Přístup SZPI ke kontrole reziduí pesticidů v potravinách rostlinného původu Radim Štěpán Státní zemědělská a potravinářská inspekce Inspektorát v Praze
Státní zemědělská a potravinářská inspekce je orgánem státního dozoru nad bezpečnostní, zdravotní nezávadností a jakostí potravin v ČR. Inspectorate in Prague Inspectorate in Brno Headquarters
Laboratoře SZPI: Akreditovány podle ISO/IEC 17 025 Hlavní činnosti: potravinové kontaminanty(rezidua pesticidů, mykotoxiny ) EU monitoring potravinová aditiva(sladidla, barviva ) falšování potravin (víno, džemy ) průkaz ozařování (koření, sušené byliny ) řešení stížností spotřebitelů atd. Národní referenční laboratoř (NRL) pro rezidua pesticidů v ovoci a zelenině pro rezidua pesticidů v obilovinách pro single-residue metody pro mykotoxiny
Rezidua pesticidů v ovoci, zelenině, obilovinách a dětské výživě Multireziduální QuEChERS # metoda: 370 pesticidů v každém vzorku jednotná příprava vzorku možnost rozšiřování počtu analyzovaných pesticidů LOQ 1-10 g/kg < EU MRL 60 pesticidů LC-MS/MS 170 pesticidů GCxGC-TOF MS 140 pesticidů polární nepolární # EN 15662:2008 Foods of plant origin - Determination of pesticide residues using GC-MS and/or LC-MS/MS following acetonitrile extraction/partitioning and clean-up by dispersive SPE - QuEChERS-method
Multireziduální metoda QuEChERS # procedure for sample extraction 10g sample + 10ml acetonitrile Shaking 60 sec. Shaking 60 sec. Addition of internal standard Addition of MgSO4, NaCl, sodium citrate and sodium citrate sesquihydrate API 4000 QTRAP (ESI+, ESI-) Cetrifugation Pegasus 4D s CFM modulátorem LC-MS/MS PTV-GCxGC-TOF MS Acetonitrile extract # EN 15662:2008 Foods of plant origin - Determination of pesticide residues using GC-MS and/or LC-MS/MS following acetonitrile extraction/partitioning and clean-up by dispersive SPE - QuEChERS-method
LC-MS/MS Instrument set-up: Kolona Mobilní fáze Gradient Atlantis C18, 150 x 4 mm, 5 µm Solvent A: 2 mm NH 4 COOH + 0,1 % HCOOH Solvent B: Methanol Čas (min) % A % B 0.0 80 20 3.0 37 63 18.0 5 95 30.0 5 95 31.0 80 20 45.0 80 20
Apple matrix-matched standard at 30 µg/kg
GCxGC-TOF MS with PTV injection Instrument set-up: Injection technique Columns (GCxGC) Modulator PTV operated in a solvent vent mode injection volume 10 µl, vent time 40 sec, vent flow 20 ml/min, temp. 40 C 1 st dimension DB-5 MS (30 m x 0.25 mm x 0.25 um) 2 nd dimension BPX-50 (2 m x 0.1 mm x 0.1 um) modulation period: 5 sec TOF-MS acquisition rate: 50 spectra/sec
Apple matrix-matched standard of 140 pesticides at 100 ppb level Runtime: 45 min 3-chloroanilin deltamethrin RunTime: 47 min
Pesticide residues in oranges Complex matrix containing many coextracted matrix components Possibilities and limitations of GC/MS techniques PTV-GC-MS/MS (Varian 1200L) 10 µl extraktu v acetonitrilu PTV-GCxGC-TOF MS (Pegasus 4D)
PTV-GC-MS/MS TIC Dimethoate Diepi- -cedrene epoxide Matrix-matched standard: 80 g/kg MS/MS: 125/79 Matrix-matched standard: 20 g/kg MS/MS: 125/79 Dimethoate?
