Direct HDL Cholesterol (D-HDL) HDL Cholesterol přímý

ADVIA Chemistry Systems Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Návod k použití 2015-05 Direct HDL Cholesterol (D-HDL) HDL Cholesterol přímý Systém ADVIA 1200 Aktualizace Aktualizace: Složení a koncentrace Aktualizace: Složení a koncentrace Aktualizace: Složení a koncentrace Přehled metody Položka Princip metody Druh vzorku Popis Eliminace/kataláza Lidské sérum a plazma (heparin lithný nebo disodná sůl EDTA) Stabilita v analyzátoru ADVIA 1200 60 dnů Teplota skladování reagencie 2-8 C 60 dnů 45 dnů Frekvence kalibrace ADVIA 1200 60 dnů Frekvence reagenčního blanku Typ reakce Vlnová délka měření Standardizace V době kalibrace metody 2-bodová kinetika (2PA) 596/694 nm NCEP srovnávací metoda 30 dnů 45 dnů Analytické rozmezí Sérum/Plazma: 5-115 mg/dl (0,1-3,0 mmol/l) Očekávané hodnoty Nízké (nežádoucí, vysoké riziko) < 40 mg/dl (< 1,0 mmol/l) Vysoké (žádoucí, nízké riziko) 60 mg/dl ( 1,6 mmol/l) Kód reagencie 74073 Kalibrátor ADVIA Chemistry HDL/LDL Cholesterol Calibrator: REF 00309530 (PN B03-4763-01) 2008 Siemens Medical Solutions Diagnostics. All rights reserved. Siemens Medical Solutions Diagnostics, Tarrytown, NY 10591-5097 USA 04093915 Rev. F, 2015-05 1

Použití Pro in vitro diagnostické použití při kvantitativním stanovení HDL cholesterolu v lidském séru a plazmě na analyzátorech ADVIA. Toto stanovení se využívá při posuzování rizika onemocnění koronární tepny. Shrnutí a vysvětlení 1 Metoda Direct-HDL Cholesterol (D-HDL) měří HDL cholesterol v séru a plazmě, bez předchozí separace. Je založena na postupu vyvinutém Izawou, Okadavou a Matsuiem. 1 V prvním kroku reakce je uvolněn a eliminován cholesterol z částic neobsahujících HDL. V druhém kroku reakce je uvolněn reagencií R2 cholesterol z částic obsahujících HDL a HDL cholesterol je měřen Trinderovou reakcí. Principy metody Metoda se skládá ze dvou odlišných kroků reakce: 1. Eliminace chylomikronů, VLDL-cholesterolu a LDL-cholesterolu cholesterol esterázou a cholesterol oxidázou. Peroxid vodíku vytvořený oxidázou je odstraněn katalázou. Ester cholesterolu Cholesterol + Mastná kyselina Cholesterol + O 2 Cholestenon + H 2 O 2 2. Specifické měření HDL-cholesterolu, po uvolnění HDL-cholesterolu surfraktantem v Reagencii 2. Kataláza z kroku 1 je inhibitována azidem sodným v Reagencii 2. Intenzita chinoniminového barviva produkovaného Trinderovou reakcí je přímo úměrná koncentraci cholesterolu, která je měřena při 596 nm. Ester cholesterolu Cholesterol + Mastná kyselina Cholesterol + O 2 Cholestenon + H 2 O 2 H 2 O 2 + 4-Aminoantipyrin + HDAOS Kdy HDAOS = N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxyanilin. Chinoniminový barevný komplex + 4 H 2 O 04093915 Rev. F, 2015-05 2

