurine containing drink on cardiac parameters before and after exercise measured by echocardiography. Amino Acids 20:75-82, ) Zhang, M., et al. Role of taurine supplementation to prevent exercise-induced oxidative stress in healthy young men. Amino Acids 26: ,

66 47) Gibala, M. Dietary protein, amino acid supplements, and recovery from exercise. Sports Science Exchange15 (4):1-4, ) Tipton, K., and Wolfe, R. Exercise-induced changes in protein metabolism. Acta Physiological Scandinavica 162: , ) Walzem, R., et al. Whey components: Millennia of evolution create functionalities for mammalian nutrition. What we know and what we may be overlooking. Critical Reviews in Food Science and Nutrition 42: , ) Brinkworth, G., et al. Oral bovine colostrum supplementation enhances buffer capacity, but not rowing performance in elite female rowers. International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism 12: , ) Kuipers, H., et al. Effects of oral bovine colostrum supplementation on serum insulin-like growth factor- I levels. Nutrition 18: 566-7, ) Hofman, Z., et al. The effect of bovine colostrum supplementation on exercise performance in elite field hockey players. International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism 12:461-69, ) Brinkworth, G., et al. Effect of bovine colostrum supplementation on the composition of resistance trained and untrained limbs in healthy young men. European Journal of Applied Physiology 91:53-60, ) Tipton, K., and Wolfe, R. Protein and amino acids for athletes. Journal of Sports Sciences 22:65-79, ) Poortmans, J., and Dellalieux, O. Do regular high protein diets have potential health risks on kidney function in athletes? International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism 10: 28-38, ) Tipton, K., and Wolfe, R. Exercise, protein metabolism, and muscle growth. International Journal of Sport Nutrition and Exercise Metabolism 11:109-32, ) Eduard Knoll. Proteiny - stručně a jasně. Váš osobní trenér [online]. Brno: Ecuard Knoll@Copywrite, 2013, [cit Dostupné z: 58) CAHA, Jan. Syrovátkový protein - věčné téma. Fitnessinstitut [online]. Brno: fitnessinstitut@copywright, 2013, [cit Dostupné z: 59) HAVLÍČEK, V. AUTOMATICKÝ ANALYZÁTOR AMINOKYSELIN AAA 400: Návod k obsluze chemická část. První. Praha: INGOS s.r.o,

67 7 Seznam tabulek Tabulka č. 1: Přehled názvů a vzorců základních neutrálních aminokyselin Tabulka č. 2: Přehled názvů a vzorců základních kyselých aminokyselin Tabulka č. 3: Přehled názvů a vzorců základních zásaditých aminokyselin Tabulka č. 4: Přehled názvů a vzorců základních aminokyselin, obsahujících síru Tabulka č. 5: Přehled názvů a vzorců základních aromatických aminokyselin Tabulka č. 6: Přehled názvů a vzorců základních heterocyklických aminokyselin Tabulka č. 7: Rozdělení AMK: MACH, Ivan. Doplňky stravy: jaké si vybrat při sportu i v kažodenním životě. První vydání. Praha: Grada Publishing, a.s., ISBN str. 130 Tabulka č. 8: Obsah proteinů ve vybraných potravinách: ODSTRČIL, Jaroslav a Milada ODSTRČILOVÁ. Chemie potravin, 1. vydání, Brno: Národní centrum ošetřovatelství a nelékařských zdravotnických oborů, 2006, ISBN Tabulka č. 9: Referenční bílkovina dle WHO/FAO/UNU z roku Aminokyselinové skóre. Wikipedie otevřená encyklopedie *online+. Praha: Copyright@Wikipedia, není dostupný, [cit ]. Dostupné z: Tabulka č. 10: Přehled testovaných vzorků. Archiv autora Tabulka č. 11: Výsledky analýzy. Archiv autora Tabulka č. 12: Výsledky analýzy. Archiv autora Tabulka č. 13: Výsledky analýzy. Archiv autora Tabulka č. 14: Vypočet AMK skóre. Archiv autora Tabulka č. 15: Výsledky výpočtu AMK skóre

68 8 Seznam příloh Příloha č. 1 Průzkum užívání sportovních doplňků sportovní veřejností na veletrhu Sport Life a Dance Life Expo v Brně ve dnech 9. a 10. listopadu 2013 Příloha č. 2 Prezentace výsledků na konferenci v Praze (září 2014) - poster, příspěvek ve sborníku (autoři: Veselý, Gazárková, Hadrová) Příloha č. 3 Chromatogramy

69 Příloha č. 1: Průzkum užívání sportovních doplňků sportovní veřejností na veletrhu Sport Life a Dance Life Expo v Brně ve dnech 9. a 10. listopadu ) Dotazník hodnocení názorů respondentů jako účastníků sportovního veletrhu (zpětná vazba) Datum: Téma: Proteiny a doplňky aminokyselin pro sportovce Vyplnění dotazníku je dobrovolné a striktně anonymní! Hodící se zaškrtněte nebo vypište požadovaný údaj. Část I A (týkající se obecných dotazů o charakteristice respondenta) Respondent: žena muž Věk respondenta: do 20 let 21 až 30 let 31 až 50 let nad 50 let Pracovní zařazení respondenta: student gymnázia, SŠ, SOŠ, VOŠ, aj. student VŠ zaměstnaný/á nezaměstnaný/á Stupeň dosaženého vzdělání respondenta: základní učební obor bez maturity středoškolské s maturitou vysokoškolské (univerzitní) akademický stupeň (vědecké) Četnost sportování respondenta: 1-2x denně 2-3 x týdně 1x týdně 3-5x měsíc 5x za měsíc nesportuji Typ sportu, který respondent provozuje (prosím vypište):

70 Intenzita sportování respondenta: rekreačně závodně vrcholově Region (nebo okres), popřípadě místo sportovní realizace:... Část I B (týkající se dotazů ke sportovním produktům) Četnost konzumace kávy 1x denně 2-3x denně příležitostně kávu vůbec nepiji Četnost konzumace čaje 1x denně několikrát denně příležitostně vůbec Kouříte? ano ne Užíváte ergogenní látky, tj. látky zvyšující sportovní výkon (např. karnitin, proteinové přípravky, aminokyseliny,? ano ne občas Pokud ano, jaké druhy sportovních přípravků používáte? (prosím vypište) - 2 -

71 Četnost konzumace karnitinu pravidelně nepravidelně (příležitostně) vůbec Četnost konzumace iontových nápojů pravidelně příležitostně vůbec Četnost konzumace proteinových přípravků pravidelně příležitostně vůbec Četnost konzumace doplňků aminokyselin (např. BCAA, L-glutamin, směs aminokyselin) pravidelně příležitostně vůbec Znáte doplňky výživy pro sportovce od značky Inkospor? ano ne už jsem o nich slyšel - 3 -

72 2) Vyhodnocení dotazníků - 4 -

73 - 5 -

74 - 6 -

75 - 7 -

76 - 8 -

77 - 9 -