UriSelect g 64694

Transkript

1 UriSelect g Neselektivní chromogenní médium na přímou izolaci, diferenciaci a klasifikaci patogenů močového traktu /11 Obsah 1. POUŽITÍ 2. DIAGNOSTICKÝ VÝZNAM TESTU 3. PRINCIPY METODY 4. REAGENCIE 5. VAROVÁNÍ A UPOZORNĚNÍ 6. VZORKY 7. POSTUP 8. OMEZENÍ TESTU 9. PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY 10. FUNKČNÍ CHARAKTERISTIKY 11. LITERATURA 1 [CZ]

2 1. POUŽITÍ UriSelect 4 je neselektivní chromogenní agarové médium na izolaci, diferenciaci a klasifikaci patogenů močového traktu. UriSelect 4 umožňuje rozlišit a identifikovat Escherichia coli, Enterococcus spp., Proteus mirabilis, a presumptivně identifikovat některé další urinární patogeny, zejména Enterobacteria skupiny KESC (Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter) a skupiny PMP (Proteus-Morganella-Providencia). 2. DIAGNOSTICKÝ VÝZNAM TESTU Infekce močových cest patří mezi nejběžnější bakteriální infekce a tvoří významnou část předmětu zkoumání klinických mikrobiologických laboratoří. Escherichia coli, enterokoky, skupiny Klebsiella-Enterobacter-Serratia (KES) a Proteus- Morganella-Providencia patří v rámci infekcí močových cest mezi často zjišťované organizmy. U žen jsou významně, i když méně často nalézány Staphylococcus saprophyticus a Streptococcus agalactiae. Nestejná citlivost různých mikroorganizmů na antimikrobiální látky vyžaduje pro účinnou léčbu identifikaci kvantitativní úrovně druhů (1). Laboratoře musí pro určení klinického významu izolovaných mikrobiálních kultur výsledky kvantifikovat. UriSelect 4 je neselektivní chromogenní médium na izolaci a kvantitativní klasifikaci všech mikroorganizmů z močového traktu: přímou identifikací bakterií podílejících se nejčastěji na infekcích močových cest, tzn. Escherichia coli, Proteus mirabilis a enterokoků prostřednictvím demonstrace působení enzymů; presumptivní identifikací některých dalších urinárních patogenů, zejména enterobakterií skupin KESC (Klebsiella, Enterobacter, Serratia and Citrobacter) a PMP (Proteus-Morganella-Providencia). 3. PRINCIPY METODY UriSelect 4 tvoří bohatý živný základ kombinující různé peptony, tryptofan a chromogenní směs, která umožňuje detekci specifických enzymů, což je zárukou diferenciace druhů nebo skupin organizmů s minimální potřebou potvrzovacích testů. Vysoká koncentrace agaru je ochranou proti plazivému množení druhu Proteus. Výskyt různých enzymů: Přímé vyšetření Pozorování barev kolonií po 18 24hodinové inkubaci při C: o ß-galaktosidáza: růžové kolonie o ß-glukosidáza: tyrkysově modré kolonie o ß-galaktosidáza a ß-glukosidáza společně: modrofialové kolonie o Tryptofan deamináza (TDA): oranžovohnědé kolonie s hnědavou aureolou kolem Po přidání reagencie Pro detekci tryptofanázy (produkce indolu) kápněte jednu kapku činidla Kovac (nebo James nebo DMACA) přímo na dobře izolovanou kolonii (viz část 7. Postup). Test indolu Pozitivní reakce Negativní reakce Činidlo Kovac Činidlo James Činidlo DMACA Reagencie se zbarví růžově do 15 sekund Kolonie se zbarví červeně do 15 sekund Kolonie se zbarví modrofialově do 2 sekund Žádná změna zbarvení 4. REAGENCIE 4.1. POPIS UriSelect 4 (URI4) se dodává ve 3 adjustacích: Označení na štítku Popis Obsah Krabice agarových sklíček 20 x 90 mm, připravený k použití UriSelect Krabice agarových sklíček 100 x 90 mm, připravený k použití Láhev 500 g 500 g, dehydrovaný 2 [CZ]