Reagencie Reagencie jsou baleny tak, jak je uvedeno níže. Jednotlivé části balení jsou dostupné pouze jako souprava. REF (PN) Velikost lahvičky Symboly Obsah Množství Počet testů 07511947 Direct HDL 4 x 326 Cholesterol Reagencie 40-ml Reagencie 1 4 x 35,0 ml 20-ml Reagencie 2 4 x 13,5 ml 06521559 Direct HDL 6 x 670 Cholesterol Reagencie 70-ml Reagencie 1 6 x 68 ml 40-ml Reagencie 2 6 x 28,6 ml Složení a koncentrace Reagencie Složení Koncentrace Reagencie 1 Goods pufr, ph 6,6 100 mmol/l N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethoxyanilin 0,7 mmol/l Cholesterol estráza [E.C.3.1.1.13. Pseudomonas, 37 C] Cholesterol oxidáza [E.C.1.1.3.6. Streptomyces, 37 C] 800 U/l 500 U/l Kataláza [E.C.1.11.1.6.z hovězích jater, 25 C] 300 KU/l Reagencie 2 Goods pufr, ph 7,0 100 mmol/l 4-Aminoantipyrin 4 mmol/ Peroxidáza [E.C.1.11.1.7. Křenová, 25 C] 4 KU/l Azid sodný 0,05% POZNÁMKA: Azid sodný může reagovat s mědí a může tvořit explozivní kovové azidy. Pokud je odstranění do odpadu v souladu s federálními, státními a místními podmínkami, pak spláchněte reagencie velkým množstvím vody, abyste zabránili nárůstu azidů. Pro in vitro diagnostické použití. Varování! Může vyvolat alergickou kožní reakci. Používejte ochranné rukavice / ochranný oděv/ Ochranné brýle / obličejový štít. Kontaminovaný pracovní oděv by neměl být povolen mimo pracoviště. Při zasažení kůže: Omyjte velkým množstvím vody a mýdla. Je-li kůže podrážděná nebo se vyskytne vyrážka: Vyhledejte lékařskou pomoc / ošetření. 04093915 Rev. F, 2015-05 3

Zlikvidujte obsah a obal v souladu se všemi místními, regionálními a národními předpisy. Obsahuje: 5-chlor-2-methyl-4-isothiazolin-3-one w / 2-methyl-2H-isothiazol-3-one; ADVIA Chemistry DHDL R1 Reagent a ADVIA Chemistry DHDL R2 Reagent Příprava a použití reagencie Reagencie jsou připraveny k použití. Před použitím, jemně reagencii promíchejte z důvodu uvolnění bublin a zajištění homogenity. Pokud se bubliny v reagencii vyskytují ve formě pěny, tak je před použitím pomocí čisté pipety z reagencie odsajte. Stabilita reagencie v analyzátoru Systém ADVIA 1200 Stabilita 60 dnů 60 dnů 45 dnů Pro všechny systémy, neotevřené reagencie jsou stabilní do data expirace, které je vytištěno na štítku lahvičky, pokud jsou skladovány při teplotě 2-8 C a chráněny před světlem. Reagencie nezamrazujte. Pro další detaily se obraťte na kapitolu Nastavení metod, konkrétní návodu k použití analyzátoru. Manipulace se vzorkem Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat pro tuto metodu sérum nebo plazmu (heparin lithný nebo disodnou sůl EDTA). Pro další detaily se obraťte na kapitolu Odběr a příprava vzorku v Nastavení metod v návodu konkrétního analyzátoru. Pro instrukce o zavedení reagencie a měření vzorků, se obraťte na kapitolu Denní operace, v návodu konkrétního analyzátoru. Potřebné materiály nedodávané se soupravou Následující seznam obsahuje materiály, které jsou potřebné, ale nejsou poskytované, pro provedení této metody: nádobky na vzorky systémové roztoky materiály pro kalibraci (viz kapitola Přehled metody, pro REFs) kontroly adaptéry pro nádobky na reagencie: 20-ml adaptér (REF 02404085; PN 094-0159-01) pro 40-ml otvor (ADVIA 1200/1800) 20-ml adaptér (REF 05249323; PN 073-0936-01) pro 70-ml otvor (ADVIA 1200) 20-ml adaptér (REF 00771668; PN 073-0345-02) pro 70-ml otvor (ADVIA 1650/2400) 40-ml adaptér (REF 08163594; PN 073-0788-01) pro 70-ml otvor (ADVIA 1650/2400) Pro informace o skladování a stabilitě se obraťte na příbalový leták. 04093915 Rev. F, 2015-05 4

