VITAMINY. vymezení a význam klasifikace jednotlivé vitaminy (hydrofilní a lipofilní)

Transkript

1 VITAMIY vymezení a význam klasifikace jednotlivé vitaminy (hydrofilní a lipofilní) struktura, vlastnosti biochemický význam nutriční a medicínský význam výskyt v potravinách chemické reakce a změny v potravinách látky s antivitaminovým účinkem Symboly použité v prezentaci a vztahující se k učivu Žádný symbol základní učivo, jehož znalost bude v rozumné míře vyžadována. Učivo by měl(a) student(ka) již znát z organické chemie; zde je připomenuto pro osvěžení nebo uvedení do souvislosti. rientace v příslušných pasážích organické chemie se u zkoušky předpokládá. B V Souvislost s jiným předmětem (biochemie, základy výživy); uvedené skutečnosti jsou sice v kontextu významné, nepatří ale primárně do učiva chemie potravin. etail, doplňková nebo dokreslující informace, jejíž znalost nebude vyžadována; v některých případech ale může být důležitá pro hlubší pochopení podstaty věci; v jiných případech se jedná jen o faktické podrobnosti. etail vyššího řádu. Ve výčtech s odrážkami jsou nejdůležitější body uvedeny barevnými odrážkami, body méně významné pro tento předmět a detaily černými odrážkami. ámeček nebo ovál upozorňuje na důležitou nebo zvláštní sloučeninu nebo část molekuly. 1

2 Vitaminy tradiční název pro některé biologicky aktivní složky potravin (původ názvu K. Funk vita amina pro thiamin) organické esenciální exogenní biokatalyzátory minoritní nebo stopové složky mikronutrienty nedostatek vitaminu: hypovitaminosa nepřítomnost vitaminu: avitaminosa značný nadbytek vitaminu: hypervitaminosa biologicky účinné prekurzory vitaminů: provitaminy z chemického hlediska rozmanité nízkomolekulární sloučeniny (často heterocyklické či polycyklické) Biochemické funkce vitaminů B kofaktory enzymů biotin, kys. askorbová prekurzory kofaktorů thiamin TPP, riboflavin FM, FA niacin A /A, AP /AP pyridixin pyridoxalfosfát pantothenová kyselina koenzym A (SoA) vit. B 12 (kobalamin) kobamidový kofaktor redoxní systémy, antioxidanty vit. (AA/AA), vit. E (tokoferoly) látky podobné hormonům vit. (kalciferoly) 2

3 Klasifikace vitaminů podle struktury acyklické sloučeniny (pantothenová kyselina) dusíkaté heterocyklické sloučeniny (thiamin, riboflavin, niacin) kyslíkaté heterocyklické sloučeniny (vit., vit. E) sirné heterocyklické sloučeniny (thiamin, biotin) chinony (vit. K) isoprenoidy (vit. A, vit. ) podle funkce (kofaktory/jiné funkce) podle rozpustnosti vitaminy rozpustné ve vodě (hydrofilní): B, vitaminy rozpustné v tucích (lipofilní): A,, E, K Thiamin vitamin B 1 (aneurin) Struktura Vlastnosti thiaminu l - 2 S [(4-amino-2-methylpyrimidin-5-yl)methyl]- -5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chlorid bezbarvá kryst. látka rozpustná ve vodě a 96 % ethanolu nerozpustná v čistém Et, etheru, l 3 M r = 301, t.t. 248 (rozklad) λ max 246 nm (hydrochlorid), 232 nm (ve vodném roztoku a) velmi nestálý v alkalickém prostředí (hydrolyzuje) relativně stálý v mírně kyselém prostředí (p 3 5) 3

4 Biologicky aktivní formy vitaminu B 1 thiamin fosfáty: thiaminmonofosfát thiamindifosfát (TPP) TPP je důležitý kofaktor transferas, isomeras a lyas thiamintrifosfát S S S 2 2 P P P 2 2 P P P alší částečně aktivní formy vitaminu B 1 thiaminthiol (TS) a TS vázaný na proteiny S 2 2 thiamindisulfid (TSST) S S

5 Biochemické funkce thiaminu B TPP je kofaktorem dekarboxylas, dehydogenas, transketolas a karboligas nejdůležitější procesy za účasti TPP: vznik acetyl oa z pyruvátu (oxidační dekarboxylace) vznik sukcinyl oa z α-ketoglutarátu (oxidační dekarboxylace) druhý krok katabolismu aminokyselin s rozvětveným řetězcem (Val, Leu, Ile) viz v části o biotinu transketolasová reakce v hexosamonofosfátovém zkratu xidační dekarboxylace pyruvátu Účast TPP v prvním kroku: B - alší kroky: pyruvátdehydrogenasa TPP 2 2 S 3 2 aktivní acetaldehyd (2 )2P263 přenos acetylové skupiny na lipoát a regenerace TPP přenos acetylové skupiny na SoA vznik acetyloa a dihydrolipoátu regenerace lipoátu přenosem 2 na A 5

6 utriční a medicínský význam thiaminu V doporučené dávky: 1,2 mg/den (v pubertě až 1,4, kojící matky 1,4 mg/den) relativně bohaté zdroje: obilné klíčky, celozrnné obiloviny, kvasnice, játra možnosti vzniku deficitu nedostatečné dávky thiaminu vliv thiaminasy a oxythiaminu (antivitamin B 1 ) alkoholismus důsledky deficitu: hromadění pyruvátu a laktátu v těle zdravotní důsledky hypovitaminosy/avitaminosy B 1 choroba beri-beri (JV Asie) laktát, pyruvát vasodilatace poruchy srdeční činnosti Wernickova-Korsakovova encefalopatie poruchy vědomí a koordinace pohybu, poruchy pohybu očí poruchy paměti 3 S Výskyt thiaminu v potravinách Převažující formy výskytu maso fosfáty thiaminu vázané na bílkoviny, volný thiamin mléko volný thiamin a difosfát obiloviny a luštěniny volný thiamin 6

7 bsah vitaminu B 1 v potravinách (rozpětí hodnot jako thiamin v mg/kg) maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí eakce thiaminu v potravinách Enzymová degradace thiaminu 2 0 thiaminasa II 4-amino-5-hydroxymethyl- 2-methylpyrimidin nikotinová kys. thiaminasa I 5-(2-hydroxyethyl)-4-methylimidazol thiaminasa I výskyt v syrových rybách thiaminasa II mikrobiální původ 7

8 eenzymové štěpení thiaminu v alkalickém prostředí účinkem oxidu siřičitého nebo hydrogensiřičitanu - 2 S 3 - xidace thiaminu reverzibilní vznik thiamindisulfidu, thiaminthiolu ireverzibilní vznik thiochromu žlutá forma thiochrom thiaminthiolát -2e - thiamindisulfid 8

9 ásledné reakce thiaminthiolu Vznik vonných látek termickým rozkladem S 2 2 S hydroxy-3-sulfanylpentan-2-on meziprodukty (deriváty furanu, heterobicyklické sloučeniny a S) bis(2-methyl- 4,5-dihydro- -furan-3-yl) disulfid bis(2-methyl- -3-furyl)disulfid použití thiaminu pro simulaci masového aroma (sirné sloučeniny) ásledné reakce thiaminthiolu Vazba TS na bílkoviny protein S S -2-2e - protein S S TS protein S S T S TS S protein S T S S T 9

10 eakce thiaminu s aldehydy a aldosami aktivní místo molekuly: atom 2 thiazolového kruhu (disociace, vznik aniontu) nukleofilní adice aniontu na karbonylovou skupinu thiamin Glc S (2 )2 2 esulfurace thiaminu probíhá v alkalickém prostředí katalýza aminokyselinami (Gly, Ala, Val, Glu) produktem je tzv. dethiothiamin 3 2 S S

