Vývoj stanovení lipoproteinu(a)

Transkript

1 Vývoj stanovení lipoproteinu(a) M. Beňovská, D. Bučková OKB Fakultní nemocnice Brno Katedra laborat. metod LF MU

2 Lipoprotein(a) 1. Obecná charakteristika 2. Doporučení 3. Vývoj stanovení na OKB FN Brno 4. Nová souprava na stanovení Lp(a) 5. Srovnání metod, statistika stanovení 6. Kazuistika 7. Závěry

3 Složení Lp(a) Poprvé popsán v r (Berg) Molekula podobná LDL Kovalentním disulfidickým můstkem spojená s apo(a) (ze 70% homolog plasminogenu) apo (a) apo B 100

4 Lipoprotein(a) Syntéza Apo(a) se syntetizuje v játrech Lp(a) vzniká v cytoplasmě (případně na povrchu hepatocytů) vazbou apo(a) na apo B 100 v částici podobné LDL Množství cirkulujícího Lp(a) dáno zejména produkcí ne degradací Odbourávání Játra, ledviny, srdce LDL-receptor related protein, VLDL receptor atd. (hrají úlohu v patogenezi aterosklerózy)

5 Ovlivnění Lp(a) Genetický vliv (z 90%) Pozitivní reaktant akutní fáze záněty, infekce Selhání jater (Lp(a) ), selhání ledvin (Lp(a) ) Hypotyreóza, menopauza Dieta nemá vliv (s vysokým příjmem tuků živočišného původu?)

6 Lipoprotein(a) Aterosklerotické postižení tepen Spojen s tvorbou aterosklerotického plátu (hromadí se v něm) Vysoké Lp(a) potenciálně zvyšuje riziko ICHS, kalcifikace aortálních chlopní, stenózy Role jako nezávislý rizikový faktor pro kardiovaskulární onemocnění studie obtížně hodnotitelné >0,3 g/l (>75 nmol/l) vyšší riziko aterosklerózy + ischemického iktu Inhibitor fibrinolýzy (projeví se jen při zvýšení nad 95 perc.) Hraje úlohu při reparaci a hojení ran Antikarcinogenní vlastnosti - Lp(a) ve stáří dlouhověkost

7 Doporučení pro Lp(a) 2007 v ČR platí Doporučení pro diagnostiku a léčbu dyslipidémií v dospělosti Lp(a) - zvyšuje riziko kardiovaskulárního onemocnění >0,3 g/l 2010 EAS Consensus panel 2010 Guideline for Healthcare Profesionals from AHA/ASA 2012 EAS Consensus panel doporučuje stanovovat Lp(a) v nmol/l

8 Z doporučení 2010 Lp(a) stanovovat Rodinná anamnéza Genetické příčiny hypercholesterolémie Pacienti se středním a vysokým rizikem KVO KVO i přes hypolipidemickou léčbu Pacienti s řadou rizikových faktorů Lp(a) nestanovovat V primární prevenci a u asymptomatických pacientů bez rodinné anamnézy U pacientů s nízkým kardiovaskulárním rizikem Při sledování efektu terapie Lp(a) minimálně kolísá, často se stanovuje pouze jedenkrát

9 Léčba Lp(a) Kyselina nikotinová, kyselina acetylsalicylová (snížení cca o %) U pacientů s Lp(a) > 0,5 g/l a mnoha kardiovaskulárními rizikovými faktory, zvýšeným LDL a sníženým HDL Neléčit izolovaně zvýšené Lp(a) Statiny - malý efekt, LDL aferéza (agresivní LDL vede k snížení produkce Lp(a))

10 Lp(a) stanovované na OKB FN Brno Vyšetření Lp(a) (6763 stanovení) 8% 4% 2% 4% 28% 12% Dětská hematologie Pediatrie (převážně gastro amb) Interna (převážně kardiologie) Hematologická ambulance Infekční (AIDS amb) Biochemie ambulance Externí ambulance Ostatní odd., personál aj. 19% 23%