3 Přibližné složení média (g/l) Peptonová směs 21 Oxid křemičitý 20 Chromová směs <1 Tryptofan 1 Agar PODMÍNKY PRO SKLADOVÁNÍ A POUŽITÍ Reagencie lze použít do data exspirace uvedeného na obalu. Dodání Agarová sklíčka Dehydrované Uchovávání 2 8 C, chráněné před světlem C, v dobře uzavřené láhvi, na suchém místě Datum exspirace a číslo šarže se uvádějí na obalu. Před inkubací i během inkubace chraňte média před světlem. Světlo může znehodnotit funkčnost média. 5. VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ UPOZORNĚNÍ Určeno pro diagnostické použití in vitro. K použití odbornými zdravotníky ZDRAVOTNÍ A BEZPEČNOSTNÍ UPOZORNĚNÍ Toto médium smí používat pouze kvalifikovaní pracovníci vyškolení v laboratorních postupech a seznámení s možnými riziky. Používejte patřičný ochranný oděv, rukavice, ochranu zraku, případně obličejový štít. Při práci dodržujte zásady správné laboratorní praxe. Trvale dbejte na aseptickou techniku a předepsané bezpečnostní zásady ochrany proti mikrobiologickému nebezpečí. Všechny vzorky a materiály použité k testům likvidujte jako infekční. Při nakládání s laboratorním, chemickým a biologickým odpadem a jeho likvidaci dodržujte všechny platné předpisy. Bezpečnostní doporučení a upozornění na nebezpečnost některých součástí tohoto média naleznete v piktogramech na štítcích a na konci návodu k použití. Bezpečnostní list je k dispozici na adrese Obsahuje < 0,25 % N,N-dimetylformamidu (DMF): toxický pro reprodukci, kategorie 1B NEBEZPEČÍ 5.2. UPOZORNĚNÍ TÝKAJÍCÍ SE METODY PŘÍPRAVA Před použitím nechte sklíčka stabilizovat v prostředí s teplotou C. Nepoužívejte prošlé reagencie. Nepoužívejte sklíčka, která jeví známky kontaminace, vysychají, jsou prasklá či jinak zjevně poškozená. Dlouhé působení světla může zhoršit schopnost média CandiSelect 4 izolovat, případně zbarvit organizmy kvalitativních kontrol nebo kultur odebraných pacientům ZPRACOVÁNÍ Test se provádí při teplotě C. Neměňte postup testu. 6. VZORKY Správný odběr mikrobiologicky použitelných vzorků moči má podstatný vliv na použitelnost kultivačních výsledků. Při odběru a zacházení se vzorky se řiďte příslušnými zásadami a standardy (2). 3 [CZ]

4 7. POSTUP 7.1. DODANÝ MATERIÁL UriSelect POTŘEBNÝ NEDODÁVANÝ MATERIÁL: 10 μl kalibrační kličky Reagencie na test indolu: činidla Kovac, James nebo DMACA inkubátor C nádoba na odpad (kontaminovaný) kotouč se savým papírem Volitelný nedodávaný materiál: organizmy na kvalitativní kontroly PŘÍPRAVA REAGENCIÍ (POUŽÍVANÁ PODLE POTŘEBY) Příprava dehydrovaného média (64694): před použitím rozmíchejte prášek do homogenního stavu. Za stálého míchání nasypte 56,8 g do litru destilované vody a cca 10 minut míchejte do homogenního stavu. Uveďte směs do varu a dobře míchejte, aby se agar optimálně rozpustil. Podle potřeby upravte ph na 7,3. V autoklávu proveďte 15minutovou sterilizaci teplotou 120 C. Rozlijte do 90mm Petriho misek (o objemu ml) POSTUP ANALÝZY 1) Používá se standardní 10 µl bakteriologická klička. 2) Uchopte kličku svisle a ponořte ji do vzorku moči. 3) Naneste moč na agar tahem kličky v délce poloměru misky (a). 4) Od vrchu naneseného vzorku bez noření nepřerušovaným klikatým pohybem kličky kolmo k prvotnímu nátahu rozetřete vzorek po povrchu agaru (b). 5) Nechte sklíčko hodin v inkubátoru při C. (a) Nanesení prvního nátahu kličkou (b) Rovnoměrné rozetření na misce 7.5. KONTROLA KVALITY Kvalitativně kontrolní testy se provádějí podle místně platných předpisů, akreditačních podmínek a laboratorních standardů. Funkčnost média UriSelect 4 se kontroluje podle kmenů (výsledky se uvádějí pro 18 až 24 hodin inkubace při C): KMEN Escherichia coli ATCC Enterococcus faecalis ATCC Klebsiella pneumoniae ATCC Proteus mirabilis ATCC Providencia stuartii ATCC Staphylococcus aureus ATCC BARVA KOLONIE na UriSelect 4 CHARAKTERISTIKA ß-galaktosidáza ß-glukosidáza INDOL TDA RŮŽOVÁ TYRKYSOVĚ MODRÁ MODROFIALOVÁ ORANŽOVOHNĚDÁ s hnědavou aureolou ORANŽOVOHNĚDÁ s hnědavou aureolou BÍLÁ INTERPRETACE VÝSLEDKŮ POČÍTÁNÍ Po inkubaci 18 až 24 hodin při C následuje interpretace výsledků s ohledem na anamnézu pacienta, zdroj vzorku, klinické manifestace, množství leukocytů v moči, zjištěné mikroorganizmy a počty kolonií. Počítání dobře izolovaných kolonií na UriSelect 4 je zpravidla možné do 10 4 CFU/ml moči. Nad touto koncentrací nelze na souvislých koloniích dosáhnout správně spočítaných výsledků. 4 [CZ]

5 IDENTIFIKACE Schéma identifikace mikroorganizmů podle barvy kolonií: RŮŽOVÉ KOLONIE ß-galaktosidáza signalizuje výskyt E.coli, který je třeba potvrdit testem produkce indolu. Naneste jednu kapku reagencie na test indolu na dobře izolovanou růžovou kolonii a nález interpretujte ve smyslu odstavce 3. Pro smíšené kultury: naneste 1 až 3 morfologicky homogenní kolonie na kotouč savého papíru. Přidejte kapku reagencie na test indolu a nález produkce indolu patřičně interpretujte. Produkce indolu signalizuje, že zjištěným mikroorganizmem je E.coli (ale malý podíl kmenů E. coli je indol Θ). Pokud se neprokáže produkce indolu, proveďte identifikaci mikroorganizmu konvenční metodou. Více než 99 % kmenů E.coli produkuje ß-galaktosidázu. Malý podíl jiných mikroorganizmů než E.coli produkuje ß-galaktosidázu a může na médiu UriSelect 4 produkovat růžové kolonie. Některé z těchto mikroorganizmů vzácně způsobují UTI (Salmonella, Shigella), jiné mohou produkovat UTI, avšak indol Θ (Citrobacter freundii) nebo tvořit menší kolonie (S. saprophyticus). TYRKYSOVĚ MODRÉ KOLONIE Působení ß-glukosidázy: malé světlé tyrkysově modré kolonie (o průměru 0,5 až 1,5 mm) gram-pozitivních koků, mikroskopicky ověřené jako enterokoky. Pokud se některá z těchto charakteristik neprojeví, proveďte identifikaci mikroorganizmu konvenční metodou. Mezi streptokoky se pouze enterokoky projevují jako pozitivní vůči ß-glukosidáze produkcí kolonií světle tyrkysově modré barvy. Velmi bledé modré kolony koků nemusí být enterokoky a vyžadují přezkoumání konvenční metodou (mohou představovat streptokoky skupiny A nebo B). 5 [CZ]

6 MODROFIALOVÉ KOLONIE Jak ß-galaktosidáza, tak ß-glukosidáza vytvářejí modrofialově zbarvené kolonie. Velké kolonie (průměru 2,0 až 3,0 mm) určené jako gramnegativní bacily ukazují na mikroorganizmus, který pravděpodobně patří do skupiny KESC (Klebsiella, Enterobacter, Serratia nebo Citrobacter). Proveďte identifikaci mikroorganizmu konvenční metodou. Obecně se bakterie ze skupiny KESC projevují jak ß-galaktosidázou, tak ß-gluksidázou a produkuji modrofialové kolonie. Některé kmeny této skupiny se však mohou slabě projevovat ß-galaktosidázou: barva kolonií se pak jeví jako odstín mezi modrofialovou a tyrkysově modrou. Citrobacter diversus produkuje modrofialové indol kolonie. ORANŽOVOHNĚDÉ KOLONIE s hnědavou aureolou Tryptofan deamináza (TDA) ukazuje na mikroorganizmus skupiny PMP (Proteus-Providencia-Morganella). Testem indolu lze rozlišit Proteus mirabilis od zbytku skupiny. Naneste kapku reagencie na test indolu přímo na dobře izolovanou oranžovohnědou kolonii s hnědavou aureolou podle popisu v části 3, Principy metody. Pro smíšené kultury naneste 1 až 3 morfologicky homogenní kolonie na kotouč savého papíru. Přidejte kapku reagencie na test indolu a nález produkce indolu patřičně interpretujte. Produkci indolu signalizuje Proteus spp. (jiný než P. mirabilis), Providencia spp. nebo Morganella spp. Identifikaci mikroorganizmu je třeba provést konvenční metodou. Není-li produkován indol, znamená to, že mikroorganizmem je Proteus mirabilis (vzácně se vyskytující Proteus penneri je také indole Θ a TDA ). Také Proteus vulgaris a Providencia rettger se někdy projevují ß-glukosidázou a produkují modrozelené nebo zelené kolonie s hnědavou aureolou. Ty lze identifikovat podle pozitivního testu indolu. BÍLÉ, JINOBAREVNÉ nebo BEZBARVÉ KOLONIE Proveďte identifikaci mikroorganizmu konvenční metodou Komentáře i ii iii. Přímo na koloniích izolovaných na UriSelect 4 lze provádět testy katalázy, oxidázy a aglutinace latexu. Přímo na koloniích izolovaných na UriSelect 4 lze provádět testy konvenčními metodami identifikace a testy citlivosti na antibiotika. Při rekonstituci dehydrovaného média mohou zůstat některá reziduální zrnka nerozpuštěná. Jejich výskytem není ovlivněna funkčnost médie s kulturami. 8. OMEZENÍ TESTU Malá část stafylokokových kmenů se nemusí na UriSelect 4 množit během 24 hodin. A limited number of yeast strains may not grow on UriSelect 4. Pokud se jeví, že koncentrace organizmů může být vyšší než 10 7 /ml, doporučuje se pro získání dobře izolovaných kolonií inokulovat dvě sousedící sklíčka s UriSelect 4 z jednoho náběru kličky, nebo před inokulací vzorek moči zředit. UriSelect 4 připravený z dehydrovaného média: pokud inkubace sklíček s agarem trvá déle než 24 hodin, může se na některých kmenech Staphylokoku aureus objevit modravý lesk. 9. OČEKÁVANÉ HODNOTY Infekce močových cest patří mezi nejobvyklejší bakteriální infekce. Navíc jsou infekce močových cest nejčastější v nemocnicích šířenou infekcí s podílem 35 % z nozocomiálních infekcí a druhou nejčastější příčinou bakteremie hospitalizovaných pacientů (2, 3). V mnoha klinických laboratořích jsou močové kultury nejobvyklejším typem kultur, s podílem % ze zpracovávaných kultur a 80 % těchto močových kultur pochází od ambulantně vyšetřovaných pacientů. Zjišťované bakterie závisí na faktorech, jako jsou předchozí hospitalizace či souběžně léčené nemoci (viz tabulka). Například v externím klinickém hodnocení UriSelect 4 činí celková prevalence infekcí močových cest zjišťovaná rutinními i chromogenními metodami 75,8 % (589/777). Mezi izoláty je zřejmá převaha kmenů E.coli se 43,3 %, (351/811), následovaná kmeny Enterococcus faecalis detakovanými v 19,2 % (156/811). 6 [CZ]

7 Komunitní infekce močových cest Escherichia coli (80 %) Proteus mirabilis Klebsiella Enterobacter Serratia Staphylococcus aureus Enterococcus faecalis Vzácné bakterie Oligella urethralis Aerococcus urinae Corynebacterium urealyticum Lactobacillus spp. Nemocniční infekce močových cest Escherichia coli (50%) Pseudomonas aeruginosa Enterobakterie Enterococcus faecalis Staphylococcus aureus Acinetobacter spp Kvasinky *Zejména u pacientů se zavedeným močovým katétrem nebo po katetrizaci. 10. FUNKČNÍ CHARAKTERISTIKA STUDIE PŘESNOSTI Dvěma různými laboratořemi byla souběžně zkoumána skupina devíti stejných kmenů. Tři různé šarže UriSelect 4 byly testovány na opakovatelnost funkčnosti na kulturách (množení a zbarvení kolonií). Všechny testy odpovídaly očekávaným výsledkům KLINICKÁ FUNKČNOST Na 777 čerstvých vzorcích moči středního proudu a z katétrů byla provedena prospektivní klinická studie (10) : 405 vzorků (52,1 %) pocházelo od nemocničních pacientů a 372 (47,9 %) od pacientů odeslaných praktickým lékařem. Vybrány byly ty, které vykazovaly výskyt organizmů nebo podle rutinního mikroskopického vyšetření obsahovaly >200 bílých krvinek/mm 3. Z každého vzorku byl1µl kultivován duplicitně a paralelně semikvantitativní metodou kultivace na médiích UriSelect 4 a CLED (Cystin Laktóza Elektrolyt-deficitní). Zjišťování hodnot a interpretace výsledků byla prováděna podle pokynů výrobců. Všechny bakteriální kmeny, které vykázaly potenciálně významné množení ( 50 kolonií) byly podle morfologie a barvy kolonií zkoumány a identifikovány biochemickými metodami. Ze 777 testovaných vykázalo 589 vzorků moči potenciál významného množení alespoň jednoho kmene (pozitivní vzorky). Celkem bylo na alespoň jednom médiu izolováno 811 kmenů. Studie ukázala: Celková účinnost UriSelect 4 CLED Pozitivní Negativní Celkem Celková shoda s 95% CI (%) Pozitivní Negativní Celkem % [89.5% %] SPECIFICITA Studie prokázala, že UriSelect 4 je užitečný pro předběžnou identifikaci nejobvyklejších patogenů močových cest a jeho předností je lepší diferenciace smíšených kultur. Druh nebo skupina Základní nebo presumptivní identifikátor Citlivost detekce Specificita barevnosti Escherichia coli Červené a růžové kolonie Červené a růžové kolonie, indol 97,1 % 97,1 % 98 % 100 % Skupina Enterococci Malé tyrkysově modré kolonie 100 % 100 % Skupina PMP Oranžovohnědé kolonie 82,4 % 100 % Skupina KESC Modrofialové kolonie 100 % 92 % S. saprophyticus Malé růžové kolonie 100 % 88,9 % 7 [CZ]

8 Zjištěné údaje prokázaly, že UriSelect 4 umožňuje: 1) Přímou identifikaci Escherichia coli s vysokou mírou specificity (98 %) a ostatních, které produkují bílé kolonie v důsledku absence působení ß-galaktosidázy; s testem indolu se specificita zvýšila na 100 % pro E. coli a vzrostla spolehlivost diferenciace kmene E.coli od kmene Citrobacter freundii. Všech 100 % enterokoků tvořilo malé tyrkysově modré kolonie, lehce odlišitelné od stafylokoků (produkujících také malé kolonie s odlišným vybarvením). Všech 100 % Proteae produkovalo difuzní hnědé vybarvení. Negativní test indolu také prokázal užitečnost pro specifickou identifikaci P. mirabilis. 2) Presumptivní identifikaci: Všech 100 % Enterobacteriaceae ze skupiny KESC tvořilo modrofialové kolonie. Všech 100 % S. saprophyticus se na UriSelect 4 dobře množilo s produkcí malých růžových kolonií lehce rozeznatelných od jiných staylokokových kmenů, které tvořily bílé kolonie. Pouze jeden kmen Staphylococcus simulans se jevil barvou podobný, a vykázal nižší specificitu identifikace S. saprophyticus 88,9 % CITLIVOST Citlivost detekce mikroorganizmů na médiích UriSelect 4 a CLED byla hodnocena na 589 pozitivních vzorcích moči (s výrazným množením 50 kolonií). Výsledky jsou shrnuty v přehledu. V úvahu je nezbytné vzít již zmíněná omezení (viz část 8). Organizmus celkem / Izolační médium Kmeny celkem CLED UriSelect 4 Zjištěné kmeny celkem (1) 811 z různých médií 737 (90,9 %) 797 (98,3 %) Nezjištěné kmeny celkem - 74 (9,1 %) 14 (1,7 %) Acinetobacter spp Aerococcus viridans Candida spp Citrobacter diversus Citrobacter freundii Enterobacter aerogenes Enterobacter cloacae Enterococcus faecalis (2) Enterococcus faecium Escherichia coli (3) Klebsiella oxytoca Klebsiella pneumoniae Morganella morganii Proteus mirabilis Proteus penneri Proteus vulgaris Providencia stuartii Pseudomonas aeruginosa Serratia spp Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis (4) Staphylococcus saprophyticus Jiné stafylokoky negativní na koagulázu Stenotrophomonas maltophilia Streptococcus agalactiae (1) Citlivost média UriSelect 4 byla vyšší než 98,3 %, zatímco médium CLED detekovalo pouze 90,9 % kmenů. Hlevním důvodem horší funkčnosti média CLED byly někdy potíže s detekcí vícero kmenů ve smíšených kulturách. Distribuci izolovaných druhů charakterizuje převaha kmenů Enterobacteriaceae s velkou většinou E. coli (43 %). (2) Ukázalo se, že největší rozdíl mezi kmeny izolovanými na médiu UriSelect 4 byl způsoben detekcí enterokoků. UriSelect 4 podpořil o 30,3 % větší množení enterokokových kmenů. Na tomto médiu byly dobře odlišitelné malé kolonie tyrkysově modré barvy ve smíšených kulturách. Na médiu CLED byly často maskované většími koloniemi gram Θ druhů. (3) Neidentifikované zůstaly kmeny E. coli negativní na ß-galaktosidázu produkující bílé kolonie. (4) Tři kmeny Staphylococcus epidermidis nebyly na médiu UriSelect 4 detekovány. Naproti tomu všechny S. saprophyticus a S. aureus se zmnožily dobře. UriSelect 4 se projevil příznivě v detekci S. saprophyticus produkující malé růžové kolonie (jiné staphylokoky tvoří bílé kolonie, vyjma jednoho kmene S. simulans). 8 [CZ]

9 Jak už bylo zmíněno, na médiu CLED slabší byla detekce kmenů ve smíšených kulturách: ze směsí alespoň 2 kmenů bylo detekováno pouze 131 kmenů (78 %) ze 168 (28,5 %) vzorků moči. Na médiu UriSelect 4 bylo detekováno 166 kmenů (99 %). Navíc z 51 vzorků, na nichž se namnožily alespoň 3 odlišné kmeny bylo na médiu CLED detekováno pouze 22 kultur (43 %), zatímco na médiu UriSelect 4 to bylo 47 kultur (92 %). Počet izolovaných kmenů Počet pozitivních vzorků CLED UriSelect (43 %) 47 (92 %) Směs kultur 131 (78 %) 166 (99 %) STUDIE DETEKCE Pro zjištění procentní schopnosti detekce na médiu UriSelect 4 byla s různým ředěním zkoumána množina nejběžnějších infekcí močových cest E.coli, Enterococcus, P. mirabilis, S. aureus a K. pneumoniae. Pro každý kmen byla připravena suspenze 0.5 McFarland. Na UriSelect 4 byla zkoumána série 10 odstupňovaných ředění ve fyziologickém roztoku s inokulací sklíčka při C na atmosférickém vzduchu po hodinách. Zaznamenávaly se barvy a počty kolonií. Zjištěné údaje prokázaly, že minimální koncentrace pro detekci většiny patogenů močových cest na médiu UriSelect 4 je 10 3 CFU/ml KLASIFIKACE Testována byla detekce množiny nejobvyklejších infekcí močových cest při koncentracích odstupňovaných 10 3 až 10 7 CFU/ml moči. Zjišťoval se rozsah koncentrací použitelný na rutinní testy. Pro každý testovaný kmen byla připravena suspenze 0.5 McFarland. Na UriSelect 4 byla zkoumána série 10 odstupňovaných ředění ve fyziologickém roztoku s inokulací sklíčka při C na atmosférickém vzduchu po hodinách. Zaznamenávaly se barvy a počty kolonií, které které bylo možné izolovat do koncentrace 10 4 CFU/ml moči. Nad touto koncentrací nelze na souvislých koloniích dosáhnout správně spočítaných výsledků. 11. LITERATURA 1. Isenberg, H.D. (ed.) Clinical microbiology procedures handbook, vol. 1. American Society for Microbiology. Washington, D.C. 2. Miller JM, HT Holmes, K Krisher General principles of specimen collection and handling. Clinical Microbiology procedures handbook, ASM Washington DC. 3. NCCLS. Quality controls for commercially prepared Microbiological Culture Media; Approved Standard Third Edition. NCCLS document M22-A3 (ISBN ). NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania USA, January Stamm WE. Scientific and clinical challenges in the management of urinary tract infections. Am J Med 2002;113: Weinstein MP, Towns ML, Quartey SM, et al. The clinical significance of positive blood cultures in the 1990s: a prospective comprehensive evaluation of the microbiology, epidemiology, and outcome of bacteremia and fungemia in adults. Clin Infect Dis 1997;24: Clinical and Laboratory Standards Institute Approved Guideline M29-A3. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 3rd ed. CLSI, Wayne, PA. 7. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Basic Laboratory Procedures Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva st edition. 9. Procedures/Guidelines for the Microbiology Laboratory, College of Physicians & Surgeons of Saskatchewan. Laboratory Quality Assurance Program, January [CZ]

10 10. J D Perry, L A Butterworth, A Nicholson, M R Appleby, K E Orr. Evaluation of a new chromogenic medium, UriSelect4, for the isolation and identification of urinary tract pathogens. J Clin Pathol 2003; 56: Ferjani A, Marzouk M, Idriss N, Sammoud S, Hannachi N, Boukadida J. Evaluation du milieu chromogène UriSelect4 au cours des urocultures. Biol Clin 2011; 69 (5):541 doi: /abs Kornherr et al. Comparison of Three Chromogenic and Two Standard Urine Culture Media for Detection of Urinary Tract pathogens. Department of Microbiology, Gamma-Dynacare Medical Laboratories Ottawa and Toronto, Ontario Canada. Poster ASM E. Thomas, S. Anderson, L. Dawson, C. Barth, K. Manickam, Regina Qu Appelle Health Region, Regina SK Canada. The use of UriSelect4 chromogenic media for the detection of urinary tract pathogens. Poster James A.L., Yeoman P., Detection of specific bacterial enzymes by high cont rast metal chelate formation. Part I. 8- Hydroxyquinoline- ß-D-Glucoside, an altenative to aesculin in the differentiation of members of the family Enterobacteriaceae-Zbl. Bakt. hyg. A (1987). 15. Clarridge J.E., Pezzlo M.T., Vosti K.L., Cumitech 2A. Laboratory diagnosis of urinary tract infections. Coordinating ed. Weissfeld A.S., American Society for Microbiology, Washington, D.C. 16. Manafi M., Kneifel W., Fluorogenic and chromogenic substrates - a promising tool in microbiology, Acta Microbiologica Hungarica. 38 (3-4). pp (1991). 10 [CZ]

11 11 [CZ]

12 12 [CZ]

13 13 [CZ]

14 14 [CZ]

15 Sklíčka musí být chráněna před světlem. Osvědčení o analýzách naleznete na stránce Distributor v USA: Bio-Rad Laboratories th Ave NE, Redmond, WA 98052, U.S.A. Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincare Marnes-la-Coquette - France Tel. : +33 (0) /11 Fax : +33 (0) Objednávky a technické služby pro zákazníky v USA: BIORAD ( ) 15 [CZ]