11 Změny obsahu thiaminu při zpracování potravin maso ztráty vařením % ztráty smažením % mléko pasterace, UT záhřev, sušení mléka: ztráty % skladování sušeného mléka: ztráty do 20 % výrobky z obilovin pečení chleba: ztráty cca 20 % výroba sušenek: ztráty až 80 % (alkalické uhličitany jako kypřící látky) ovoce a zelenina ztráty vařením zeleniny % aplikace S 2 téměř úplná destrukce thiaminu iboflavin vitamin B 2 (laktoflavin) Struktura ribitylový zbytek 6 9 5a 9a ' 2 2' 3' 4' 4a 10a 5' isoalloxazinový skelet 7,8-dimethyl-10-(-ribo-2,3,4,5-tetrahydroxy- -pentyl)-isoalloxazin nebo 7,8-dimethyl-10-[(2S,3S,4)-tetrahydroxypentyl]- benzo[g]-pteridin-2,4-dion Vlastnosti riboflavinu žlutá kryst. látka rozp. ve vodě, nerozp.v Et, l 3 M = 376, t.t. 280, λ max fluoreskuje je fotolabilní 224, 267, 370, 460 nm 11

12 edoxní přeměny riboflavinu žlutý riboflavin (chinoidní forma) e - 3 červený semi- -chinoidní anionradikál 3 ½ 2-2 e téměř bezbarvý 1,5-dihydroriboflavin leukoriboflavin (hydrochinoidní forma) 3 modrý semichinoidní radikál Biochemické funkce riboflavinu B riboflavin je základem struktury tzv. flavinových kofaktorů FM a FA FM a FA jsou prostetické skupiny flavinových dehydrogenas v příslušných katalyzovaných reakcích se substrátu odebírají 2 a obvykle vzniká produkt s násobnou vazbou mezi atomy : dehydrogenasa FM nebo FA FM 2 nebo FA 2 12

13 Struktura FM a FA B P 2 P P 2 difosfát adenosin flavinmononukleotid (FM) = riboflavin-5'-fosfát flavinadenindinukleotid (FA) utriční a medicínský význam riboflavinu V doporučené dávky: 0,4 mg/den (malé děti) 1,5 mg/den (dospělí) důležité zdroje: mléko, mléčné výrobky, zelenina, kvasnice, vejce, maso a vnitřnosti, játra ryb, jikry, pivo možnosti vzniku deficitu nedostatečné dávky riboflavinu omezená absorpce riboflavinu (z rostlinných zdrojů) alkoholismus nedostatek vitaminu B 2 (ariboflavinosa) zánětlivé změny kůže a sliznic (např. sliznice žaludku, sliznice horního rtu a ústní dutiny ), suchost kůže, anemie (vzácně) objevuje se obvykle společně s jinými avitaminosami (pelagra) 13

14 Výskyt vitaminu B 2 v potravinách Převažující formy výskytu mléko volný riboflavin, riboflavin vázaný na kaseiny, dále FA, stopy FM maso volný riboflavin, FM a FA a asociované s bílkovinami obiloviny, luštěniny, houby volný riboflavin, FA, FM rovněž vázané formy (estery) a deriváty (aldehyd, kyselina) = bsah vitaminu B 2 v potravinách (rozpětí hodnot jako riboflavin v mg/kg) maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí 14

15 eakce riboflavinu v potravinách za nepřístupu světla je riboflavin v potravinách stálý (rozklad až v silně kyselém nebo silně alkalickém prostředí) světlo (UV složka) vyvolává rychlý a téměř úplný fotochemický rozklad hν p > lumiflavin 2 p < lumichrom Změny obsahu riboflavinu při zpracování potravin ztráty fotodegradací jsou velmi významné u mléka vystaveného slunci pokles obsahu % za hod ztráty vyluhováním vaření zeleniny: pokles obsahu % ztráty termickým rozkladem jsou malé u mléka zanedbatelné (UT mléko cca 2 % ztráty) pečení chleba pokles obsahu cca 10 % ztráty při skladování skladování sušeného mléka cca 2 % ztráty zvýšení obsahu mikrobiální činností: fermentace mléka 15

16 iacin vitamin B 3, faktor PP (pellagra-preventive factor) hemické formy (vitamery) nikotinová kyselina 2 nikotinamid Vlastnosti bezbarvé kryst. látky velmi stálé Biochemický význam niacinu B od nikotinamidu jsou odvozeny kofaktory dehydrogenas A a AP 2 P 2 difosfát 2 IKTIAMI AEI IUKLETI A ( = ) IKTIAMI AEI IUKLETI FSFÁT AP ( = P 3 2- ) P 2 adenosin (=) nebo 2'-fosfoadenosin (= P 3 2- ) 16

17 edoxní přeměny A a AP B 2 dehydrogenasa 2 S 2 S A nebo AP A nebo AP lavní biochemické děje probíhající za účasti A B glykolysa oxidační dekarboxylace pyruvátu acetyl oa oxidace acetyl oa v citrátovém cyklu β-oxidace mastných kyselin oxidace ethanolu 17

18 lavní biochemické děje probíhající za účasti AP B syntéza mastných kyselin syntéza cholesterolu a steroidních hormonů syntéza prolinu syntéza deoxyribonukleotidů regenerace glutathionu (GS), kys. askorbové, thioredoxinu syntéza fofátových kofaktorů (F, TF, methyl-tf ) Vznik AP v pentosovém cyklu (v oxidační fázi) Vznik nikotinové kyseliny z tryptofanu (v játrech a střevě účinkem mikroorganismů) V B = 2 -formylkynurenin 2 2 kynurenin kynureninasa pyridoxal- -fosfát 2 2 Ala 2 3-hydroxy- -kynurenin 2 3-hydroxyanthranilová kys. = = 2 6-semialdehyd 2-amino-3-karboxymukonové kys chinolinová kys. 18

19 utriční a medicínský význam niacinu V doporučená dávka niacinového ekvivalentu(= niacintrp/60): cca 15 mg/den u dospělých (až 18 mg/den u dospívajících) bohaté zdroje niacinu: játra, ledviny > maso, ryby, droždí > obilné klíčky a otruby > celozrnná pšenice, káva (mléko, maso, vejce zdroje Trp) možnosti vzniku deficitu nízké dávky nebo snížená absorpce niacinu (obiloviny) strava s nízkým obsahem Trp (kukuřice) deficit vitaminu B 6 (blokovaná konverze Trp niacin) nedostatek niacinu pelagra; projevy choroby: dermatitis záněty kůže v ostře ohraničených oblastech (vzhled jako při silném popálení sluncem, pigmentace, olupování kůže, často na krku) zánět jazyku, průjmy, mentální příznaky ( demence) Výskyt niacinu v potravinách Převažující formy výskytu maso, vnitřnosti, vejce nikotinamid, A a AP obiloviny převažuje nikotinová kyselina, často vysoký celkový obsah (celozrnné obiloviny, zvláště klíčky) podstatná část ve vázaných formách (vysokomolekulární estery glykopeptidů v čiroku a kukuřici, -glykosidy) malá využitelnost zelená káva obsahuje trigonelin, z něhož částečně vzniká při pražení nikotinová kys nikotinyl-β--glukopyranosa jednotka polymerních glykopeptidů -(β--glukopyranosyl)- -nikotinová kys. trigonelin 19

20 bsah niacinu v potravinách (rozpětí hodnot jako nikotinová kys. v mg/kg) maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí hemické reakce a změny niacinu v potravinách reaktivita: oba vitamery jsou velmi stabilní přeměna vitamerů: hydrolýza (amid kyselina) v silně kyselém a silně alkalickém prostředí ztráty niacinu při pracování termická úprava (pečení): pokles obsahu cca 10 % vyluhování, odkap při rozmrazování masa: významnější ztráty zvýšení obsahu využitelného niacinu: vlivem alkalické hydrolýzy vázaných forem (při použití zásaditých kypřících prostředků v pečivu) 20