Kalibrace Obraťte se na příbalový leták, který je dodáván společně s ADVIA Chemistry HDL/LDL Cholesterol Calibrator (REF 00309530; PN B03-4763-01), pro instrukce o manipulaci a hodnotách. Pro instrukce o nastavení a použití se obraťte na kapitolu Přehled kalibrace, návodu konkrétního analyzátoru. Frekvence kalibrace Kalibraci proveďte, jakmile je tato metoda vložena do systému. Překalibrujte po následujících událostech: když se změní číslo šarže reagencie po výměně důležitých optických nebo hydraulických komponentů pokud to naznačuje postup kontroly kvality Siemens validoval minimální frekvenci kalibrace, jak je zobrazeno v následující tabulce: Systém ADVIA 1200 Stabilita* 60 dnů 60 dnů 45 dnů *nebo kdykoli, podle výsledků kontrol kvality Siemens doporučuje kalibraci nového balení reagencie, pokud bylo předchozí balení reagencie kalibrováno kdykoli, během doby jeho stability v analyzátoru, jindy než jako nové balení. Individuální laboratorní program a postupy kontroly kvality mohou vyžadovat častější provádění kalibrace. Frekvence reagenčního blanku (RBL) Siemens doporučuje provádění RBL v době kalibrace metody. Pokud předchozí reagenční cartridge RBL byl provozován jinak než nové balení RBL, pak spusťte RBL na nový reagenční cartridge. Kontrola kvality Siemens doporučuje používání materiálů kontroly kvality firmy Bio-Rad Laboratories aspoň o dvou hladinách koncentrace (nízké a vysoké). Uspokojivé úrovně kvality je dosaženo, pokud jsou dosažené hodnoty analytu, pro každou kontrolu, mezi Akceptovatelným rozmezím kontroly pro daný systém nebo ve vámi definovaném rozmezí odpovídající schématu interní laboratorní kontroly kvality. Aktuální frekvence kontroly v laboratoři, je založena na mnoha faktorech, jako je pracovní proces, zkušenosti se systémem a vládní směrnice. Každá laboratoř by měla vyhodnotit frekvence kontrol, na základě směrnic ustanovených konkrétní laboratoří. Pokud je tato metoda měřena, analyzujte aspoň 2 hladiny kontrol denně. Měření kontrol kvality provádějte také za následujících podmínek: kdykoli použijete novou šarži reagencií 04093915 Rev. F, 2015-05 5

po provedení jakékoli údržby systému, čištění nebo řešení problémů po provedení nové kalibrace Pro více informací, se obraťte na kapitolu Přehled kontrol kvality, návodu konkrétního analyzátoru. Omezení postupu 2 Mnoho látek způsobuje fyziologické změny v koncentracích analytu séra nebo plazmy. Vyčerpávající diskuse o možných interferujících látkách, jejich koncentracích v séru nebo plazmě a jejich možný fyziologický vliv, je nad rámec tohoto dokumentu. Konzultujte seznam dopadů pro specifické detaily na známých potenciálně interferujících látkách 2. Jako s jakoukoli chemickou reakcí, musíte být připraveni na možné ovlivnění výsledků, neznámými interferencemi z léčebných nebo endogenních substancí. Laboratoř a lékař musí vyhodnotit všechny výsledky pacienta na základě celkového klinického stavu pacienta. Interference V okně analytické parametry (sérum), můžete nastavit ADVIA Chemistry System zaškrtnutím různých úrovní lipémie (zákalu), hemolýzy a ikteru pro vzorky které běží na systému. Siemens testoval následující potencionální interference a došel k výsledkům zobrazeným níže: ADVIA 1200 Interferent Hladina interferentu Koncentrace DHDL Interference* ve vzorku Bilirubin 25 mg/dl 46 mg/dl NSI (konjugovaný a nekonjugovaný) (428 μmol/l) (1,2 mmol/l) Hemolýza 500 mg/dl 46 mg/dl NSI (hemoglobin) (5,0 g/l) (1,2 mmol/l) Lipémie 1000 mg/dl 45 mg/dl NSI (z Intralipidu) (11,3 mmol/l)** (1,2 mmol/l) * NSI = No Significant Interference (Bezvýznamná interference). Procentuální efekt 10% je považován za podstatnou interferenci. **jako triolein 04093915 Rev. F, 2015-05 6

