Lékařská mykologie (Bi3390) Kvasinky a kvasinkám blízké organizmy

Transkript

1 MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV EXPERIMENTÁLNÍ BIOLOGIE Laichmanová Monika Lékařská mykologie (Bi3390) Kvasinky a kvasinkám blízké organizmy

2 součást saprofytické mikroflóry člověka v dutině ústní, ve střevě a na poševní sliznici oportunní patogeni nejčastější původci: Candida, Cryptococcus, Rhodotorula, Sacharomyces, Trichosporon aj.

3 Rod Candida Fungi, Ascomycota, Saccharomycotina, Saccharomycetes, Saccharomycetidae, Saccharomycetales nejvýznamnější a nejčastěji nalézán v klinickém materiálu původcem kandidóz - povrchové (kožní, slizniční) - systémové slizniční kandidózy: kandióza sliznice pochvy, kandidóza ústní sliznice kožní kandidózy (plenková dermatitida u kojenců, kandidózy kůže a nehtů) invazivní infekce se vyskytují především u oslabených osob a u osob léčených kombinací širokospektrých antibiotik nejběžnější je Candida albicans (více jak ½ případů), dále C. tropicalis, C. glabrata, C. krusei, C. parapsillosis a další

4 Candida albicans Morfologie záleží na typu substrátu tvoří blastokonidie, pseudomycelium, chlamydospory (rýžový nebo kukuřičný agar), zárodečné klíčky (germ tubes, G-test)

5 Morfologii kvasinek ovlivňuje přítomnost živin v substrátu zdroj C - mono-, di-a oligosacharidy zdroj N - amonné ionty a aminokyseliny

6 Morfologii kvasinek ovlivňuje přítomnost živin v substrátu zdroj C - mono-, di-a oligosacharidy zdroj N - amonné ionty a aminokyseliny

7 Candida albicans Morfologie blastokonidie 4 8 µm CCM 8180, Gramovo barvení CCM 8226, Gramovo barvení

8 Candida albicans Kultivace vhodná kultivační teplota je C doba kultivace hodin schopnost růstu při C na baktriologických půdách např. KA vytvoří za 24 hodin drobné, lesklé, bílé kolonie (chlebová vůně)

9 Candida albicans Kultivace na Sabouraudově agaru s 4% glukózy tvoří krémové, neprůhledné, matné, vypouklé kolonie s typickou vůní

10 Candida albicans Patogeneze komenzál lidské sliznice (kandidy jsou v malém počtu v dutině ústní, ve střevě, v oblasti vagíny a dalších slizničních površích, aniž vyvolávají chorobné příznaky) vyskytují se také na kůži v místech s vlhkou zapářkou (zdroj infekce v případě oslabení imunitního systému) většina kandidóz je endogenního původu schopnost rychlého klíčení ve tkáních schopnost měnit povrchové struktury (parazitická forma se vyznačuje přítomností pseudomycelia jehož tvorba je indukována přítomností séra)

11 Candida albicans Patogeneze Podmínky za nichž se uplatňuje jako patogen: u nedonošených novorozenců než se u nich vytvoří normální mikroflóra při hormonálních změnách (těhotenství, diabetes mellitus, endokrinní poruchy) oslabené imunitě (imunosuprese), těžká celková onemocnění místní poruchy bariér (déletrvající zavedení kanyl a katetrů)

12 Candida albicans Slizniční kandidózy kandidóza ústní sliznice (Candidosis mucosae oris ) na sliznici úst a jazyka se tvoří bílé splývající povlaky (pablány) vyskytuje se u imunokompromitovaných osob a novorozenců, než se u nich vytvoří normální mikroflóra tvoří 4 formy 1. akutní pseudomembranózní forma (soor, moučnivka) bělavé povlaky na sliznici úst, jazyku a patře, mohou přejít i na ústní koutky, sliznice vypadá jak posypaná moukou 2. akutní atrofická forma - zarudnutí a bolestivost ústní sliznice, bez přítomnosti povlaku, vzniká po léčbě širokospektrými antibiotiky 3. chronická atrofická forma - projevuje se zarudlými ložisky bez povlaku, postihuje lidi se zubní protézou 4. chronická hypertrofická forma

13 Candida albicans Slizniční kandidózy kandidóza ústní sliznice (Candidosis mucosae oris ) 1. akutní pseudomembranózní forma (soor, moučnivka)

14 Candida albicans Slizniční kandidózy kandidóza jícnu (oesophagitis)

15 Candida albicans Slizniční kandidózy vaginální kandidóza (Vulvovaginitis candidosa ) - chronické onemocnění charakterizované zánětlivě zduřelou a červenou vulvou s bělavým tvarohovitým výtokem a svěděním - u mnoha žen však probíhá asymptomaticky - predisponující faktory: gravidita, hormonální terapie, diabetes mellitus, antibiotická terapie, nižší ph prostředí, dietní vlivy (kvasinky jsou mlsné, a jeli mlsná i jejich hostitelka, rády to uvítají) - rezervoárem infekce je střevo

16 Candida albicans Kvasinková balanitida - kandidóza predkožkového vaku (Balanitis candidosa ) - postihuje především starší obézní muže, diabetiky, muže při kontaktu s ženami s vaginální kandidózou

17 Candida albicans Kandidózy kůže a nehtů vznikají v místech vlhké zapářky (pod prsy, v podpaží, v tříslech, mezi prsty, na zadečku nepřebalovaného kojence) plenková dermatitida

18 Candida albicans Kandidózy kůže a nehtů profesionální onemocnění kuchařek, pekařů a cukrářů

19 Candida albicans Kandidózy kůže a nehtů Kandidové paronychium - postihuje osoby máčející často ruce ve vodě

20 Candida albicans Invazivní kandidová onemocnění (systémové kandidóza) poměrně vzácné v porovnání s povrchovými kandidózami charakteristické přechodem kvasinkové formy ve vláknitou nejčastěji postihuje močové cesty a ledviny vysoká úmrtnost při kandidémie kvasinkové infekci krevního řečiště postihuje především imunosuprimované pacienty, po transplantaci kmenových buněk krvetvorby, po orgánových transplantacích, s hematologickými malignitami, se solidními nádory, pacienti na jednotkách intenzívní péče, léčení steroidy, novorozenci s nízkou porodní hmotností, pacienti s HIV a při porušení místních bariér (po chirurgických výkonech, kolonizace močových katétrů) nejčastěji se vyskytující kvasinkou byla C. albicans (56 %), nejvyšší mortalitu však vykazovaly infekce vyvolané C. glabrata (45 %) a C. krusei (55,3 %)

21 Candida albicans kandidurie - vylučování kandid močí, obv. při kandidové infekci močových cest kolonizace močových katétrů "Fungal Pathogenicity", book edited by Sadia Sultan, ISBN , Print ISBN , Published: May 11, 2016 under CC BY 3.0 license. The Author(s). Biofilm Formation as a Pathogenicity Factor of Medically Important Fungi By Taissa Vieira Machado Vila and Sonia Rozental

22 Ostatní kandidy Candida tropicalis izolovaná ze čtvrtiny invazivních kandidóz (C. albicans z poloviny) po C. albicans druhá nejčastěji nalézaná na sliznicích infekce střev, respiračního traktu, na sliznici pochvy u nemocných leukemií se jeví patogennější než C. albicans všeobecný komenzal v ústech, trávicím ústrojí, v plicích, ve vagíně, na pokožce lidí a zvířat CCM 8223, gramovo barvení

23 Ostatní kandidy C. parapsilosis nejhojnější komenzální kvasinka na kožním povrchu, často kolonizuje katétry a způsobuje katétrové sepse C. dubliniensis - tvoří zárodečné klíčky a chlamydospory ve shlucích, zatímco C. albicans jednotlivě Candida dubliniensis

24 Ostatní kandidy C. glabrata, C. guilliermondii, C. zeylanoides, C. krusei, C. lipolytica, C. kefyr, C. lusitaniae

25 Rod Cryptococcus Fungi, Basidiomycota, Agaricomycotina, Tremellomycetes, Tremellomycetidae, Tremellales, Tremellaceae běžně se vyskytující v půdě a na různých alkalických substrátech častým zdroj kryptokoků bývá trus městských holubů nebo klecových ptáků (kanárů) na rozdíl od kandid netvoří pseudomycelium tvoří mohutná polysacharidová pouzdra, kolonie opouzdřených kmenů mají výrazně mukózní vzhled multilaterální pučení pozitivní ureázový test

26 Rod Cryptococcus

27 Rod Cryptococcus suchý roztěr, barvení Gomori- Grocott (foto: Prof. MUDr. Alena Tomšíková, DrSc.)

28 Rod Cryptococcus nejvýznamnější druh Cryptococcus neoformans u oslabených lidí může vyvolat fatálně končící pneumonie, meningitidy a sepse (kryptokokóza) kromě invazivních infekcí je původcem infekcí kůže či kožních adnex faktorem virulence je pouzdro, které buňky kryptokoka chrání před imunitním systémem agens je v okolí člověka rozšířeno především v půdních substrátech obsahujících trus holubů další izolované druhy kryptokoků jsou C. albidus, C. laurentii, C. gattii

29 Cryptococcus gattii výskyt je omezen na oblasti v Austrálii, Papui Nové Guinei, Africe, Středomoří, Indii, jihovýchodní Asii, Mexiku, Brazílii, Paraguay a jižní Kalifornii ekologická vazba na několik druhů Eucalyptus C. gattii na agaru s eukalyptem

30 Cryptococcus neoformans teleomorfa Filobasidiella neoformans - mycelium tvoří přezky, jednotlivé, stopkaté, kyjovité holobazidie, bazidiospory se tvoří v řetízcích na vrcholu bazidie

31 Rod Geotrichum Fungi, Ascomycota, Saccharomycotina, Saccharomycetes, Saccharomycetidae, Saccharomycetales, Dipodascaceae nejvýznamnější druh Geotrichum candidum ubikvitní saprofyt, vyskytuje se v mléčných výrobcích, mléku, smetaně, tvarohu, sýru, ale i v půdě, ve vodě, v aktivovaných kalech z odpadních vod apod. pro člověka může být sekundárním patogenem nejčastěji izolován z dýchacích cest a gastrointestinálního traktu zejména u osob s diabetem nebo s imunosupresí vyvolává příležitostné infekce různé lokalizace arthrokonidie

32 Rod Malassezia (dříve Pityrosporum) Fungi, Basidiomycota, Ustilaginomycotina, Exobasidiomycetes, Malasseziales, Malassezia nejčastěji nalézaný druh Malassezia globosa, M. sympodialis a M. furfur saprofytické obligátně lipofilní kvasinky (kromě M. pachydermatis) běžnou součástí kožní mikroflóry člověka a dalších teplokrevných obratlovců Malassezia furfur on Dixon's agar

33 Rod Malassezia (dříve Pityrosporum) příčinou povrchového onemocnění kůže pityriasis versicolor povrchová mykóza lokalizovaná pouze ve stratum coroneum, při které na kůži vytváří světlé skvrnky bez zánětu hyfy prorůstají mezi rohovými buňkami a dokonce jsou schopny intracelulární invaze. V napadených buňkách dochází k rozrušení keratinu a ztrátě organel, buňky se odlučují onemocnění je časté v tropickém a subtropickém pásmu

34 Rod Malassezia (dříve Pityrosporum) pro vznik onemocnění je klíčová přeměna saprofytické blastokonidiální formy malassezií na myceliální, která napadá povrchové oblasti rohové vrstvy k průkazu slouží mikroskopické vyšetření kožních šupin z ložisek, které zobrazí krátké segmentované hyfy a hroznovité shluky spor. Tento obraz je v zahraniční literatuře s oblibou nazýván spaghetti and meatballs M. pachydermatis u nedonošenců a imunokompromitovaných osob může vyvolat katétrové sepse s pneumonií

35 Rod Malassezia (dříve Pityrosporum) Seberoická dermatitida (SD) chronicky probíhající dermatóza vázaná na oblast obličeje, vlasatéčásti hlavy a horní části trupu, kde je nejvíce mazových žláz projevuje se tvorbou v mastných žlutavých šupinek a většinou i zarudnutím postihuje především novorozence během prvních 3 4 týdnů života ve vlasové oblasti výskyt v dospělé populaci se odhaduje na 3 5 % s vyšším výskytem u mužů než u žen

36 Rod Rhodotorula Fungi, Basidiomycota, Pucciniomycotina, Microbotryomycetes, Sporidiobolales nejčastěji nalézaný druh Rhodotorula mucilaginosa (syn. R. rubra) ubikvitně rozšířený druh po celém světě, osídlují vlhké prostředí, lze ho izolovat ze vzduchu, půdy, sladké i slané vody, z vinařských provozů, z povrchu rostlin, ale i z různých orgánů živočišného těla obvykle kontaminant či doprovodná mikroflóra ojediněle může vyvolat onychomykózu i systémové onemocnění

37 Klinicky významné mikroskopické huby Rod Rhodotorula tvoří charakteristické růžové, oranžové až cihlově červeně zbarvené kolonie Sabouraudův glukózový agar, 25 C

38 Rod Saccharomyces Fungi, Ascomycota, Saccharomycotina, Saccharomycetes, Saccharomycetidae, Saccharomycetales, Saccharomycetaceae dlouho považován za nepatogenní pro člověka Saccharomyces cerevisiae bývá izolován z více než 8% případů vaginálních mykóz rovněž zaznamenány případy výskytu u pneumonií a sepsí morfologie: elipsoidní i kulovité blastokonidie, některé kmeny tvoří cylindrické až protáhlé buňky, vytváří rudimentární nebo stromečkovité- bohatě větvené pseudomycelium, pravé mycelium se nevytváří v praxi se ve velké míře využívá hlavně v kvasném průmyslu

39 Rod Trichosporon Fungi, Basidiomycota, Agaricomycotina, Tremellomycetes, Tremellomycetidae, Tremellales, Trichosporonaceae nejvýznamnějším druhem je Trichosporon asahii původce tzv. bílé piedry v tropických a subtropických oblastech bílá piedra - mykotické postižení vlasů charakterizované vznikem drobných uzlíků tvořených buňkami této kvasinky onemocnění kosmetického charakteru

40 Trichosporon asahii kolonie bílé až krémové, povrch suchý sametový až škrobový s radiálními brázdami pučící blastokonidie chybí, tvoří arthrokonidie pozitivní ureáza (Geotrichum negativní ureáza) YPGA, 25, 5 dnů

41 Rod Sporobolomyces Fungi, Basidiomycota, Pucciniomycotina, Microbotryomycetes, Sporidiobolales rozšířen v životním prostředí (lidé, savci, ptáci, a rostliny) běžně izolovány z ovzduší, listy stromů a pomerančové kůry původce mykotických infekcí, zvláště u imunosuprimovaných pacientů nejčastější druh Sporobolomyces salmonicolor kolonie mají máslovitý charakter a lososové zbarvení, mohou se podobat Rhodotorula spp. tvoří blastokonidie oválného až protáhlého tvaru, pseudomycelium, pravé hyfy a ledvinovité balistokonidie

42 Postup jednoduché rodové identifikace kvasinek Kultura na SGA G-test, rýžový agar - červená pigmentace + uniformita buněk klíčící blastokonidie, chlamydospory + - pseudomycelium - + ureáza artrokonidie C. albicans C. dubliniensis Rhodotorula Sporobolomyces ureáza askospóry - Geotrichum Trichosporon Cryptococcus + Saccharomyces Candida sp.. mikromorfologie zymogram/auxanogram

43 Příště: Diagnostika kvasinek