PTV-GCxGC-TOF MS Dimethoate Spectral Match: 871 Diepi- -cedrene epoxide Spectral Match: 723
Vyhodnocení LOQ s ohledem na EU MRL pro dětskou výživu Pesticide Apples PTV-GCxGC- TOF MS LOQ ( g/kg) PTV-GC- MS/MS Oranges PTV-GCxGC- TOF MS PTV-GC- MS/MS EU MRL ( g/kg) Aldrin 8 2 8 2 3 Cadusafos 2 2 2 2 6 Diedrin 8 2 8 2 3 Dimethoate 2 2 2 20 10 Endrin 2 2 2 2 3 Ethoprophos 8 2 8 2 8 Hexachlorobenzene 2 2 2 2 3 Heptachlor 2 2 2 2 3 Heptachlorepoxid A 2 2 2 2 3 Heptachlorepoxid B 2 2 2 2 3 Nitrofen 2 2 2 2 3
Single-reziduální metody Amitraz Chlormequat/mepiquat Propylenthiomočovina (PTU)/propineb Glyfosát Fentin, fenbutatin oxid Bromidy Dithiokarbamáty (jako CS2) atd.
Amitraz Nepřímé stanovení po přeměně na 2,4-dimethylanilin 5g vzorku + 5ml HCl (2 mol/l) Přídavek ISTD (značený amitraz) Třepání 1 min, stání 30 min Přídavek 3ml toluenu Odstředění (10 min) Odstranění toluenové vrstvy, přídavek 1ml NaOH (10 mol/l) a 10g bezv. Na2SO4 Třepání 1 min, přídavek 1ml toluenu, třepání, odstředění GCxGC-TOFMS (splitless, 1ul)
Chlormequat/mepiquat 20g vzorku + 20ml methanolu Turrax (2 min) Filtrace, doplnění na 50ml směsí MeOH/H2O Odstředění 10 ml extraktu (15 min) LC-MS (Thermo LCQ Advantage, ion trap) Instrument set-up: ESI+, iontoměničová kolona AGILENT Zorbax 300 SCX (150 mm x 2,1 mm x 5 µm), mobilní fáze: MeOH / 0,1M CH 3 COONH 4 (40/60)
Propylenthiomočovina (PTU) 10g vzorku + 20ml methanolu Přídavek ISTD (značená PTU) Třepání (1 min), filtrace Doplnění na 50ml methanolem LC-MS/MS (Agilent 6410, QqQ) Instrument set-up pro PTU: ESI+, kolona ZIC-pHILIC (150 mm 2,1 mm, 5 µm), mobilní fáze: solvent A: 5 mm CH 3 COONH 4 + 0,1% CH 3 COOH solvent B: metanol, gradient
Kvalitativní stanovení propinebu LC-MS/MS (Agilent 6410, QqQ) Instrument set-up pro propineb: ESI-, kolona ZIC-pHILIC (150 mm 2,1 mm, 5 µm), mobilní fáze: solvent A: 10 mm NH 4 OH solvent B: acetonitril
Glyfosát 10g vzorku + 10ml 1% HCOOH Přídavek ISTD Třepání (1 min), odstředění Filtrace přes membránový filtr LC-MS/MS (API 3200, QqQ) Instrument set-up: ESI+, iontoměničová chromatografická kolona IonPac AS11-HC (2x250 mm, 5 µm) mobilní fáze: 10% MeOH / KOH Dionex LC, supresor
Monitoring reziduí pesticidů v ČR v roce 2011 Počet vzorků konvenčních: 926 Počet vzorků Bio : 175 Ovoce, zelenina, obiloviny, dětská výživa Konvenční vzorky Negativní Pozitivní < EU MRL Pozitivní > EU MRL
Monitoring reziduí pesticidů v ČR v roce 2011 Počet vzorků konvenčních: 926 Počet vzorků Bio : 175 Ovoce, zelenina, obiloviny, dětská výživa Bio vzorky Negativní Pozitivní < EU MRL Pozitivní > EU MRL
Spolupráce Hlášení do systému RASFF Kontrola produktů z třetích zemí: spolupráce s Celní správou Lhůta pro dodání výsledků: 48 hodin Černý čaj Oolong: dovoz Čína Identifikováno a kvantifikováno 23 pesticidů z toho 7 nad EU MRL Nález (mg/kg) EU MRL (mg/kg) acetamiprid 2,3 0,1 chlorpyrifos 0,2 0,1 diafenthiuron 0,2 0,01 fipronil 0,7 0,005 methomyl 0,9 0,1 pyridaben 0,4 0,05 thimethoxam 0,3 0,1 Celkem zadrženo: 50kg čaje 50 kg čaje = 25 000 šálků
Děkuji za pozornost! E-mail: radim.stepan@szpi.gov.cz www.szpi.gov.cz