LABORATORNÍ METODY A TESTY V GASTROENTEROLOGII. MUDr.Petr Kocna CSc.

Transkript

1 LABORATORNÍ METODY A TESTY V GASTROENTEROLOGII MUDr.Petr Kocna CSc. FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK VŠCT seminář - Praha, listopad VÝCOZÍ STAV STIMULACE DIAGNOSTICKÝ PROCES MORFOLOGIE 3 METODY LABORATORNÍ REÁLNÝ STAV FUNKČNÍ ODEZVA ZOBRAZOVACÍ METODY FUNKČNÍ ODEZVA ČASOVĚ ZÁVISLÁ ODPOVĚĎ FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK MALABSORBCE 5 6 LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA MALABSORBCE

2 MALABSORPCE, MALDIGESCE, MALASIMILACE MALABSORPCE STAV, KDY JEDNA, NEBO VÍCE ZÁKLADNÍC ŽIVIN NENÍ TRÁVENA A VSTŘEBÁVÁNA, NEBO NEDOSTATEČNĚ ŽALUDEČNÍ, DUODENÁLNÍ, STŘEVNÍ SONDA MALABSORPČNÍ SYNDROM (MS) ZARNUJE: PORUCU INTRALUMINÁLNÍO TRÁVENÍ, DIGESCE PORUCU VSTŘEBÁVÁNÍ ŽIVIN, ABSORPCE ABNORMÁLNÍ SEKRECE TRÁVICÍC ŠŤAV ZÁVAŽNÉ NARUŠENÍ MOTILITY TRÁVICÍ TRUBICE NEDOSTATEČNÝ PŘÍJEM POTRAVY PRIMÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROM PORUCA NA ÚROVNI ENTEROCYTU CÉLIAKIE, TROPICKÁ SPRUE, WIPPLOVA C... ŽALUDEČNÍ SONDA TYP LEVIN CROSBY KAPSLE SEKUNDÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROM ONEMOCNĚNÍ PANKREATU, ŽLUČNÍKU, JATER OBSTRUKČNÍ COROBY STŘEVA, INFEKCE RTG KONTROLA ZAVEDENÍ SONDY TENKÉ STŘEVO DUODENUM - JEJUNUM - ILEUM, DÉLKA 3-4 METRY POVRC 5 x ZVĚTŠUJÍ KLKY (0,5-1 mm, klků / mm 2 ) MIKROKLKY - KARTÁČOVÝ LEM - ZVĚTŠUJE POVRC 30x 100 m 2 KLKY ENTEROCYTY MIKROKLKY 9 10 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK VYŠETŘENÍ STOLICE ANALÝZA STOLICE UMOŽŇUJE DIAGNOSTICKÝ PROCES ONEMOCNĚNÍ ZAŽÍVACÍO ÚSTROJÍ, JATER A PANKREATU. UJASNĚNÍ PŘÍČÍN VEDOUCÍC K SYMPTOMŮM OVLIVŇUJÍCÍ ZAŽÍVACÍ TRAKT VČETNĚ PRŮJMU, NAUSEY, ZVRACENÍ, EDÉMU, BOLESTÍ, KŘEČÍ, OREČKY, ZTRÁTY CUTI APOD. DETEKCE NĚKTERÝC ENZYMŮ VE STOLICI K URČENÍ MÍRY PANKREATICKÉ FUNKCE. DETEKCE OKULTNÍO KRVÁCENÍ PRO SCREENING KOLOREKTÁLNÍC TUMORŮ DETEKCE PŘÍTOMNOSTI PARASITŮ, NAPŘ. LAMBLIE DETEKCE A IDENTIFIKACE NĚKTERÝC TYPŮ BAKTERIÍ DETEKCE NENATRÁVENÝC ZBYTKŮ POTRAVY PŘI MALABSORPČNÍM SYNDROMU 11 12

