LABORATORNÍ METODY A TESTY V GASTROENTEROLOGII. MUDr.Petr Kocna CSc.

Transkript

1 LABORATORNÍ METODY A TESTY V GASTROENTEROLOGII MUDr.Petr Kocna CSc. FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK VŠCT seminář - Praha, listopad VÝCOZÍ STAV STIMULACE DIAGNOSTICKÝ PROCES MORFOLOGIE 3 METODY LABORATORNÍ REÁLNÝ STAV FUNKČNÍ ODEZVA ZOBRAZOVACÍ METODY FUNKČNÍ ODEZVA ČASOVĚ ZÁVISLÁ ODPOVĚĎ FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK MALABSORBCE 5 6 LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA MALABSORBCE

2 MALABSORPCE, MALDIGESCE, MALASIMILACE MALABSORPCE STAV, KDY JEDNA, NEBO VÍCE ZÁKLADNÍC ŽIVIN NENÍ TRÁVENA A VSTŘEBÁVÁNA, NEBO NEDOSTATEČNĚ ŽALUDEČNÍ, DUODENÁLNÍ, STŘEVNÍ SONDA MALABSORPČNÍ SYNDROM (MS) ZARNUJE: PORUCU INTRALUMINÁLNÍO TRÁVENÍ, DIGESCE PORUCU VSTŘEBÁVÁNÍ ŽIVIN, ABSORPCE ABNORMÁLNÍ SEKRECE TRÁVICÍC ŠŤAV ZÁVAŽNÉ NARUŠENÍ MOTILITY TRÁVICÍ TRUBICE NEDOSTATEČNÝ PŘÍJEM POTRAVY PRIMÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROM PORUCA NA ÚROVNI ENTEROCYTU CÉLIAKIE, TROPICKÁ SPRUE, WIPPLOVA C... ŽALUDEČNÍ SONDA TYP LEVIN CROSBY KAPSLE SEKUNDÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROM ONEMOCNĚNÍ PANKREATU, ŽLUČNÍKU, JATER OBSTRUKČNÍ COROBY STŘEVA, INFEKCE RTG KONTROLA ZAVEDENÍ SONDY TENKÉ STŘEVO - FUNKCE ENTEROCYTU DUODENUM - JEJUNUM - ILEUM, DÉLKA 3-4 METRY POVRC 5 x ZVĚTŠUJÍ KLKY (0,5-1 mm, klků / mm 2 ) MIKROKLKY - KARTÁČOVÝ LEM - ZVĚTŠUJE POVRC 30x 100 m 2 KLKY ENTEROCYTY MIKROKLKY 9 10 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK VYŠETŘENÍ STOLICE ANALÝZA STOLICE UMOŽŇUJE DIAGNOSTICKÝ PROCES ONEMOCNĚNÍ ZAŽÍVACÍO ÚSTROJÍ, JATER A PANKREATU. UJASNĚNÍ PŘÍČÍN VEDOUCÍC K SYMPTOMŮM OVLIVŇUJÍCÍ ZAŽÍVACÍ TRAKT VČETNĚ PRŮJMU, NAUSEY, ZVRACENÍ, EDÉMU, BOLESTÍ, KŘEČÍ, OREČKY, ZTRÁTY CUTI APOD. DETEKCE NĚKTERÝC ENZYMŮ VE STOLICI K URČENÍ MÍRY PANKREATICKÉ FUNKCE. DETEKCE OKULTNÍO KRVÁCENÍ PRO SCREENING KOLOREKTÁLNÍC TUMORŮ DETEKCE PŘÍTOMNOSTI PARASITŮ, NAPŘ. LAMBLIE DETEKCE A IDENTIFIKACE NĚKTERÝC TYPŮ BAKTERIÍ DETEKCE NENATRÁVENÝC ZBYTKŮ POTRAVY PŘI MALABSORPČNÍM SYNDROMU 11 12

