MASARYKOVA UNIVERZITA PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA ÚSTAV EXPERIMENTÁLNÍ BIOLOGIE Laichmanová Monika Lékařská mykologie (Bi3390) Mykotoxiny
Mykotoxiny sekundární metabolity mikroskopických hub, nebílkovinné povahy, toxické pro bakteriální, rostlinné, houbové nebo živočišné buňky > 300 mykotoxinů rozlišení na toxiny bílkovinné a nebílkovinné povahy bílkovinné toxiny mají mnoho shodných rysů s bakteriálními toxiny jejich význam z hlediska kontaminace potravin je však zanedbatelný. Při požití jsou cizorodé bílkoviny tohoto původu patrně destruovány trávicím procesem a snad již také přípravou stravy. Zatím nebyla u houbovitých organizmů popsána produkce nějaké obdoby botulotoxinů, které nejenže vydrží krátkodobý var, ale jsou i odolné vůči trávení.
Mykotoxiny se stanoveným limitem v potravinách v ČR aflatoxiny - arašídy, čili koření, fíky, kakao, kari, kmín, kukuřice, ořechy brazilské, pekanové, vlašské, pistácie, paprika, pepř ochratoxin A - obiloviny, rozinky, káva, víno, koření, zelený čaj, grep. šťáva, luštěniny, maso, vnitřnosti patulin - jablka a výrobky z jablek, banány, borůvky, plesnivé kompoty, jablečné mošty deoxynivalenol - obiloviny a výrobky z nich sterigmatocystin - obiloviny a výrobky z nich, tvrdé sýry
Další mykotoxiny na potravinách v ČR alternariové MT - rajčata, řepka fumonisin B1- kukuřice a kukuřičné výrobky kyselina cyklopiazonová - kukuřice, arašídy, kroupy, sýry typu camembert T-2 toxin - obiloviny a výrobky z nich zearalenon - obiloviny a výrobky z nich
Mykotoxiny - rozdělení Rozdělení podle účinků cytotoxické mykotoxiny toxiny s imunosupresívními účinky teratogenní toxiny karcinogenní mykotoxiny mutagenní toxiny
Mykotoxiny - rozdělení Rozdělení podle toxicity - kvantitativní 1. Silně toxické - aflatoxiny, patulin, luteoskyrin, sporidesminy, ochratoxin A, cyklochlorotin (= islandotoxin), zearalenon (F-2 toxin), T-2 toxin, DAS (diacetoxyscirpenol), citreoviridin, rubratoxiny, penitrem A 2. Středně toxické - citrinin, kyselina penicillová, sterigmatocystin, kyselina cyklopiazonová 3. Slabě toxické - griseofulvin, kyselina koji, trihothecin, kyselina mykofenolová, chaetomin nejtoxičtější mykotoxiny mají LD 50 pro běžná laboratorní zvířata blízkou KCN (tj. cca 1 mg.kg-1 tělesné hmotnosti) toxicita pro člověka je odhadem podle toxicity vůči různým živočichům
Mykotoxiny - rozdělení Rozdělení podle toxicity kvalitativní (Nilipour, 2002; Šimůnek, 2003) 1. Hepatotoxiny - aflatoxiny, sterigmatocystin 2. Nefrotoxiny - ochratoxin A, citrinin 3. Toxiny zažívacího traktu - T-2 toxin a další trichotheceny 4. Neurotoxiny a myotoxiny - tremorgeny (např. penitrem A), citreoviridin 5. Dermotoxiny - T-2 toxin 6. Toxiny dýchacího traktu - patulin 7. Genitotoxiny - zearalenony 8. Imunotoxiny - aflatoxiny, ochratoxin A, trichotheceny 9. Toxiny nezařaditelné nebo málo prozkoumané
Mykotoxiny - historie první doložené zprávy o toxicitě plesnivých potravin pocházejí z Japonska. Některé z nich navazují na lidové zkušenosti, např.: žlutou rýži je třeba vystavit na několik hodin v tenké vrstvě prudkému slunci, aby pozbyla svoji toxicitu (fotolýza mykotoxinu citreoviridinu) ve 30. a 40. letech byly na území tehdejšího SSSR zkoumány vzorky obilí, napadené houbami rodu Fusarium. Ty byly spojeny s onemocněním, které se nyní nazývá alimentární toxická aleukie (ATA), v té době bylo známo pod mnoha synonymy (např. "septická angína"). Tehdy na tuto chorobu zahynulo až několik desítek tisíc lidí. exaktní modelový pokus, prokazující původ ATA z otravy fusariovými mykotoxiny byl proveden až v 70. letech obnovení zájmu o toxické látky z mikroskopických hub přišlo v roce 1960, když na farmách Nové Anglie uhynulo několik desítek tisíc krůťat. Byla prokázána produkce toxických látek z hub vyskytujících se v arašídech, které tvořily součást krmné směsi pro krůťata