3 MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE BIOCEMICKÁ VYŠETŘENÍ VZORKU STOLICE SVALOVÁ VLÁKNA ŠKROBOVÁ ZRNKA TUKOVÉ KAPÉNKY NATIVNÍ PREPARÁT ZBYTKY POTRAVY VLÁKNA CELULÓZY BARVENÍ FRIEDIGER S REAGENS - SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ - TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ - ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE Gastroenterologie für die Praxis München, Anti ttg IgA Anti Gliadin sciga β-defensin 2 Zonulin α 1 -antitrypsin EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin Calprotectin Lactoferin emoglobin aptoglobin Transferin elicobacter pylori Ag Amyláza Lipáza Chymotrypsin Elastáza - 1 Lysozyme Albumin Myeloperoxidáza PMN Elastáza PCR / DNA VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU CALPROTECIN VE STOLICI - RAPID TESTY CalDetect CalPro CalFast CerTest - CALPROTECTIN + LACTOFERRIN KOMBINOVANÉ RAPID-TESTY NA STOLICI ODBĚROVÝ SYSTÉM PRO NĚKOLIK TESTŮ emoglobin Calprotectin Lactoferin E-coli toxin Transferin IDK Extract Single Tube Analytics Analyt Calprotectin Lactoferrin Pancreatic elastase emoglobin aptoglobin anti-gliadin anti-transglutaminase s-iga α 1-antitrypsin Albumin Lysozyme β-defensin 2 EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin Stabilita 2-8 C

4 AUTOMATICKÉ ANALYZÁTORY NA STOLICI Kroma it Linear KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICI SBĚR STOLICE - 72 hod. REFERENČNÍ METODA EXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU FAT 72 hod. S-CCK TEST NS-Prime Alfresa Pharma 19 NS-Plus Alfresa Pharma 20 2 MICRO - ANALYZÁTOR APLIKACE 2 - DECOVÝC TESTŮ 21 Kód VZP: bodů klinický kód, GE, odb. 105 PARAMETRY JEDNODUCÁ OBSLUA BATERIOVÝ TYP REAL-TIME KINETICKÝ SW ROZSA MĚŘENÍ ppm CITLIVOST 1 ppm APLIKACE MALABSORPCE LAKTÓZY MALABSORPCE SACARÓZY MALABSORPCE FRUKTÓZY BAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ MOTILITA GIT, TRANSIT TIME 2 -ppm 30 cut-off TEST S FRUKTÓZOU FRUKTÓZOVÁ INTOLERANCE TEST S LAKTULÓZOU BAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ TS TEST S LAKTULÓZOU OCTT OROCAECAL TRANSIT TIME DECOVÝ TEST LAKTÓZOVÉ INTOLERANCE KONCENTRACE 2 (ppm) PO PODÁNÍ 25g LAKTÓZY 2 (ppm) ČAS (min) 2 /C 4 BAKTERIÁLNÍ PRODUKCE ANAEROBNÍ YDROLÝZA A PRODUKCE VODÍKU A METANU STŘEVNÍ MIKROFLÓROU 23 odnocení dechových testů po podání různých monosacharidů a disacharidů Bc. Jana Bartoňová, Praha Pimentel M.,Gunsalus RP.,Rao SSC.,Zhang.: Methanogens in uman ealth and Disease. Am J Gastroenterol Suppl (2012) 1:28 33

5 KOMBINACE STANOVENÍ VODÍKU a METANU ELIMINACE FAL.NEGATIVITY MODULÁRNÍ KONCEPCE SENZORY: 2 /C 4 /CO 2 - VLIV ANTIBIOTIK - NÍZKÁ PRODUKCE VODÍKU 2 /C 4 /CO 2 - LACTOTEST /C 4 /CO 2 - LACTOTEST 202 KALIBRACE TŘÍ SENSORŮ YDROGEN METAN OXID ULIČITÝ REKALKULACE KONCENTRACE 2 PODLE CO 2 25 M. Di Stefano, G.R. Corazza Role of hydrogen and methane breath testing in gastrointestinal diseases Digestive and Liver Disease Supplements 2009/3, Satish S.C. Rao - Ability of the Normal uman Small Intestine to Absorb Fructose: Evaluation by Breath Testing Clinical Gastroenterology and epatology 2007/5, ANALYZÁTORY DECOVÝC TESTŮ C/ 12 C IR force 600, Richen BreathID, Exalenz Zkušenosti laboratoře ÚKBLD 1.LF UK a VFN IR analytické systémy Isomax 4000 elifan plus FLIP, umedics 27 elifan, Fischer - FAN 28 C DECOVÉ TESTY - PDB STANDARD C DECOVÉ TESTY - PDB STANDARD Standardem PDB je primární referenční materiál pro měření přirozených změn obsahu izotopu uhlíku C, stanoveného v uhličitanu vápenatém ze schránek křídových belemnitů rodu Belemnitella americana z geologické formace Pee Dee v Jižní Karolíně (USA) PDB - Pee Dee Belemnitella americana PDB Pee Dee Belemnitae Mezinárodní standard C = % 29 30

