ELEKTROCHEMICKÉ STANOVENÍ cis-pt V KOMPLEXECH S DNA
|
|
- Kamila Kučerová
- před 5 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 ELEKTROCHEMICKÉ STANOVENÍ cis-pt V KOMPLEXECH S DNA Dana Dospivova 1, Kristyna Smerkova 1, Soňa Křížková 1,2, Marketa Ryvolova 1,2, David Hynek 1,2, Vojtech Adam 1,2, Pavel Kopel 1,2, Marie Stiborova 3, Tomas Eckschalager 4, Jaromir Hubalek 1,2, Rene Kizek* 1,2 1 Ústav chemie a biochemie, Agronomická fakulta, Mendelova univerzita v Brně, Zemědělská 1, CZ Brno, Česká republika, 2 Středoevropský technologický institut, VUT v Brně, Technická 3058/10, CZ Brno, Česká republika, Evropská unie, 3 Ústav biochemie, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Karlova, Albertov 2030, CZ Praha 2, Česká republika, Evropská unie, 4 Klinika dětské hematologie a onkologie, 2. LF UK, V Úvalu 84, CZ Praha 5, Česká republika, Evropská unie *Korespondenčníautor: kizek@sci.muni.cz Klíčováslova:cis-platina; square wave voltametrie; diferenčnípulsnívoltametrie; DNA; ÚVOD Onkologická onemocnění jsou jednou z nejčastějších příčin úmrtí v rozvinutých zemích. (Fuertes, et al.) Jednou z možností léčby zhoubných nádorů je chemoterapie (van Zutphen, et al.). Efekt použitých léčiv spočívá především v omezení růstu tkání s vysokou proliferační schopností. Účinky nejsou pouze inhibiční, ale také cytocidní, kdy působení cytostatik může indukovat apoptózu nebo jiné druhy buněčné smrti. Účinek cytostatik není omezen jen na nádorové buňky, ale působí i na zdravou tkáň, zvláště postihuje buňky s vysokou frekvencí dělení a vznikají tak nežádoucí vedlejší účinky. Cytostatika na bázi platiny jsou dnes jedny z nejčastěji používaných protinádorových léčiv. Nejběžnějšími léčivy této skupiny jsou cisplatina, karboplatina a oxaliplatina. Cisplatina je velmi účinná u celé řady lidských maligních onemocnění. Využívá se především v léčbě nádorů varlat, vaječníků a močového měchýře (Kaneko, et al.). Cílovým místem protinádorového působení cisplatiny v buňce je molekula DNA. Platinové léčivo se do buňky dostává pasivním nebo aktivním buněčným transportem, následuje akumulace léčiva v buňce. V intracelulárním prostředí dochází k aktivaci platinového komplexu (hydrolýzou)a k vazbě na nukleové kyseliny za vzniku Pt- DNA aduktů. Kovalentní vazba cisplatiny způsobuje poškození ovlivňující funkci buňky. (Monjardet-Bas, et al.) Tyto změny jsou identifikovány řadou proteinů (Jamieson, et al.), které se váží k DNA modifikované cisplatinou, a tím zprostředkovávají protinádorový efekt léčiva.
2 Cílem této práce bylo studium in vitro interakce cisplatiny s DNA pomocí elektrochemické instrumentace a následná optimalizace a automatizace těchto elektrochemických metod. Square-wave volatmetrie a diferenční pulsní voltametrie byly zvoleny jako nejvhodnější elektrochemické techniky. EXPERIMENTÁLNÍ ČÁST Materiál a metody V prvním kroku experimentu byly připraveny vzorky cisplatiny s DNA. Do 1.5 ml mikrozkumavky (Eppendorf, Německo) byla napipetována směs dsdna (100 µg/ml) a cisplatiny (100µg/ml) ve fosfátovém pufru o ph 7,5. Mikrozkumavka byla umístěna do termostatu, kde probíhala inkubace 24 hod. při teplotě 37 C. Po této době byla provedena dialýza komplexu DNA+cis-Pt oproti Tris-HCl o ph 7,5, s cílem odstranit nenavázanou cisplatinu, která nevytvořila s DNA adukt. K dialýze byl použit membránový filtr (Filter type 0.025µm, VSWP, Irsko). Dialýza probíhala za stálého mírného míchání na magnetické míchačce (Maneko, ČR) při teplotě 6 C a po dobu 24 hod. Po ukončení dialýzy byl vzorek odebrán a byla stanovena výsledná koncentrace DNA. Ke stanovení DNA byla využita metoda square-wave voltametrie (SWV) ve spojení s adsorpční přenosovou technikou. Tato metoda je založena na akumulaci vzorku na povrchu pracovní elektrody a následném měření. Doba akumulace byla pro naše stanovení 120 s, všechny experimenty byly prováděny při teplotě 25 C. SWV měření probíhalo za přítomnosti acetátového pufru o ph 5,0. Všechna naměřená data byla vyhodnocena v programu GPES (EcoChemie). Koncentrace cisplatiny byla stanovena pomocí metody diferenční pulsní voltametrie (DPV). K měření byla využita následující instrumentace: AUTOLAB PGS30 (EcoChemie, Nizozemí) vespojení s VA-Stand 663 (Metrohm, Švýcarsko) s klasickým tříelektrodovým zapojením. Visící rtuťová kapková elektroda (HMDE) byla použita jako pracovní, Ag/AgCl/3M