11 Historie stanovení Lp(a) - Roche Imunoturbidimetrické stanovení s králičí protilátkou proti lidskému Lp(a) Do r Bez latexových částic Částicemi usnadněné imunoturbidimetrické stanovení Od r Restandardizace metody návaznost na referenční materiál IFCC SRM 2B

12 Historie stanovení Lp(a) - Roche Imunoturbidimetrické stanovení s králičí protilátkou proti lidskému Lp(a) Do r Bez latexových částic [g/l] Částicemi usnadněné imunoturbidimetrické stanovení [g/l] Od r Restandardizace metody návaznost na referenční materiál IFCC SRM 2B [nmol/l]

13 Proč nová souprava Lp(a) Gen.2 Dlouho chyběla jednotná standardizace Dle doporučení EAS firma Roche vydala novou soupravu na stanovení Lp(a) Díky polymorfismu apo(a) - velikost Lp(a) částic různá Diskrepance: Málo velkých molekul (méně aterogenní) nízké riziko KVO Hodně malých mol. (více aterogenní) vysoké riziko KVO Výsledky těžko srovnatelné podhodnocené nebo nadhodnocené

14 Molekula Lp(a) Apo (a): Délková variabilita Část tvořena doménami zv. Kringly (struktura trojité smyčky)

15 Lipoprotein(a) Gen.2 Porovnatelné výsledky pro všechny jedince Koreluje s referenční metodou ELISA Měří počet Lp(a) částic, ne molekulovou hmotnost Lp(a) molekul Výsledky asi o 20% nižší ve srovnání s přímým přepočtem (restandardizace) Souprava velmi stabilní, CVrepro = 4,1% (cobas 8000, c702 od 1/2014 jediná kalibrace)

16 Referenční rozmezí Lp(a) 0-0,3 g/l Lp(a) Gen nmol/l V populaci velké rozdíly až 1000x - interindividuální, etnika (černošská populace 2-3x vyšší hodnoty)

17 Referenční rozmezí Lp(a) 0-0,3 g/l Lp(a) Gen nmol/l V populaci velké rozdíly až 1000x - interindividuální, etnika (černošská populace 2-3x vyšší hodnoty) JUPITER Trial: Rasa n Medián [nmol/l] perc. [nmol/l] Běloši Aziaté Černoši Ženy bílé Muži bílí

18 Srovnání Lipoprotein(a) Gen.2/ souprava Lp(a) předchozí generace 12 pacientů y = 206,688x - 8,355 R2 = 0,9896 Stejný odběr

19 Srovnání Lipoprotein(a) Gen.2/ souprava Lp(a) předchozí generace y = 192,018x- 9,616 R2 = 0, pacientů Jiný odběr

20 Srovnání Lipoprotein(a) Gen.2/ souprava Lp(a) předchozí generace y = 192,018x- 9,616 R2 = 0, pacientů Jiný odběr

21 Lp(a) stanovení Pacienti OKB FN Brno 23% 14% 63% do 0,3 g/l 0,31-0,59 g/l 0,6 g/l a vyšší Lp(a) Gen stanovení 5% 11% 84% do 75 nmol/l nmol/l nad 180 nmol/l

22 Český chlapec - otec z USA

23 Externí kontrola kvality RFA1/14 5 účastníků 100% úspěšnost

24 Závěrem Výsledky stanovení Lp(a) Gen.2 jsou správnější, standardizované srovnatelné Metoda Lp(a) Gen.2 vykazuje méně patologických výsledků Podstatné mohou být případy, kdy je Lp(a) analyzované novou metodou vyšší než původně Rizikoví pacienti by měli být analyzováni znovu bude ověřeno dlouhodobější zkušeností lékařů

25 Zdroje (JUPITER Trial) L. Zlatohlávek, K. Zítková, M. Vráblík: Lipoprotein (a). Vnitř Lék 2007; 53(4): Příbalový leták Lp(a) Gen.2, Roche