6 VÝSKYT IZOTOPU C V PŘÍRODĚ NABÍDKA SUBSTRÁTŮ PRO DECOVÉ TESTY 31 % C δ C PDB 1, Uhličitany 1,110 PeeDee Belemnite 0 1,100 1,090 1,080 1,070 1,060 1,050 C4 rostliny Atmosférický CO 2 C3 rostliny Fosilní zdroje US - Dech CO Jap. - Dech CO 2 EU - Dech CO C abundances of nutrients and the effect of variations in C isotopic abundances of test meals formulated for CO2 breath tests. Schoeller DA. et al.: Am J Clin Nutr. 1980; 33(11): C - acetát C - methacetin C - oktanoát C - galaktóza C - urea C - aminopyrin C - bikarbonát C - kofein C - glukóza C - fenylalanin C - mixed triglycerid C - laktóza C - triolein C - xylóza C - škrob C - glykocholát C - palmitát 32 PRINCIP C- MTG DECOVÉO TESTU PŘIROZENÉ SUBSTRÁTY C PRO DECOVÉ TESTY C-škrob perorální podání stanovení poměru C/ 12 C kukuřice C-substrát produkce CO 2 C4 rostliny C-laktóza enzymatická hydrolytická funkce GIT C CO 2 eliminace mléko krystalizace laktózy 33 C absorpce kumulativní výdej CO 2 cpdr C-enriched lactose, derived from milk of cows fed with silo corn (d= ) for 5 weeks. Because it is known that it takes 14 days for cows milk to be in equilibrium with a diet, milk of seven cows was collected during the last 3 weeks of this 5-week period and pooled. Lactose was obtained by crystallization techniques. 34 eliview - IRMS ANALYZÁTOR DECOVÝC TESTŮ NA BÁZI ULÍKU C IRMS ANALYZÁTOR CO 2 - SEPARACE VZORKU INJEKTOR SEPARACE VODY e e NAFION VACUTAINER REF.INJEKTOR VENTIL MS REFERENČNÍ CO 2 Kód VZP: bodů analytika, odb. 801, IRMS AUTOSAMPLER SEPARACE GC 35 36

7 IRMS ANALYZÁTOR CO 2 - DETEKCE ANALYZÁTOR CO 2 - NDIRS DETEKCE VÝSTUP Z GC IONIZACE PLYNU SEPARACE PODLE MOTNOSTI MAGNETICKÉ POLE 12 C 16 O cm -1 C 16 O cm -1 C 16 O 18 O 37 IRMS ISOTOPE - RATIO MASS SPECTROMETRY TRIPLE FARADAY COLLECTOR DETEKCE C 16 O C 16 O C 16 O 18 O 38 ABSORBČNÍ MAXIMA ISOTOPŮ: 4348,5 nm ,2 nm ANALYZÁTOR CO 2 - NDIRS DETEKCE ANALYZÁTOR CO 2 - NDIRS DETEKCE ZDROJ IR λ = 2-8 μm REF.PLYN VZOREK CO 2 OptoAkustický detektor Lehrer & Luft typ Lehrer E and Luft K F 1938 German Patent No CO 2 - absorpce IR -změna tlaku - deformace membrány - akustický signál 39 NonDispersive Isotope-selective InfraRed Spectroscopy 40 An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detector Daniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: ANALÝZA VYDECOVANÉO VZDUCU NÁDEC VÝDEC CO 2 = 0,04 % CO 2 2,5-3,5 % FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK CO 2 = 5,20 % NÁDEC - VÝDEC (BEZ ZADRŽENÍ DECU) NÍZKÁ KONC.CO 2 NÁDEC - ZADRŽENÍ DECU - KRÁTKÝ VÝDEC NÍZKÁ KONC.CO 2 NÁDEC - ZADRŽENÍ DECU NA 10 sec - DLOUÝ VÝDEC KONC.CO 2 JE OK 41 42