KCl elektroda sloužila jako referenční a Pt elektroda jako pomocná. Měření probíhalo v objemu 2 ml, byl použit elektrolyt o složení 0,36 mol/l H 2 SO 4, obsahující 0,24 ml hydrazinu (10 mmol/l), 0,01 ml formaldehydu (37% vodný roztok). Z analyzovaných vzorků byl vždy před měřením odstraněn kyslík probubláváním argonem (99,999%) po dobu 120 s. Zvolené rozmezí potenciálu bylo od -0,5 V do -1,2 V s rychlostí skenu 10 mv/s, charakteristický signál platiny byl zaznamenán při -0,85 V. Další parametry metody byly: modulační čas 0,057 s, časový interval 0,1 s, potenciálový krok 1,95 mv s rychlostí skenu 10,5 mv/s a modulační amplitudou 49,5 mv. Po odstranění kyslíku následovala akumulacena HMDE po dobu 15 s. (-0,7 V vs. Ag/AgCl, zastálého míchání). Koncentrace platiny byla stanovena ze tří standardních přídavků. Navržený metodický postup byl optimalizován a podařilo se nám plně
3 automatizovat metodu pro detekci iontů platiny i cisplatiny. Pro plně automatickou detekci byl využíván elektrochemický analyzátor Metrohm 797 VA Computrace ve spojení s 813 Compact Autosampler. Pro přidávání standardních roztoků a činidel, byly využívány dva automaty (765Dosimat) a peristaltické pumpy (772Pump Unit, ovládané RelayBox731). VÝSLEDKY A DISKUSE Katalytické vylučování vodíku je v elektrochemii jedním z nejsenzitivnějších elektroanalytických způsobů detekce biomolekul (Arjmand, et al., Kizek, et al., Palecek, et al., Palecek, et al.). V naší práci jsme se na počátku experimentu zaměřili na provedení elektrochemické detekce iontů platiny ve stacionárním uspořádání na základě literárně dostupných dat (Zimmermann, et al., Zimmermann, et al.). Nejvhodnější doba prekoncetrace iontů platiny na HMDE byla15 s. Při použití těchto parametrů jsme získali dobré katalytické signály a nedocházelo k poklesu citlivosti metody. Lineární závislost koncentrace Pt na katalytickém signálu byla stanovena až do 25 ng/ml (y = 1,6808x+1,2224, R 2 = 0,9909). Kalibrační křivka platiny je na obrázku 1, část A a příslušné katalytické signály, které platina vykazuje při potenciálu -0,9V je možné pozorovat na voltamogramech viz obrázek 1, část C. Limit detekce byl stanoven na 16 pm. Při detekci cisplatiny bylo chování katalytického signalu podobné jako u iontů platiny. Souměrnost píku byla jen nepatrně odlišná. Maximum píku se v závislosti na koncentraci posouvalo od -0.8 do V. Pozorované změny souvisely s tvorbou složitějších aqua komplexů cisplatiny. Linearita byla pozorována do koncentrace 3 mg/ml. Limit detekce byl určen na 32 nm. Optimalizovanou metodiku pro automatizovanou detekci bylo možné aplikovat pro analýzu obsahu vázané platiny do struktury DNA. DNA izolovaná z ptačích erytrocytů byla modifikována cisplatinou po dobu 24 a 72 hodin. Vliv délky inkubace na koncentraci cis-pt je znázorněn na obrázku 1, část B. Pro obě inkubace byla zvolena následná dialýza 24 hodin. Molekuly cisplatiny, které se nenavázaly, byly odstraněny pomocí dialýzy (24 hod, 6 C). Při následné detekci byl zjištěn nejvýraznější nárůst signálu při použití nízkých množství platiny (do 200 ng/ml). Zjistili jsme, že cisplatina v DNA ovlivňuje tvar i průběh voltamogramů. V katodické oblasti docházelo k dřívějšímu uvolnění vodíku ze základního elektrolytu. K těmto změnám docházelo již mezi potenciály -1,1až -1,3V. Tyto změny měly vliv i na redoxní signály adeninu a cytosinu. ZÁVĚR
4 Metodiku, kterou jsme optimalizovali pro automatizovanou detekci bylo možné aplikovat pro analýzu obsahu vázané platiny do struktury DNA. Technika adsorptivního přenosu umožnila selektivní studium interakce DNA na povrchu pracovní elektrody a odstranění nespecificky vázaných molekul, včetně malých molekul, jak z povrchu elektrody, tak z biomolekuly. Díky tomuto principu lze využít navržené metody pro sledování interakce cis-pt s DNA. Automatizace a optimalizace použitých elektrochemických metod nám dovoluje zrychlit a zjednodušit studium interakce Pt komplexů s DNA. Díky naší technice je možné studovat mechanismus působení a určit výslednou protinádorovou účinost sledovaného léčiva. Poděkování Práce byla finančně podpořena projekty CYTORES GAČR P301/10/0356, NANIMEL GAČR 102/08/1546, Liga proti rakovině Praha 2011 a CEITEC CZ.1.05/1.1.00/ Popisky k obrázkům Obr. 1 A - Kalibrační křivka platiny (PtCl 2 rozpuštěno v roztoku KOH) naměřená pomocí diferenční pulzní