3 MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE BIOCEMICKÁ VYŠETŘENÍ VZORKU STOLICE 13 SVALOVÁ VLÁKNA ŠKROBOVÁ ZRNKA TUKOVÉ KAPÉNKY NATIVNÍ PREPARÁT ZBYTKY POTRAVY VLÁKNA CELULÓZY BARVENÍ FRIEDIGER S REAGENS - SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ - TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ - ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE Gastroenterologie für die Praxis München, Anti ttg IgA Anti Gliadin sciga β-defensin 2 Zonulin α 1 -antitrypsin EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin Calprotectin Lactoferin emoglobin aptoglobin Transferin elicobacter pylori Ag Amyláza Lipáza Chymotrypsin Elastáza - 1 Lysozyme Albumin Myeloperoxidáza PMN Elastáza PCR / DNA VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU CALPROTECIN VE STOLICI - RAPID TESTY CalDetect CalPro CalFast CerTest - CALPROTECTIN + LACTOFERRIN KOMBINOVANÉ RAPID-TESTY NA STOLICI ODBĚROVÝ SYSTÉM PRO NĚKOLIK TESTŮ emoglobin Calprotectin Lactoferin E-coli toxin Transferin IDK Extract Single Tube Analytics Analyt Calprotectin Lactoferrin Pancreatic elastase emoglobin aptoglobin anti-gliadin anti-transglutaminase s-iga α 1-antitrypsin Albumin Lysozyme β-defensin 2 EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin Stabilita 2-8 C

4 AUTOMATICKÉ ANALYZÁTORY NA STOLICI Kroma it Linear KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICI SBĚR STOLICE - 72 hod. REFERENČNÍ METODA EXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU FAT 72 hod. S-CCK TEST NS-Prime Alfresa Pharma 19 NS-Plus Alfresa Pharma 20 2 MICRO - ANALYZÁTOR APLIKACE 2 - DECOVÝC TESTŮ 21 Kód VZP: bodů klinický kód, GE, odb. 105 PARAMETRY JEDNODUCÁ OBSLUA BATERIOVÝ TYP REAL-TIME KINETICKÝ SW ROZSA MĚŘENÍ ppm CITLIVOST 1 ppm APLIKACE MALABSORPCE LAKTÓZY MALABSORPCE SACARÓZY MALABSORPCE FRUKTÓZY BAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ MOTILITA GIT, TRANSIT TIME 2 -ppm 30 cut-off TEST S FRUKTÓZOU FRUKTÓZOVÁ INTOLERANCE TEST S LAKTULÓZOU BAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ TS TEST S LAKTULÓZOU OCTT OROCAECAL TRANSIT TIME DECOVÝ TEST LAKTÓZOVÉ INTOLERANCE KONCENTRACE 2 (ppm) PO PODÁNÍ 25g LAKTÓZY 2 (ppm) ČAS (min) 2 /C 4 BAKTERIÁLNÍ PRODUKCE ANAEROBNÍ YDROLÝZA A PRODUKCE VODÍKU A METANU STŘEVNÍ MIKROFLÓROU 23 odnocení dechových testů po podání různých monosacharidů a disacharidů Bc. Jana Bartoňová, Praha Pimentel M.,Gunsalus RP.,Rao SSC.,Zhang.: Methanogens in uman ealth and Disease. Am J Gastroenterol Suppl (2012) 1:28 33

5 2 /C 4 /CO 2 - LACTOTEST /C 4 /CO 2 - LACTOTEST 202 KOMBINACE STANOVENÍ VODÍKU a METANU ELIMINACE FAL.NEGATIVITY MODULÁRNÍ KONCEPCE SENZORY: 2 /C 4 /CO 2 - VLIV ANTIBIOTIK - NÍZKÁ PRODUKCE VODÍKU KALIBRACE TŘÍ SENSORŮ YDROGEN METAN OXID ULIČITÝ REKALKULACE KONCENTRACE 2 PODLE CO 2 25 M. Di Stefano, G.R. Corazza Role of hydrogen and methane breath testing in gastrointestinal diseases Digestive and Liver Disease Supplements 2009/3, Satish S.C. Rao - Ability of the Normal uman Small Intestine to Absorb Fructose: Evaluation by Breath Testing Clinical Gastroenterology and epatology 2007/5, ANALYZÁTORY DECOVÝC TESTŮ 13 C/ 12 C IR force 600, Richen BreathID, Exalenz Zkušenosti laboratoře ÚKBLD 1.LF UK a VFN IR analytické systémy Isomax 4000 elifan plus FLIP, umedics 27 elifan, Fischer - FAN C DECOVÉ TESTY - PDB STANDARD 13 C DECOVÉ TESTY - PDB STANDARD Standardem PDB je primární referenční materiál pro měření přirozených změn obsahu izotopu uhlíku 13 C, stanoveného v uhličitanu vápenatém ze schránek křídových belemnitů rodu Belemnitella americana z geologické formace Pee Dee v Jižní Karolíně (USA) PDB - Pee Dee Belemnitella americana PDB Pee Dee Belemnitae Mezinárodní standard 13 C = % 29 30