Mykotoxiny - historie producentem toxinů byl druh Aspergillus flavus, podle něhož byly nazvány aflatoxiny. K jejich bližší identifikaci byla použita písmena, zprvu B pro modře a G pro zeleně světélkující pod dlouhovlnným ultrafialovým zářením a číselnými indexy, značící jejich pořadí na chromatogramu při tehdy užívané tenkovrstevné chromatografii, aflatoxiny M byly nalezeny v mléce, H v játrech, P byly v době svého objevu považovány za specifické pro primáty. k zahájení výzkumu mykotoxinů na lékařské fakultě v Brně došlo v souvislosti s následující kazuistikou. V jednom ze závodů tehdejší Fruty došlo k zaplísnění rajčat. Pracovníci hygienické služby, provádějící tehdy senzorické zkoušky, onemocněli s příznaky poškození jater. v současné době představuje vrcholové pracoviště pro mykotoxiny v potravinách a potravinových surovinách Centrum zdraví, výživy a potravin v Brně (CZVP)
AFPA Mykotoxiny - přehled Aflatoxiny aflatoxin B1 - nejsilnější dosud známý přírodní karcinogen za základní považujeme aflatoxiny B 1, B 2, G 1, a G 2 producenti: Aspergillus flavus a A. parasiticus aj. produkce závisí na teplotě, vlhkosti, přístupu vzduchu, struktuře a chemickém složení substrátu, důležité jsou i vlivy doprovodné mikroflóry (např. inhibice tvorby aflatoxinů vlivem Aspergillus sk. niger) akutně toxické (blokáda syntézy bílkovin), karcinogenní (vazba na RNA), teratogenní, imunosupresivní http://www.mdpi.com/2072-6651/4/11/991/htm
Mykotoxiny - přehled Aflatoxiny vyvolávají u člověka Reyův syndrom, zánět jater, primární hepatom a stavy útlumu imunity zdrojem jsou obiloviny (kukuřice, čirok, pšenice, rýže), olejniny (sója, arašídy, slunečnice, semena bavlníku), koření (chilli papriky, černý pepř, koriandr, kurkuma, zázvor) a ořechy (pistácie, mandle, vlašské ořechy, kokosové ořechy a para-ořechy) aflatoxikózy u lidí méně časté (Asie, Afrika) A. flavus se vyskytuje především v teplých oblastech Ameriky, Afriky a Asie k nám je transportován na různých hospodářských komoditách špatné kvality
Akutní toxicita LD 50 aflatoxinu B1 0,4 18 mg/kg (225kg paraořechů)
Mykotoxiny - přehled Sterigmatocystin producenti: Aspergillus versicolor, Aspergillus nidulans aj. hepatotoxický, karcinogenita pravděpodobná zdroj: v obiloviny a výrobky z nich, kávová zrna, salámy, sýry Aspergillus versicolor (NRRL 238), culture plates are 9 cm diam, colonies grown at 25 C for 10 d. a. CYA colonies. b. CYA colony reverse. c. MEA colonies. d. MEA colony reverse. e. Bifurcating stipe producing two conidiophores, bar=50 µm. f. Smooth stipe, subglobose vesicle, and conidia, bar=10 µm. g. Globose conidia with roughened walls, bar=10 µm. http://www.mycology.adelaide.edu.au/fungal_descriptions/hyphomycetes_%28hyaline%29/aspergillus/nidulans.html https://www.researchgate.net/figure/233424552_fig11_aspergillus-versicolor-nrrl-238-culture-plates-are-9-cm-diam-colonies-grown-at-25-c
Mykotoxiny - přehled Ochratoxin A ze skupiny ochratoxinů nejtoxičtější produkován některými druhy rodů Aspergillus a Penicillium (Aspergillus ochraceus, A. verrucosum, A. sulphureum, A. mellus, Penicillium verrucosum P. viridicatum, P. palitans, P. commune, P. aurantiogriseum, P. freii, P. tricolor, P. polonicum) mechanismus jeho toxicity spočívá v inhibici proteosyntézy vliv na organizmus je v útlumu imunity a postižení ledvin
Mykotoxiny - přehled Ochratoxin A hlavním zdrojem je obilí (naše obilí zpravidla obsahuje detekovatelné ale podlimitní koncentrace), dalším zdrojem jsou masné výrobky (ochratoxin A vytváří rezidua ve tkáních) káva vepřová krev, v níž je ochratoxin vázán na albumin (domácí zabijačky, krevní speciality) sušené ovoce