voltametrie. B - Vliv doby modifikace DNA cis-pt na koncentraci cis- Pt v komplexu. C naměřené voltamogramy Pt, z nichž byla vytvořena kalibrační závislost (viz A). LITERATURA 1. Fuertes, M. A., et al., (2003): Biochemical modulation of cisplatin mechanisms of action: Enhancement of antitumor activity and circumvention of drug resistance, Chemical Reviews, 103: van Zutphen, S., et al., (2005): Targeting platinum anti-tumour drugs: Overview of strategies employed to reduce systemic toxicity, Coordination Chemistry Reviews, 249: Kaneko, G., et al., (2011): Neoadjuvant Gemcitabine Plus Cisplatin for Muscle-invasive Bladder Cancer, Japanese Journal of Clinical Oncology, 41: Monjardet-Bas, W., et al., (2002): Fast interstrand cross-linking of Cisplatin-DNA monoadducts compared with intrastrand chelation: A kinetic study using hairpin-stabilized duplex oligonucleotides, Chemistry-a European Journal, 8: Jamieson, E. R., et al., (1999): Structure, recognition, and processing of cisplatin-dna adducts, Chemical Reviews, 99: Arjmand, F., et al., (2011): Cyclic Voltammetry-An Electrochemical Approach to Study Metal-based Potential Antitumor Drug-DNA Interaction, Current Analytical Chemistry, 7: Kizek, R., et al., (2002): Determination of nanogram quantities of osmium-labeled single stranded DNA by differential pulse stripping voltammetry, Bioelectrochemistry, 55:
5 8. Palecek, E., et al., (2002): DNA hybridization at microbeads with cathodic stripping voltammetric detection, Talanta, 56: Palecek, E., et al., (2002): Electrochemical enzyme-linked immunoassay in a DNA hybridization sensor, Analytica Chimica Acta, 469: Zimmermann, S., et al., (2001): Trace analysis of platinum in biological samples: a comparison between sector field ICP-MS and adsorptive cathodic stripping voltammetry following different digestion procedures, Analytica Chimica Acta, 439: Zimmermann, S., et al., (2003): Determination of Pt, Pd and Rh in biological samples by electrothermal atomic absorption spectrometry as compared with adsorptive cathodic stripping voltammetry and total-reflection X-ray fluorescence analysis, Analytica Chimica Acta, 498:
Název: Stanovení železa ve vzorcích krve pomocí diferenční pulzní voltametrie
Název: Stanovení železa ve vzorcích krve pomocí diferenční pulzní voltametrie Školitel: MVDr. Ludmila Krejčová Datum: 24.2. 2012 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.0148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce
VíceSarkosin jako jednoduchý test na rakovinu prostaty analytická studie přednášky Natalia Cernei
Název: Školitel: Sarkosin jako jednoduchý test na rakovinu prostaty analytická studie přednášky Natalia Cernei Datum: 20.1.2011 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.0148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce
VíceSpecifická izolace microrna pomocí magnetizovatelných mikročástic
Název: Školitel: Specifická izolace microrna pomocí magnetizovatelných mikročástic Veronika Vlahová Datum: 21. 3. 214 Reg.č.projektu: CZ.1.7/2.3./2.148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce v oblasti
VíceStanovení olovnatých iontů zapouzdřených v liposomech The determination of lead ions encapsulated in liposomes
Laboratoř Metalomiky a Nanotechnologií Anotace Stanovení olovnatých iontů zapouzdřených v liposomech The determination of lead ions encapsulated in liposomes Olovo je těžký kov, který je toxický i při
VíceOPTIMALIZACE METODY ANODICKÉ ROZPOUŠTĚCÍ VOLTAMETRIE PRO ANALÝZU BIOLOGICKÝCH VZORKŮ S OBSAHEM RTUTI
Středoškolská technika 212 Setkání a prezentace prací středoškolských studentů na ČVUT OPTIMALIZACE METODY ANODICKÉ ROZPOUŠTĚCÍ VOLTAMETRIE PRO ANALÝZU BIOLOGICKÝCH VZORKŮ S OBSAHEM RTUTI Eliška Marková
VíceMonitorování hladiny metalothioneinu a thiolových sloučenin u biologických organismů vystavených působení kovových prvků a sloučenin
Laboratoř Metalomiky a Nanotechnologií Monitorování hladiny metalothioneinu a thiolových sloučenin u biologických organismů vystavených působení kovových prvků a sloučenin Ing. Kateřina Tmejová, Ph. D.,
VíceMikrofluidní systémy a možnosti jejich automatizovaného a vzdáleného řízení
SPOLEČNĚ PRO VÝZKUM, ROZVOJ A INOVACE CZ/FMP.17A/0436 Mikrofluidní systémy a možnosti jejich automatizovaného a vzdáleného řízení Ondřej Zítka 09. 04. 2015, 13:00 13:20 h Laboratoř metalomiky a nanotechnologií,