6 VÝSKYT IZOTOPU 13 C V PŘÍRODĚ NABÍDKA SUBSTRÁTŮ PRO DECOVÉ TESTY 31 % 13 C δ 13 C PDB 1, Uhličitany 1,110 PeeDee Belemnite 0 1,100 C4 rostliny Atmosférický CO 2-10 US - Dech CO 2 1,090 C3 rostliny -20 1,080 Jap. - Dech CO 2 EU - Dech CO ,070 1,060 1,050 Fosilní zdroje C abundances of nutrients and the effect of variations in 13C isotopic abundances of test meals formulated for 13CO2 breath tests. Schoeller DA. et al.: Am J Clin Nutr. 1980; 33(11): C - acetát C - methacetin C - oktanoát C - galaktóza 13 C - urea 13 C - aminopyrin 13 C - bikarbonát 13 C - kofein 13 C - glukóza 13 C - fenylalanin 13 C - mixed triglycerid 13 C - laktóza 13 C - triolein 13 C - xylóza 13 C - škrob 13 C - glykocholát 13 C - palmitát 32 PRINCIP 13 C- MTG DECOVÉO TESTU PŘIROZENÉ SUBSTRÁTY 13 C PRO DECOVÉ TESTY 13 C-škrob perorální podání stanovení poměru 13 C/ 12 C kukuřice 13 C-substrát produkce CO 2 C4 rostliny 13 C-laktóza enzymatická hydrolytická funkce GIT 13 C 13 CO 2 eliminace mléko krystalizace laktózy C absorpce kumulativní výdej CO 2 cpdr 13C-enriched lactose, derived from milk of cows fed with silo corn (d= ) for 5 weeks. Because it is known that it takes 14 days for cows milk to be in equilibrium with a diet, milk of seven cows was collected during the last 3 weeks of this 5-week period and pooled. Lactose was obtained by crystallization techniques. 34 eliview - IRMS ANALYZÁTOR DECOVÝC TESTŮ NA BÁZI ULÍKU 13 C ANALYZÁTOR 13 CO 2 - IRMS DETEKCE INJEKTOR SEPARACE VODY e e NAFION VACUTAINER REF.INJEKTOR VENTIL MS REFERENČNÍ CO 2 Kód VZP: bodů analytika, odb. 801, IRMS AUTOSAMPLER SEPARACE GC 35 36

7 ANALYZÁTOR 13 CO 2 - IRMS DETEKCE ANALYZÁTOR 13 CO 2 - NDIRS DETEKCE VÝSTUP Z GC IONIZACE PLYNU SEPARACE PODLE MOTNOSTI MAGNETICKÉ POLE 12 C 16 O cm C 16 O cm C 16 O 18 O 37 IRMS ISOTOPE - RATIO MASS SPECTROMETRY TRIPLE FARADAY COLLECTOR DETEKCE C 16 O C 16 O C 16 O 18 O 38 ABSORBČNÍ MAXIMA ISOTOPŮ: 4348,5 nm ,2 nm ANALYZÁTOR 13 CO 2 - NDIRS DETEKCE ANALYZÁTOR 13 CO 2 - NDIRS DETEKCE ZDROJ IR λ = 2-8 μm REF.PLYN VZOREK 13 CO 2 OptoAkustický detektor Lehrer & Luft typ Lehrer E and Luft K F 1938 German Patent No CO 2 - absorpce IR -změna tlaku - deformace membrány - akustický signál 39 NonDispersive Isotope-selective InfraRed Spectroscopy 40 An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detector Daniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: ANALÝZA VYDECOVANÉO VZDUCU NÁDEC VÝDEC CO 2 = 0,04 % CO 2 2,5-3,5 % FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK CO 2 = 5,20 % NÁDEC - VÝDEC (BEZ ZADRŽENÍ DECU) NÍZKÁ KONC.CO 2 NÁDEC - ZADRŽENÍ DECU - KRÁTKÝ VÝDEC NÍZKÁ KONC.CO 2 NÁDEC - ZADRŽENÍ DECU NA 10 sec - DLOUÝ VÝDEC KONC.CO 2 JE OK 41 42