8 PRŮKAZ INFEKCE ELICOBACTER PYLORI DECOVÝ TEST s C - MOČOVINOU (UREOU) SUBSTRÁT: C-MOČOVINA DÁVKA: mg DOBA TESTU: 30 minut p - UREÁZA DECOVÝ TEST globální test - žaludku N 2 - CO-N O = 2 N 3 + CO 2 PRŮKAZEM BAKTERIE/ANTIGENU p NIKOLIV DETEKCE PROTILÁTEK K p RYCLÝ UREÁZOVÝ TEST lokální test - biopsie DECOVÝ TEST s C - MOČOVINOU (UREOU) ENDOSKOPICKÝ DECOVÝ TEST - C EUBT Kód VZP: bodů klinická část, GE, odb. 105 Pylobactell a Infai UBT - p soupravy jsou registrovány v ČR - SUKL 25 mg C-urea aplikace spray sondou 5 minutový test Five minute endoscopic urea breath test with 25 mg of ()C-urea in the management of elicobacter pylori infection. Isomoto et al.: Eur J Gastroenterol epatol Oct;14(10): ELICOBACTER PYLORI - DAKO TEST pstar ODBĚROVÁ NÁDOBKA Kód VZP: odb. 8, 761 bodů POROVNÁNÍ p RAPID TESTŮ mab - TEST MEMBRÁNA FILTR PRŮKAZ ELICOBACTER PYLORI pstar TEST - DAKO RAPID TEST MONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKA helicocare negativní p StAR negativní helicocare pozitivní p StAR negativní helicocare pozitivní p StAR pozitivní 47 INKUBAČNÍ NÁDOBKA 48 Jeřábek, J.: Stanovení antigenu elicobacter pylori ve stolici rapid testem. Diplomová práce 1.LF UK Praha 2007

9 ELICOBACTER PYLORI INFEKCE.Pylori + hostitel Podezření na gastritídu, p infekci, CA žaludku detekce p PGI/PGII, G-17b Cl Cl negativní p, normální PGI/PGII normální G-17b pozitivní p, normální PGI/PGII normální G-17b p +/-, nízké PGI/PGII zvýšené G-17b pozitivní p, nízké PGI/PGII nízké G-17b p gastritída Atrofická gastritída DUODENÁLNÍ VŘED GASTRIN BEZ ONEMOCNĚNÍ GASTRIN ATROFIE KARCINOM Normální žaludeční sliznice Rizko žaludečního nebo duodenálního vředu Rizko karcinomu žaludku 49 KMENY BAKTERIE - GENETICKÁ DISPOZICE - VNĚJŠÍ PROSTŘEDÍ - DIETA 50 Eradikace p infekce + gastroskopie FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE TVORBA ŽLUČE CCK-PZ ENZYMY 0.7 l/den SEKRETIN PANKREATICKÁ ŠŤÁVA CO 3-, VODA 2.0 l/den SPECIFICKÁ STIMULACE ORMONY SEKRETIN COLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN CRONICKÁ PANKREATITIDA ZOBRAZOVACÍ METODY ERCP ŠŇŮRA PEREL MRCP VÝPOČET OBJEMU SEKRECE FUNKČNÍ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE 53 ERCP KLASIFIKACE PANKREATITID ERCP PAPILA MINOR D.WIRSUNGI D.SANTORINI 54 Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and its correlation with faecal elastase-1 in patients with chronic pancreatitis Manfredi R. el al. Radiol med. - DOI /s