21 Pantothenová kyselina vitamin B amid β-alaninu a -pantoové kyseliny aminopropan-1-ol γ-aminomáselná kyselina ()-pantothenová kys. ()-panthenol ()-homopantothenová kys. tyto tři sloučeniny mají vitaminovou účinnost (L-enantiomery nikoli) pantothenová kys. je viskózní kapalina mísitelná s vodou Biochemický význam pantothenové kyseliny B od pantothenové kyseliny je odvozen koenzym A (S-oA) pantethein (pantothenoyl-cysteamin) je vázán na fosfoserinovou jednotku v tzv. acyl-přenášejícím proteinu (S-AP, zkr. acyl-carrier protein), který je nezbytný pro syntézu mastných kyselin 2 P S fosfoserinová jednotka proteinu pantothenová kyselina pantethein cysteamin 21

22 cysteamin B 2 2 S 2 pantotenová kyselina 2 2 Struktura koenzymu A (S-oA) 3 2 P P 2 3'-fosfoadenosin difosfát - P Biochemické procesy probíhající za účasti koenzymu A a acylkoenzymů A B metabolismus lipidů aktivace mastných kyselin před β-oxidací první krok syntézy (prodloužení řetězce) mastných kyselin (vznik malonyl-soa karboxylací acetyl-soa) syntéza fosfatidů a triacylglycerolů (přenosem acylových skupin z acyl-oa na glycerol-fosfát) citrátový cyklus a související reakce oxidační dekarboxylace pyruvátu přenos acetylové skupiny na S-oA a vznik acetyl-soa (rovněž s přispěním thiamindifosfátu - TPP, lipoátu, FA a A ) oxidační dekarboxylace 2-oxoglutarátu (α-ketoglutarátu) vznik sukcinátu ze sukcinyl-soa 22

23 Biosyntéza pantothenové kyseliny rostlinami B Val transaminace 2 P apartátdekarboxylasa ( pyridoxalfosfát) Asp 2-oxoglutarát Glu 5,10-methylen- 4 PteGlu 2 4 PteGlu 3-methyl-2-oxobutanoát 3 hydroxymethyltransferasa 2 3 oxopantoátreduktasa AP AP pantothenátsynthetasa 2 AMP ATP β-ala 2 utriční a medicínský význam pantothenové kys. V doporučená dávka 6 mg/den (dospělí) zdroje pantothenové kys. téměř všechny potraviny s výjimkou tuků a cukru deficit pantothenové kys. u člověka nevzniká (výjimka: podvyživení váleční zajatci kožní příznaky) panthenol použití ve farmacii a kosmetice 23

24 Výskyt pantothenové kyseliny v potravinách Formy výskytu vázané formy: S-oA, acyl-soa, S-AP volná kyselina homopantothenová kys. (kvasnice) bsah v potravinách obsah v konkrétních potravinách může být velmi proměnlivý bohatší zdroje jsou potraviny živočišného původu a droždí tuky a vysoce rafinované produkty (cukr) neobsahují p.k. vůbec bsah pantothenové kyseliny v potravinách (rozpětí hodnot v mg/kg) maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí 24

25 eakce pantothenové kyseliny v potravinách ydrolýza a následná dehydratace (cyklizace) kyselé nebo alkalické prostředí hydrolytické štěpení na β-ala a pantoovou kys. kyselé prostředí (p < 3) dehydratace pantoové kys. za vzniku laktonu β-ala ()- pantolakton Pyridoxin vitamin B 6 Struktura vitamerů pyridoxinové triády pyridoxol pyridoxal pyridoxamin 4,5-bis(hydroxymethyl)- 2-methylpyridin-3-ol 3-hydroxy-5-hydroxymethyl- 2-methylpyridin-4-karbaldehyd bezbarvé krystalické látky stabilní v kyselém prostředí (pyridoxol je nejstálejší) (3-hydroxy-5-hydroxymethyl- 2-methylpyridin-4-yl)- methylamin 25

26 Fosforylované formy pyridoxinu P 2 2 pyridoxol-5 -fosfát P 2 pyridoxal-5 -fosfát PLP PLP je kofaktorem mnoha enzymů P pyridoxamin-5 -fosfát PMP dvozené sloučeniny pyridoxinová kyselina lakton pyridoxinové kyseliny (4-pyridoxolakton) isopyridoxal (5 ) isopyridoxinová kyselina její lakton metabolity pyridoxinu vylučované močí, nemají účinek vitaminu 2 2 pyridoxal cyklický poloacetál pyridoxalu 26

27 Biochemické procesy probíhající za účasti PLP B transaminace aminokyselin dehydratace/deaminace serinu metabolismus sirných aminokyselin včetně hys (viz B 12 ) dekarboxylace aminokyselin a jejich derivátů vznik běžných biogenních aminů vznik neurotransmiterů a (tkáňových) hormonů Glu γ-aminomáselná kys. (GABA) is histamin 5-hydroxy-Trp serotonin Tyr dihydroxyfenylalanin dopamin noradrenalin adrenalin 2 2 Transaminace B výměna (přenos) aminoskupiny mezi aminokyselinou-1 a α-ketokyselinou-2 aminokyselina2 α-ketokyselina-1 akceptorem aminoskupiny je obvykle α-ketoglutarát, případně pyruvát nebo oxalacetát enzymy aminotransferasy (transaminasy) prostetickou skupinou je pyridoxalfosfát (PLP) během reakce se mění na pyridoxaminfosfát (PMP) a zpět na PLP 27

28 Průběh transaminace dvousubstrátová reakce ping-pongový mechanismus B 2 aminokyselina 1 enzym - Schiffova báze pyridoxalfosfátu 2 enzym PLP enzym PMP α-ketokyselina1 1 aminokyselina 2 2 α-ketokyselina 2 2 ehydratace/deaminace serinu B enzym serindehydratasa s PLP jako kofaktorem krok 1: vznik Schiffovy báze, kroky 2 4 jsou enzymově katalyzované, kroky 5 a 6 jsou neenzymové Ser PLP P 2 3 P 2 3 P 2 pyruvát PLP 2 aminoakrylát 28

29 alší procesy, pro které je potřebný PLP fosforolýza glykogenu vznik δ-aminolevulové kys. (první krok v syntéze porfyrinů) syntéza sfingolipidů (sfingomyelinu, cerebrosidů) syntéza taurinu (taurin = 2-aminoethansulfonát) 2 2 S oa sukcinyl-oa synthetasa δ-aminolevulové kys. PLP 2 2 S oa δ-ala 2 porfobilinogen dehydratasa B serin 2 3-keto- -sfingosamin- -synthasa PLP ( 2 ) ketosfingosamin ( 2 ) ( 2 ) 14 SoA 2 1. redukce (AP ) SoA 2. acylace (SoA) 3. dehydrogenace (FA) UP UP-Glc nebo UP-Gal gluko-cerebrosid (1--β--glukopyranosylceramid) nebo galakto-cerebrosid (1--β--glukopyranosylceramid) palmitoyl-oa ( 2 ) 12 ( 2 ) ceramid (-acylsfingosin) fosfatidylcholin P diacylglycerol sfingomyelin B 2 2 ( ) 3 29

30 Výskyt pyridoxinu v potravinách Formy výskytu pyridoxol, (hlavně v rostlinách), pyridoxamin (hlavně v mase), pyridoxal ve všech potravinách fosfáty: pyridoxolfosfát, PLP, PMP (v živočišných materiálech) vázané formy (účinné): Schiffovy báze PLP s proteiny (v mase) hůře využitelné vázané formy: glykosidy obsažené v rostlinách příklad glykosidu: 5 --(β--glukopyranosyl)pyridoxol bsah v potravinách obvykle jednotky mg/kg dobré zdroje: droždí, maso, vnitřnosti, vaječný žloutek, celozrnné obiloviny, luštěniny bsah pyridoxinu v potravinách (rozpětí hodnot v mg/kg) maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí 30