VíceRenáta Kenšová. Název: Školitel: Datum: 24. 10. 2014
Název: Školitel: Sledování distribuce zinečnatých iontů v kuřecím zárodku za využití moderních technik Monitoring the distribution of zinc ions in chicken embryo using modern techniques Renáta Kenšová
VíceNázev: Školitel: Datum:
Název: Školitel: Sledování distribuce kademnatých iontů v kuřecím zárodku za využití moderních technik Monitoring the distribution of cadmium ions in chicken embryo using modern techniques Renáta Kenšová
VíceELEKTROCHEMIE JAKO NÁSTROJ PRO STUDIUM INTERAKCE MATRIXOVÉ METALOPROTEINÁZY-9 A KOLAGENU. univerzita v Brně, Zemědělská 1, 613 00 Brno
ELEKTROCHEMIE JAKO NÁSTROJ PRO STUDIUM INTERAKCE MATRIXOVÉ METALOPROTEINÁZY-9 A KOLAGENU Ondřej Zítka 1,2, Dalibor Húska 2, Vojtěch Adam 2,3, Libuše Trnková 4, René Kizek 2 1 Ústav biochemie, Přírodovědecká
VíceMINIATURIZACE PRŮTOKOVÝCH ELEKTROCHEMICKÝCH CEL PRO GENEROVÁNÍ TĚKAVÝCH SLOUČENIN. Jakub Hraníček
MINIATURIZACE PRŮTOKOVÝCH ELEKTROCHEMICKÝCH CEL PRO GENEROVÁNÍ TĚKAVÝCH SLOUČENIN Jakub Hraníček Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Karlova, Albertov 6, 128 43 Praha 2 E-mail:
VíceElektrochemická analýza metalothioneinu u pacientů s onkologickým onemocněním
Blok: Nádorové markery Elektrochemická analýza metalothioneinu u pacientů s onkologickým onemocněním René Kizek 1,2*, JiříSochor 1,2, David Hynek 1,2, Soňa Křížková 1,2, Vojtěch Adam 1,2, Tomáš Eckschlager
VíceSIMULTANEOUS DETERMINATION OF COPPER, CADMIUM AND LEAD IN BIOLOGICAL MATRIX SOUČASNÉ STANOVENÍ MĚDI, KADMIA A OLOVA V BIOLOGICKÉ MATRICI
SIMULTANEOUS DETERMINATION OF COPPER, CADMIUM AND LEAD IN BIOLOGICAL MATRIX SOUČASNÉ STANOVENÍ MĚDI, KADMIA A OLOVA V BIOLOGICKÉ MATRICI Hanuštiak P. 1), Petřek J. 2), Potěšil D. 1,3), Adam V. 1,3), Havel
VíceModifikace uhlíkové pastové elektrody pro stanovení stříbrných iontů
Název: Školitel: Modifikace uhlíkové pastové elektrody pro stanovení stříbrných iontů Mgr. Dana Dospivová Datum: 24.2.212 Reg.č.projektu: CZ.1.7/2.3./2.148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce v oblasti
VíceELECTROCHEMICAL BEHAVIOUR OF UREASE AND UREASE MODIFIED ELECTRODE ELEKTROCHEMICKÉ CHOVÁNÍ UREASY A UREASOU MODIFIKOVANÁ ELEKTRODA
ELECTROCHEMICAL BEHAVIOUR OF UREASE AND UREASE MODIFIED ELECTRODE ELEKTROCHEMICKÉ CHOVÁNÍ UREASY A UREASOU MODIFIKOVANÁ ELEKTRODA Hradecký J. 1), Petrlová J. 1), Zehnálek J. 1), Babula P. 2), Adam V. 1),
VíceIzolace, separace a detekce proteinů a nukleových kyselin a jejich význam VOJTĚCH ADAM
Izolace, separace a detekce proteinů a nukleových kyselin a jejich význam VOJTĚCH ADAM Životní prostředí Obranné mechanismy Rostlinná buňka Živočišná buňka 2GS - M M GSH VAKUOLA GSH GSH *Aktivace* PC -
VíceU = E a - E k + IR Znamená to, že vložené napětí je vyrovnáváno
Voltametrie a polarografie Princip. Do roztoku vzorku (elektrolytu) jsou ponořeny dvě elektrody (na rozdíl od potenciometrie prochází obvodem el. proud) - je vytvořen elektrochemický článek. Na elektrody
VíceVARIOUS ELECTROCHEMICAL TECHNIQUES FOR PRION PROTEIN DETERMINATION
VARIOUS ELECTROCHEMICAL TECHNIQUES FOR PRION PROTEIN DETERMINATION Šobrová P., Adam V., Kizek R. Department of Chemistry and Biochemistry, Faculty of Agronomy, Mendel University in Brno, Zemědělská 1,
VíceInhibitory koroze kovů
Inhibitory koroze kovů Úvod Korozní rychlost kovových materiálů lze ovlivnit úpravou prostředí, ve kterém korozní děj probíhá. Mezi tyto úpravy patří i použití inhibitorů koroze kovů. Inhibitor je látka,
VíceELEKTROCHEMIE JAKO NÁSTROJ PRO STUDIUM INTERAKCE MATRIXOVÉ METALOPROTEINASY-9 A KOLAGENU
ELEKTROCHEMIE JAKO NÁSTROJ PRO STUDIUM INTERAKCE MATRIXOVÉ METALOPROTEINASY-9 A KOLAGENU ONDŘEJ ZÍTKA a,b, DALIBOR HÚSKA b, VOJTĚCH ADAM b,c, LIBUŠE TRNKOVÁ d a RENÉ KIZEK b a Ústav biochemie, Přírodovědecká
VíceMagnetické částice pro detekci nádorových onemocnění, založené na protilátkách Vojtěch Adam
Název: Školitel: Magnetické částice pro detekci nádorových onemocnění, založené na protilátkách Vojtěch Adam Datum: 7..203 Reg.č.projektu: CZ..07/2.4.00/3.0023 Název projektu: Partnerská síť centra excelentního
VíceVoltametrické stanovení diazepamu a nordiazepamu na meniskem modifikované stříbrné pevné amalgámové elektrodě
U N I V E R Z I T A K A R L O V A V P R A Z E P ř í r o d o v ě d e c k á f a k u l t a Studijní program: Chemie Studijní obor: Analytická chemie D i p l o m o v á p r á c e Voltametrické stanovení diazepamu