10 ŽÁDNÁ STIMULACE ELASTÁZA VE STOLICI SEKREČNÍ KAPACITA GRADING CP 55 TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU NEPŘÍMÁ STIMULACE PANKREATICKÁ LIPÁZA DIGESTIVNÍ FUNKCE TRÁVENÍ (TUKŮ) STIMULAČNÍ POKRM SUBSTRÁT KUKUŘIČNÝ CLÉB 20g RAMA PERORÁLNÍ PODÁNÍ ANALÝZA C-MARKERU 250mg C-MTG SUBSTITUČNÍ TERAPIE SUBSTITUČNÍ LIPÁZA C - DECOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU VOLBA SUBSTRÁTU C - TRIOLEIN STEATOREA > g/den C - IOLEIN INTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZA C - MIXED SPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE TRIGLYCERIDE VÝDEJ LIPÁZY < 90 ku/hod C - COLESTERYL PANKREAT. COLESTEROL ESTERÁZA OCTANOATE STEATOREA > 11 g/den C - TRIPALMITIN MALABSORPCE TUKŮ C - TRIOCTANOIN TKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30% C - STARC SEKRECE AMYLÁZY < 10% C-BzTyrAla KORELACE s PABA testem 56 METABOLICKÉ PROCESY C-MTG CO 2 V DECU PANKREATICKÁ LIPÁZA 1,3 DI - STEAROYL O C 2 -O-C-(C 2 ) 16 -C 3 O 2 - ( C) - OCTANOYL C - O - C-(C 2 ) 6 -C 3 O C 2 -O-C-(C 2 ) 16 -C 3 JATERNÍ β - OXIDACE 57 cpdr MTG (%) 80,0 70,0 60,0 50,0 40,0 30,0 20,0 10,0 C-MTG - DECOVÝ TEST & FELA VE STOLICI 100 μg/g CUT-OFF FELA: 200 μg/g PATOLOGICKÝ NORMÁLNÍ CP-A CP-B CP-C CP-D NON-CP CUT-OFF MTG: 30 % 226 DECOVÝC TESTŮ C-MTG 155 CP - 71 KONTROL (NON-CP) SODA MTG & FELA % (181/226) 0, FELA μg/g FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK CO JE CÉLIAKIE? CELOŽIVOTNÍ ONEMOCNĚNÍ, PERMANENTNÍ STŘEVNÍ INTOLERANCE LEPKU OBILOVIN GENETICKÝM FAKTOREM JE LA-B8, LA-DR3 a LADQ2 SPOUŠTĚCÍM FAKTOREM JSOU GLIADINOVÉ PEPTIDY IMUNOLOGICKÁ ODPOVĚĎ, AUTOIMUNITNÍ CARAKTER ONEMOCNĚNÍ POŠKOZENÍ SLIZNICE TENKÉO STŘEVA PROJEVY MALABSORPČNÍO SYNDROMU ODPOVĚĎ NA BEZLEPKOVOU DIETU 59 60