31 utriční souvislosti a medicínský význam pyridoxinu V doporučená dávka 1,2 1,6 mg/den (dospělí) 2 mg/den (těhotné ženy a kojící matky) absorpce v GI traktu: pouze volné formy (pxol, pxal, pxamin), fosfáty musí být defosforylovány (alkalická fosfatasa) vitamery B 6 jsou v játrech fosforylovány (ATPpyridoxin kinasa), pyridoxolfosfát a PMP se v játrech oxidují na PLP za katalýzy PP oxidasou (FM), v krevní plasmě je PLP vázán na albumin deficit je vzácný, vyšší pravděpodobnost deficitu ve starším věku a u alkoholiků příznaky deficitu: kožní vyrážky, slabost, únava, zánět jazyka, záněty sliznice v ústech, rozštěp rtu, neurologické problémy (zmatenost, záchvaty, křeče) možný sek. efekt deficit niacinu (pelagra) zvýšení hladiny homocysteinu srdeční choroby Terapeutické použití pyridoxinu a interakce s léky použití vyšších dávek pyridoxinu při léčbě hyperhomocysteinemie syndromu karpálního tunelu ranní nevolnosti, premenstruačního syndromu rizika aplikace vyšších dávek (>200 mg/den) jsou významná max. bezpečná dávka 100 mg/den tuberkulostatika penicilamin kortikosteroidy inaktivují vitamin B 6 nebo zhoršují jeho využitelnost hormonální kontraceptiva sub-optimální stav vitaminu B 6 Toxicita pyridoxinu dávky cca 2 g/den zhoršená svalová motorika, ataxie, parestezie (brnění, mravenčení v končetinách), neurodegenerativní změny 31

32 eakce pyridoxinu v potravinách eaktivita pyridoxalfosfát (PLP) > pyridoxal > pyridoxamin > pyridoxol eakce PLP a pyridoxalu s aminosloučeninami s volnými aminokyselinami (α- 2 skupina) s peptidy a proteiny ( 2 skupina -konce) s peptidy a proteiny (ε- 2 skupina lysylového zbytku) reakce za účasti dalších funkčních skupin a částí molekuly skupina S cysteinu reakcí s ys, Glu, Trp a is heterocyklické struktury vznikají cyklické produkty eakce pyridoxalu nebo PLP s α-aminokyselinami 2 AA 2-2 AA redukce pyridoxyl-aminokyselina (téměř biol. inaktivní) Schiffova báze (aldimin) 2 ketokyselina pyridoxamin(5 -fosfát) ketimin (5 -fosfo-)pyridoxyliden-diaminokyselina 32

33 eakce pyridoxalu a PLP s cysteinem S 2 S S - 2 S derivát thiazolidinu eakce pyridoxalu a PLP s glutamovou kyselinou glutamová kys oxo-pyrrolidin- 2-karboxylová kys. (pyroglutamová kys.)

34 eakce pyridoxalu a PLP s tryptofanem derivát β-karbolinu eakce pyridoxalu a PLP s histidinem

35 eakce pyridoxalu se sulfanem sulfan vzniká rozkladem cysteinu (např. při mikrobiální degradaci bílkovin) 2 S S dehydratace a redukce S pyridoxylthiol S 2 oxidace 2 S S 2 S S 2 disulfidy 3 Změny obsahu pyridoxinu při zpracování potravin ztráty způsobené chemickými reakcemi jsou obvykle menší u potravin rostlinného původu, v nichž převažuje stabilnější pyridoxol ztráty frakcionací: při mletí obilovin přechází většina do otrub bílé mouky mají nižší obsah, celozrnné vyšší pečení chleba: ztráty cca 15 % vaření těstovin: ztráty % pečení masa: ztráty cca % tepelné ošetření mléka: ztráty cca 10 % 35

36 Biotin vitamin B 7, vitamin Struktura ()-biotin S [(1, 5S, 6S)-3-oxo-7-thia-2,4-diaza- -bicyklo[3.3.0]oktan-6-yl]-pentanová kyselina Vlastnosti slabě kyselá látka termostabilní, fotostabilní v neutrálním a kyselém prostředí oxilabilní v alkalickém prostředí Biochemické funkce biotinu B biotin je prostetickou skupinou enzymů katalyzujících přenos karboxylové skupiny příslušné metabolické procesy biosyntéza mastných kyselin katabolismus aminokyselin s rozvětveným řetězcem meziprodukt reakcí je -karboxybiotin v molekule enzymu je biotin vázán amidovou vazbou na ε-aminoskupinu lysinu S ( 2 ) 4 seskupení se nazývá biocytin (ε--biotinyllysin) S 36

37 Karboxylační reakce za účasti biotinu B karboxylace pyruvátu vznik oxalacetátu: start citrátového cyklu pyruvátkarboxylasa biotin ATP AP P 4 2- karboxylace acetylkoenzymu A vznik malonylkoenzymu A: start biosyntézy MK acetyl-oa-karboxylasa S oa 2 2 biotin - 2 S oa ATP AP P 4 2- Karboxylační reakce za účasti biotinu B karboxylace propionylkoenzymu A -methylmalonylkoenzym A L-methylmalonylkoenzymA isomearce na sukcinylkoenzym A ( citr. cyklus) S oa propionyl-oakarboxylasa biotin - S oa racemasa 3 - S oa ATP AP P 4 2- L-methylmalonyl-oAmutasa kofaktor B S oa 37

38 Karboxylační reakce za účasti biotinu B karboxylace 3-methylkrotonylkoenzymu A (jedna z reakcí v katabolismu leucinu) Leu 3 dehydrogenasa α-ketokyselin s rozv. řetězcem thiaminpyrofosfát aminotransferasa AK s rozvětveným řetězcem pyridoxalfosfát Glu α-ketoglutarát α-ketoisokapronová kys. (4-methyl-2-oxo-pentanová) SoA A A oas 2 isovaleryl-oa FA FA SoA acyl-oadehydrogenasa β-methylkrotonyl-oa 3 3 SoA β-methylkrotonyl-oa 3 2 β-methylkrotonyl-oakarboxylasa biotin - 2 ATP 2 2 AP P 4 2- SoA β-methyl-glutakonyl-oa 2 β-methyl- glutakonyl- oa hydratasa - 2 β-hydroxyisovalerová kys. (3-hydroxy-3-methylbutanová) 2 SoA β-hydroxyβ-methylglutaryl-oa (MG-oA) MG-oA lyasa - 2 B acetoacetát 3 SoA acetyl-oa 38

39 utriční souvislosti a význam biotinu V přiměřená dávka je cca µg/den pro dospělé, cca 5 µg/den pro novorozence dobré zdroje: játra, ledviny, vejce (žloutek), kvasnice, mléko biotin je v potravinách vázán na bílkoviny, absorpce v GI traktu je podmíněna předchozím enzymovým štěpením na volný biotin, případně biocytin absorpce biotinu probíhá především v jejunu (lačníku) ve vaječném bílku je obsažen protein avidin, který tvoří s biotinem nevyužitelný komplex; termickou denaturací antivitaminový účinek avidinu mizí deficit biotinu ve stravě je vzácný příznaky avitaminosy: kožní vyrážky, ztráta vlasů, nauzea, zvracení, zánět jazyka, poruchy přijmu potravy, deprese, hypercholesterolemie bsah biotinu v potravinách (rozpětí hodnot v mg/kg) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí 39

40 eakce a změny biotinu v potravinách oxidace vznik sulfoxidů a sulfonu (např. účinkem 2 2 ) S ( 2 ) 4 nitrosace ()-biotinsulfoxid ½ 2 S ( 2 ) 4 ½ 2 (-)-biotinsulfoxid S ( 2 ) 4 S ( 2 ) 4 biotinsulfon S ( 2 ) S ( 2 ) 4 nitrosobiotin Změny obsahu biotinu při zpracování potravin biotin je poměrně stabilní ztráty biotinu především vyluhováním, méně rozkladem vaření masa: ztráty cca 20 % pasterace mléka: ztráty % změny způsobené mikroorganismy při fermentacích jogurt: snížení (Lactobacillus) nebo naopak zvýšení obsahu (Micrococcus) o desítky % 40

