toxoplasmózy Petr Kodym sérologických nálezů u

Transkript

1 Interpretace sérologických nálezů u toxoplasmózy Petr Kodym Národní referenční laboratoř pro toxoplasmózu Oddělení zoonóz s přírodní ohniskovostí Centrum epidemiologie a mikrobiologie Státní zdravotní ústav Praha petr.kodym@szu.cz ,

2 Má laboratoř interpretovat své výsledky? ANO Má rozsáhlé zkušenosti s výsledky používaných metod v různých případech Dokáže posoudit, zdali jsou výsledky relativně vysoké či nízké, zdali pokles či vzestup je průkazný či zdánlivý Lékař, obzvláště pokud není vyložený specialista a soustavně nepracuje s výsledky od určité laboratoře, se v číselných hodnotách někdy ztěží orientuje NE K interpretaci výsledků a vyvozování závěrů je oprávněn pouze lékař. Laboratoř nemá dostatek informací (klinika, výsledky dalších vyšetření, reakce na terapii ), aby činila jakékoliv závěry. Pokud dostane výsledek vyšetření do rukou pacient, bude se na základě uvedené interpretace laboratorních výsledků dožadovat např. terapie, dalších vyšetření apod.

3 Interpretace metod přímé diagnostiky-pcr/isolační pokus na zvířeti A. Vyšetření krve negativní: pacient není nebo je infikován Toxoplasma gondii - positivní: pacient je infikován Toxoplasma gondii, je pravděpodobně v počáteční (akutní) fázi infekce, případně též ve fázi chronické či latentní.

4 Interpretace metod přímé diagnostiky-pcr/isolační pokus na zvířeti B. Vyšetření plodové vody, mozkomíšního moku, novorozenecké krve negativní: pacient pravděpodobně není infikován Toxoplasma gondii positivní: jedná se pravděpodobně o infekci plodu či novorozence resp. o neurotoxoplasmózu

5 Diagnostika toxoplasmózy: 1. Zjištění, je-li je vyšetřována dospělá osoba infikována. 2. Zjištění, má-li vyšetřovaná osoba (i gravidní žena) akutní toxoplasmózu. 3. Zjištění, je-li infikován plod 4. Diagnostika u novorozeneců 5. Diagnostika oční formy toxoplasmózy 6. Diagnostika u HIV+ pacientů (viz 1).

6 STANOVENÍ SÉRONEGATIVITY/SÉROPOSITIVITY Zjistíme: pacient je/není infikován Nezjistíme: klinické potíže způsobeny/nezpůsobeny toxoplasmózou Zjišťované hladiny protilátek: velmi nízké (u imunodeficientních osob) velmi vysoké (přetrvávají i léta po akutní toxoplasmóze) Metody: Stanovení celkových protilátek (KFR, NIFR..), IgG Užití: předtransplantační vyšetření, oční toxoplasmóza, HIV +, epidemiologické studie

7 VYŠETŘENÍ NA AKUTNÍ TOXOPLASMóZU Zjistíme: Toxoplasmóza akutní v současnosti či nedávné minulosti. Může být příčinou klinických obtíží, riziko přenosu infekce z matky na plod. Nezjistíme: dynamiku infekce zjišťujeme jen zprostředkovaně přes protilátkovou odpověď Zjišťované hladiny protilátek: vysoké výrazně positivní Metody: Stanovení IgM, IgA, IgE, avidity IgG Dynamika (vzestup) protilátek (KFR, NIFR, IgG, IgM, IgA, IgE) Užití: Suspektní klinická toxoplasmóza, vyšetření gravidních žen

8 I gm I ga I ge I gg Akutní toxoplasmóza IgM IgA IgE IgG

9 IgM IgA IgE IgG Akutní a latentní toxoplasmóza IgM IgA IgE IgG

10 Jak poznat akutní toxoplasmózu?

11 Avidity index IgG avidity Months after onset of symptoms

12 IgE [positivity index] IgE Months after onset of symptoms

13 IgA [positivity index] IgA Months after onset of symptoms

14 IgM [positivity index] IgM Months after onset of symptoms

15 CFT titre CFT titre Months after onset of symptoms

16 Parametry 5 testů v diagnostice akutní toxoplasmózy (výsledky 105 pac. s akutní a 386 s latentní toxoplasmózou) IgA (positivní) IgE (positivní) IgM (positivní) IgG avidita (nízká) KFR (titr 256) Citlivost (%) Specificita (%) Předpovědní hodnota positivního testu (%) Předpovědní hodnota negativního testu (%)

