II DAT Amphetamines II Informace pro objednání 04512936 190 DAT Amphetamines II (200 testů) 03304671 190 Preciset DAT Plus I CAL 1 6 (6 5 ml) 03304680 190 Preciset DAT Plus II CAL 1 6 (6 5 ml) 03304698 190 C.f.a.s. DAT Qualitative Plus (6 5 ml) 04590856 190 C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical (3 5 ml) 03312968 190 03312950 190 04500873 190 03312976 190 Control Set DAT II (pro stanovení 300 ) PreciPos DAT Set II (2 10 ml) Preci DAT Set II (2 10 ml) Control Set DAT I (pro stanovení 500 ) PreciPos DAT Set I (2 10 ml) Preci DAT Set I (2 10 ml) Control Set DAT Clinical (pro stanovení 500 ) PreciPos DAT Clinical (2 10 ml) Preci DAT Clinical (2 10 ml) Control Set DAT III (pro stanovení s cut-off 1000 ) PreciPos DAT Set III (2 10 ml) Preci DAT Set III (2 10 ml) Systémové ID 07 6835 9 Analyzátory, na kterých lze cobas c pack použít COBAS INTEGRA 400 plus COBAS INTEGRA 800 Česky Systémové informace Test AM3S2, test-id 0 358 pro semikvantitativní stanovení, 300 Test AM5S2, test-id 0 359 pro semikvantitativní stanovení, 500 Test AM1S2, test-id 0 360 pro semikvantitativní stanovení, 1000 Test AM3Q2, test-id 0 330 pro kvalitativní stanovení, 300 Test AM5Q2, test-id 0 340 pro kvalitativní stanovení, 500 Test AM1Q2, test-id 0 350 pro kvalitativní stanovení, 1000 Test AM5QC, test-id 0 341 pro kvalitativní stanovení, 500, použitím C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical Použití Amphetamines II (II) je in vitro diagnostický test pro kvalitativní a semikvantitativní detekci amfetaminů a metamfetaminů v lidské moči na systémech COBAS INTEGRA při koncentraci cut-off 300, 500 a 1000 při kalibraci d metamfetaminem. Získat lze semikvantitativní výsledky testu, které umožňují laboratořím určit využití stanovení jako součást programu kontroly kvality. Semikvantitativní stanovení slouží k vhodného naředění potvrzením konfirmační metody jako je plynová chromatografie/hmotnostní spektrometrie (). Amphetamines II poskytuje pouze předběžný analytický výsledek. K získání potvrzeného analytického výsledku se musí použít více specifická alternativní chemická metoda. Preferovanou konfirmační metodou je. 1 Výsledek testu užívání drog, zvláště je-li předběžně pozitivní, je třeba hodnotit s klinickým zřetelem a odborným úsudkem. Souhrn Amfetaminy jsou známy jako sympatomimetické aminy, jelikož napodobují účinky stimulace sympatetického nervového systému. Tyto malé molekuly založené na ß fenyletylaminu strukturálně připomínají katecholamin. Substitucí vznikla široká škála kdekoliv ve struktuře. Amfetaminy jsou silné stimulanty centrálního nervového systému. Mohou zvyšovat bdělost, fyzickou aktivitu a potlačovat chuť k jídlu. Amfetaminy mají omezenou indikaci a schválení pro použití při ADHD, narkolepsii a obezitě. Vzhledem k tomu, že tyto stimulanty CNS navozují pocit sebevědomí, pohody a euforie, jsou tyto látky vysoce návykové, hojně užívané, a proto kontrolované. 2 Užívání může mít zdravotní, psychologické a sociální důsledky. Mezi negativní zdravotní účinky patří ztráta paměti, agresivita, psychotické chování, poškození srdce, podvýživa a závažné dentální problémy. 3 Amfetaminy si může jedinec aplikovat perorálně nebo nitrožilně v množstvích až 2000 mg denně u těžce závislých. Je metabolitem mnoha jiných látek včetně metamfetaminu. Běžně je zhruba 30 vyloučeno v nezměněné podobě v 24hod. moči, to se ale může změnit až k 74 v kyselé moči nebo klesnout až k 1 v zásadité moči. 4 Stanovení Amphetamines II je kalibrováno d metamfetaminem, a proto je citlivost na amfetaminy jiná než na d metamfetaminy, jak je uvedeno v části "Analytická specifičnost". Princip testu Toto stanovení je založeno na kinetické interakci mikročástic v roztoku (KIMS) 5,6, která se měří jako změna průchodu světla. V případě absence amfetaminu anebo metamfetaminu ve se volný konjugát drogy váže na protilátku, vázanou na mikročástici, a vytváří agregáty. S probíhající agregací v případě absence amfetaminu anebo metamfetaminu absorbance roste. Jestliže vzorek moči obsahuje amfetamin anebo metamfetamin, probíhá kompetice drogy s konjugátem derivátu drogy o protilátku vázanou na mikročástice. Protilátka vázaná na amfetamin anebo metamfetamin není již dostupná pro podporu agregace částic a následný vznik struktury částic je inhibován. Přítomnost amfetaminu anebo metamfetaminu úměrně snižuje nárůst absorbance vůči koncentraci drogy ve. Obsah amfetaminu anebo metamfetaminu se zjišťuje poměrem ke známé hodnotě cut-off koncentrace d metamfetaminu. Reagencie - pracovní roztoky R1 SR Konjugované deriváty amfetaminu a metamfetaminu; pufr; hovězí sérový albumin; 0.09 azid sodný Mikročástice navázané na protilátky amfetaminu a metamfetaminu (monoklonální myší); pufr; hovězí sérový albumin; 0.09 azid sodný R1 je v pozici A a SR je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Věnujte pozornost všem varováním a bezpečnostním opatřením uvedeným v části 1 / Úvod této Příručky metod. Pro USA: Varování: Federální zákon omezuje prodej tohoto přístroje pouze lékařem nebo na jeho pokyn. Zacházení s reagenciemi Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus Všechny nové (nepropíchnuté) cobas c packy před použitím v analyzátoru promíchejte po dobu 1 min. v mixéru kazet. Všechny cobas c packy, které jsou již v užívání, musí být na počátku každého týdne (jedenkrát týdně) promíchány stejným způsobem. Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Připravena k přímému použití. Analyzátor reagencii automaticky promíchá po dobu 1 minuty po propíchnutí cobas c packu a půl minuty při sekvenci "Begin of Day". 1 / 10 II
II DAT Amphetamines II Uskladnění a stabilita Doba skladování při 2 8 C: Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus Na palubě při použití při 10 15 C Analyzátor COBAS INTEGRA 800 Na palubě při použití při 8 C Čtěte datum exspirace na štítku balení cobas c pack 12 týdnů 12 týdnů Reagencie nezamrazujte. Reagencie, které byly zmrazené, se nesmí použít. Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Moč: Vzorky moče odebírejte do čistých skleněných či plastových nádobek. Vzorky čerstvé moče nepotřebují zvláštní předúpravu nebo zacházení, ale měly by být ochráněny před kontaminací při pipetování. Vzorky by měly být v běžném fyziologickém rozmezí ph 5 8. Nejsou potřeba žádná aditiva ani konzervans. Doporučujeme uchovávat vzorky při teplotě 2 8 C a zpracovat je do 5 dnů od odběru. 7 Velmi zakalené vzorky před analýzou zcentrifugujte. Příměs či naředění vzorků může způsobit chybný výsledek. Při podezření, že byl vzorek znehodnocen, proveďte nový odběr. Testování validity se vyžaduje u vzorků odebíraných podle Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. 8 Varování: Ředění by mělo být použito jen při jejich přípravě pro ale jinak není vhodné. Postup ředění, je-li použit, by měl být validován. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Aplikace pro moč Definice testu COBAS INTEGRA 400 plus Semikvantitativní Kvalitativní Způsob Absorbance Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Koncový bod Způsob reakce R1-S-SR R1-S-SR Směr reakce Nárůst Nárůst Start reakce SR SR Vlnová délka A 659 nm 659 nm Rozmezí testu AM3S2 0-2000 0-2000 AM3Q2 AM5S2, AM1S2 0-5000 0-5000 AM5Q2, AM5QC, AM1Q2 s následným ředěním AM3S2 0-20000 AM5S2, AM1S2 0-50000 Faktor postdiluce Doporučuje se 10 a) Ne Výpočet první/posl. 51/70 51/70 Jednotka a) Pro použití při výpočtu koncentrace při přípravě pro analýzu. Pipetovací parametry AM3S2, AM3Q2 Diluent (H 2 O) Vzorek 10 µl 5 µl SR 47 µl 5 µl Celkový objem 147 µl AM5S2, AM5Q2, AM5QC Diluent (H 2 O) Vzorek 7.5 µl 5 µl SR 47 µl 5 µl Celkový objem 144.5 µl AM1S2, AM1Q2 Diluent (H 2 O) Vzorek 5 µl 5 µl SR 47 µl 5 µl Celkový objem 142 µl Definice testu COBAS INTEGRA 800 Semikvantitativní Kvalitativní Způsob Absorbance Absorbance Způsob výpočtu abs. Koncový bod Koncový bod Způsob reakce R1-S-SR R1-S-SR Směr reakce Nárůst Nárůst Start reakce SR SR Vlnová délka A 659 nm 659 nm Rozmezí testu AM3S2 0-2000 0-2000 AM5S2, AM1S2 0-5000 s následným ředěním AM3S2 0-20000 AM5S2, AM1S2 0-50000 Faktor postdiluce Doporučuje se 10 b) Ne Výpočet první/posl. 46/86 46/86 Jednotka b) Pro použití při výpočtu koncentrace při přípravě pro analýzu. Pipetovací parametry AM3S2, AM3Q2 Diluent (H 2 O) Vzorek 10 µl 5 µl SR 47 µl 3 µl Celkový objem 145 µl AM5S2, AM5Q2, AM5QC Diluent (H 2 O) Vzorek 7.5 µl 5 µl SR 47 µl 3 µl Celkový objem 142.5 µl AM1S2, AM1Q2 Diluent (H 2 O) Vzorek 5 µl 5 µl SR 47 µl 3 µl Celkový objem 140 µl II 2 / 10
II DAT Amphetamines II Kalibrace Kalibrátory Semikvantitativní aplikace AM3S2, 0-358 Kalibrátory Preciset DAT Plus II, CAL 1 6 0, 150, 300, 600, 1000, 2000 d metamfetamin (300 cut-off, DATS8, systémové ID 07 6796 4) AM5S2, 0-359; AM1S2, 0-360 Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 6 0, 250, 500, 1000, 3000, 5000 d metamfetamin (500 a 1000 cut-off, DATS2, systémové ID 07 6764 6) Kvalitativní aplikace AM3Q2, 0-330 Kalibrátory Preciset DAT Plus II, CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a kalibrátory Preciset DAT Plus II, CAL 3 300 (300 cut-off, DATQ3, systémové ID 07 6770 0) Pro kvalitativní aplikaci má hodnota cut-off 300 přiřazenou hodnotu 1000. AM5Q2, 0-340 Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a C.f.a.s. DAT Qualitative Plus 500 (500 cut-off, DATQ1, systémové ID 07 6744 1) Pro kvalitativní aplikaci má hodnota cut-off 500 přiřazenou hodnotu 1000. AM5QC, 0-341 Kalibrátory Preciset DAT Plus I nebo II, CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a C.f.a.s. DAT Qualitative Plus Clinical 500 (500 cut-off, DATQ5, systémové ID 07 6880 4) Pro kvalitativní aplikaci má hodnota cut-off 500 přiřazenou hodnotu 1000. AM1Q2, 0-350 Kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 1 0 nebo deionizovaná voda a kalibrátory Preciset DAT Plus I, CAL 4 1000 (1000 cut-off, DATQ2, systémové ID 07 6768 9) Mód kalibrace Opakování kalibrace Pro kvalitativní aplikaci má hodnota cut-off 1000 přiřazenou hodnotu 1000. Semikvantitativní aplikace Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus: Logit/log 5 (AM1S2, 0-360) Logit/log 4 (AM3S2, 0-358; AM5S2, 0-359) Analyzátor COBAS INTEGRA 800: Logit/log 4 Kvalitativní aplikace Lineární regrese Doporučen duplikát Kalibrační interval Analyzátor COBAS INTEGRA 400 plus: Každou šarži, každé 4 týdny a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Analyzátor COBAS INTEGRA 800: Každou šarži, každé 4 týdny a jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Kalibrační křivka je vytvářena použitím kalibrátorů. Kalibrátory musí být umístěny podle hodnot koncentrace od nejvyšší po nejnižší do CAL/QC stojánku. Vytvořená křivka je uložena v paměti systému COBAS INTEGRA a podle potřeby znovu vyvolána. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná dle primární referenční metody. Kontrola kvality Kontrola kvality Pořadí kontrol Kontrola po kalibraci 300 cut-off Control Set DAT II PreciPos DAT Set II (DAT2P, systémové ID 07 6771 9) Preci DAT Set II (DAT2N, systémové ID 07 6772 7) 500 cut-off Control Set DAT I nebo PreciPos DAT Set I (DAT1P, systémové ID 07 6753 0) Preci DAT Set I (DAT1N, systémové ID 07 6754 9) Control Set DAT Clinical PreciPos DAT Clinical (DATCP, systémové ID 07 6879 0) Preci DAT Clinical (DATCN, systémové ID 07 6878 2) 1000 cut-off Control Set DAT III PreciPos DAT Set III (DAT3P, systémové ID 07 6773 5) Preci DAT Set III (DAT3N, systémové ID 07 6774 3) Určeno uživatelem Doporučena Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. léčiva v Control Set DAT I, II, III a Clinical byly verifikované. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Systémy COBAS INTEGRA vykazují výsledky s následujícím označením: Vykazování semikvantitativního výsledku AM3S2 (cut-off 300 ) Bez označení ativní < 300 3 / 10 II
II DAT Amphetamines II <TEST RNG ativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 2000 POS 300 Pozitivní 300 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na hladině cut-off 300. Vykazování semikvantitativního výsledku AM5S2 (cut-off 500 ) Bez označení ativní < 500 <TEST RNG ativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 5000 POS 500 Pozitivní 500 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na hladině cut-off 500. Vykazování semikvantitativního výsledku AM1S2 (cut-off 1000 ) Bez označení ativní < 1000 <TEST RNG ativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 5000 POS 1000 Pozitivní 1000 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na hladině cut-off 1000. Vykazování kvalitativního výsledku AM3Q2 (cut-off 300 ) Bez označení ativní < 1000 <TEST RNG ativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 2000 POS 1000 Pozitivní 1000 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na přiřazení hodnoty 1000 cut-off hodnotě 300. Vykazování kvalitativního výsledku AM5Q2, AM5QC (cut-off 500 ) Bez označení ativní < 1000 <TEST RNG ativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 2000 POS 1000 Pozitivní 1000 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na přiřazení hodnoty 1000 cut-off hodnotě 500. Vykazování kvalitativního výsledku AM1Q2 (cut-off 1000 ) Bez označení ativní < 1000 <TEST RNG ativní < 0 >TEST RNG Pozitivní > 2000 POS 1000 Pozitivní 1000 Výše uvedená rozmezí hodnot jsou založená na přiřazení hodnoty 1000 cut-off hodnotě 1000. Semikvantitativní hodnocení výsledků Semikvantifikaci předběžně pozitivních výsledků by měly laboratoře použít pouze k vhodného naředění pro potvrzení konfirmační metodou jakou je. Laboratoři rovněž umožňuje zřídit postupy kontroly kvality a stanovit využití kontroly. Upozornění: Při použití následného ředění (ředění 1:10) zajistěte, aby nedošlo k přílišnému naředění, ředěný výsledek musí mít hodnotu alespoň poloviny hodnoty cut-off x10. Jestliže je naředěný výsledek menší než polovina hodnoty cut-off krát 10, zopakujte stanovení s menším ředěním. Ředění, která mají výsledky v blízkosti cut-off, poskytují nejpřesnější stanovení. Chcete-li určit koncentraci předběžně pozitivního, vynásobte výsledek odpovídajícím faktorem ředění. Ředění by mělo být použito jen při přípravě hodnot pro. Omezení - interference Informace o látkách testovaných tímto stanovením jsou uvedeny v kapitole "Specifické údaje o využití" tohoto dokumentu. Možné však je, že mohou interferovat i jiné komponenty nebo faktory, které mohou negativně ovlivnit výsledek (např. technická chyba nebo chyba postupu). Předběžný pozitivní výsledek dosažený touto metodou indikuje přítomnost amfetaminu anebo metamfetaminu v moči. Nestanovuje však míru intoxikace. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech COBAS INTEGRA je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny a pro nejnovější verzi seznamu Extra mycích cyklů čtěte, prosím, metodický list CLEAN. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Očekávané hodnoty U osob, které nepožili amfetaminy anebo metamfetaminy, by neměla být přítomná žádná látka. Specifické údaje o využití Reprezentativní údaje o využití pro analyzátory COBAS INTEGRA jsou uvedeny níže. získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Roztok d metamfetaminu () (1 mg/ml) byl přidán do 9 vzorků, získaných z poolované lidské moči, aby byly dosaženy koncentrace při přibl. hodnotách cut-off 100, 75, 50, 25, ±0, +25, +50, +75 a +100. Tyto vzorky byly testované na ve kvalitativních a semikvantitativních režimech. V souladu s protokolem pro CLSI (EP5 A2) byly vzorky testované ve 2 opakováních na sérii, 2 sériích denně po dobu 21 dní, celkem n = 84. Kvalitativní - 300 cut-off # Poz 84 84 / 0 Poz -75 84 84 / 0 Poz -50 84 84 / 0 Poz -25 84 83 / 1 Poz cut-off 84 27 / 57 Poz +25 84 0 / 84 Poz +50 84 0 / 84 Poz +75 84 0 / 84 Poz +100 84 0 / 84 Poz Kvalitativní - 500 cut-off # Poz 84 84 / 0 Poz II 4 / 10
II DAT Amphetamines II # Poz -75 84 84 / 0 Poz -50 84 84 / 0 Poz -25 84 84 / 0 Poz cut-off 84 28 / 56 Poz +25 84 0 / 84 Poz +50 84 0 / 84 Poz +75 84 0 / 84 Poz +100 84 0 / 84 Poz Kvalitativní - 1000 cut-off # Poz 84 84 / 0 Poz -75 84 84 / 0 Poz -50 84 84 / 0 Poz -25 84 84 / 0 Poz cut-off 84 13 / 71 Poz +25 84 0 / 84 Poz +50 84 0 / 84 Poz +75 84 0 / 84 Poz +100 84 0 / 84 Poz Semikvantitativní - 300 cut-off 84 / 0 9.4 95.4 12.2 123.8-75 84 / 0 12.9 15.5 15.7 18.8-50 84 / 0 14.3 9.0 17.7 11.2-25 84 / 0 13.2 5.4 19.8 8.2 cut-off 34 / 50 23.2 7.6 23.5 7.7 +25 0 / 84 20.9 5.2 24.4 6.1 +50 0 / 84 22.5 5.0 29.5 6.6 +75 0 / 84 27.4 5.0 36.5 6.6 +100 0 / 84 35.7 5.7 40.8 6.5 Semikvantitativní - 500 cut-off 84 / 0 9.6 117.3 11.0 134.1-75 84 / 0 14.6 10.5 20.6 14.9-50 84 / 0 20.0 7.9 21.9 8.6-25 84 / 0 24.1 6.2 27.2 7.0 cut-off 39 / 45 28.2 5.6 39.4 7.8 +25 0 / 84 31.5 4.9 48.5 7.5 +50 0 / 84 34.5 4.8 49.5 6.8 +75 0 / 84 41.6 5.0 62.3 7.5 +100 0 / 84 46.7 4.6 72.4 7.1 Semikvantitativní - 1000 cut-off 84 / 0 20.2 97.2 24.9 119.5-75 84 / 0 25.3 9.3 30.7 11.2-50 84 / 0 33.3 6.4 39.4 7.5-25 84 / 0 34.3 4.6 52.1 7.0 cut-off 25 / 59 56.9 5.5 71.3 6.9 +25 0 / 84 56.6 4.2 79.3 5.9 +50 0 / 84 63.6 4.0 81.3 5.2 +75 0 / 84 60.3 3.5 101.6 5.9 +100 0 / 84 108.1 5.1 126.6 6.0 Stejný experiment i byl opakován použitím d amfetaminu () jako cílového analytu místo d metamfetaminu. Následující tabulky zobrazují výsledky získané analyzátorem COBAS INTEGRA 800. Kvalitativní - 300 cut-off # Poz 84 84 / 0 Poz -75 84 84 / 0 Poz -50 84 84 / 0 Poz -25 84 83 / 1 Poz cut-off 84 2 / 82 Poz +25 84 0 / 84 Poz +50 84 0 / 84 Poz +75 84 0 / 84 Poz +100 84 0 / 84 Poz Kvalitativní - 500 cut-off # Poz 84 84 / 0 Poz -75 84 84 / 0 Poz -50 84 84 / 0 Poz -25 84 82 / 2 Poz cut-off 84 6 / 78 Poz +25 84 0 / 84 Poz +50 84 0 / 84 Poz +75 84 0 / 84 Poz +100 84 0 / 84 Poz 5 / 10 II
II DAT Amphetamines II Kvalitativní - 1000 cut-off # Poz 84 84 / 0 Poz -75 84 84 / 0 Poz -50 84 84 / 0 Poz -25 84 82 / 2 Poz cut-off 84 7 / 77 Poz +25 84 1 / 83 Poz +50 84 0 / 84 Poz +75 84 0 / 84 Poz +100 84 0 / 84 Poz Semikvantitativní - 300 cut-off 84 / 0 8.6 110.0 10.6 135.7-75 84 / 0 10.4 16.8 13.6 21.9-50 84 / 0 14.6 10.0 19.9 13.6-25 84 / 0 15.7 6.6 20.6 8.7 cut-off 4 / 80 25.8 7.4 28.5 8.2 +25 0 / 84 30.7 7.1 32.2 7.4 +50 0 / 84 31.1 6.1 37.6 7.3 +75 0 / 84 29.1 4.9 41.2 7.0 +100 0 / 84 36.2 5.3 44.6 6.5 Semikvantitativní - 500 cut-off 84 / 0 12.6 117.0 13.2 122.5-75 84 / 0 21.4 16.9 25.2 20.0-50 84 / 0 18.2 6.9 25.6 9.8-25 83 / 1 25.6 5.7 29.7 6.6 cut-off 0 / 84 29.1 4.7 38.3 6.2 +25 0 / 84 42.0 5.5 51.7 6.8 +50 0 / 84 40.3 4.6 49.9 5.7 +75 0 / 84 58.7 5.9 59.7 6.0 +100 0 / 84 79.0 7.0 86.3 7.6 Semikvantitativní - 1000 cut-off 84 / 0 15.9 111.1 19.0 132.6-75 84 / 0 21.9 9.2 29.8 12.5-50 84 / 0 30.3 5.4 40.9 7.3-25 84 / 0 44.3 5.2 55.0 6.4 cut-off 6 / 78 53.4 4.8 84.3 7.6 +25 0 / 84 72.5 5.6 87.5 6.7 +50 0 / 84 65.7 4.4 96.6 6.5 +75 0 / 84 74.3 4.5 105.2 6.4 +100 0 / 84 106.7 5.9 131.4 7.3 Správnost Správnost tohoto stanovení byla měřená podle výsledků d metamfetaminu nebo d amfetaminu. Vyhodnocené koncentrace cut-off pro testování byly stejné jako screeningové cut-off stanovení. 36 vzorků moči získaných z klinické laboratoře, bylo potvrzeno na d metamfetamin a d amfetamin jako negativní a vyhodnoceno stanovením Amphetamines II. 100 těchto normálních vzorků moči bylo negativních vzhledem ke cut-off 300, 500 a 1000, a to jak se semikvantitativním, tak i kvalitativním stanovením. 4 další nezměněné vzorky, obsahující d metamfetamin mezi 85 204 (potvrzeno ) byly testované 500 cut-off a poskytly negativní výsledky. 36 vzorků získaných klinickou laboratoří, kde byly stanovené jako předběžně pozitivní komerčně dostupným enzymovým imunostanovením a byly následně potvrzené metodou na d metamfetamin nebo d amfetamin, bylo vyhodnoceno stanovením Amphetamines II. 100 těchto vzorků bylo pozitivních vzhledem ke cut-off 300, 500 a 1000. Navíc bylo pro každé cut-off testováno několik nezměněných vzorků blízko cut-off. Tyto vzorky spadly do negativního rozmezí blízko cut-off (mezi 50 a cut-off) a pozitivního rozmezí blízko cut-off (mezi cut-off a +50 ). Pro každé cut-off byly testované 4 negativní vzorky blízko cut-off a 4 pozitivní vzorky blízko cut-off. Údaje ze studií správnosti popsaných výše byly kombinované s údaji vytvořenými z nezměněných vzorků moči blízko cut-off. Následující výsledky byly získané stanovením Amphetamines II na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 vůči hodnotám pro d metamfetamin i d amfetamin. kvalitativního stanovení Amphetamines II () Stanovení DAT II Nízké 300 cut-off ativní (mezi 50 a cut-off) Pozitivní (mezi cutoff a +50 ) Vysoce pozitivní (více než +50 ) Procentuální shoda s () Pozitivní 0 4 4 36 100 ativní 36 0 0 0 90 500 cut-off Pozitivní 0 4 4 36 100 ativní 40 0 0 0 91 1000 cut-off Pozitivní 0 4 4 36 100 ativní 36 0 0 0 90 II 6 / 10
II DAT Amphetamines II semikvantitativního stanovení Amphetamines II () Stanovení DAT II Nízké 300 cut-off ativní (mezi 50 a cut-off) Pozitivní (mezi cutoff a +50 ) Vysoce pozitivní (více než +50 ) Procentuální shoda s () Pozitivní 0 4 4 36 100 ativní 36 0 0 0 90 500 cut-off Pozitivní 0 4 4 36 100 ativní 40 0 0 0 91 1000 cut-off Pozitivní 0 4 4 36 100 ativní 36 0 0 0 90 Vzorky správnosti byly rozdělené do kategorií pouze na základě koncentrace d metamfetaminu. Tabulka níže zobrazuje ty vzorky s koncentrací d metamfetaminu pod hodnotou cut-off, u kterých byl na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 pozorovaný výsledek pozitivní. Sloupec očekávaných výsledků zobrazuje výsledek očekávaný stanovením Amphetamines II, založený na hodnotě d metamfetaminu () v porovnání s cut-off. Souhrn odchylných výsledků () Hodnota cutoff () DAT II POZORO VANÉ DAT II OČEKÁVA NÉ 500 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 500 (SQ, Q) Pozitivní ativní 500 (SQ, Q) Pozitivní ativní 500 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 1000 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 1000 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 1000 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 1000 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní () 173 181 278 101 171 220 291 145 488 466 325 171 291 145 472 650 706 443 540 693 769 395 572 432 / Metabolit kvalitativního stanovení Amphetamines II () Stanovení DAT II Nízké 300 cut-off ativní (mezi 50 a cut-off) Pozitivní (mezi cutoff a +50 ) Vysoce pozitivní (více než +50 ) Procentuální shoda s () Pozitivní 0 3 4 36 100 ativní 36 1 0 0 92.5 500 cut-off Pozitivní 0 3 4 36 100 ativní 36 1 0 0 92.5 1000 cut-off Pozitivní 0 1 4 36 100 ativní 36 3 0 0 97.5 semikvantitativního stanovení Amphetamines II () Stanovení DAT II Nízké 300 cut-off ativní (mezi 50 a cut-off) Pozitivní (mezi cutoff a +50 ) Vysoce pozitivní (více než +50 ) Procentuální shoda s () Pozitivní 0 3 4 36 100 ativní 36 1 0 0 92.5 500 cut-off Pozitivní 0 3 4 36 100 ativní 36 1 0 0 92.5 1000 cut-off Pozitivní 0 2 4 36 100 ativní 36 2 0 0 95 Vzorky správnosti byly rozdělené do kategorií pouze na základě koncentrace d amfetaminu. Tabulka níže zobrazuje ty vzorky s koncentrací d amfetaminu pod hodnotou cut-off, u kterých byl na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 pozorovaný výsledek pozitivní. Sloupec očekávaných výsledků zobrazuje výsledek očekávaný stanovením Amphetamines II, založený na hodnotě d amfetaminu () v porovnání s cut-off. Souhrn odchylných výsledků () Hodnota cutoff () DAT II POZORO VANÉ DAT II OČEKÁVA NÉ 500 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní () 157 363 181 173 220 171 438 121 / Metabolit 7 / 10 II
II DAT Amphetamines II Hodnota cutoff () DAT II POZORO VANÉ DAT II OČEKÁVA NÉ 500 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 500 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní () 457 1152 443 706 / Metabolit 1000 (SQ,) Pozitivní ativní 920 1000 (SQ, Q) Pozitivní Pozitivní 837 1163 Analytická specifičnost Specifičnost Amphetamines II na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 pro různé fenetylaminy a strukturálně příbuzné sloučeniny byla měřená vytvořením inhibiční křivky pro každou uvedenou sloučeninu pro semikvantitativní i kvalitativní režimy a určením přibližného množství každé sloučeniny, která je ekvivalentní reaktivitě stanovení při cut-off hodnotě 300, 500 a 1000 d metamfetaminu. Tabulky níže zobrazují semikvantitativní výsledky studie pro každé cut-off stanovení. Stejné vzorky byly zpracovávané v kvalitativním režimu a všechny zrekuperovaly náležitě negativně nebo pozitivně, na základě vypočítané křížové reaktivity. ekvivalent k 300 Přibližné procento křížové reaktivity ± MDMA c) 114 264 PMA d) 143 210 PMMA e) 181 166 ± MDA f) 249 121 ± MDEA i) 285 105 d-amfetamin 311 96 g) d-metamfetamin 327 92 ± MBDB HCl h) 339 88 ± BDB HCl j) 648 46 meta-chlorfenylpiperazin k) 1322 23 1-metyl-3-fenylpropylamin l) 1792 17 l-metamfetamin 2754 11 l-amfetamin 6443 5 Dimetylamylamin m) 21111 1.4 Fendimetrazin 47473 0.63 Fentermin 66385 0.45 Tyramin 86271 0.35 d-pseudoefedrin 87578 0.34 l-efedrin 94792 0.32 d,l-fenylpropanolamin HCl 280374 0.11 d-efedrin 329670 0.09 ekvivalent k 500 Přibližné procento křížové reaktivity ± MDMA c) 173 289 PMA d) 231 216 PMMA e) 299 167 ekvivalent k 500 Přibližné procento křížové reaktivity ± MDA f) 433 115 d-metamfetamin 444 113 d-amfetamin 460 109 g) ± MDEA i) 494 101 ± MBDB HCl h) 713 70 ± BDB HCl j) 1209 41 meta-chlorfenylpiperazin k) 2414 21 1-metyl-3-fenylpropylamin l) 2925 17 l-metamfetamin 4098 12 l-amfetamin 11174 4 Fendimetrazin 72500 0.69 Fentermin 118483 0.42 Dimetylamylamin m) 37701 1.3 d-pseudoefedrin 132275 0.38 Tyramin 141243 0.35 l-efedrin 154321 0.32 d,l-fenylpropanolamin HCl 390625 0.13 d-efedrin 413223 0.12 ekvivalent k 1000 Přibližné procento křížové reaktivity ± MDMA c) 446 224 PMA d) 599 167 PMMA e) 695 144 ± MDA f) 785 127 d-metamfetamin 970 103 d-amfetamin 1024 98 g) ± MBDB HCl h) 1194 84 ± MDEA i) 1203 83 ± BDB HCl j) 2262 44 meta-chlorfenylpiperazin k) 4946 20 1-metyl-3-fenylpropylamin l) 5479 18 l-metamfetamin 9008 11 l-amfetamin 23445 4 Dimethylamylamin m) 79780 1.3 Fendimetrazin 156740 0.64 d-pseudoefedrin 269542 0.37 Fentermin 294118 0.34 l-efedrin 317460 0.32 Tyramin 323625 0.31 d-efedrin 793651 0.13 d,l-fenylpropanolamin HCl 1111111 0.09 c) d,l-3,4-metylendioxymetamfetamin d) para-metoxyamfetamin e) para-metoxymetamfetamin f) d,l-3,4-metylendioxyamfetamin g) Reprezentativní údaje z různých šarží ukazují křížovou reaktivitu v rozmezí přibl. 75 125 h) d,l-n-metyl-1-(3,4-metylendioxyfenyl)-2-butanamin hydrochlorid II 8 / 10
II DAT Amphetamines II i) d,l-3,4-metylendioxyetylamfetamin j) d,l-3,4-metylendioxyfenyl-2-butanamin hydrochlorid k) 1-(3-chlorfenyl)piperazin (mcpp), hlavní metabolit trazodonu l) APB, metabolit Labetalolu m) 4-methylhexan-2-amin, DMAA Interference a křížová reaktivita s nepříbuznými léčivy Následující sloučeniny byly v uvedených koncentracích přidány do poolu lidské moči obohacené buď o d amfetamin nebo d metamfetamin při přibl. negativních a pozitivních koncentracích kontroly pro každé cut-off (± 25 cut-off stanovení). Pro každou sloučeninu zrekuperovaly vzorky v kontrolní hladině řádně pro cut-off 300, 500 a 1000, a to v semikvantitativních i kvalitativních režimech. () Semikvantitativní Všechny cut-off Nízká Ktrl Vysoká Ktrl Kvalitativní Všechny cut-off Nízká Ktrl Vysoká Ktrl Acetaminofen 100000 NEG POS NEG POS Kys. acetylsalicylová 100000 NEG POS NEG POS Amitriptylin 100000 NEG POS NEG POS Aspartam 40000 NEG POS NEG POS Benzokain 100000 NEG POS NEG POS Benzoylekgonin 100000 NEG POS NEG POS Kofein 100000 NEG POS NEG POS Kanabidiol 100000 NEG POS NEG POS Kokain 100000 NEG POS NEG POS Kodein 100000 NEG POS NEG POS Desipramin HCl 100000 NEG POS NEG POS Dextrometorfan 100000 NEG POS NEG POS Dextropropoxyfen 100000 NEG POS NEG POS Diazepam 100000 NEG POS NEG POS Digoxin 100000 NEG POS NEG POS Difenhydramin 100000 NEG POS NEG POS Difenylhydantoin 100000 NEG POS NEG POS Doxepin 100000 NEG POS NEG POS Ekgonin 100000 NEG POS NEG POS Ekgoninmetylester 100000 NEG POS NEG POS Erytromycin 100000 NEG POS NEG POS Furosemid 100000 NEG POS NEG POS Guajakol glyceroléter 100000 NEG POS NEG POS Hydrochlorotiazid 100000 NEG POS NEG POS Ibuprofen 100000 NEG POS NEG POS Ketamin 100000 NEG POS NEG POS Levotyroxin 100000 NEG POS NEG POS L 2500 NEG POS NEG POS Meperidin 100000 NEG POS NEG POS Metadon 100000 NEG POS NEG POS Metakvalon 75000 NEG POS NEG POS Morfin 100000 NEG POS NEG POS Naloxon 100000 NEG POS NEG POS Naltrexon 100000 NEG POS NEG POS Naproxen 100000 NEG POS NEG POS Niacinamid 100000 NEG POS NEG POS Nikotin 100000 NEG POS NEG POS Nifedipin 100000 NEG POS NEG POS Nordiazepam 100000 NEG POS NEG POS Omeprazol 100000 NEG POS NEG POS Oxazepam 100000 NEG POS NEG POS Penicilin G 100000 NEG POS NEG POS Fencyklidin 40000 NEG POS NEG POS Fenobarbital 100000 NEG POS NEG POS Chinin 100000 NEG POS NEG POS Sekobarbital 100000 NEG POS NEG POS Tetracyklin 100000 NEG POS NEG POS Δ 9 -THC 10000 NEG POS NEG POS Sloučeniny včetně metylfenidátu byly dodatečně přidané k alikvotům poolované lidské moči bez drog v koncentraci 100000. Žádná z těchto sloučenin ve stanovení nevykázala hodnoty stejné nebo větší než 0.19 křížové reaktivity a žádné výsledky nebyly větší než cut-off stanovení (300, 500 a 1000 ), s následující výjimkou. Sloučeniny labetalol HCl a trazodon byly dodatečně přidány k alikvotům poolované lidské moči bez drog v koncentraci 100000. Ranitidin byl přidán k alikvotům poolované normální lidské moči v koncentraci 50000. Získané výsledky byly v rozmezí 0.21 až 0.36 pro cutoff stanovení 300, 500 a 1000. Křížová reaktivita na L byla testovaná při koncentraci 2500. Získané výsledky byly 0.32 a 0.71 pro stanovení cut-off 300 a 1000. Křížová reaktivita na prokain HCl byla testovaná v moči bez přítomnosti drog při koncentraci 100000. Získané výsledky byly 1.00, 0.99 a 0.90, pro cut-off stanovení 300, 500 a 1000. Interference s jinými látkami Interferující látky byly přidané do moči obsahující d metamfetamin () při 25 a +25 hladiny cut-off při koncentraci uvedené níže. Stejné látky byly dodatečně přidané do moči obsahující d amfetamin () při 25 a +25 hladiny cut-off při koncentraci uvedené níže. Všechny vzorky byly testované a následující výsledky byly získané na analyzátoru COBAS INTEGRA 800: Hodnota v tabulce ukazuje hladinu, při které nebyla pro vzorky obsahující buď d metamfetamin nebo d amfetamin zjištěna žádná interference. Kvalitativní Slčn. 300 cut-off Poz 500 cut-off Poz 1000 cut-off Poz Aceton 7.9 mg/ml Pos Pos Pos Kys. askorbová Konjugovaný bilirubin 10 mg/ml Pos Pos Pos 0.1 mg/ml Pos Pos Pos Kreatinin 5 mg/ml Pos Pos Pos Etanol 7.9 mg/ml Pos Pos Pos Glukóza 12 mg/ml Pos Pos Pos Hemoglobin 1 mg/ml Pos Pos Pos Lidský sérový albumin 3 mg/ml Pos Pos Pos Kys. oxalová 2 mg/ml Pos Pos Pos Chlorid sodný 23 mg/ml Pos Pos Pos Močovina 60 mg/ml Pos Pos Pos Stejný experiment byl proveden v semikvantitativním módu pro každou cutoff. Všechny negativní a pozitivní kontroly v přítomnosti interferující látky řádně zrekuperovaly. 9 / 10 II
II DAT Amphetamines II Byl spuštěn protokol, ve kterém byly testovány vzorky obsahující buď nebo při hladinách kontroly (± 25 cut-off) s relativní hustotou v rozmezí 1.001 až 1.034. Podobně jako u ostatních interferencí ani při extrémních hodnotách specifické hustoty nebyly zaznamenaná žádná křížová kontaminace kontroly u žádného ze 3 cut-off stanovení. Testované byly rovněž vzorky s ph v rozmezí od 4.5 do 8.0 a obsahující buď nebo v kontrolních hladinách (± 25 cut-off). Křížová kontaminace při kterémkoliv ze 3 cut-off byla 5. Jakákoliv modifikace přístroje, jak je zde uvedeno, vyžaduje validaci laboratoří. Odkazy 1 Karch SB, ed. Drug Abuse Handbook. Boca Raton, FL: CRC Press LLC 1998. 2 Borenstein M. Central Nervous System Stimulants. In: Troy D. ed. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. 21st ed. Baltimore, MD: Lippincott Williams & Wilkins Co 2005;1551. 3 NIDA Research Report - Methamphetamine Abuse and Addiction: NIH Publication No. 06-4210. National Institute on Drug Abuse 6001 Executive Blvd. Room 5213, Bethesda, MD 20892-9561. 4 Baselt RC. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 7th ed. Foster City, CA: Biomedical Publications 2004;67. 5 Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Pierce BL, et al. Method comparison of EMIT II and with RIA for drug screening. J Forensic Sci 1993;38:1326-1341. 6 Armbruster DA, Schwarzhoff RH, Hubster EC, et al. Enzyme immunoassay, kinetic microparticle immunoassay, radioimmunoassay, and fluorescence polarization immunoassay compared for drugs-ofabuse screening. Clin Chem 1993;39:2137-2146. 7 Toxicology and Drug Testing in the Clinical Laboratory; Approved Guideline. 2nd ed. (C52-A2). Clinical and Laboratory Standards Institute 2007;27:33. 8 Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. Fed Regist 2008 Nov 25;73:71858-71907. Symboly Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO 15223 1 následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku https://usdiagnostics.roche.com): GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2016, Diagnostics Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com Distribuce v USA: Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v 1-800-428-2336 II 10 / 10