Expoziční standarty pro ochratoxin A 5 ng/kg tělesné hmotnosti na den
Mykotoxiny - přehled Patulin produkován řadou druhů mikroskopických hub rodů Byssochlamys, Penicillium, Aspergillus (název je odvozen od Penicillium patulum) objeven ve 40. letech jako antibiotikum, účinný např. proti Bacterium tuberculosis antibiotické účinky na bakterie, antifungální účinky na houby, toxicita pro rostlinné i živočišné buňky, poškozuje žaludeční sliznici
Mykotoxiny - přehled Patulin zdrojem je kazící se ovoce, velice často v jablkách, ovocné šťávy v ovoci se vyskytují ochranné látky (např. vitamín C), které zabrání rozkladu patulinu při tepelném zpracování kompotů, dření i moštů (čistý patulin se rozkládá při 80 C) je jeden z mála dobře detoxikovatelných mykotoxinů v potravinách je spíše indikátor špatných výrobních postupů - používání "plesnivých" vstupních surovin http://www.lookfordiagnosis.com/mesh_info.php?term=patulin&lang=1
Mykotoxiny - přehled Penicillium expansum Byssochlamys nivea Gerald Holmes, California Polytechnic State University at San Luis Obispo, Bugwood.org http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/mikro/
Mykotoxiny - přehled Trichotheceny skupina látek, charakterizovaných přítomností tzv. trichothecenového jádra producenti: teplomilné i chladnomilné druhy rodu Fusarium (Fusarium poae, F. graminearum, F. sporotrichoides), u nás s nimi bývají problémy jen v teplotně atypických letech vyvolávají alimentární toxickou aleukii zvláštní skupinu tvoří tzv. makrocyklické trichotheceny, patří mezi ně satratoxiny (Stachybotrys chartarum, Dendrodochium toxicum). Působí na kůži už ve zlomcích mikrogramu těžké dráždění.
Mykotoxiny - přehled Stachybotryotoxikóza - postihuje především domácí zvířata konzumující kontaminované seno nebo slámu - zřídka postiženi lidé - Stachybotrys chartarum - mykotoxiny satratoxiny a stachybotryotoxiny Čtyři různé formy: - postižení kůže a sliznice (ústa, jícen, žaludek, plíce) - celková intoxikace postižení krvetvorby a krve - nervová forma - potraty http://www.biotopia.net.au/gpage.html https://www.selfhealgo.com/stachybotrys-chartarum-aka-black-mold/
Mykotoxiny - přehled T-2 toxin trichotecenový mykotoxin produkovám druhy rodu Fusarium mykotoxin je produkován při teplotě 3 až 8 C (při 25 C se již netvoří) způsobuje kožní a slizniční nekrotické léze, zejména v horní části gastrointestinálního traktu po kontaktu s mykotoxinem (pozorováno u drůbeže a prasat) možné zneužití k vojenským účelům - zpuchýřující účinek podobný yperitu, navíc vyvolává těžké postižení imunity a krvetvorby
Mykotoxiny - přehled Deoxynivalenol (DON) trichotecenový mykotoxin produkovám druhy rodu Fusarium společně s T-2 toxinem nejvíce frekventovaným mykotoxinem v krmivech zdrojem obiloviny obecné symptomy jsou nauzea, iritace pokožky a poruchy krvetvorby u přežvýkavců dochází ke snížené užitkovosti a příjmu krmiva hlavním mechanismem toxického účinku je v enterocytech, kde inhibuje syntézu proteinů a vyvolává apoptózy http://milksci.unizar.es/bioquimica/temas/toxico/micotoxinas.html
Mykotoxiny - přehled Zearalenon produkován některými druhy rodu Fusarium, může se jednat i o stejné druhy, které produkují trichotheceny ač nemá steroidní strukturu, má účinky steroidních hormonů estrogenů u lidí i hospodářských zvířat může způsobovat hyperestrogenismus zdrojem jsou obiloviny nebezpečí u konzumace naklíčeného obilí a dalších semen, kdy během klíčení mohou fuzária vyrůst a vyprodukovat mykotoxiny