8 PRŮKAZ INFEKCE ELICOBACTER PYLORI DECOVÝ TEST s 13 C - MOČOVINOU (UREOU) SUBSTRÁT: 13 C-MOČOVINA DÁVKA: mg DOBA TESTU: 30 minut p - UREÁZA DECOVÝ TEST globální test - žaludku N 2-13 CO-N O = 2 N CO 2 PRŮKAZEM BAKTERIE/ANTIGENU p NIKOLIV DETEKCE PROTILÁTEK K p RYCLÝ UREÁZOVÝ TEST lokální test - biopsie CLO TEST (RUT) s MOČOVINOU (UREOU) DECOVÝ TEST s 13 C - MOČOVINOU (UREOU) Kód VZP: bodů klinická část, GE, odb. 105 Rychlý ureázový test změna p = změna zbarvení výsledek během hodiny Pylobactell a Infai UBT - p soupravy jsou registrovány v ČR - SUKL ENDOSKOPICKÝ DECOVÝ TEST - 13 C EUBT ELICOBACTER PYLORI - DAKO TEST pstar ODBĚROVÁ NÁDOBKA Kód VZP: odb. 813, 761 bodů mab - TEST MEMBRÁNA 25 mg 13 C-urea aplikace spray sondou 5 minutový test FILTR PRŮKAZ ELICOBACTER PYLORI pstar TEST - DAKO RAPID TEST MONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKA 47 Five minute endoscopic urea breath test with 25 mg of (13)C-urea in the management of elicobacter pylori infection. Isomoto et al.: Eur J Gastroenterol epatol Oct;14(10): INKUBAČNÍ NÁDOBKA

9 POROVNÁNÍ p RAPID TESTŮ ELICOBACTER PYLORI INFEKCE.Pylori + hostitel Cl Cl helicocare negativní p StAR negativní helicocare pozitivní p StAR negativní helicocare pozitivní p StAR pozitivní DUODENÁLNÍ VŘED GASTRIN BEZ ONEMOCNĚNÍ GASTRIN ATROFIE KARCINOM 49 Jeřábek, J.: Stanovení antigenu elicobacter pylori ve stolici rapid testem. Diplomová práce 1.LF UK Praha KMENY BAKTERIE - GENETICKÁ DISPOZICE - VNĚJŠÍ PROSTŘEDÍ - DIETA PODEZŘENÍ NA GASTRITÍDU, P INFEKCI, CA ŽALUDKU negativní p, normální PGI/PGII normální G-17b detekce p PGI/PGII, G-17b pozitivní p, normální PGI/PGII normální G-17b p +/-, nízké PGI/PGII zvýšené G-17b pozitivní p, nízké PGI/PGII nízké G-17b FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK p gastritída Atrofická gastritída Normální žaludeční sliznice Rizko žaludečního nebo duodenálního vředu Rizko karcinomu žaludku 51 Eradikace p infekce + gastroskopie 52 REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE TVORBA ŽLUČE 0.7 l/den SEKRETIN CCK-PZ CRONICKÁ PANKREATITÍDA ZOBRAZOVACÍ METODY ERCP ŠŇŮRA PEREL ENZYMY PANKREATICKÁ ŠŤÁVA CO 3-, VODA 2.0 l/den 53 SPECIFICKÁ STIMULACE ORMONY SEKRETIN COLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN 54 ERCP KLASIFIKACE PANKREATITID ERCP PAPILA MINOR D.WIRSUNGI D.SANTORINI