VíceIZOLACE DNA POMOCÍ MAGNETIZOVATELNÝCH ČÁSTIC A JEJICH VYUŽITÍ V DIAGNOSTICE NÁDOROVÝCH ONEMOCNĚNÍ
IZOLACE DNA POMOCÍ MAGNETIZOVATELNÝCH ČÁSTIC A JEJICH VYUŽITÍ V DIAGNOSTICE NÁDOROVÝCH ONEMOCNĚNÍ Marcela Vlčnovská 1, Kristýna Šmerková 1, Simona Dostálová 2, Jiří Sochor 1, René Kizek 1* 1 Ústav chemie
VíceUhlíkové struktury vázající ionty těžkých kovů
Uhlíkové struktury vázající ionty těžkých kovů 7. června/june 2013 9:30 h 17:30 h Laboratoř metalomiky a nanotechnologií, Mendelova univerzita v Brně a Středoevropský technologický institut Budova D, Zemědělská
VíceMONITORING KOVŮ PLATINOVÉ ŘADY V ŽIVOTNÍM PROSTŘEDÍ
MONITORING KOVŮ PLATINOVÉ ŘADY V ŽIVOTNÍM PROSTŘEDÍ Ing. Anna Cidlinová, MUDr. Magdalena Zimová, CSc., Ing. Zdena Podolská, MUDr. Jan Melicherčík, CSc. Státní zdravotní ústav v Praze Česká zemědělská univerzita
VíceVoltametrie (laboratorní úloha)
Voltametrie (laboratorní úloha) Teorie: Voltametrie (přesněji volt-ampérometrie) je nejčastěji používaná elektrochemická metoda, kdy se na pracovní elektrodu (rtuť, platina, zlato, uhlík, amalgamy,...)
VíceGRAFEN VERSUS MWCNT; POROVNÁNÍ DVOU FOREM UHLÍKU V DETEKCI TĚŽKÉHO KOVU. Název: Školitel: Mgr. Dana Fialová. Datum: 15.3.2013
Název: Školitel: GRAFEN VERSUS MWCNT; POROVNÁNÍ DVOU FOREM UHLÍKU V DETEKCI TĚŽKÉHO KOVU Mgr. Dana Fialová Datum: 15.3.2013 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.0148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce
VíceStudium vlastností liposomů jako přenašečů léčiv pomocí různých analytických metod
Název: Školitel: Studium vlastností liposomů jako přenašečů léčiv pomocí různých analytických metod Roman Guráň Datum: 6.2.2014 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.4.00/31.0023 Název projektu: Partnerská síť centra
VíceLABORATOŘE OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE
LABORATOŘE OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) Z Technologie prekurzorů léčiv onkologických onemocnění Vedoucí práce: Ing. Jan Svoboda Umístění práce: AS58 1 1 ÚVOD Platinová cytostatika tvoří nejvýznamnější
VíceUrychlení úpravy krvetvorby poškozené cytostatickou terapií (5-fluorouracil a cisplatina) p.o. aplikací IMUNORu
Urychlení úpravy krvetvorby poškozené cytostatickou terapií (5-fluorouracil a cisplatina) p.o. aplikací IMUNORu Úvod Myelosuprese (poškození krvetvorby) patří mezi nejčastější vedlejší účinky chemoterapie.
VíceLaboratorní práce č. 8: Elektrochemické metody stanovení korozní rychlosti
Laboratorní práce č. 8: Elektrochemické metody stanovení korozní rychlosti Cíl práce: Cílem laboratorní úlohy Elektrochemické metody stanovení korozní rychlosti je stanovení korozní rychlosti oceli v prostředí
VíceNové metody v průtokové cytometrii. Vlas T., Holubová M., Lysák D., Panzner P.
Nové metody v průtokové cytometrii Vlas T., Holubová M., Lysák D., Panzner P. Průtoková cytometrie Analytická metoda využívající interakce částic a záření. Technika se vyvinula z počítačů částic Počítače
VíceEtela Kouklíková. Vyšší odborná a Střední zemědělská škola Benešov Mendelova 131, 256 01 Benešov 1/27
Středoškolská technika 2011 Setkání a prezentace prací středoškolských studentů na ČVUT VOLTAMERICKÁ STANOVENÍ FLUORODIFENU Etela Kouklíková Vyšší odborná a Střední zemědělská škola Benešov Mendelova 131,
Více2) Připravte si 3 sady po šesti zkumavkách. Do všech zkumavek pipetujte 0.2 ml roztoku BAPNA o různé koncentraci podle tabulky.
CVIČENÍ Z ENZYMOLOGIE 1) Stanovení Michaelisovy konstanty trypsinu pomocí chromogenního substrátu. Aktivita trypsinu se určí změřením rychlosti hydrolýzy chromogenního substrátu BAPNA (Nα-benzoyl-L-arginin-p-nitroanilid)
VíceEvropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti ELEKTROMIGRAČNÍ METODY
Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti ELEKTROMIGRAČNÍ METODY ELEKTROFORÉZA K čemu to je? kritérium čistoty preparátu stanovení molekulové hmotnosti makromolekul stanovení izoelektrického
Více2 Roztoky elektrolytů. Osmotický tlak
Roztoky elektrolytů. Osmotický tlak 1. Doplněním uvedených schémat vyjádřete rozdílné chování různých typů látek po jejich rozpuštění ve vodě. Použijte symboly AB(aq), A + (aq), B - (aq). [s pevná fáze,
Více2) Připravte si 7 sad po pěti zkumavkách. Do všech zkumavek pipetujte 0.2 ml roztoku BAPNA o různé koncentraci podle tabulky.