11 MESENCYMÁLNÍ BUŇKY TKÁŇOVÁ TRANSGLUTAMINÁZA M.BUNĚK ttg DEAMIDACE podle: Mowat AT, Lancet 2003, 361: 1290 GLIADIN 33-mer PEPTID PŠENICE ŽALUDEČNÍ, PANKREATICKÉ PEPTIDÁZY, PROLYL-ENDOPEPTIDÁZY CÉLIAKIE ATROFIE KLKŮ negativní protilátky normální IgA ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI PODEZŘENÍ NA CS Nízká pravděpodobnost celiakie vysoké klinické podezření negativní histologie IgA attg/iga EmA a celkové IgA pozitivní protilátky Biopsie TS, histologie histologický obraz celiakie deficit IgA IgG attg, IgG EmA nebo IgG AGA pozitivní protilátky Vysoká pravděpodobnost celiakie CD4+ T-BUŇKA T2-BUŇKA T1-BUŇKA ZÁNĚTLIVÁ ODPOVĚĎ LA typizace, opakovat biopsii Předběžná diagnóza celiakie Bezlepková dieta klinická a histologická normalizace 61 B-BUŇKA PROTILÁTKY IL 4,5,10 IL2, γifn, TNF CÉLIAKIE YPERPLASIE KRYPT 62 Definitivní diagnóza celiakie C. Briani et al. / Autoimmunity Reviews 2008; 7, ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI ZVÝŠENÉM GENETICKÉM RIZIKU negativní LA pozitivní LA LA DQ2 and/or DQ8 BIOPSIE TENKÉO STŘEVA - KLASIFIKACE Není riziko CS negativní protilátky Vyloučit IgA deficienci Nízký příjem glutenu IgA attg2 & total IgA anti TG2 > 3x normy anti TG2 < 3x normy IgA EmA 63 Marsh 0 or 1 Normální dieta Falešně pozitivní test Potenciální CS Střevní biopsie Marsh 2 or 3 Definitivní diagnóza celiakie EmA pozitivní European Society for Pediatric Gastroenterology, epatology, and Nutrition Guidelines for the Diagnosis of Coeliac Disease. usby S. at al. JPGN 2012; 54: EmA negativní Tranzientně falešná pozit. anti TG2 Normální dieta Další serologické testy 64 Marsh 0 Marsh 1 Marsh 2 Marsh 3a Marsh 3b Marsh 3c Clinical practice - Coeliac disease. Kneepkens C. M., von Blomberg B. M. Eur J Pediatr. 2012; 171(7) : SOUČASNÝ PROTOKOL STANOVENÍ PROTILÁTEK (EVIDENCE - BASED) IgA attg +IgA +IgA EmA ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA attg PERSPEKTIVNÍ PROTOKOL STANOVENÍ PROTILÁTEK (PRACOVNÍ YPOTÉZA) IgA attg ANTIENDOMYSIÁLNÍ PROTILÁTKY - EmA EmA IF - opičí jícen AGA-16, AGG-1, attg-1.5 pacient D.K. 10/2004 +IgG attg +IgGDGP DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU +IgAAGA DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA attg DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET EmA IF - opičí jícen pozitivní kontrola 65 Old and new serological tests for celiac disease screening. Volta U., Fabbri A., Parisi C. et al. Expert Rev. Gastroenterol. epatol. 2010, 4(1) 66 EmA IF - opičí jícen AGA-238, AGG-220, attg-233 CSF, pacient M.P. 02/2002

12 AKLIDES - CytoBead CeliAK GLIADINY - SEPARACE PROTEINŮ anti-ttg, anti-dgp, EmA Kombinace tří základních protilátek pro screening a diagnostiku celiakie imunofluorescenční technologií α-gliadin ω γ β α ŠKROBOVÁ - GELOVÁ ELEKTROFORÉZA (SGE) SEPARACE JEDNOTLIVÝC PROTEINŮ - GLIADINŮ KLASIFIKACE GLIADINŮ NA ČTYŘI SKUPINY α β γ ω FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK STŘEVNÍ DISACARIDÁZA - LAKTÁZA DISACARID - LAKTÓZA JE YDROLYZOVÁN STŘEVNÍ DISACARIDÁZOU LAKTÁZA AKTIVITA ENZYMU V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTU C 2 O C 2 O O O O O O 1 4 O O O O β-d-galactose α-d-glucose DIAGNOSTIKA LAKTÁZOVÉ INTOLERANCE ISTOCEMICKÝ PRŮKAZ AKTIVITY LAKTÁZY V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTU IMUNOISTOCEMICKÁ DETEKCE FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK 71 MODERNÍ RAPID TEST DETEKCE AKTIVITY LAKTÁZY CROMOGENNÍ METODOU 72