41 Folacin folát, listová kyselina, pteroylglutamová kyselina, vitamin B 9 (symboly F, PteGlu) a 5 2 8a 1 8 pterin (2-amino-4-oxopteridin) jednotka 4-amino- -benzoové kys. acyl pteroové kyseliny 2 jednotky L-glutamové kys. (n = 1 8) 4-[(pterin-6-yl-methyl)amino]-benzoyl-poly-L-γ-glutamát M r 441 (monoglutamát) až 1344 (oktaglutamát) 1 γ α β n Tetrahydrofolát n biochemicky aktivní forma vitaminu zkratky TF, F 4, 4 PteGlu ve srovnání s listovou kys. jsou zredukovány dvojné vazby mezi atomy a číslo 5, 6 a 7, 8 v pyrazinovém cyklu funkce: přenos jednouhlíkových skupin (methyl, formyl) 41

42 Sloučeniny odvozené od TF n n methyl- 4 PteGlu (5-Me-TF) 5-formimino- 4 PteGlu (5-formimino-TF) n n 2 2 5,10-methylen- 4 PteGlu (5,10-methylen-TF) 5,10-methenyl- 4 PteGlu (5,10-methenyl-TF) Sloučeniny odvozené od TF n n formyl- 4 PteGlu (5-formyl-TF) 10-formyl- 4 PteGlu (10-formyl-TF) 42

43 Biochemický význam folacinu B TF ( 4 PteGlu) je koenzymem enzymů (transferas, lyas, isomeras), které katalyzují přenos jednouhlíkatých zbytků (methyl, hydroxymethyl, formyl) mezi molekulami intermediáty reakcí jsou např. 5-Me-TF (=5-methyl- 4 PteGlu) 5-formyl-TF(=5-formyl- 4 PteGlu) 5,10-methylen-TF (=5,10-methylen- 4 PteGlu) příslušné metabolické děje katabolismus a přeměny aminokyselin přeměny nukleotidů syntéza purinových nukleotidů ěkteré reakce probíhající za účasti TF a jeho derivátů B Substráty / produkty (enzymy, koenzymy/další produkty) těchto reakcí jsou např. serin / glycin 2 (serinhydroxymethyltransferasa, TF/ 5,10-methylen-TF) homocystein / methionin (methioninsynthasa, 5-Me-TF a kofaktor B 12 / TF) histidin / glutamát 4 (formiminotransferasa, TF / 5-formimino-TF) dump / dtmp (thymidylátsynthasa, 5,10-methylen-TF / F) 43

44 B dump (deoxyuridin- -monofosfát. deoxyuridylát) P thymidylátsynthasa 2 2 n 5, 10-methylen- -tetrahydrofolát P dtmp (thymidinmonofosfát, thymidylát) 2 n dihydrofolát utriční souvislosti a medicínský význam folacinu V minimální potřebná dávka pro dospělé 0,15-0,20 mg/den doporučená dávka 0,4 mg/den v těhotenství 0,6 mg/den, pro kojící matky 0,6 mg/den (mimořádná důležitost folacinu v těhotenství pro zdravý vývoj plodu) listová kys. (monoglutamát) se vstřebává lépe než přírodní folát ekvivalence: 1 mg listové kys. odpovídá 1,7 mg přírodního folátu nedostatek folacinu megaloblastická (makrocytární) anemie (ubývání erytrocytů, abnormální zvětšování erytrocytů, zvětšování dalších buněk a jejich jader makrocyty) souvislost s deficitem B 12 (vyvolává podmíněný deficit TF) nedostatek 5-Me-TF zvýšení hladiny homocysteinu (zablokování konverze na methionin) zvýšení rizika srdečních chorob 44

45 Výskyt folacinu v potravinách Běžné formy výskytu TF s různým počtem jednotek glutamové kys. 5-methyl-tetrahyrofoláty 10-formyl-terahydrofoláty listová kyselina s proměnným počtem jednotek glutamové kys. bsah folacinu v potravinách (rozpětí hodnot v mg/kg) 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 maso vepřové maso hovězí maso kuřecí játra vepřová ryby mléko sýry vejce mouka pšeničná chléb luštěniny zelí špenát rajčata mrkev brambory jablka citrusové ovoce banány ořechy droždí 15 45

46 eakce folacinu v potravinách Možnosti chemických změn hydrolytické štěpení polyglutamátů Pte(Glu) n Pte(Glu) n-1 PteGlu zachování účinnosti, zvýšení biologické využitelnosti isomerace (za tepla nebo v alkalickém prostředí) 10-formyl- 4 PteGlu 5-formyl- 4 PteGlu oxidace a štěpení na inaktivní produkty (degradace) p-aminobenzoyl-(poly)-glutamová kys. derivát pteridinu redukce kys. askorbovou např. 5-Me- 2 PteGlu 5-Me 4 PteGlu Stabilita vůči oxidaci klesá v pořadí Pte(Glu) n > PteGlu 5-formyl- 4 PteGlu >5-Me- 4 PteGlu egradace TF = pterin (2-amino- -4-oxopteridin) - 2-2e e ( ) 2 7,8-dihydropterin 2 = e - 2 xanthopterin 46

47 Komplexy folacinu a příbuzných sloučenin s ionty kovů 2 2 M 2 2 Změny obsahu folacinu v potravinách obsah folacinu se snižuje především vyluhováním (např. při vaření), zčásti degradací vaření a pečení masa: ztráty až 95 % pasterace mléka: ztráty cca 5 % výroba zahuštěného mléka: ztráty až 75 % výroba sýrů: snížení obsahu ve srovnání s mlékem % pečení chleba: ztráty cca 20 % vaření a konzervování zeleniny: ztráty % 47

48 Kobalaminy vitamin B A B o 3 2 P = kyanokobalamin = hydroxykobalamin = 2 akvakobalamin = methylkobalamin = 2 nitritokobalamin = S 2 sulfitokobalamin = 2 2 Struktura korinový skelet centrální atom o vazba o se čtyřmi atomy pyrrolových jader korinového cyklu a s dalším atomem dimethylbenzimidazolu šestý ligand je malá molekula ( 2 ) karbanion ( ) nebo jiný anion ( -, - ) nebo zbytek 5 -deoxyadenosinu 5 -deoxy-5 -adenosylkobalamin (kofaktor B 12 ) Biochemický význam kobalaminu B eoxyadenosyl-kobalamin (kofaktor B 12 ) je prostetickou skupinou několika enzymů, především methylmalonyl-oa mutasy (přeměna methylmalonyl-oa na sukcinyl-oa) methylmalonyl-oa vzniká karboxylací (viz část o biotinu) propionylkoenzymu A, který je intermediátem katabolismu Val, Ile, cholesterolu a MK s lichým počtem methionin synthasy, která katalyzuje přeměnu (methylaci) homocysteinu na methionin donorem methylové skupiny je 5-Me-TF (viz schéma na dalším snímku) 48

49 B glycin serin 5 TF methionin ATP 2 SAM 2 _ 2 _ P 4 2 P 2 7 substrát AP 5,10-methylen- TF SA methylovaný substrát 2 AP 5-Me-TF homocystein adenosin methionin synthasa kofaktor B 12 (homocystein methyltransferasa) adenosyltransferasa methyltransferasa S-adenosylhomocystein hydrolasa 5 6 serin hydroxymethyltransferasa methylen-tf reduktasa SAM = S-adenosylmethionin SA = S-adenosylhomocystein S-Adenosylmethionin a S-adenosylhomocystein B S 2 2 S 2 substrát substrát 49