Mykotoxiny - přehled Citrinin produkován některými druhy rodu Penicillium (P. citrinum, P. expansum, P. verrucosum) a rodu Aspergillus (A. tereus, A. candidus) původně používán jako antibiotikum, ale pro značnou toxicitu (nefrotoxický) vyřazen může se vyskytovat společně s ochratoxinem v našich podmínkách je zejména kontaminantou obilí, v plesnivém chlebu a špatně skladované šunce je dobře stanovitelný vzhledem k intenzivní žluté fluorescenci pod ultrafialovým světlem
Mykotoxiny - přehled Fumonisiny skupina látek odvozených od nenasycených mastných kyselin : fumonisin A 1, A 2, B 1 - B 4 ; nejčastěji je nalézán fumonisin B 1 produkovány některými druhy rodu Fusarium a patrně i dalšími mikroskopickými houbami vyvolávají několik typů onemocnění hospodářských zvířat, přičemž nejznámější je leukoencephalomalacie koní a zhoubné nádory u laboratorních potkanů u člověka existují souvislosti s výskytem karcinomu jícnu (potenciální karcinogen) hlavním zdrojem této skupiny mykotoxinů je kukuřice včetně výrobků z ní (např. Claver Popcorn slaný)
Mykotoxiny - přehled Kyselina cyklopiazonová produkována druhy rodů Penicillium a Aspergillus flavus barevně reaguje s Ehrlichovým činidlem, což lze použít i pro její stanovení a v druhové identifikaci při perorálním kontaktu dochází především k postižení trávicí trubice a jater v menším množství se mykotoxin pravidelně vyskytuje v plísňových sýrech pod pokryvem Penicillium camemberti, vyskytuje se i v tavených sýrech (sem se dostává s plesnivými odkrojky), plísňových salámech apod. dalším možným zdrojem je drůbeží maso (příjem krmivem)
Mykotoxiny - onemocnění mykotoxikózy - onemocnění člověka a hospodářských zvířat, vyvolaná mykotoxiny 1. Onemocnění člověka vyvolaná pouze mykotoxiny ergotismus Claviceps purpurea akutní kardiální beri-beri - Penicillium citreonigrum, Penicillium islandicum alimentární toxická aleukie (ATA)- Fusarium
Mykotoxiny - onemocnění Ergotismus historicky první mykotoxikózou popsanou u člověka. Vyskytoval se po konzumaci mouky infikované paličkovicí nachovou Claviceps purpurea do roku 1879 bylo v Evropě známo 306 epidemií ergotismu. Onemocnění bylo v minulosti často označováno jako oheň sv. Antonína (vaskulární forma). Poslední popsaný případ ergotismu byl ve Francii v roce 1950. onemocnění způsobují alkaloidy, nacházející se ve sklerociích houby (námel), tyto látky využívá farmaceutický průmysl stromata perithecia
Mykotoxiny - onemocnění Ergotismus dvě formy: vaskulární a psychotropní vaskulární forma (ergotamin) dominují spasmy drobných cév, vyvolávající při opakovaném působení toxinů gangrenizaci tkáně a odpadnutí akrálních částí těla (ušní boltce, nos, brady, rty, prsty apod.) psychotropní forma (ergin a hydroxyethylamidkyseliny lysergové) výskyt halucinací, křeče, zvracení, svědění, bolesti hlavy, průjem, nekontrolované pohyby rukou obraz Žebráci od holandského autora Pietera Brueghela (1530-1569)
Mykotoxiny - onemocnění Akutní kardiální beri-beri projevuje se křečemi a vzestupnou paralýzou stejně jako klasická beri-beri, dušností a může skončit úmrtím na zástavu srdce vyvolávajícími toxiny jsou citreoviridin, citrinin, luteoskyrin aj. producenti: Penicillium citreonigrum, Penicillium islandicum citreoviridin je silně fotolabilní (detoxikace slunečním zářením), má jasně žlutou barvu, která se projeví na rýži ("žlutá rýže") Asie, Japonsko za 2. Světové války Penicillium citreonigrum http://www.bcrc.firdi.org.tw/fungi/fungal_detail.jsp?id=fu200802260013