17 PRENATÁLNÍ VYŠETŘENÍ (plodová voda) Zjistíme: Jsou-li v plodové vodě tachyzoity Toxoplasma gondii,a/nebo protilátky vytvářené plodem, je plod kongenitálně infikován. Nezjistíme: Falešná negativita PCR-po přeléčení. Ne každý infikovaný plod tvoří IgM. Nevíme, zda jsou či nejsou IgG přeneseny od matky. Zjišťované hladiny protilátek: I nízké těsně nad hranicí positivity Metody: Isolace toxoplasem biologický pokus Detekce DNA: PCR Stanovení IgM, IgA Porovnání protilátkového profilu dítěte a matky (Western blot). Užití: Děti matek s podezřením na primoinfekci v graviditě.

18 VYŠETŘENÍ NOVOROZENCŮ Zjistíme:Tvoří li novorozenec protilátky proti Toxoplasma gondii, je kongenitálně infikován. Nezjistíme: Zda jsou či nejsou IgG přeneseny od matky. Zjišťované hladiny protilátek: I nízké těsně nad hranicí positivity Metody: Stanovení IgM, IgA, IgE opakovat, vždy současně matka + dítě Dynamika (vzestup/odbourávání) protilátek (KFR, IgG ) v případě nejasnosti dlouhodobě Porovnání protilátkového profilu dítěte a matky (Western blot). Užití: Děti matek s podezřením na primoinfekci v graviditě.

19 Komparativní Western blot antitoxoplasmických IgG

20 Komparativní Western blot antitoxoplasmických IgG

21 Komparativní Western blot antitoxoplasmických IgG

22 Děvče JN-KFR titr a IgG index x Věk (dny) Po narození hraniční/nízká avidita IgG

23 J.N.- 1. vyšetření WB bez rozdílu matka/dítě, 2. vyšetření - rozdíl 6 dní 48 dní

24 chlapec MB-KFR titr a IgG, IgA, IgM index x Věk (dny) Nízká avidita IgG ještě 62. den po narození

25 M.B.- 1. a 2. vyšetření WB s rozdílem matka/dítě 279 dní 6 dní 62 dní Likvor: isolace myš posit

26 SÉRODIAGNOSTIKA OČNÍ FORMY TOXOPLASMOZY Zjistíme: pacient je/není infikován, podpoříme /nepodpoříme závěr oftalmologů Nezjistíme: Oční změny způsobeny /nezpůsobeny toxoplasmózou Zjišťované hladiny protilátek: i velmi nízké velmi vysoké (vč. IgM + při akutní toxo) * Metody: Stanovení celkových protilátek (KFR, NIFR..), IgG, též IgM, IgA, IgE Kvantitativní stanovení antitoxopl. IgG v oční tekutině a jeho porovnání s obsahem v séru Western blot-porovnání profilu sklivce/séra PCR sklivce málo citlivé Užití: Vyšetření osob, se suspektní oční formou toxoplasmózy

27 SÉRODIAGNOSTIKA TOXOPLASMOZY HIV+ OSOB Zjistíme: Pacient je/není infikován, je/není riziko reaktivace Nezjistíme: Klinické souvislosti Zjišťované hladiny protilátek: i velmi nízké (možný nesoulad KFR/IgG IgM + velmi vzácně * Metody: Stanovení celkových protilátek (KFR, NIFR..), IgG, též IgM, IgA, IgE Užití: Sledování HIV+ či jiných imunosuprimovaných osob

28 Nejednoznačná protilátková odpověď HIV + pacientůs toxoplasmózou u 5 (2,4%) pacientů toxo-negativních zjištěny i positivní výsledky u 35 (21,3%) pacientů toxo-positivních opakovaně i negativní výsledky Skutečná prevalence může být až 36,3% u mužů a 34,3% u žen.

29 Sérokonverze Muž, 40 let Datum KFR IgG IgM ,163 0, , , , , , :16 1, :16 1,433 0, :16 0,898 0,4

30 Má laboratoř interpretovat své výsledky? Výsledek, který nedokáže nikdo interpretovat, nemá smysl Laboratoř musí být schopná se ke svému výsledku vyjádřit, musí mít odborníky, kteří problematice rozumějí. Vyjádření laboratoře pomůže lékaři zorientovat se ve výsledcích laboratorních testů K interpretaci laboratorních testů lékař může přihlížet, ale nemusí. Diagnózu, terapii atd. může na základě znalosti klinického stavu a výsledků VŠECH laboratorních vyšetření určit jedině lékař.