Interferent Hladina Koncentrace DHDL interferentu ve vzorku Interference* Bilirubin 30 mg/dl 42 mg/dl NSI (konjugovaný a nekonjugovaný) (513 μmol/l) (1,1 mmol/l) Hemolýza 500 mg/dl 42 mg/dl NSI (hemoglobin) (5,0 g/l) (1,1 mmol/l) Lipémie 1000 mg/dl 41 mg/dl NSI (z Intralipidu) (11,3 g/l) ** (1,1 mmol/l) * NSI = No Significant Interference (Bezvýznamná interference). Procentuální efekt 10% je považován za podstatnou interferenci. **jako triolein Interferent Hladina Koncentrace DHDL interferentu ve vzorku Interference* Bilirubin 30 mg/dl 41 mg/dl NSI (konjugovaný a nekonjugovaný) (513 μmol/l) (1,1 mmol/l) Hemolýza 500 mg/dl 42 mg/dl NSI (hemoglobin) (5,0 g/l) (1,1 mmol/l) Lipémie 1000 mg/dl 40 mg/dl NSI (z Intralipidu) (11,3 mmol/l) ** (1,0 mmol/l) * NSI = No Significant Interference (Bezvýznamná interference). Procentuální efekt 10% je považován za podstatnou interferenci. **jako triolein Charakteristiky metody Přesnost 3 Každý vzorek byl měřen dvakrát během série, 1 nebo 2 série za den, nejméně po dobu deseti dní. Přesnost byla spočítána podle CLSI dokument EP05-A2, Vyhodnocení přesnosti metody kvantitativních měřících metod, schválená směrnice 3. Data obsažená v této kapitole reprezentují typická data pro analyzátor ADVIA. Data vaší laboratoře mohou být od těchto hodnot odlišná. Konverzní faktor: mg/dl x 0,0259 = mmol/l 04093915 Rev. F, 2015-05 7

ADVIA 1200 V rámci série Celkem Typ vzorku Hladina SD CV (%) SD CV (%) Běžné jednotky (mg/dl) Sérum 35,9 0,48 1,3 1,19 3,3 Sérum 56,9 0,63 1,1 1,78 3,1 Sérum 69,8 0,82 1,2 2,30 3,3 SI jednotky (mmol/l) Sérum 0,93 0,012 1,3 0,031 3,3 Sérum 1,47 0,016 1,1 0,046 3,1 Sérum 1,81 0,021 1,2 0,060 3,3 V rámci série Celkem Typ vzorku Hladina SD CV (%) SD CV (%) Běžné jednotky (mg/dl) Kontrola 1 36,1 0,83 2,3 0,94 2,6 Kontrola 2 55,0 0,38 0,7 1,15 2,1 Kontrola 3 76,9 0,77 1,0 1,54 2,0 SI jednotky (mmol/l) Kontrola 1 0,94 0,022 2,3 0,024 2,6 Kontrola 2 1,43 0,010 0,7 0,030 2,1 Kontrola 3 1,99 0,020 1,0 0,040 2,0 V rámci série Celkem Typ vzorku Hladina SD CV (%) SD CV (%) Běžné jednotky (mg/dl) Kontrola 1 35,0 0,38 1,1 0,77 2,2 Kontrola 2 53,8 0,77 1,4 1,15 2,1 Kontrola 3 75,4 1,16 1,5 1,92 2,5 SI jednotky (mmol/l) Kontrola 1 0,91 0,010 1,1 0,020 2,2 Kontrola 2 1,39 0,019 1,4 0,029 2,1 Kontrola 3 1,95 0,029 1,5 0,049 2,5 04093915 Rev. F, 2015-05 8

Analytické rozmezí Tato metoda je lineární v rozsahu 5-115 mg/dl (0,1-3,0 mmol/l) pro sérum a plazmu. Siemens validoval podmínku automatického opakování cyklu pro tuto metodu, která rozšíří hlášený rozsah pro sérum a plazmu až do 230 mg/dl (5,96 mmol/l) pro sérum a plazmu. Očekávané hodnoty 4 Následující tabulka zobrazuje referenční rozmezí pro tuto metodu: Typ vzorku Nízký (nežádoucí, vysoké riziko) Vysoký (žádoucí, nízké riziko) Referenční rozmezí < 40 mg/dl (< 1,0 mmol/l) 60 mg/dl ( 1,6 mmol/l) Siemens poskytuje tyto informace jako orientační. Každá laboratoř by měla ustanovit vlastní normální rozmezí. Normální a abnormální rozmezí hodnot, můžete vložit v okně Analytické parametry (chemické) (Analytical Parameters (Chemistry)). Korelace systému Výkon příslušné metody (y) byl porovnán s výkonem stejné metody na srovnávacím systému (x). ADVIA 1200 Typ vzorku Srovnávací systém (x) No. Rovnice regrese Sy.x r Rozmezí vzorku Sérum ADVIA 1650 HDL 276 y = 1,04x - 0,81 2,11 0,993 15-102 mg/dl Chol II y = 1,04x - 0,02 0,05 0,993 0,4-2,6 mmol/l Plazma* ADVIA 1200 (sérum) 30 y = 0,99x - 0,06 0,48 1,000 32-106 mg/dl y = 0,99x - 0,00 0,01 1,000 0,8-2,7 mmol/l Sérum Referenční metoda 41 y = 0,99x + 1,41 2,05 0,993 28-94 mg/dl *heparin lithný (DCM ) y = 0,99x + 0,04 0,05 0,993 0,7-2,4 mmol/l srovnávací metoda Národního vzdělávacího programu o cholesterolu 04093915 Rev. F, 2015-05 9