50 alší metabolické přeměny homocysteinu B homocystein S serin cystathioninsynthasa PLP S 2 cystathionin methylmalonyl-oamutasa cystathioninγ-lyasa PLP 2 4 S oa 2 2 B 12 2 S oa oxidační dekarboxylace S sukcinyl-oa propionyl-oa α-ketobutyrát cystein utriční souvislosti a medicínský význam vit. B 12 V doporučená dávka 3 µg/den u dospělých (3,5 µg/den pro těhotné ženy, µg/den 4 pro kojící matky) hlavní nutriční zdroje: játra, maso, vejce (vit B 12 vzniká také mikrobiální činnosti v tlustém střevu) pro absorpci vit. B 12 je potřebný tzv. vnitřní faktor (intrinsic factor) glykoprotein vylučovaný buňkami žaludeční sliznice komplex vitaminu a vnitřního faktoru je absorbován v ileu nedostatek vit. B 12 ve stravě se projeví až za několik let deficit: ve vyšším věku a často v souvislosti s chorobami žaludku důsledek deficitu: perniciosní anemie aktivita methioninsynthasy klesá hyperhomocysteinemie, folacin se hromadí ve formě 5-Me-TF (nemůže se přeměňovat na jiné formy) megaloblastická anemie je inhibována syntéza porfyrinů anemie z nedostatku hemu 50

51 Výskyt vit. B 12 v potravinách jen potraviny živočišného původu játra: µg/kg maso savců: 5 20 µg/kg drůbež, vejce: cca 5 µg/kg ryby: µg/kg mléko 3 40 µg/kg potraviny rostlinného původu mohou vit. B 12 obsahovat jen při spolupůsobení mikroorganismů (fermentované zelí ) Vitamin e - 2 2e - kyselina L-askorbová (AA) kyselina L-dehydroaskorbová (AA) Vlastnosti kys. L-askorbové bílá kryst. látka, rozp. ve vodě, nerozpustná v etheru M = 176, t.t. 218 (rozklad) redukční a antioxidační účinky 51

52 Kyselina L-askorbová (2,3-endiol γ-laktonu 2-keto-L-gulonové kyseliny) = endiol L-gulosa L-gulonová kys. 2-keto-L-gulonová kys. 2 kyselina L-askorbová Stereoisomery keto-L-gulonová kys. (2-keto-L-xylo-hexonová) kys. L-askorbová 2 kys. -isoaskorbová 2-keto--mannonová kys. (-erythorbová) (2-keto--arabino-hexonová) keto--gulonová kys. (2-keto--xylo-hexonová) kys. -askorbová kys. L-isoaskorbová (L-erythorbová) 2-keto-L-mannonová kys. (2-keto-L-arabino-hexonová) 52

53 Acidita kyseliny askorbové pk a1 = 4,04 pk a2 = 11,4 Estery kys. L-askorbové s karboxylovými a minerálními kyselinami 6-L-askorbyl palmitát = 3 ( 2 ) 14 6-L-askorbyl acetát = 3 S 3 P L-askorbyl sulfát (inaktivní) 2-L-askorbyl fosfát (aktivní) 53

54 alší odvozené sloučeniny 3 kys. 6-deoxy-L-askorbová (částečně aktivní) 5,6-acetál kys. L-askorbové s alifatickým aldehydem 2 2 askorbigen (částečně aktivní) kys. 2--(α--glukopyranosyl)-L-askorbová (aktivní) edukční a antioxidační vlastnosti kys. L-askorbové Látky oxidující AA: 2 Fe 3, u 2 peroxidy radikály, 2 2 chinony AA askorbyl radikál AA e. e GSSG 2 GS alší aktivní biomolekuly regenerující AA z AA: dihydrolipoát jiné thioly thioredoxin A(P) 54

55 Průběh a stechiometrie oxidace kys. L-askorbové kyslíkem a peroxidem vodíku autooxidace 2 A 2 A A 2 2 A A 2 2 A 2 2 stech. poměr 2 A: 2 1:1 až 2:1 Symboly: 2 A= kys. L-askorbová A = kys. L-dehydroaskorbová A = askorbylový radikál A = anion askorbylového radikálu enzymově katalyzovaná oxidace askorbát oxidasa 2 2 A 2 2 A 2 2 poměr 2:1 askorbát peroxidasa 2 A 2 2 A 2 2 poměr 1:1 Prooxidační efekt kys. L-askorbové nastává při vysokých (nefysiologických) koncentracích nekomplexovaných iontů kovů, za přítomnosti peroxidů nebo kyslíku redukcí iontů kovů (Fe 3, u 2 ) do nižšího oxidačního stavu vznikají prooxidačně působící ionty kovů, které vstupují do tzv. Fentonovy reakce s peroxidem vodíku, čímžvznikámimořádně reaktivní hydroxylový radikál, reakcí s molekulovým kyslíkem vzniká hydroperoxylový radikál: Fe Fe 3 Fe 2 2 Fe

56 Biochemický význam vitaminu B hydroxylace prolinových a lysinových zbytků bílkovin (kolagenu) spojeno s ox. dekarboxylací α-ketoglutarátu enzymy prolyl-4-hydroxylasa, prolyl-3-hydroxylasa, lysyl-5-hydroxylasa konverze Fe 2 /Fe 3 a regenerace účinkem kys. L-askorbové antioxidační působení syntéza karnitinu syntéza a katabolismus tyrosinu syntéza katecholaminů a serotoninu modifikace prim. struktury některých peptidových hormonů (amidace na -konci) hydroxylace xenobiotik eakce katalyzovaná prolyl-4-hydroxylasou B 2 2 enzym - Fe 2 enzym - Fe 3 AA AA 56

57 eakce katalyzovaná lysyl-5-hydroxylasou B enzym - Fe 2 enzym - Fe 3 2 AA AA utriční souvislosti a medicínský význam vit. V doporučená dávka 100 mg/den pro dospělé 110 mg/den v těhotenství, 150 mg/den pro kojící matky hlavní nutriční zdroje brambory, zelenina bohaté zdroje: drobné ovoce, citrusové ovoce, šípky, brukvovitá zelenina absorpce AA ve střevě aktivním transportem AA se vstřebává rychleji nadbytek se vylučuje močí, část se metabolizuje na oxalovou kys. normální hladina AA v plasmě cca 50 µmol/l (23 87 µmol/l) hladina uvnitř buněk je vyšší než v extracelulární tekutině deficit: kurděje (skorbut) symptomy po 3-6 měsících: únava, záněty kůže, hyperkeratosa, krvácivost kůže, deprese k vyléčení stačí dávky cca 10 mg AA/den 57

58 eakce a přeměny AA a AA ve vodném prostředí p 2,5 5,5 AA je stabilní AA tvoří hydrát a cyklický ketál silně kyselé prostředí vznik derivátů furfuralu alkalické prostředí oxidace AA AA rozpuštěným kyslíkem hydrolýza laktonového kruhu AA diketogulonová kys. štěpení: vznik oxalové, threonové kys. a dalších produktů ydratace AA a cyklizace hydrát cyklický ketál hydrátu 58

59 egradace AA v kyselém prostředí hydrolýza, dekarboxylace, dehydratace hlavní produkt: furfural (furan-2-karbaldehyd) keto-L-gulonová kys. (enolforma) deoxy-2,3-diketo-L-gulonová kys deoxy-L-pentosulosa 3,4-dideoxypentosulos-3-en ydrolýza laktonového kruhu AA (p 4) 2 2 / 2 anion 2,3-diketo- L-gulonové kyseliny 2 2 / oxidace 2 L-vinná kys. L-threonová kys. anion oxalové kys. 59