10 MRCP VÝPOČET OBJEMU SEKRECE FUNKČNÍ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE ŽÁDNÁ STIMULACE TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU NEPŘÍMÁ STIMULACE STIMULAČNÍ POKRM SUBSTRÁT KUKUŘIČNÝ CLÉB 20g RAMA PERORÁLNÍ PODÁNÍ ANALÝZA 13 C-MARKERU SUBSTITUČNÍ TERAPIE ELASTÁZA VE STOLICI PANKREATICKÁ LIPÁZA 250mg 13 C-MTG SUBSTITUČNÍ LIPÁZA 55 Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and its correlation with faecal elastase-1 in patients with chronic pancreatitis Manfredi R. el al. Radiol med. - DOI /s SEKREČNÍ KAPACITA GRADING CP 56 DIGESTIVNÍ FUNKCE TRÁVENÍ (TUKŮ) 13 C - DECOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU METABOLICKÉ PROCESY 13 C-MTG VOLBA SUBSTRÁTU 13 C - TRIOLEIN STEATOREA > g/den 13 C - IOLEIN INTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZA 13 C - MIXED SPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE TRIGLYCERIDE VÝDEJ LIPÁZY < 90 ku/hod 13 C - COLESTERYL PANKREAT. COLESTEROL ESTERÁZA OCTANOATE STEATOREA > 11 g/den 13 C - TRIPALMITIN MALABSORPCE TUKŮ 13 C - TRIOCTANOIN TKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30% 13 C - STARC SEKRECE AMYLÁZY < 10% 13 C-BzTyrAla KORELACE s PABA testem CO 2 V DECU PANKREATICKÁ LIPÁZA 1,3 DI - STEAROYL O C 2 -O-C-(C 2 ) 16 -C 3 O 2 - ( 13 C) - OCTANOYL C - O - 13 C-(C 2 ) 6 -C 3 O C 2 -O-C-(C 2 ) 16 -C 3 JATERNÍ β -OXIDACE cpdr MTG (%) 80,0 70,0 60,0 50,0 13 C-MTG - DECOVÝ TEST & FELA VE STOLICI 100 μg/g CUT-OFF FELA: 200 μg/g NORMÁLNÍ CP-A CP-B CP-C CP-D NON-CP FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK 40,0 30,0 CUT-OFF MTG: 30 % 20,0 10,0 PATOLOGICKÝ 226 DECOVÝC TESTŮ 13 C-MTG 155 CP - 71 KONTROL (NON-CP) SODA MTG & FELA % (181/226) 0, FELA μg/g 60

11 CO JE CÉLIAKIE? podle: Mowat AT, Lancet 2003, 361: 1290 CELOŽIVOTNÍ ONEMOCNĚNÍ, PERMANENTNÍ STŘEVNÍ INTOLERANCE LEPKU OBILOVIN GENETICKÝM FAKTOREM JE LA-B8, LA-DR3 a LADQ2 MESENCYMÁLNÍ BUŇKY TKÁŇOVÁ TRANSGLUTAMINÁZA M.BUNĚK ttg DEAMIDACE GLIADIN 33-mer PEPTID ŽALUDEČNÍ, PANKREATICKÉ PEPTIDÁZY, PROLYL-ENDOPEPTIDÁZY PŠENICE SPOUŠTĚCÍM FAKTOREM JSOU GLIADINOVÉ PEPTIDY IMUNOLOGICKÁ ODPOVĚĎ, AUTOIMUNITNÍ CARAKTER ONEMOCNĚNÍ 19-mer PEPTID Zonulin CÉLIAKIE ATROFIE KLKŮ POŠKOZENÍ SLIZNICE TENKÉO STŘEVA CD4+ T-BUŇKA PROJEVY MALABSORPČNÍO SYNDROMU T2-BUŇKA T1-BUŇKA ZÁNĚTLIVÁ ODPOVĚĎ 61 ODPOVĚĎ NA BEZLEPKOVOU DIETU 62 B-BUŇKA PROTILÁTKY IL 4,5,10 IL2, γifn, TNF CÉLIAKIE YPERPLASIE KRYPT ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI PODEZŘENÍ NA CS ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI ZVÝŠENÉM GENETICKÉM RIZIKU negativní protilátky normální IgA 63 Nízká pravděpodobnost celiakie LA typizace, opakovat biopsii vysoké klinické podezření negativní histologie IgA attg / IgA EmA a celkové IgA pozitivní protilátky Biopsie TS, histologie Bezlepková dieta histologický obraz celiakie Předběžná diagnóza celiakie deficit IgA klinická a histologická normalizace Definitivní diagnóza celiakie C. Briani et al. / Autoimmunity Reviews 2008; 7, IgG attg, IgG EmA nebo IgG AGA pozitivní protilátky Vysoká pravděpodobnost celiakie 64 negativní LA Není riziko CS Marsh 0 or 1 Normální dieta Falešně pozitivní test Potenciální CS LA DQ2 and/or DQ8 negativní protilátky Vyloučit IgA deficienci Nízký příjem glutenu Střevní biopsie anti TG2 > 3x normy Marsh 2 or 3 Definitivní diagnóza celiakie pozitivní LA IgA attg2 & total IgA EmA pozitivní anti TG2 < 3x normy IgA EmA European Society for Pediatric Gastroenterology, epatology, and Nutrition Guidelines for the Diagnosis of Coeliac Disease. usby S. at al. JPGN 2012; 54: EmA negativní Tranzientně falešná pozit. anti TG2 Normální dieta Další serologické testy BIOPSIE TENKÉO STŘEVA - KLASIFIKACE SOUČASNÝ PROTOKOL STANOVENÍ PROTILÁTEK (EVIDENCE - BASED) PERSPEKTIVNÍ PROTOKOL STANOVENÍ PROTILÁTEK (PRACOVNÍ YPOTÉZA) IgA attg +IgA IgA attg +IgA EmA ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA attg +IgG attg DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU +IgAAGA DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET +IgGDGP ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA attg DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET Marsh 0 Marsh 1 Marsh 2 Marsh 3a Marsh 3b Marsh 3c 65 Clinical practice - Coeliac disease. Kneepkens C. M., von Blomberg B. M. Eur J Pediatr. 2012; 171(7) : Old and new serological tests for celiac disease screening. Volta U., Fabbri A., Parisi C. et al. Expert Rev. Gastroenterol. epatol. 2010, 4(1)