CVIČENÍ Z ENZYMOLOGIE 1) Stanovení Michaelisovy konstanty trypsinu pomocí chromogenního substrátu. Aktivita trypsinu se určí změřením rychlosti hydrolýzy chromogenního substrátu BAPNA (Nα-benzoyl-L-arginin-p-nitroanilid)
VíceAutomatická potenciometrická titrace Klinická a toxikologická analýza Chemie životního prostředí Geologické obory
Automatická potenciometrická titrace Klinická a toxikologická analýza Chemie životního prostředí Geologické obory Titrace je spolehlivý a celkem nenáročný postup, jak zjistit koncentraci analytu, její
VíceVOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ NITROVANÝCH EKOTOXICKÝCH SLOUČENIN NA LEŠTĚNÉ STŘÍBRNÉ PEVNÉ AMALGÁMOVÉ KOMPOZITNÍ ELEKTRODĚ
VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ NITROVANÝCH EKOTOXICKÝCH SLOUČENIN NA LEŠTĚNÉ STŘÍBRNÉ PEVNÉ AMALGÁMOVÉ KOMPOZITNÍ ELEKTRODĚ JAN DĚDÍK, VLASTIMIL VYSKOČIL a JIŘÍ BAREK Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká
VíceANALYTICAL METHODS FOR DETERMINATION OF METAL- BINDING PEPTIDES AND PROTEINS ANALYTICKÉ METODY PRO STANOVENÍ PEPTIDŮ A PROTEINŮ VÁZAJÍCÍCH KOVY
ANALYTICAL METHODS FOR DETERMINATION OF METAL- BINDING PEPTIDES AND PROTEINS ANALYTICKÉ METODY PRO STANOVENÍ PEPTIDŮ A PROTEINŮ VÁZAJÍCÍCH KOVY Vacek J. 1,2, Kizek R. 1, Havel L. 2, Klejdus B. 1 1 Ústav
VíceIng.Branislav Ruttkay-Nedecký, Ph.D., Ing. Lukáš Nejdl
Název: Školitel: Vznik radikálů v přítomnosti DNA, heminu, peroxidu vodíku, ABTS, kovových iontů a jejich spektrofotometrická detekce Ing.Branislav Ruttkay-Nedecký, Ph.D., Ing. Lukáš Nejdl Datum: 11.10.2013
VíceBc. Jana Tvrdíková VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ DINITRONAFTALENŮ POMOCÍ KRYSTALOVÉ STŘÍBRNÉ AMALGAMOVÉ ELEKTRODY
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE Přírodovědecká fakulta Studijní program: Chemie Studijní obor: Analytická chemie Bc. Jana Tvrdíková VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ DINITRONAFTALENŮ POMOCÍ KRYSTALOVÉ STŘÍBRNÉ AMALGAMOVÉ
VíceLABORATORNÍ PŘÍSTROJE A POSTUPY
Chem. Listy 00, 0 0 (00) LABORATORNÍ PŘÍSTROJE A POSTUPY VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ SUBMIKROMOLÁRNÍCH KONCEN- TRACÍ -NITROFLUORANTHENU A PENDIMETHALINU NA STŘÍBRNÉ PEVNÉ AMALGÁMOVÉ ELEKTRODĚ LUCIE VAŇKOVÁ
VíceHodnocení účinku cytostatik a inhibitorů histondeacetylázy na nádorové buňky in vitro
Hodnocení účinku cytostatik a inhibitorů histondeacetylázy na nádorové buňky in vitro T.Groh 1,2, J.Hraběta 1, T.Eckschlager 1 1 Klinika dětské hematologie a onkologie, 2.LF UK a FN Motol a 2 Katedra biochemie
VíceP. Verner, V. Chrást
ACTA UNIVERSITATIS AGRICULTURAE ET SILVICULTURAE MENDELIANAE BRUNENSIS SBORNÍK MENDELOVY ZEMĚDĚLSKÉ A LESNICKÉ UNIVERZITY V BRNĚ Ročník LIII 13 Číslo 2, 2005 Chování konverzních vrstev v laboratorních
VíceLABIFEL: Laboratoře Biofyzikální Chemie a Elektrochemie
LABIFEL: Laboratoře Biofyzikální Chemie a Elektrochemie doc. RNDr., CSc. doc. Jan Hrbáč, Dr., Mgr. Libor Gurecký, Bc. Aneta Večeřová, Markéta Bosáková CO? JAK? Protonační a komplexotvorné rovnováhy DNA,
VícePufry, pufrační kapacita. Oxidoredukce, elektrodové děje.
ÚSTAV LÉKAŘSKÉ BIOCHEMIE A LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY 1. LF UK Pufry, pufrační kapacita. Oxidoredukce, elektrodové děje. Praktické cvičení z lékařské biochemie Všeobecné lékařství Martin Vejražka, Tomáš Navrátil
VícePrůtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny)
Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny) 1. Přímé měření: analyzovaná kapalina většinou odvětvena + vhodný detektor 2. Kapalinová chromatografie (HPLC) Stanovení po předchozí separaci 3.