Mykotoxiny - onemocnění Alimentární toxická aleukie (ATA) Rusko, 19. st., 2. světová válka onemocnění je způsobeno T-2 toxinem a příbuznými trichotheceny producenti: druhy z rodu Fusarium (Fusarium poae a F. sporotrichioides) onemocnění má tři fáze: 1) první příznaky na trávicím ústrojí - záněty sliznice, zvracení, průjmy. T-2 toxin může proniknout do organizmu i neporušenou pokožkou 2) dostavuje se zdánlivá úleva, doprovázená poklesem počtu krevních destiček a bílých krvinek 3) postižení bakteriálními infekcemi pro zdravého člověka nepatogenními, krvácení (vykrvácení žen během menstruace), často bývají postiženy krční mandle, proto byla choroba známa i pod synonymem "septická angína, někdy smrt udušením (otok krku)
Mykotoxiny - onemocnění 2. Multifaktoriální - mykotoxin je jedním z možných činitelů: toxická hepatitida primární hepatom Reyův syndrom hyperestrogenismus
Mykotoxiny - onemocnění Toxická hepatitida původci hepatotoxické mykotoxiny (aflatoxiny, cyklochlorotin či luteoskyrin) při chronické expozici vyvolávají poškození jater, mající charakter zánětu častěji se vyskytuje hepatitida hospodářských zvířat výskyt tohoto onemocnění je u lidí převážně v rozvojových zemích
Mykotoxiny - onemocnění Primární hepatom karcinogenita aflatoxinů se projevuje především indukcí nádoru jater primární hepatom má rovněž vztah k nosičství viru infekční hepatitidy B prodělání hepatitidy B zvyšuje riziko karcinomu jater cca dvacetinásobně virus je nyní považován za jeden z prokázaných lidských onkovirů, ovšem k onkogenezi potřebuje přítomnost karcinogenní látky, což je velice často právě aflatoxin
Mykotoxiny - onemocnění Aflatoxiny vyvolaný Reyův syndrom Reyův syndrom je polyetiologický chorobný stav postihující děti, který lze vyvolat i některými léky (např. Acylpyrin), jedy a virovou infekcí. S aktivitou aflatoxinů je u nás spojováno úmrtí dětí v 70. letech, u nichž byl popsán Reyův syndrom. Ve všech případech byl zjištěn v játrech aflatoxin B 1. Přítomnost aflatoxinu byla poté dokázána mimo jiné v sušeném mléce, které bylo součástí výživy kojenců. Onemocnění se vyznačuje rychlým přechodem do těžkého bezvědomí po horečnatém onemocnění s nespecifickými příznaky, připomínajícími virózu. V komatu se projeví současné těžké postižení jater a mozku, které je i příčinou smrti. byly popsány i dva případy vrozeného Reyova syndromu, kdy se dítě s jeho příznaky narodilo a zemřelo do 24 hod poté. V obou případech šlo o matky pracující v živočišné výrobě i ve vysokém stupni těhotenství, u nichž se předpokládá profesionální expozice matky (aflatoxiny v prachu z krmiv) a následná intrauterinní expozice plodu
Mykotoxiny - onemocnění Hyperestrogenismus je vyvolán zearalenonem s účinky estrogenů, který se vyskytuje v potravě (zejména obilniny a výrobky z nich) vyskytuje se především u dobytka, kdy jsou popsány záněty rodidel, zmetání a poruchy plodnosti u samců v ČSSR bylo zachyceno několik případů hyperestrogenismu u dětí, kde vektorem bylo maso slepic, konzumované rodinami pracovníků drůbežáren v neobvyklém množství
Mykotoxiny - onemocnění Kategorizace mykotoxinů z hlediska karcinogenity (IARC-WHO) Aflatoxiny 1 prokázaný karcinogen pro člověka Ochratoxin A 2B možný karcinogen pro člověka Fumonisiny 2B možný karcinogen pro člověka Fusarin C 2B možný karcinogen pro člověka Zearalenon 3 zatím není klasifikován jako karcinogen pro člověka Deoxynivalenol 3 zatím není klasifikován jako karcinogen pro člověka T-2 toxin 3 zatím není klasifikován jako karcinogen pro člověka Category 1: carcinogenic to humans (karcinogenní pro lidi). Category 2A: probably carcinogenic to humans (pravděpodobně karcinogenní). Category 2B: possibly carcinogenic to humans (možná karcinogenita). Category 3: not classifiable as to carcinogenicity in humans (nezařaditelný jako karcinogenní). Category 4: probably not carcinogenic to humans (pravděpodobně nekarcinogenní).