12 ANTIENDOMYSIÁLNÍ PROTILÁTKY - EmA AKLIDES - CytoBead CeliAK EmA IF - opičí jícen AGA-16, AGG-1, attg-1.5 pacient D.K. 10/ EmA IF - opičí jícen AGA-238, AGG-220, attg-233 CSF, pacient M.P. 02/2002 EmA IF - opičí jícen pozitivní kontrola 68 anti-ttg, anti-dgp, EmA Kombinace tří základních protilátek pro screening a diagnostiku celiakie imunofluorescenční technologií GLIADINY - SEPARACE PROTEINŮ SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY α-gliadin ŠKROBOVÁ - GELOVÁ ELEKTROFORÉZA (SGE) SEPARACE JEDNOTLIVÝC PROTEINŮ -GLIADINŮ KLASIFIKACE GLIADINŮ NA ČTYŘI SKUPINY α β γ ω anti-ttg (IgA & IgG) anti-dgp (IgA &IgG) + celkové IgA RYCLÉ, RAPID TESTY Z PLNÉ KRVE POCT ANALÝZA ω γ β α anti-ttg (IgA) + celkové IgA anti-ttg (IgA, IgG, IgM) SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY Fingertip rapid point-of-care test in adult case-finding in coeliac disease. Popp A., Jinga M., Jurcut C., Balaban V., Bardas C., Laurila K., Vasilescu F., Ene A., Anca I., Mäki M. BMC Gastroenterology 2013, 13:115 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK Diagnostic accuracy of a new point-of-care screening assay for celiac disease, Benkebil F., Combescure C., Anghel SI., Duvanel CB., Schäppi MG. World J Gastroenterol 2013; 19(31): Evaluation of a DGP point-of-care test for celiac disease in a pediatric population. Marti CO., Fellay B., Bürgin-Wolff A., Magnin JL., Baehler P. International Journal of Celiac Disease, 2015, 3/

13 STŘEVNÍ DISACARIDÁZA - LAKTÁZA DISACARID - LAKTÓZA JE YDROLYZOVÁN STŘEVNÍ DISACARIDÁZOU DIAGNOSTIKA LAKTÁZOVÉ INTOLERANCE ISTOCEMICKÝ PRŮKAZ AKTIVITY LAKTÁZY V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTU IMUNOISTOCEMICKÁ DETEKCE LAKTÁZA 73 AKTIVITA ENZYMU V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTU C 2 O C 2 O O O O O O 1 4 O O O O β-d-galactose α-d-glucose 74 MODERNÍ RAPID TEST DETEKCE AKTIVITY LAKTÁZY CROMOGENNÍ METODOU 75 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK INCIDENCE A MORTALITA KOLOREKTÁLNÍO KARCINOMU V ČR na INCIDENCE MORTALITA Epidemiologie nádorů České republiky normální adenom progresivní lokalizovaný KRCA lymfatické KRCA jaterní sliznice adenom KRCA metastázy metastázy 5 leté přežití (%) let 2005 TESTY OKULNÍO KRVÁCENÍ VE STOLICI - FOBT/TOKS J Med Screen. 2002;9(3): Basic variables at different positivity thresholds of a quantitative immunochemical test for faecal occult blood. Castiglione G, Grazzini G, Miccinesi G, Rubeca T, Sani C, Turco P, Zappa M. qi-fobt - 3.generace 1990 i-fobt - 2.generace 77 KRCA stádium: Dukes I-II Dukes III Dukes IV Proteomics of colorectal cancer: overview of discovery studies and identification of commonly identified cancer-associated proteins and candidate CRC serum markers. Jimenez CR, Knol JC, Meijer GA, Fijneman RJ. - J Proteomics. 2010;73: g-fobt - 1.generace Schweiz Med Wochenschr Feb 28;106(9):297 The hemoccult test in the screening for colonic carcinoma Deyhle P, Nüesch J, Kobler E, Jenny S, Säuberli.

