Kvasinkové patogeny. Hansenula Torulopsis Geotrichum Saccharomyces. Candida Cryptococcus Malassezia Trichosporon Rhodotorula.

Transkript

1 Patogenní kvasinky

2 Kvasinkové patogeny Candida Cryptococcus Malassezia Trichosporon Rhodotorula Hansenula Torulopsis Geotrichum Saccharomyces % onemocnění kvasinkami jsou kandidózy počet druhů působících ch jako etiologické agens a účastnících ch se patologických procesů u člověka, se zvyšuje

3 forma a závaz važnost infekce závisz visí na: -infekčním m agens (druh, množstv ství) - způsobu a bráně infekce - stavu imunitního systému hostitele endogenní infekce (autoinfekce) zdrojem jsou komenzálov lové člověka při i porušen ení homeostázy, vnímavosti a rezistence povrchové mykózy nakažliv livé

4 Povrchové mykózy : - postihují kůži, nehty, sliznici úst a pochvy - většinou endogenní,, přenos p i pohlavním m stykem Candida (albicans) komenzál Malassezia furfur (kožní infekce pityriasis versicolor)

5 Systémov mové mykózy (mykózy postihující vnitřní orgány a orgánov nové systémy) Původci: (Cryptococcus,( Candida) imunodeficientní pacienti pacienti po transplantaci Vlastnosti patogenů: Mannan (stěnový polysacharid) u kandid a mukopolysacharid pouzdra u Cryptococcus neoformans potlačuj ují buněč ěčnou imunitu

6 Diagnostika: kombinace klinického pozorování a laboratorního vyšet etření Laboratorní vyšet etření: mikroskopický průkaz kultivační průkaz sérologické metody

7 mikroskopický průkaz povrchové mykózy - šupinky kůžk ůže, části nehtů,, seškrab kštice k s vlasovými kořínky a kožními šupinami kandidóza stěry sliznic systémov mové infekce vzorky tkání z více míst

8 přímá mikroskopie: - ve vlhkých preparátech po natráven vení tkáně 10-20% hydroxidem draselným - infekce sliznic Gramovo barvení - morfologie buněk histologické vyšet etření

9 kultivace - většina kvasinek snadno kultivovatelná - Sabouraudův agar (glukóza, sladinový agar,, hydrolyzát kaseinu + chloramfenikol nebo amikacin + vankomycin) - Czapek Doksův agar - současn asně při i C C a 37 C - doba kultivace 1 5 dnů

10 - kvašen ení cukrů a další biochemické testy (identifikační soupravy) auxanogram test na asimilaci cukrů a dusíkatých látek l (zdroj C) zymogram test na zkvašování cukrů

11 sérologie Průkaz specifických protilátek: (protilátková odpověď slabá) - ELISA

12 Antimykotika: kvasinky - eukaryontn tní buňky běžná antibakteriáln lní antibiotika jsou neúčinn inná Terčov ové struktury antimykotik: buněč ěčná stěna plasmatická membrána cytoskelet Antimykotika hostitele) toxický účinek na

13 - Příklady antimykotik - peroráln lně: ketokonazol, terbinafin - parenteráln lně: amfotericin B, mikonazol (malá vstřebatelnost z trávicího ústrojí) - parenteráln lně i peroráln lně: flukonazol, itrakonazol, flucytozin

14 azolové deriváty a) 2-nitroimidazoly2 : klotrimazol mikonazol ketokonazol b) triazoly : itrakonazol (kandidózy, kryptokokózy zy) flukonazol (peroráln lně kryptokoková meningitida) - existuje primárn rní i získanz skaná rezistence k azolovým sloučenin eninám

15 kyselina benzoová (Whitfieldova mast) povrchové mykózy polyeny toxické,, ukládají se v nově tvořen eném keratinu nystatin (kandidózy) amfotericin B (kandidózy, kryptokokózy zy)

16 griseofulvin proti dermatofytům imidazoly kyselina nalidixová fluoropyrimidiny kandicidin další látky toxické vůči kvasinkám: jodid draselný, kyselina boritá, bazická barviva kombinace antimykotik:

17 Povrchové mykózy Povrchová kandidóza za: - postižen ení kůže, nehtů,, sliznic úst a pochvy (infekce sliznic moučnivka ) % Candida albicans,, zbývající případy pady další druhy (C.( tropicalis, C. krusei, C. parapsilosis, C. glabrata ) - 20% lidské populace C. albicans součást st komensáln lní flóry pokožky a sliznic - výskyt závisz visí na stavu organismu bakteriáln lníči virová infekce, těhotenstvt hotenství, aj