Mykotoxiny - stanovení Analytika mykotoxinů - ke stanovení mykotoxinů je možné využít jejich fyzikální, chemické a biologické vlastnosti fyzikálně-chemické biologické toxikologické mikrobiologické Detekce kvalitativní semikvantitativní kvantitativní
Mykotoxiny - stanovení Analytické procesy: odběr vzorku extrakce přečištění stanovení http://eagri.cz/public/web/file/232493/pospichalova_seminar2013.pdf
Mykotoxiny - stanovení Odběr vzorku odběr a zpracování vzorků je pro některé potraviny a suroviny upraven zvláštní normou a k dosažení reprodukovatelných výsledků je nutno předepsané postupy striktně dodržovat ČSN EN 14123 Potraviny - Stanovení aflatoxinu B1 a sumy aflatoxinů B1, B2, G1 a G2 v lískových oříšcích, arašídech, pistáciích, fících a práškové paprice - Metoda HPLC s postkolonovou derivatizací a s přečištěním na imunoafinitní kolonce
Mykotoxiny - stanovení Extrakce účelem je převést co největší podíl stanovované látky ze vzorku do co nejmenšího objemu vhodného rozpouštědla s co nejmenším podílem rušících látek způsob extrakce závisí na fyzikálně-chemických vlastnostech komodit kontaminovaných mykotoxiny a na zvoleném způsobu přečištění extraktů
Mykotoxiny - stanovení Čištění extraktu zbavení primárního extraktu nežádoucích látek čištění ve fázích kapalina - kapalina, kapalina - pevná látka a čištění imunoafinní čištěním kapalina-kapalina převádíme testovanou látku z jednoho rozpouštědla do druhého, popř. převádíme do jiného rozpouštědla nežádoucí extrahované látky (ochratoxin A nebo kyselina cyklopiazonová) čištěním kapalina - pevná látka dochází k sorpci testované látky na povrchu vhodného sorbentu, vymytí nežádoucích zároveň adsorbovaných látek a následnému vymytí testované látky imunoafinní kolonky představují prostupný gel v němž jsou ukotveny specifické protilátky proti mykotoxinu - skupině mykotoxinů. Extrakt je protlačen (nebo volně proteče) přes kolonku, nežádoucí látky jsou vymyty a poté je kolonka promyta rozpouštědlem, které ruší vazbu mykotoxin - protilátka.
Mykotoxiny - stanovení Metody fyzikálně-chemické sloupcová chromatografie v současné době používána k předčišťování vzorků, které jsou poté analyzovány jinou metodou tenkovrstevná chromatografie (TLC) - zpravidla méně přesná, ale čištění vzorku může být méně náročné vysokotlaká kapalinová chromatografie (HPLC) - vysoká přesnost, ale je nutno použít velmi účinné čistící postupy, při nichž dochází ke značným ztrátám detekce fluorimetricky
Mykotoxiny - stanovení Metody biologické imunologické metody RIA a ELISA mykotoxiny působí jako hapteny, to znamená, že po navázání na vhodný nosič (např. bílkovinu) vyvolají tvorbu specifických protilátek imunologických metod se používá především v rámci výzkumu, popř. vnitropodnikového sledování, kde vynikne jejich vysoká citlivost (alespoň v případě aflatoxinů, ochratoxinu, zearalenonu apod.) Metody toxikologické používají se minimálně testy, detekující estrogenní látky (zearalenon) na základě zvětšení dělohy u nedospělých samiček potkanů a myší testy na bezobratlých (žábronožky, prvoci)
Mykotoxiny - stanovení Metody mikrobiologické detekce blokády růstu testovacího kmene kolem disků s obsahem mykotoxinu podezření na konkrétní mykotoxin je dáno jednak postupem přípravy vzorku a použitím kmene se selektivně vysokou citlivostí k určitému mykotoxinu - skupině mykotoxinů