14 79 senzitivita aemoccult SENZITIVITA TESTŮ - FOBT/TOKS 28,7% 56,8% 83,4% g-fobt i-fobt qi-fobt ImmoCare, emeselect, emolex, Actim FB, exagon OBTI specificita OC Sensor 100 ng/ml Ferkl M., Kocna P. et al. ČLČ 1992; Benešová A., Frič P. et al. ČLČ 1993 Dvorak M., Kocna P. et al. Z.- Facharzt, 2003; Kohout P., Granatova J. et al. GUT ng b/ml ng/ml mean 35 ng/ml ifobt - OC Micro - Eiken cut-off 75 ng/ml ng/ml mean 202 ng/ml ng/ml mean 485 ng/ml ng/ml mean 1087 ng/ml NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER Levi Z.,Rozen P.,azazi R.,Vilkin A.,Waked A.,Maoz E.,Birkenfeld S.,Leshno M.,Niv Y. Ann Intern Med. 2007;146: A Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Test for Colorectal Neoplasia ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ LINÍKOVÝ UZÁVĚR PRO PERFORACI NÁSTŘIKOVOU JELOU VLOŽENÍ VZORKU STOLICE PERFORACE LINÍKOVÉ FÓLIE NÁSTŘIK 25 μl PRO ANALÝZU FILTRAČNÍ VLOŽKA SEPTUM DEFINUJÍCÍ MNOŽSTVÍ STOLICE KARTÁČEK PRO ODBĚR STOLICE IDENTIFIKAČNÍ ČÁROVÝ KÓD VZORKU ELIMINACE NADBYTKU STOLICE TRANSFER 10 mg TRANSFER EXTRAKTU PŘES FILTR DO VZORKOVACÍ JAMKY i-fobt LABORATORNÍ & POCT ANALYZÁTORY KVANTITATIVNÍ ANALÝZA b VE STOLICI - VFN OC-DIANA Eiken QuikRead Orion M-Jack Kyowa prosinec 2013 SmartPlus Eurolyser Kroma it Linear Kvantitativní stanovení b ve stolici analyzátorem Eiken OC-Sensor-micro Všeobecná fakultní nemocnice Praha analýz za 5let ( ) Data-mining analytický nástroj I-COP umožnil zkompletovat několik databází OpenLIMS, laboratorní data, FIT, b ve stolici s výstupem Národního onkologického registru Senti FIT Sentinel 83 SENTi-FIT Sentinel i-chroma Boditech NS-Plus Alfresa Pharma 84 Kocna P., Májek O., Blaha M., Zima T., Dušek L.: Characteristics of Colorectal Cancer Detected by Quantitative Faecal aemoglobin Test in ospital Opportunistic Screening. Clin Chem Lab Med 2014; 52, Special Suppl, pp S416

15 LOKALIZACE TUMORU - ODNOTY FIT TESTU LOKALIZACE TUMORU - FALEŠNÁ NEGATIVITA 627 ng/ml ( ) 1322 ng/ml ( ) 1/ ng/ml ( ) 1322 ng/ml ( ) 1/8 9.1% 12.5% 810 ng/ml ( ) 969 ng/ml ( ) 810 ng/ml ( ) Falešná negativita je 15,62% Senzitivita pro KRCA je 84,38% 969 ng/ml ( ) 3/16 5/29 odnoty b ng/ml se významně neliší podle lokalizace tumoru 18.7% Při jednom testu a cut-off (75 ng/ml) je procento nezachycených karcinomů 17.6% 17.2% 85 Metodu FIT OC-Sensor lze spolehlivě použít pro screening KRCA v kterékoliv lokalizaci tumoru 86 Kelley L, Swan N, ughes DJ. - Colorectal Dis Sep; 15(9): e An analysis of the duplicate testing strategy of an Irish immunochemical FOBT colorectal cancer screening programme ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU Medline on-line nejnovější publikace Přímý link na MZČR Národní číselník 88