60 alší reakce diketogulonové kyseliny (alkalické i kyselé prostředí) 2 ethylglyoxal 3-hydroxy- 2-pyron pyroslizová kys enolforma hydrát L-lyxonová kys deoxy-2-keto-L-lyxonová kys redukton III L-threopentosulosa redukton B Výskyt vitaminu v potravinách Formy výskytu AA AA askorbigen (zelenina) glykosidy kys. askorbové kys. 6-deoxy-L-askorbová a její glykosidy (houby) 1,4-lakton -glycero-pent-2-enonové a jeho glykosidy (houby) 60

61 bsah vitaminu v potravinách (rozpětí hodnot v mg/kg) maso šunka vnitřnosti mléko mrkev petržel kořenová petržel kadeřavá pažitka pór cibule česnek křen zelí kapusta hlávková kapusta růžičková brokolice květák kedluben salát hlávkový špenát rajčata paprika okurka chřest hrášek fazolové lusky brambory bsah vitaminu v potravinách (rozpětí hodnot v mg/kg) jablka hrušky švestky broskve višně, třešně angrešt rybíz červený rybíz černý hrozny jahody borůvky melouny pomeranče citrony grapefruity ananas banány kiwi mango papája šípky acerola

62 eakce AA a AA se složkami potravin reakce oxidačně-redukční reakce s oxidovanými lipidy a volnými radikály reakce s chinony reakce s dusitany reakce s hemovými barvivy reakce s thiolovými a disulfidovými skupinami bílkovin/peptidů reakce adiční a kondenzační reakce s aminokyselinami reakce s karbonylovými sloučeninami eakce s oxidovanými lipidy a reaktivními formami kyslíku reaguje AA (= 2 A) nebo askorbylpalmitát (v lipidovém podílu) společně s tokoferoly reakce s peroxylovým a alkoxylovým radikálem 2 A A 2 A A reakce s hydroxylovým radikálem, superoxidovým anionradikálem 2 A A 2 2 A 2 A

63 eakce s chinony, resp. s oxidovanými fenolovými látkami AA AA ěkteré substráty fenoloxidas: 2 3 chlorogenová kys. (5-kaffeoylchinová) fenolové látky (zejména o-difenoly) jsou substráty reakcí enzymového hnědnutí oxidací kyslíkem za katalýzy fenoloxidasami vznikají chinony polymerací chinonů vznikají barevné produkty AA redukuje chinony zpět na difenoly, čímž zpomaluje hnědnutí 5 1 ()-katechin a (-)-epikatechin gallokatechin a epigallokatechin eakce AA s kys. dusitou nebo dusitany a 2 a AA se používají společné jako aditiva do masných výrobků odstranění nadbytku 2 reakcí s AA zabraňuje vzniku karcinogenních nitrosaminů

64 eakce AA s hemovými barvivy oxymyoglobin Mb(Fe 2 ) 2 a metmyoglobin Mb(Fe 3 ) se redukují na myoglobin Mb(Fe 2 ) 2 A Mb(Fe 2 ) 2 2 A Mb(Fe 3 ) A Mb(Fe 3 ) A Mb(Fe 2 ) volný myoglobin reaguje s na stabilní nitroxymyoglobin Mb(Fe 2 ) eakce AA s aminokyselinami hydrát AA kondezuje s aminokyselinou na imin probíhá Streckerova degradace ( 2 aldehyd) produkt: kys. L-skorbamová kys. L-skorbamová 64

65 Produkty následných reakcí kys. skorbamové s AA kys. skorbamová AA červený pigment kys. skorbamová žlutý pigment kys. skorbamová 2 AA tris(2-deoxy-2-l-askorbyl)amin červený pigment žlutý pigment tris(2-deoxy-2-l-askorbyl)amin eakce AA a cyklického hydrátu AA s glukosinoláty S askorbigen S 2 glukobrassicin 2 2 myrosinasa AA 2 2 -Glc S 4 - AA 2 - S ==S 3-indolyl- -methylisothiokyanát další produkty 3-hydroxymethylindol 65

66 Změny vitaminu při zpracování potravin ztráty vyluhováním až desítky % značné ztráty oxidací AA zvláště v neutrálním a alkalickém prostředí a za katalýzy ionty železa a mědi účinkem enzymů (askorbátoxidasa, askorbátperoxidasa) následuje degradace AA ztráta vitaminové účinnosti oxidační štěpení AA účinkem askorbát-2,3-dioxygenasy oxalová a L-threonová kys. pokles obsahu vit. při konzervárenském zpracování ovoce a zeleniny cca % Vitamin A all-trans-retinol (axeroftol, vitamin A 1 ) all-trans-retinal (retinaldehyd) all-trans-retinová kyselina struktura β-jononový kruh délka řetězce: 9 ( 2 postranní ), 4 dvojné vazby Vlastnosti = lipofilní látky snadno podléhají oxidaci a isomeraci 66

67 etinol je diterpenický alkohol B Skupina monoterpeny seskviterpeny diterpeny triterpeny tetraterpeny počet jednotek isoprenu počet atomů isopren (2-methylbuta-1,3-dien) P P Sestavení skeletu molekuly retinolu z jednotek isoprenu: isopentenyldifosfát ( aktivní isopren ) 3 2 alší formy vitaminu A 3 2 3,4-didehydroretinol (vitamin A 2 ) Složené sloučeniny odvozené od vitaminu A estery retinolu (acetát, palmitát ) běžné formy vit. A v potravinách a užívané pro fortifikaci glykosidy glukuronidy metabolity (např. v jaterních buňkách)

68 is-trans isomerie vitaminu A cis-retinol cis-retinal = 9-cis-retinová kyselina Provitaminy A látky, ze kterých vzniká vitamin A metabolickou přeměnou karotenoidy obsahující β-jononový kruh β-karoten dále např. α-karoten, γ-karoten, β-kryptoxanthin, echinenon etinoidy širší okruh sloučenin s účinkem vitaminu A ( 20 isoprenoidy i 40 sloučeniny karotenoidy) přírodní i syntetické látky 68

69 Vznik retinalu z β-karotenu karoten dioxygenasa Biochemický význam vitaminu A B účast retinalu v biochemii vidění vazba 11-cis-retinalu na bílkovinu oční sítnice opsin rhodopsin světlo isomerace vázaného retinalu v rhodopsinu na all-trans konformační změny bílkoviny nervový vzruch opsin all-trans-retinal all-trans-retinol 11-cis-retinol 11-cis-retinal retinová kyselina (all-trans a 11-cis isomer) se podílí na řízení růstu a diferenciace buněk prostřednictvím regulace genové exprese 69

70 utriční souvislosti a medicínský význam vit. A V doporučená dávka ekvivalentu vitaminu A pro děti 0,4 0,9 mg, pro dospívající 0,9 1,1 mg, pro dospělé muže1,0 mg, pro ženy 0,8 mg (pro těhotné 1,1 mg a 1,5 mg pro kojící matky) retinolový ekvivalent = m retinol (1/6). m beta-karoten (1/12). m ostatní provitaminy mezinárodní jednotka (IU) obsahu vit. A = 0,3 µg retinolu hlavní zdroje provitaminů: zelenina bohatý zdroj retinolu: tuk z jater ryb projevy nedostatku šeroslepost a xeroftalmie (vysychání spojivky a rohovky) zpomalený růst (u dětí), zhoršená imunita, změny kůže a sliznic (zvětšení vlasových folikulů, keratinizace ) nadbytek vitaminu A je toxický Význam a účinky karotenoidů antioxidační působení zhášení singletového kyslíku (karoteny, lykopen, lutein ) (1) 2 β-karoten (3) 2 β-karoten* zhášení radikálů zdravotní účinky ochrana proti degenerativním změnám očních tkání ochrana proti aterosklerose inhibice proliferace a stimulace diferenciace buněk antikacerogenní účinky? V 70