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Xerofilní a termotolerantní houby rostou na substrátech s nízkou vodní aktivitou (substráty sušší, s vysokými koncentracemi cukrů nebo solí) např.: vysychající pečivo většinou se jedná o zelené porosty rodu Eurotium (anamorfa Aspergillus) častěji se vyskytují v tropických a subtropických oblastech k nám jsou dováženy s kořením (např. pepř, nové koření) nebo jiných sušených produktech ve formě spor jsou termotolerantní askospory krátkodobě přežívají teplotu 60 65 C pro kultivaci se používají média s vyšším obsahem cukru (např.: CY20S Czapkův agar s kvasničným extraktem a 20% sacharózy) http://liveandlearnfarm.com/penicillin-and-bread-crumbs-through-history/
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Xerofilní a termotolerantní houby Wallemia sebi nepohlavně se rozmnožující bazidiomyceta na bílém pečivu (housky, rohlíky, arabský chléb) vytváří hnědé 1-2 mm velké kolonie http://ziva.avcr.cz/2012-5/houby-v-nasich-domacnostech-aneb-o-cem-doma-vite-i-nevite.html https://en.wikipedia.org/wiki/wallemia_sebi
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Psychrotolerantní houby Cladosporium nacházen na stěnách zanedbaných lednic nebo zapomenutých potravinách http://mold-awareness.org/cladosporium-common-mold-spore/ http://advancedbio-treatment.com/mold-a-stealthy-assassin/
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Psychrotolerantní houby Thielaviopsis thielavioides způsobuje tmavé skvrny na uskladněné mrkvi http://www.pilzforum.eu/board/thema-schimmelpilze-auf-karotten
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Psychrotolerantní houby Botrytis cinerea plíseň šedá - za chladného a deštivého počasí napadá dužnaté plody např.: jahody, réva vinná - ušlechtilá plíseň výroba botrytického vína anamorfa http://www.plantwise.org/default.aspx?site=234&page=4279&dsid=9611 http://www.biolib.cz/en/image/id100649/ teleomorfa http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1364-3703.2011.00783.x/full http://botany.upol.cz/atlasy/system/gallery.php?entry=botryotinia%20fuckeliana
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Psychrotolerantní houby Penicillium digitatum, P. italicum a P. expansum původci hnilob ovoce v domácnostech P. digitatum a P. italicum se vyskytují výlučně na citrusech (citrony, pomeranče, grepy aj.) P. digitatum způsobuje zelenou hnilobu P. italicum modrou hnilobu http://thecitrusguy.blogspot.cz/2012_03_01_archive.html
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Psychrotolerantní houby Monilia fructigena hniloba ovoce (většinou si houbu přineseme již na ovoci)
Další mikromycety kontaminující potraviny Food borne fungi Mikroskopické houby v nápojích druhy rodu Fusarium a Trichoderma nalezeny v sycených a ochucených minerálních vodách https://en.wikipedia.org/wiki/trichoderma http://www.apsnet.org/edcenter/intropp/lessons/fungi/ascomycetes/pages/fusarium.aspx
Modelové odzkoušení uchovávání vybraných potravin v domácnosti Po 72 hodinách uchování koncentrace aflatoxinů několikanásobně překročila hygienické limity Aflatoxiny jsou produkovány při pokojové teplotě i v chladničce při teplotě 8 C
Modelové odzkoušení uchovávání vybraných potravin v domácnosti Plísňové sýry camembertského typu, které byly uchované v domácnosti při pokojové teplotě, obsahovaly mykotoxin kyselinu cyklopiazonovou. Kyselina cyklopiazonová je produkována ve vyšších koncentracích "kulturní plísní Penicillium camemberti při teplotě nad 10 C. Jablko kontaminované sporami toxinogenní plísně Penicillium expansum obsahovalo vysoké koncentrace mykotoxinu patulinu jak v nahnilé, tak i ve zdravé vykrájené části. Plesnivý jablečný mošt osídlený sporami plísně rodu Byssochlamys, které přečkaly konzervační záhřev 85 C po dobu 20 minut, obsahoval mykotoxin patulin. https://www.plantmanagementnetwork.org/pub/php/research/2006/storage/