Typ vzorku Srovnávací systém (x) No. Rovnice regrese Sy.x r Rozmezí vzorku Sérum ADVIA 1650 HDL Chol 130 y = 1,09x - 3,76 2,26 0,991 17-100 mg/dl II y = 1,09x - 0,10 0,06 0,991 0,4-2,6 mmol/l Sérum Roche/Hitachi 717 93 y = 0,96x + 1,16 2,32 0,994 19-112 mg/dl y = 0,96x + 0,03 0,06 0,994 0,5-2,9 mmol/l Plazma* ADVIA 1650 (sérum) 20 y = 1,01x - 1,00 0,61 0,999 37-79 mg/dl y = 1,01x - 0,03 0,02 0,999 1,0-2,0 mmol/l Plazma** ADVIA 1650 (sérum) 20 y = 1,01x - 0,90 0,72 0,998 37-79 mg/dl y = 1,01x - 0,02 0,02 0,998 1,0-2,0 mmol/l Sérum Referenční metoda 41 y = 0,97x + 2,47 2,03 0,993 29-93 mg/dl (DCM ) y = 0,97x + 0,06 0,05 0,993 0,8-2,4 mmol/l *heparin lithný **disodná sůl EDTA srovnávací metoda Národního vzdělávacího programu o cholesterolu Typ vzorku Srovnávací systém (x) No. Rovnice regrese Sy.x r Rozmezí vzorku Sérum HDL 96 y = 0,99x - 1,93 2,70 0,992 19-112 mg/dl Chol II y = 0,99x - 0,05 0,07 0,992 0,5-2,9 mmol/l Sérum Roche/Hitachi 717 94 y = 0,94x + 1,16 2,32 0,994 19-112 mg/dl y = 0,94x + 0,03 0,06 0,994 0,5-2,9 mmol/l Plazma* (sérum) 20 y = 1,01x - 1,00 0,61 0,999 37-79 mg/dl y = 1,01x - 0,03 0,02 0,999 1,0-2,0 mmol/l Plazma** (sérum) 20 y = 1,01x - 0,90 0,72 0,998 37-79 mg/dl y = 1,01x - 0,02 0,02 0,998 1,0-2,0 mmol/l Sérum Referenční metoda 41 y = 0,98x + 1,01 1,90 0,994 28-93 mg/dl (DCM ) y = 0,98x + 0,03 0,05 0,994 0,7-2,4 mmol/l *lithium heparin **disodná sůl EDTA srovnávací metoda Národního vzdělávacího programu o cholesterolu Standardizace Metoda D-HDL je v návaznosti na NCEP srovnávací metodu, přes korelaci vzorků pacientů. Pro tento vztah prostudujte korelační data v části Korelace systému. Přidělené hodnoty pro ADVIA Chemistry HDL/LDL Cholesterol Calibrator jsou v návaznosti na tuto standardizaci. 04093915 Rev. F, 2015-05 10

Literatura 1. Izawa S, Okada M, Matsui H, et al. Medicine and Pharmaceutical Sci. 1997;37:1385-1388. 2. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 3rd ed. Washington: AACC Press; 1990. 3. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2004. NCCLS Document EP5-A2. 4. Third Report of the Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), NIH Publication No. 01-3670, May 2001. Technická podpora Pro zákaznickou podporu, prosím kontaktujte vašeho místního dodavatele nebo distributora. www.siemens.com/diagnostics Ochranné známky ADVIA je obchodní značkou společnosti Siemens Medical Solution Diagnostics. Roche je obchodní značkou společnosti Roche Diagnostics, Inc. Intralipid je obchodní značkou společnosti Fresenius Kabi AB. Made in: UK Siemens Medical Solutions Diagnostics Pty Ltd ABN 65 007 436 651 885 Mountain Highway Bayswater Victoria 3153 Australia 04093915 Rev. F, 2015-05 11

04093915 Rev. F, 2015-05 12