18

19

20 Candida albicans Sabouraudův agar

21 Identifikace: - Sabouraudův glukózový agar kvasinková fáze (ováln lné buňky, 3-8µm), 3 kolonie za 1-21 dny při p i C - in vivo směs s kvasinkových buněk, pseudomycelia a pravého mycelia - po obarvení dle Grama: grampozitivní ováln lné pučící buňky

22 - Candida albicans tvorba charakteristických klíčků (po minutách inkubace v séru při p i 37 C) - další identifikace: soupravy, testy fermentace a utilizace cukrů a zdrojů dusíku Léčení: - lokáln lní terapie nystatinem, amfotericinem B, mikonazolem - vagináln lní kandidóza azolové deriváty, azolové poševn evní čípky u recidivujících případů

23 infekce sliznic: - nejčast astější povrchové kandidózy - na sliznici ohraničen ené bílé skvrny, mohou splývat a vytvářet pseudomembrány (tvarohový vzhled) - infekce dutiny ústní: - bukáln lní sliznice, tvrdé patro, okolí bílých skvrn zarudlé - kojenci, staré osoby, osoby se sníženou imunitou (AIDS) - umělý chrup infekce pod protézou

24 infekce kůžk ůže e a nehtů: - v tříslech, mezi prsty, v podpažní jamce, pod prsy (v místech vlhké zapářky) - postižen ení nehtu a nehtového ho lůžl ůžka při častém m máčenm ení rukou (ošet etřovatelky, myčky nádobí)

25

26 Mykotické plaky na zubech Původce: většinou Candida albicans, souvislost se stravovacími návyky

27 Pityriasis versicolor - chronická infekce způsobená lipofilní Malassezia furfur - odbarvené skvrny na kůžk ůži M. furfur - běžný komenzál na kůžk ůži, většina v infekcí je endogenní - vyžaduje k růstu lipidy; monopolárně pučící (jediný rod) - ováln lné lahvovité buňky, velikost x 4-64 µm, při p pityriasis versicolor kvasinkovité buňky s krátkými hyfami - kultivace speciáln lní půdy s Tweenem nebo lipidy (37 C) - podílí se na tvorbě lupů a seboroické dermatitidě

28

29

30 Systémov mové mykózy Kryptokokóza za: - způsobuje Cryptococcus neoformans vytvářející hladké lesklé kolonie, kolem buněk silné pouzdro - onemocnění CNS a plic - sporadicky po celém m světě,, nejčast astější u pacientů s AIDS (u 10%) - prostřed edí alkalické substráty ty bohaté na dusík

31 Kožní infekce Pouzdro Fázový kontrast Basidiospores

32

33 Průkaz: mikroskopicky: v mozkom mozkomíšním m moku a další ším klinickém materiálu - kulovité buňky 2 10 µm s mukopolysacharidovým pouzdrem (až 60 % izolátů) po smíš íšení mozkomíš íšního moku s tuší se pouzdro jeví jako jasný dvorec kolem buněk kultivace: - na na Sabouradově agaru při i C C a 37 C C za dny - smetanově bílé až žlutohnědé mukózn zní kolonie (neopouzdřen ené kmeny suché) - netvoří pseudomycelium ani mycelium - nefermentuje cukry, silná produkce ureázy, asimilace inozitolu

34 Blastoschizomyces capitatus (dříve Trichosporon capitatum) -diseminované infekce - oslabení neutropeničtí pacienti se zhoubnými lymfomy - asimilace pouze glukózy a galaktózy Geotrichum candidum - infekce u diabetiků, imunosuprimovaných osob

35 Saccharomyces cerevisiae - sepse a plicní infekce - původce vagináln lních mykóz z (8,5 %)

36 Rhodotorula - barevné kolonie (oranžové, červené) - neasimiluje inositol

37 Dimorfní houby vláknit knitá fáze - většinou saprofytická (průnik přes p kůži i a sliznice) kvasinková fáze - infekční (hluboké infekce tkání a orgánů) - kvasinkový růst podporují bohatější půdy (krevní agar) a teplota C - tvorba hyf teplota C

38 Dimorfní patogenní kvasinky Blastomykóza, kokcidiomykźa, sporotrichóza etc.

39 Sporothrix schenckii buňky ve fázovém kontrastu hyfy a konídie

40

41 Sporothrix schenckii studie buněk freeze fracture technikou

42 Sporothrix schenckii studie buněk freeze-fracture technikou

43 Candida albicans

44 Candida albicans studium vlivu antibiotika nystatinu na morfologii plasmatické membrány

45

46 Genová kontrola morfogeneze C. albicans Genová kontrola morfogeneze u C. albicans

47 Role Ca++ v morfogenezi Candida albicans Localized Ca2+-channel activation caused by localized changes in membrane potential or membrane stretch, results in calcium influx that directs polarized growth

48 Blastomyces dermatitis