13 INCIDENCE A MORTALITA NA KOLOREKTÁLNÍO KARCINOMU V ČR normální adenom progresivní lokalizovaný KRCA lymfatické KRCA jaterní sliznice adenom KRCA metastázy metastázy na INCIDENCE MORTALITA Epidemiologie nádorů České republiky leté přežití (%) let KRCA stádium: Dukes I-II Dukes III Dukes IV Proteomics of colorectal cancer: overview of discovery studies and identification of commonly identified cancer-associated proteins and candidate CRC serum markers. Jimenez CR, Knol JC, Meijer GA, Fijneman RJ. - J Proteomics. 2010;73: TESTY OKULNÍO KRVÁCENÍ VE STOLICI - FOBT/TOKS 2005 J Med Screen. 2002;9(3): Basic variables at different positivity thresholds of a quantitative immunochemical test for faecal occult blood. Castiglione G, Grazzini G, Miccinesi G, Rubeca T, Sani C, Turco P, Zappa M. qi-fobt - 3.generace SENZITIVITA TESTŮ - FOBT/TOKS senzitivita specificita 28,7% 56,8% 83,4% g-fobt - 1.generace i-fobt - 2.generace Schweiz Med Wochenschr Feb 28;106(9):297 The hemoccult test in the screening for colonic carcinoma Deyhle P, Nüesch J, Kobler E, Jenny S, Säuberli aemoccult g-fobt i-fobt qi-fobt OC Sensor 100 ng/ml ImmoCare, emeselect, emolex, Actim FB, exagon OBTI Ferkl M., Kocna P. et al. ČLČ 1992; Benešová A., Frič P. et al. ČLČ 1993 Dvorak M., Kocna P. et al. Z.- Facharzt, 2003; Kohout P., Granatova J. et al. GUT 2009 ng b/ml ifobt - OC Micro - Eiken cut-off 75 ng/ml ng/ml mean 1087 ng/ml LINÍKOVÝ UZÁVĚR PRO PERFORACI NÁSTŘIKOVOU JELOU ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ ng/ml mean 485 ng/ml FILTRAČNÍ VLOŽKA ng/ml mean 35 ng/ml ng/ml mean 202 ng/ml NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER SEPTUM DEFINUJÍCÍ MNOŽSTVÍ STOLICE KARTÁČEK PRO ODBĚR STOLICE IDENTIFIKAČNÍ ČÁROVÝ KÓD VZORKU 77 Levi Z.,Rozen P.,azazi R.,Vilkin A.,Waked A.,Maoz E.,Birkenfeld S.,Leshno M.,Niv Y. Ann Intern Med. 2007;146: A Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Test for Colorectal Neoplasia 78

14 ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ i-fobt LABORATORNÍ & POCT ANALYZÁTORY VLOŽENÍ VZORKU STOLICE PERFORACE LINÍKOVÉ FÓLIE NÁSTŘIK 25 μl PRO ANALÝZU OC-DIANA Eiken QuikRead Orion M-Jack Kyowa SmartPlus Eurolyser Kroma it Linear 79 ELIMINACE NADBYTKU STOLICE TRANSFER 10 mg TRANSFER EXTRAKTU PŘES FILTR DO VZORKOVACÍ JAMKY Senti FIT Sentinel 80 SENTi-FIT Sentinel i-chroma Boditech NS-Plus Alfresa Pharma 81 prosinec 20 KVANTITATIVNÍ ANALÝZA b VE STOLICI - VFN Kvantitativní stanovení b ve stolici analyzátorem Eiken OC-Sensor-micro Všeobecná fakultní nemocnice Praha analýz za 5let ( ) Data-mining analytický nástroj I-COP umožnil zkompletovat několik databází OpenLIMS, laboratorní data, FIT, b ve stolici s výstupem Národního onkologického registru Kocna P., Májek O., Blaha M., Zima T., Dušek L.: Characteristics of Colorectal Cancer Detected by Quantitative Faecal aemoglobin Test in ospital Opportunistic Screening. Clin Chem Lab Med 2014; 52, Special Suppl, pp S ng/ml ( ) LOKALIZACE TUMORU - ODNOTY FIT TESTU 627 ng/ml ( ) odnoty b ng/ml se významně neliší podle lokalizace tumoru 22 ng/ml ( ) Metodu FIT OC-Sensor lze spolehlivě použít pro screening KRCA v kterékoliv lokalizaci tumoru 969 ng/ml ( ) 9.1% 1/11 LOKALIZACE TUMORU - FALEŠNÁ NEGATIVITA 627 ng/ml ( ) 22 ng/ml ( ) 1/8 12.5% ng/ml ( ) Falešná negativita je 15,62% Senzitivita pro KRCA je 84,38% 969 ng/ml ( ) 3/16 5/ % 17.2% Při jednom testu a cut-off (75 ng/ml) je procento nezachycených karcinomů 17.6% 83 Kelley L, Swan N, ughes DJ. - Colorectal Dis. 20 Sep; 15(9): e An analysis of the duplicate testing strategy of an Irish immunochemical FOBT colorectal cancer screening programme 84 Medline on-line nejnovější publikace Přímý link na MZČR Národní číselník

15 ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU