Rychlý test na srdeční troponin I (ctni) v plné krvi, séru nebo plazmě. In vitro diagnostikum pouze pro profesionální použití. ZAMÝŠLENÉ POUŽITÍ ulti med ctni test je rychlý imunochromatografický test pro kvalitativní detekci srdečního troponinu I (ctni) ve vzorcích plné krve, séra nebo plazmy, s cut-off koncentraci 0,5 ng / ml. Slouží jako pomoc při stanovení diagnózy akutního infarktu myokardu (AIM). ctni test je kvalitativní test, který nemůže sledovat vzestup ani pokles ctni v jediném testování. Jediné testování není doporučeno pro sledování AIM. Výsledky testů by měl posoudit lékař společně s výsledky jiných vyšetření a klinickými příznaky pacienta. SOUHRN A VYSVĚTLENÍ TESTU Při infarktu myokardu (MI) je nedostatečně zásobena určitá oblast myokardu kyslíkem. K buněčné smrti dochází bez kyslíku již od 10-15 minut. To má za následek uvolnění určitých bílkovin z cytoplasmy do krevního oběhu. Některé tyto proteiny jsou specifické pro srdeční sval, využívají se tedy jako markery poškození myokardu a jsou stanovovány ve vzorcích krve pacientů metodami specializovaných imunotestů. 1,3 Srdeční troponin I, je jedním z biochemických markerů záchytu časné fáze akutního infarktu myokardu(aim), nestabilní anginy pectoris (UA), a městnavého srdečního selhání (CHF) UA. Troponin je proteinový komplex kosterního a srdečním svalu. Komplex se skládá ze tří polypeptidových komponent, troponin I (TnI), troponin T (TnT), a troponin C (TnC), a hraje zásadní roli při přenosu intracelulárního vápníku v interakcích aktin-myosin. 5 TnC v srdeční tkáni je stejný jako ten v kosterní tkáni, ale TnI a TnT srdeční izoformy jsou odlišné od kosterních izoforem, což umožnilo vývoj specifických srdečních protilátek 6. Hladina ctni se zvyšuje v krvi následkem poškození myokardu nebo nekrózy. Proto se ctni používá jako pomocné vyšetření při diagnostice infarktu. 7,8 Studie kinetiky uvolňování ukazují, že ctni není nejčasnějším ukazatelem nekrózy myokardu (Tím je myoglobin, který je ovšem nespecifickým markerem). TroponinI se objeví krvi (séru) do 3-6 hodin po nástupu příznaků, podobně jako enzym CK-MB, ale ctni zůstává zvýšený po dobu 4-9 dnů po AIM a je až 13krát hojnější v myokardu než CK-MB. 9-10 Kromě přínosu v diagnostice, dávají zvýšené hladiny ctni prognostické informace zvýšeného rizika úmrtí. 11 PRINCIP ulti med ctni test je imunochromatografický test pro kvalitativní detekci ctni v plné krvi, séru nebo plazmě. Na chromatografické membráně se ve výsledkovém okně mají vytvořít dvě linie: jedna testovací T a jedna kontrolní C. V testovací zóně T je použita streptavidin biotinylovaná protilátka proti ctni a králičí protilátka proti kozímu IgG v kontrolním systému C. Podložka umístěna na konci membrány obsahuje biotinylované protilátky proti ctni a zlaté koloidní částice konjugované s protilátkami ctni. Vzorek se aplikuje do označené jamky a nasákne do membrány. Zde se srdeční markery (ctni), pokud jsou přítomny ve vzorku, naváží na specifickou protilátku, značenou koloidním zlatem. ctni ve vzorku se váže jak na ctni konjugovaný s koloidním zlatem, tak na biotinylované protilátky. Imunokomplexy pak prosakují nitrocelulózovou membránou a naváží se na streptavidin vázaný v místě testovací linie. Imunokomplexy bez markerů prosakují dále a jsou zachyceny králičí protilátkou proti kozí IgG v kontrolní linii. Pokud je koncentrace ctni ve vzorku vyšší, než cut-off, vytvoří se červená linie v oblasti testu i v kontrolní oblasti. Pokud koncentrace markeru ve vzorku je nižší než cut-off, vytvoří se pouze kontrolní linie. Kontrolní linie se musí vždy objevit, protože potvrzuje správnou funkci testu a tedy platný výsledek. Pokud se barevná kontrolní linie neobjeví, je výsledek testu nehodnotitelný a test je nutno zopakovat s novou kazetou. REAGENTY ulti med ctni test obsahuje všechny potřebné reagencie pro detekci ctni v plné krvi, séru a plazmě. Kazeta obsahuje membránu potaženou v testovací zóně streptavidinem a barvící podložku napuštěnou biotinylovanou polyklonální kozí protilátku proti-ctni a koloidním zlatem značené partikule se specifickou protilátkou proti-ctni. Stabilizátor 0,05% azid sodný a BSA protein jsou v suché formě na barvící podložce. BEZPEČNOSTNÍ POKYNY In vitro diagnostikum pouze pro profesionální použití. Nepoužívejte testovací kazety po uplynutí doby použitelnosti vyznačené na obalu. Nepoužívejte testovací kazetu, pokud byl její obal poškozen. Zabraňte zkřížené kontaminaci vzorků tím, že pro každý odběr vzorku použijete novou odběrovou nádobku. V průběhu testování používejte osobní ochranné prostředky jako je laboratorní plášť, jednorázové rukavice a ochrana očí. Použitý testovací materiál musí být zlikvidován v souladu s celostátními a místními předpisy. Vlhkost a teplota můžou nepříznivě ovlivnit výsledek testu. Test vyjměte z ochranného obalu až těsně před použitím. Test nepoužívejte opakovaně. Je jednorázový. Se všemi vzorky zacházejte jako by obsahovaly infekční látky.dodržujte stanovená opatření proti mikrobiologickým rizikům v průběhu celé procedury a dodržujte standardní postupy pro správnou likvidaci vzorků. Při nakládání se vzorky a testovacími soupravami nejezte, nepijte a nekuřte. Před testováním si pozorně přečtěte návod. SKLADOVÁNÍ A STABILITA Testy by měly být skladovány při teplotě mezi 2-30 C (za pokojové teploty nebo v chladničce) v původním uzavřeném obalu. Test je citlivý na přímé sluneční světlo, vlhkost a vyšší teplotu. Testování se doporučuje provést ihned po vyjmutí kazety z obálky. Nepoužívejte test po uplynutí doby použitelnosti. chraňte před mrazem. nepoužívejte po datu expirace. 1
DODANÝ MATERIÁL MATERIAL DOPORUČENÝ, AL NEDODANÝ l Testovací kazeta v uzavřené obálce s vysoušedlem l časoměřič (minutky) l Návod k použití l Zkumavky na vzorky krve, plasmy nebo séra l Jednorázové pipetky (80 μl) l Pozitivní a negativní kontroly ODBĚR A PŘÍPRAVA VZORK Tento test lze použít pro vzorky plné krve, plazmy, a séra. Pokud mají být použity vzorky séra, odebírá se krev do zkumavky bez antikoagulantů a srážení probíhá alespoň 25 minut před centrifugací. Vzorky plné krve nebo plazmy pro vyšetření Troponinu se odebírají do heparinu nebo EDTA. Jiné antikoagulanty nebyly doporučeny. Každá laboratoř by si měla stanovit vlastní kritéria pro odběr krve do zkumavek a postup a přípravky při separaci séra. Tyto přípravky se mohou lišit podle výrobce i podle výrobní šarže. Používejte pouze čiré, nehemolyzované vzorky. Vzorky se odebírají za standardních laboratorních podmínek. Nejlepších výsledků bylo dosaženo, při provedení testu bezprostředně po odběru. Vzorky plné krve by měly být zpracovány nejdéle do 4 hodin po odběru. Plazma nebo sérum může být uloženo v chladu po dobu 24 hodin při teplotě 2-8 C. Pokud test nelze provést do 24 hodin, nebo pro pro přepravu vzorků, doporučuje se zmrazení na -20 o 12, 13 C. Azid sodný může být přidán jako konzervační přísada do 0,1% bez vlivu na výsledky testu. Chlazený nebo zmrazený vzorek je třeba před testováním vytemperovat na pokojovou teplotu a homogenizovat. NÁVOD K POUŽITÍ Před testováním vytemperujte testovací soupravu, vzorky a / nebo kontroly na pokojovou teplotu (20-30 C). 1. Vzorek odeberte podle návodu v bodě Odběr a příprava vzorku. 2. Před testováním vytemperujte test i vzorek na pokojovou teplotu (20-30 o C). 3. Test vyjměte z ochranného obalu až bezprostředně před testováním. 4. Pomocí pipety na odběr vzorku nakapejte její obsah (80 μl) do jamky pro vzorek S. Viz podrobný popis níže. Lze použít i jinou laboratorní kvantitativní pipetu a napipetovat do jamky pro vzorek 80 μl vzorku. 5. Výsledek odečtěte po 15 minutách. Pro interpretaci výsledků viz bod Interpretace výsledků. Výsledky neodečítejte po uplynutí 15 minut. Postup pro odběr a správnou aplikaci 80 μl vzorku mikrokapátkem (pokud není k dispozici jiná kvantitativní pipeta). Krok 1: Odebírání vzorku - Stlačte balónek - Vložte konec pipety do vzorku - Pomalu uvolněte balónek - Vzorek vyplní odběrovou zkumavku Měla by se naplnit celá kapilárka, mírný přebytek (je- li nasáto více vzorku) přeteče do přepadové nádržky (spodního balonku), kde by měl zůstat na dně přepadové nádržky jako v příkladu A Nabrán správný objem A B Nabrán nesprávný objem C D E Krok 2: Přenesení vzorku - Držte pipetu nad jamkou pro vzorek - Zmáčkněte balónek dokud se pipeta nevyprázdní přesně 80 µl (A), (B) Nevymačkávejte přepadový balónek - nedostatek nasátého vzorku (C) může způsobit částečnou nebo žádnou migraci vzorku - nadměrné množství vzorku by mohlo způsobit zaplavení testovacího pole (D), (E) 2
INTERPRETACE VÝSLEDKU. ulti med ctni test je určen pro vizuální vyhodnocení. Výsledky jsou vztaženy k předem stanovené mezní hodnotě cut-off ctni 0,5 ng/ml. Pro ctni byla stanovena hodnota cut-off v porovnání s kvantitativním stanovením na systému Beckman Coulter, Access AccuTnI TM. Tato limitní hodnota se může lišit v případě, že je srovnávána s jiným systémem než Beckman Coulter. Pokud kontrolní laboratoř používá jiný sytém, než Beckman Coulter, Access AccuTnITM, doporučuje se provést porovnání hraniční hodnoty. Reprodukce se může lišit od originálu. Pozitivní Negativní Neplatný Pozitivní*: Když se objeví červená linka v kontrolní oblasti C a současně se objeví červená linka v testovací oblasti T dokazuje to, že koncentrace ctni je větší nebo rovna cut-off. Intenzita odstínu červené barvy v testovací zóně T může být slabší nebo intenzivnější než v kontrolní zóně C. *Důležité upozornění: Barva linky v testovací zóně T se může lišit intenzitou. I velmi slabý červený odstín linky interpretujte jako pozitivní výsledek. Negativní: jediná červená linka v oblasti C, žádná červená linka v oblasti T. Jedná se o platný negativní výsledek. Koncentrace ctni je nižší než mez detekce testu. Neplatný: pokud se do 15 minut neobjeví červená linka v kontrolní zóně C, je výsledek testu neplatný. Výsledek testu je neprůkazný a test se musí opakovat. Poznámka: Když je odstín linky v testovací zóně T velmi slabý, znamená to, že koncentrace ctni ve vzorku se nachází v blízkosti cut-off. Vzorky by měly být znovu testovány, nebo výsledky potvrzeny jiným kvantitativním testem. Intenzita odstínu linky nemusí korelovat s koncentrací proteinu ve vzorku, proto nedělejte kvantitativní hodnocení na základě intenzity linky v oblasti T. Výsledky neinterpretujte po 15 minutách. KONTROLA KVALITY Růžová linka v kontrolní oblasti (C) je vnitřní kontrolou správného postupu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správnou techniku postupu. V případě, že se linka v oblasti C neobjeví, je test neplatný a musí se opakovat. Je doporučené, podle pravidel Správné laboratorní praxe, použít kontrolní materiál za účelem zajištění správného fungování testovací soupravy. Vzorky pro kontrolu kvality jsou komerčně dostupné a musí být testovány za použití stejných postupů jako vzorky od pacientů a testovány současně se vzorky pacientů. Kontroly by měly být prováděny minimálně při otevření nové šarže testů, nebo při obdržení nové zásilky ulti med ctni testů, nebo kdykoliv kdy jsou dosaženy sporné výsledky. OMEZENÍ TESTU 1 In vitro diagnostikum pouze pro profesionální použití. 2 Pozitivní výsledek testu může být použit pouze jako orientační ukazatel poškození myokardu a vyžaduje další potvrzení. Série odběrů vzorků v různých časových intervalech u pacientů s podezřením na AIM se doporučuje také kvůli zpoždění mezi nástupem symptomů a uvolněním markerových proteinů do krevního oběhu. 3 Jako u všech diagnostických testů, výsledky musí být posuzovány lékařem spolu s dalšími klinickými informacemi. Negativní výsledek nevylučuje možnost infarktu myokardu v kterémkoliv čase. 4 Jako u všech diagnostických testů nemůže být definitivní klinická diagnóza založena na výsledku jediného testu. Výsledek testu je třeba hodnotit ve spojení s ostatními klinickými informacemi, jako klinické příznaky a výsledky dalších testů uskutečněných při diagnostice AIM. Potvrzení výsledků testů by měl provádět lékař, který má k dispozici kromě klinických symptomů i laboratorní nálezy. 5 Vzorky obsahující velmi vysoké titry některých protilátek, jako jsou lidská anti myší nebo lidská anti -králičí, mohou mít vliv na funkci testu. 14 Studie využívající ulti med ctni test nebyly provedeny. 6 Některé vzorky, které obsahují vysoké titry heterofilních protilátek nebo revmatoidního faktrotu (RF) můžou ovlivnit test výsledku. I když jsou výsledky testu pozitivní, je třeba je hodnotit s dalšími klinickými informacemi, které má lékař k dispozici. 7 Je možné, že testem nedospějeme k požadovaným výsledkům, pokud vzorky plné krve mají vysokou viskozitu, nebo byly skladovány po dobu delší než 2 dny. V tomto případě by měl být test opakován s novou testovací soupravou za použití séra nebo plazmy daného pacienta. 8 Falešně negativní výsledky testů: Ve vzácných případech mohou autoprotilátky v krvi pacienta zabránit reakci antigenprotilátka během testu. To může vést k falešně negativním výsledkům testů. Tento problém se týká všech testů na principu detekce proteinů pomocí protilátek. 3
OČEKÁVANÉ HODNOTY Mezní hodnoty cut-off pro ulti med ctni test byly stanoveny ve srovnání s kvantitativním stanovením, Access AccuTnI TM, Beckman Coulter. Cut-off ctni je 0,5 ng/ml. Vzorky obsahující ctni v koncentraci rovné nebo vyšší než cut-off dávají pozitivní výsledek při použití ulti med ctni testu. Cut-off se může lišit, pokud je použit jiný kvantitativní systém než Beckman Coulter Access. CHARAKTERISTIKY TESTU Cut-off metody Směsná plazma pacientů obsahující ctni, byla naředěna normálním humánním sérem na koncentrace blízké cut-off. Koncentrace naředěných vzorků byly potvrzeny kvantitativní metodou Access AccuTnITM společnosti Beckman Coulter. Bylo testováno 15 kazet pro každý ze vzorků o koncentracích 0,31, 0,57 a 1,07 ng/ml ctni. Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce. Cut-off koncentrace byla potvrzena na úrovni 0,5 ng/ml ctni. ctni Koncentrace potvrzena Access Assay (ng/ml) Negativní (n) Výsledek testu Pozitivní (n) 0,31 7 8 0,57 0 15 1,07 0 15 Cut-off úroveň 0,5 ng/ml Reprodukovatelnost Testování bylo provedeno tak, že sérum pacienta s vysokým obsahem ctni se zředí normálním lidským sérem, čímž se získají vzorky o různé koncentraci. Každý zředěný vzorek byl testován s použitím ulti med ctni testu ve třech opakováních. Údaje jsou uvedeny v tabulce. Byla prokázána 100% shoda mezi získanými a očekávanými výsledky při každé koncentraci ctni. Očekávaná konc. (ng/ml) Stanovená průměrná koncentrace Shoda % s očekávanými hodnotami Celková reprodukovatelnost (%) ctni 44,8 41,13 91,8 22,4 24,17 107,8 11,2 10,17 90,8 5,6 5,00 89,3 2,8 3,60 128,6 1,4 1,87 133,3 0,7 0,80 114,3 0,35 0,37 105,6 0,18 0,13 76,2 104,2 ická specificita Potenciálně interferující látky byly rozpuštěny v sérech o normálním složení a ve směsném séru pacientů,obsahujícím ctni v koncentraci 1,5 krát větší než cut-off. Uvedené sloučeniny neovlivňují výsledek ulti med ctni testu. Endogenní substance Substance Bilirubin Hemoglobin Albumin z lidského séra Triglyceridy Koncentrace 50 mg/dl 4000 mg/dl 10 g/dl 1250 mg/dl Byly ověřeny potenciálně zkříženě reagující endogenní proteiny, přidané do normálního lidského séra. V uvedených koncentracích neovlivňují výsledek testu: Zkřížená reaktivita endogenních proteinů Substance Srdeční myosin lehkého řetězce Srdeční Troponin T Srdeční Troponin C Skeletální Troponin I Koncentrace 4
Přesnost testu Na třech klinických pracovištích, na každém pracovišti 1 operátor otestoval připravené vzorky. Vzorky sér pacientů s vysokým obsahem ctni byly naředěny normálním lidským sérem, aby byly získány pozitivní vzorky různých koncentrací. Normální lidské sérum bylo použito jako negativní kontrola testu. Z každého vzorku bylo testováno na každém pracovišti 5 alikvotních částí. Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce. Ukazují100% shodu v sérii i mezi sériemi. Koncentrace každého analytu (ng/ml) v každém vzorku a výsledek testu na přesnost pomocí ulti med ctni Testu Testovací místo Vzorek 1 Vzorek 2 Vzorek 3 ctni 0 ctni 1.03 ctni 2.05 %shoda v sérii ctni - + - + - + místo I 5 0 0 5 0 5 100% místo 2 5 0 0 5 0 5 100% místo 3 5 0 0 5 0 5 100% % shoda mezi 100% 100% 100% sériemi Korelace mezi vzorky plazmy a séra Byly připraveny vzorky séra a heparinizované plazmy paralelně od téhož pacienta. Vzorky byly rozděleny do čtyř úrovní: 1,2-1,8, 0,5-1,0, 0,3-0,5 a <0,06 ng/ml ctni. Deset vzorků v každé skupině bylo testováno ulti med ctni tesem. Výsledky uvádí tabulka: Rozpětí koncentrace vzorků (ng/ml) Pozitivní sérum Negativní sérum Pozitivní plazma Negativní plazma 1,2-1,8 10 0 10 0 TnI 0,5-1,0 10 0 10 0 0,3-0,5 9 1 7 3 Korelace mezi testem z plné krve a plazmy Byla ověřena korelace výsledků testu mezi vzorky plazmy a plné krve při použití ulti med ctni testu. Plná krev byla obohacena klinickými vzorky obsahujími ctni na tři různé koncentrace od negativní po 4čtyřnásobek hodnoty cut-off. Pět vzorků v každé skupině bylo testováno pomocí ulti med ctni testu před odstraněním buněk a po odstranění buněk centrifugací. Výsledky testů jsou znázorněny v následující tabulce: Rozpětí koncentrace vzorků (ng/ml) Pozitivní plazma Negativní plazma Plná krev pozitivní Plná krev negativní TnI 1,3 2,4 5 0 5 0 0,5 1,0 5 0 5 0 0,1 0,47 3 2 2 3 Porovnání s kvantitativní metodou Vzorky plazmy byly získány od 206 pacientů pohotovosti, kteří byli přijati, pro podezření na srdeční příhodu. Kromě toho bylo 50 vzorků odebráno ambulantním pacientům s jinou diagnozou. Těchto 256 klinických vzorků bylo testováno paralelně pomocí ulti med ctni testu a kvantitativní metodou Beckman Coulter Access. Výsledky jsou shrnuty níže. Výsledek testu Access Accu TnI Test 0,023-0,29 0,3-0,47 0,52-0,6 0,61->100 ulti med ctni Test Pozitivní 1 7 6 91 Negativní 143 6 2 0 5
LITERÁRNÍ ODKAZY 1. Panteghini M, Pagani F, Bonetti G. (1999) the sensitivity of cardiac markers: an evidence-based approach. Clin Chem Lab Med. 37(11-12):1097-106 2. Wu AH. (1997) Use of cardiac markers as assessed by outcomes analysis. Clin Biochem. 30(4):339-50 3. Apple FS. (1992) Acute myocardial infarction and coronary reperfusion. Serum cardiac markers for the 1990s. Am J Clin Pathol. 97(2):217-26 4. Alan H.B. Wu, Fred S. Apple, W. Brian Gibler, Robert L. Jesse, Myron M. Warshaw, and Roland Valdes, Jr. (1999) The National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice: Recommendations for the use of cardiac markers in coronary artery diseases. The National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines 5. Mehegan JP, Tobacman LS. (1991) Cooperative interactions between troponin molecules bound to the cardiac thin filament. J Biol Chem. 266(2):966-72 6. Bodor GS, Porter S, Landt Y, Ladenson JH (1992) Development of monoclonal antibodies for an assay of cardiac troponin-i and preliminary results in suspected cases of myocardial infarction. Clin Chem. 38(11):2203-14 7. Adams JE 3rd, Bodor GS, Davila-Roman VG, Delmez JA, Apple FS, Ladenson JH, Jaffe AS (1993) Cardiac troponin I. A marker with high specificity for cardiac injury. Circulation. 88(1):101-106 8. Adams JE 3rd, Sicard GA, Allen BT, Bridwell KH, Lenke LG, Davila-Roman VG, Bodor GS, Ladenson JH, Jaffe AS (1994) Diagnosis of perioperative myocardial infarction with measurement of cardiac troponin I. N Engl J Med. 330(10):670-674 9. Mair J, Morandell D, Genser N, Lechleitner P, Dienstl F, Puschendorf B. (1995) Equivalent early sensitivities of myoglobin, creatine kinase MB mass, creatine kinase isoform ratios, and cardiac troponins I and T for acute myocardial infarction. Clin Chem. 41(9):1266-72 10. Mair J, Genser N, Morandell D, Maier J, Mair P, Lechleitner P, Calzolari C, Larue C, Ambach E, Dienstl F, Pau B, Puschendorf B.(1996) Cardiac troponin I in the diagnosis of myocardial injury and infarction. Clin Chim Acta. 245(1):19-38 11. Antman EM, Tanasijevic MJ, Thompson B, Schactman M, McCabe CH, Cannon CP, Fischer GA, Fung AY, Thompson C, Wybenga D, Braunwald E.(1996) Cardiac-specific troponin I levels to predict the risk of mortality in patients with acute coronary syndromes. N Engl J Med. 335(18):1342-9 12. The Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) (2003) Approved Standard H03-A5; Procedure for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture, Fifth Edition. 13. The Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) (2004) Approved Guideline H18; Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens, Third Edition. 14. Kazmierczak, S.,Catrou, P., Briley, K. (2000), Transient Nature of Interference Effects from Heterophile Antibodies: Examples of Interference with Cardiac Marker Measurements. Clin Chem Lab Med; 38(1):33-9 Tento návod na použití je v souladu s nejnovějšími technologiemi/revizemi. Změna vyhrazena bez předchozího upozornění! Výrobce ulti med Products (Deutschland) GmbH Reeshoop 1 22926 Ahrensburg Germany Telefon: +49-4102 80090 Fax: +49-4102 50082 e-mail: info@ultimed.de Distributor v EU ulti med Products (Belgium) BVBA Honzebroekstraat 137 8800 Roeselare Phone: +32 +51 200 425 Fax: +32 +51 200 449 e-mail: belgium@ultimed.org Distributor pro ČR JK Trading s.r.o. Křivatcová 421/5 155 21 Praha tel.: +420 257 220 760 fax: +420 257 220 771 e-mail: praha@jktrading.cz Distributor pro SK JK Trading s.r.o. Mečíkova 30 841 07 Bratislava tel.: +421 264 774 620 fax: +421 264 774 593 e-mail: jk-trading@jk-trading.sk February 2016 ND_A / JS český překlad 05/2016/VE 6