71 Výskyt vitaminu A a provitaminů A v potravinách vitamin A: jen v živočišných potravinách jako retinol nebo estery retinolu provitaminy A (β-karoten ) primárně v potravinách rostlinného původu: zelenina (mrkev, špenát, paprika ), některé druhy ovoce (meruňky, mango), obiloviny, luštěniny v některých živočišných materiálech vaječný žloutek: karoteny, většinou však vitaminově inaktivní karotenoidy (zeaxanthin, lutein působí jen antioxidačně) bsah vitaminu a provitaminů A v potravinách (mg/kg) (bohatší zdroje) játra mrkev petržel kadeřavá zelí kapusta hlávková brokolice špenát rajčata 71

72 bsah vitaminu a provitaminů A v potravinách (mg/kg) (některé ostatní zdroje) maso mléko sýry vejce ryby máslo jablka meruňky banány pomeranče melouny mango petržel kořenová květák salát hlávkový paprika hrášek fazolové lusky eakce retinolu v potravinách Isomerace retinolu cis-trans isomerace 3 all-trans (all-e) isomer posun dvojných vazeb a násl. dehydratace cis (13Z) isomer 9-cis (9Z) isomer α-retinol 2 anhydroretinol

73 xidace retinolu a karotenů oxidace retinol retinal oxidace β-jononového kruhu: vznik cyklických etherů (epoxidů) 3 3 1/ ,6-epoxid retinoid ,8-epoxid alší reakce vitaminu A retinal aminokyseliny Schiffova báze retinal cystein derivát thiazolidinu: 3 S 73

74 Vitamin Struktura cholekalciferol vitamin 3 ergokalciferol vitamin 2 Vznik vitaminu a biochemické souvislosti B vznik fotochemickou přeměnou ze sterolů (provitaminů ) 7-dehydro-cholesterol cholekalciferol (UV ozáření pokožky) ergosterol ergokalciferol hydroxylací v játrech a ledvinách vzniká postupně 1,25-dihydroxyvitamin 3, tj. vlastní aktivní forma (hormon kalcitriol) význam: regulace homeostázy vápníku a fosforu 74

75 dehydrocholesterol (provitamin 3 ) B previtamin vitamin 3 (cholekalciferol) B vitamin 3 (cholekalciferol) hydroxycholekalciferol 2 3 1α,25-dihydroxycholekalciferol (kalcitriol) 2 75

76 utriční význam vitaminu je nezbytný pro tvorbu kalcitriolu zčásti vzniká v těle fotochemickou cestou z provitaminu (7-dehydrocholesterol, ergosterol) doporučené dávky novorozenci, kojenci a senioři: 10 µg/den děti a dospělí: 5 µg/den nedostatek vit. u dětí křivice (rachitis) u dospělých osteomalácie toxické účinky vysokých dávek (100 µg/den): a v plasmě (hyperkalcemie) poškození ledvin a dalších orgánů V Výskyt vitaminu v potravinách prekurzory vit. ergosterol: v houbách a kvasinkách (droždí) a plísňových sýrech 7-dehydrocholesterol: v lilkovitých rostlinách vit. 3 (cholekalciferol) bohatý zdroj: jaterní tuky mořských ryb (jednotky až desítky mg/kg) další zdroje: ryby, rybí tuky (setiny až desetiny mg/kg) stopy v mléce, vejcích, mase a játrech jatečných zvířat a drůbeže (tisíciny až setiny mg/kg) 76

77 hemické reakce vitaminu v potravinách isomerace (kysele katalyzovaná) isotachysterol cyklizace při zahřívání steroidní sloučeniny: pyrovitamin a isopyrovitamin (za mírně zvýšených teplot je vit. stabilní) fotochemické reakce řada produktů včetně isomerů vitaminu (trans-vitamin, tachysteroly), provitaminu a jeho isomeru lumisterolu Kysele katalyzovaná isomerace vitaminu vitamin isovitamin isotachysterol 77

78 Termické přeměny vitaminu 200 pyrovitamin vitamin previtamin isopyrovitamin Termické a fotochemické přeměny vitaminu vitamin t h ν 2 previtamin provitamin (7-dehydrocholesterol nebo ergosterol) h ν h ν h ν h ν 2 3 5,6-trans-vitamin tachysterol lumisterol 78

79 Vitamin E mezi látky s účinkem vitaminu E patří tokoferoly a tokotrienoly (souhrnné označení: tokochromanoly) Struktura tokoferolů chromanový kruh isoprenoidní alkylový řetězec (délka 13 3 postranní ) α -tokoferol (α-t) β-tokoferol (β-t) γ-tokoferol (γ-t) δ-tokoferol (δ-t) Struktura tokotrienolů 3 dvojné vazby s konfigurací trans v alifatickém řetězci α -tokotrienol (α-t 3 ) β-tokotrienol γ-tokotrienol δ-tokotrienol analogická substituce methylovými skupinami jako u tokoferolů γ-t 3 a δ-t 3 mají jen malou vitaminovou aktivitu tokol (bez vitaminové aktivity)

80 hiralita tokoferolů V přírodní α-tokoferol (2,4,8 isomer) má nejvyšší vitaminovou účinnost Syntetický α-tokoferol (nižší účinnost) 3 3 2S 2S 4 S 8 8 S chirální uhlíky: 2, 4, 8 : 8 (=2 3 ) diastereomerů (zobrazen vlevo) S S S SS SS SS SSS 1) směs všech isomerů v rovnoměrném zastoupení (all-rac-α-t) 2) racemická směs dvou isomerů (2S, 4, 8 ) Vlastnosti tokoferolů bezbarvé až nažloutlé olejovité kapaliny rozpustné v tucích velmi snadno se oxidují jsou fotolabilní za nepřístupu kyslíku jsou termicky stálé v alkalickém prostředí jsou stálé v kyselém prostředí jsou stálé asi do

81 Formy vitaminu E užívané pro suplementaci estery (nejčastěji acetát) all-rac-α-t estery jsou stabilnější než volné tokoferoly Biochemický a medicínský význam vit. E B důležitý antioxidant působící in vivo: chrání lipidy (především v biol. membránách) před oxidačním poškozením (tj. tvorbou hydroperoxidů) vlivem reaktivních forem kyslíku (radikály, singletový 2 ) zpomaluje vznik oxidovaného LL v plasmě (rizikový faktor aterosklerosy) spolupůsobení s vit., karotenoidy a enzymovými antioxidačními systémy (glutathionperoxidasa) vliv na biosyntézu eikosanoidů (tj. prostaglandinů, thromboxanů a leukotrienů), na zastoupení cholesterolu a fosfatidů v biomembránách (flexibilita membrán) 81

82 utriční souvislosti V doporučená dávka vit. E: děti 5 14 mg/den muži 14 mg/den, ženy 12 (v těhotenství 13, při kojení 17) ekvivalence biol. účinnosti: 1 mg -α-t = 2 mg -β-t = 4 mg -γ-t = 100 mg -δ-t = 3,3 mg - α-t 3 = = 1,5 mg all-rac-α-t-acetátu biol.dostupnost je závislá na pankreatických enzymech (estery), dostatku žlučových kyselin a složení tuku v potravě: (SFA zvýšená biol. dostupnost, PUFA snížená b. d.) účinnost absorpce klesá s rostoucí dávkou (12 mg 50 %, 24 mg 30 %, 200 mg 10 %) deficit vit. E (konc. v plasmě < 5 µmol/l) neurologické příznaky (zhoršené reflexy a koordinace pohybu, poruchy hybnosti končetin, zhoršený pohyb očí ) zhoršení příznaků dalších nemocí (jaterní choroby, poruchy metabolismu lipidů) Výskyt vitaminu E v potravinách běžné rostlinné oleje (řepkový, olivový ): stovky mg/kg surové panenské oleje > rafinované oleje oleje z obilných klíčků: až tisíce (2500) mg/kg máslo: desítky mg/kg obiloviny a ořechy: desítky mg/kg (tokoferoly i tokotrienoly) vejce, játra, ryby: jednotky až desítky mg/kg ostatní potraviny: jednotky mg/kg nebo méně převažují T nad T 3 82