VíceImunochemické metody. na principu vazby antigenu a protilátky
Imunochemické metody na principu vazby antigenu a protilátky ANTIGEN (Ag) specifická látka (struktura) vyvolávající imunitní reakci a schopná vazby na protilátku PROTILÁTKA (Ab antibody) molekula bílkoviny
VíceIZOLACE, SEPARACE A DETEKCE PROTEINŮ I. Vlasta Němcová, Michael Jelínek, Jan Šrámek
IZOLACE, SEPARACE A DETEKCE PROTEINŮ I Vlasta Němcová, Michael Jelínek, Jan Šrámek Studium aktinu, mikrofilamentární složky cytoskeletu pomocí dvou metod: detekce přímo v buňkách - fluorescenční barvení
VíceKurz 1 Úvod k biochemickému praktiku
Kurz 1 Úvod k biochemickému praktiku Pavla Balínová http://vyuka.lf3.cuni.cz/ Důležité informace Kroužkový asistent: RNDr. Pavla Balínová e-mailová adresa: pavla.balinova@lf3.cuni.cz místnost: 410 studijní
VíceElektrochemické metody
Elektrochemické metody Konduktometrie Coulometrie Potenciometrie, Iontově selektivní elektrody (ISE) Voltametrie (Ampérometrie, Polarografie) Biosenzory Petr Breinek Elektrochemie_N2012 Elektrochemie Elektrochemie
VíceChemická reaktivita NK.
Chemické vlastnosti, struktura a interakce nukleových kyselin Bi7015 Chemická reaktivita NK. Hydrolýza NK, redukce, oxidace, nukleofily, elektrofily, alkylační činidla. Mutageny, karcinogeny, protinádorově
VíceIzolace nukleových kyselin
Izolace nukleových kyselin Požadavky na izolaci nukleových kyselin V nativním stavu z přirozeného materiálu v dostatečném množství požadované čistotě. Nukleové kyseliny je třeba zbavit všech látek, které
VíceNanotransportéry pro teranostické aplikace
Název: Nanotransportéry pro teranostické aplikace Školitel: Simona Dostálová, Markéta Vaculovičová Datum: 21. 3. 2014 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.0148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce v oblasti
VíceSoučasné stanovení toxických a esenciální iontů těžkých kovů
Současné stanovení toxických a esenciální iontů těžkých kovů Teoretická část: metody pro stanovení těžkých kovů, jejich instrumentace, výhody a nevýhody různých postupů pro přípravu vzorků. Praktická část:
VíceELEKTROCHEMIE NA SYSTÉMECH S TENKÝMI VRSTVAMI ELECTRO-CHEMICAL ANALYSIS ON SYSTEMS THIN FILM SUBSTRATE
ELEKTROCHEMIE NA SYSTÉMECH S TENKÝMI VRSTVAMI ELECTRO-CHEMICAL ANALYSIS ON SYSTEMS THIN FILM SUBSTRATE Klára Jačková Roman Reindl Ivo Štěpánek Katedra materiálu a strojírenské metalurgie, Západočeská univerzita
VíceNÁVOD K POUŽITÍ VÁPNÍK 600 KATALOGOVÉ ČÍSLO 207
NÁVOD K POUŽITÍ VÁPNÍK 600 KATALOGOVÉ ČÍSLO 207 POUŽITÍ Souprava Vápník 600 se používá ke kvantitativnímu stanovení koncentrace vápenatých iontů v séru a moči. SOUHRN V lidském organismu je vázána převážná
VíceChem. Listy 104, 186 190 (2010)
Chem. Listy, 8 9 () VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ -NITROPYRENU A -AMINOPYRENU NA BOREM DOPOVANÉ DIAMANTOVÉ FILMOVÉ ELEKTRODĚ OKSANA YOSYPCHUK*, KAROLINA PECKOVÁ a JIŘÍ BAREK Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká
VícePokročilé AFM mody Příprava nosičů a vzorků. Verze 20110707 Jan Přibyl, pribyl@nanobio.cz
Pokročilé AFM mody Příprava nosičů a vzorků Verze 20110707 Jan Přibyl, pribyl@nanobio.cz bsah prezentace 1 Pokročilé AFM módy Kontaktní mód - Konstatní výška - Konstantní síla - Chybový profil - Modulace
VíceLaboratoř Metalomiky a Nanotechnologií
Laboratoř Metalomiky a Nanotechnologií PROTOKOL: Experimenty s deoxyribonukleovou kyselinou vykazující peroxidázovou aktivitu VYUČUJÍCÍ: Ing.Branislav Ruttkay-Nedecký, PhD., Ing. Lukáš Nejdl Anotace DNA
VíceHybridizace nukleových kyselin
Hybridizace nukleových kyselin Tvorba dvouřetězcových hybridů za dvou jednořetězcových a komplementárních molekul Založena na schopnosti denaturace a renaturace DNA. Denaturace DNA oddělení komplementárních
VíceVývoj a inovace nových nanomateriálů pro cílenou modifikaci cévních náhrad. NanoCeva
Vývoj a inovace nových nanomateriálů pro cílenou modifikaci cévních náhrad NanoCeva Řešitelská pracoviště Vysoké učení technické Brno (řešitel), Výzkumný ústav pletařský (spoluřešitel), Mendelova univerzita
VíceDistribuce. Doc. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Katedra farmakologie a toxikologie Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové
Distribuce Doc. PharmDr. František Štaud, Ph.D. Katedra farmakologie a toxikologie Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Definice Distribuce je fáze farmakokinetiky, při které
VíceKonduktometrie. Potenciometrie, Iontově selektivní elektrody (ISE) Voltametrie (Ampérometrie, Polarografie)
Elektrochemické metody Konduktometrie Coulometrie Potenciometrie, Iontově selektivní elektrody (ISE) Voltametrie (Ampérometrie, Polarografie) Biosenzory Petr Breinek Elektrochemie-I 2012 Elektrochemie
VíceStanovení korozní rychlosti elektrochemickými polarizačními metodami
Stanovení korozní rychlosti elektrochemickými polarizačními metodami Úvod Měření polarizačního odporu Dílčí děje elektrochemického korozního procesu anodická oxidace kovu a katodická redukce složky prostředí
VíceJan Vyvadil VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ EXPLOZIVA PENTRITU
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE P ř írodovědecká fakulta Studijní program: Chemie Studijní obor: Chemie v přírodních vědách Jan Vyvadil VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ EXPLOZIVA PENTRITU Voltammetric Determination
VíceInteraktivní nástroje pro výuku léčebných standardů cytostatické léčby zhoubných nádorů Portál DIOS
Interaktivní nástroje pro výuku léčebných standardů cytostatické léčby zhoubných nádorů Portál DIOS Klimeš D., Dušek L., Kubásek J., Fínek J., Petruželka L., Zoláková A., Vyzula R. Historie projektu Snaha
VíceVOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ KARCINOGENNÍHO 4-NITROBIFENYLU
VOLTAMETRICKÉ STANOVENÍ KARCINOGENNÍHO -NITROBIFENYLU EVA HORÁKOVÁ, VLASTIMIL VYSKOČIL a JIŘÍ BAREK Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká Fakulta, Katedra analytické chemie, UNESCO laboratoř elektrochemie
VíceBunka a bunecné interakce v patogeneze tkánového poškození
Bunka a bunecné interakce v patogeneze tkánového poškození bunka - stejná genetická výbava - funkce (proliferace, produkce látek atd.) závisí na diferenciaci diferenciace tkán - specializovaná produkce
VíceSYLVIE SKALIČKOVÁ a, PAVEL KOPEL b, ONDŘEJ ZÍTKA b, LIBUŠE TRNKOVÁ b, VOJTĚCH ADAM a,b a RENÉ KIZEK a,b. Experimentální část. Úvod
NANOČÁSTICEMI MODIFIKOVANÁ ELEKTRODA ZE SKELNÉHO UHLÍKU V MIKROPRŮTOKOVÉM USPOŘÁDÁNÍ PRO ANALÝZU NUKLEOVÝCH KYSELIN OBSAHUJÍCÍCH OPAKOVANÉ SEKVENCE ADENINU SYLVIE SKALIČKOVÁ a, PAVEL KOPEL b, ONDŘEJ ZÍTKA
VíceOd polarografie k elektrochemii na rozhraní dvou kapalin
Od polarografie k elektrochemii na rozhraní dvou kapalin Vladimír Mareček Ústav fyzikální chemie Jaroslava Heyrovského AV ČR 1. Počátky elektrochemie 2. Rtuťová kapková elektroda 3. Polarografie 4. Rozhraní
VíceNukleární Overhauserův efekt (NOE)
LEKCE 8 Nukleární verhauserův efekt (NE) určení prostorové struktury molekul využití REY spektroskopie projevy NE a chemické výměny v jednom systému Nukleární verhauserův efekt (NE) důsledek dipolární
VíceVYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS
1 VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS JAN KNÁPEK Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta MU, Kotlářská 2, Brno 611 37 Obsah 1. Úvod 2. Tepelný zmlžovač 2.1 Princip 2.2 Konstrukce 2.3 Optimalizace
VíceSTUDY OF COMPLEXES OF ANIMAL METAL-BINDING PROTEIN WITH PLATINUM CYTOSTATICS
STUDY OF COMPLEXES OF ANIMAL METAL-BINDING PROTEIN WITH PLATINUM CYTOSTATICS STUDIUM KOMPLEXŮ ŽIVOČIŠNÝCH KOV-VAZNÝCH PROTEINŮ S PLATINOVÝMI CYTOSTATIKY Šobrová P. 1, Zítka O. 1, Komínkova M. 1, Skaličková
VícePokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii
Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1/1 Proč biofyzikální metody? Biofyzikální metody využívají fyzikální principy ke studiu biologických systémů Poskytují kvantitativní
VíceAspartátaminotransferáza (AST)
1 Aspartátaminotransferáza (AST) AST je buněčný enzym přítomný v řadě tkání, jako jsou srdce, kosterní svaly, ledviny, mozek, játra, pankreas či erytrocyty. Vyskytuje se ve dvou izoformách, cytoplazmatické
VíceVYUŽITÍ BEZKONTAKTNÍ VODIVOSTNÍ DETEKCE PRO HPLC SEPARACI POLYKARBOXYLÁTOVÝCH DERIVÁTŮ CYKLENU. Anna Hamplová
VYUŽITÍ BEZKOTAKTÍ VODIVOSTÍ DETEKCE PRO HPLC SEPARACI POLYKARBOXYLÁTOVÝCH DERIVÁTŮ CYKLEU Anna Hamplová Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra analytické chemie Albertov 6, 128 43
VíceFEMTOGRAM ELECTROCHEMICAL SENSING OF PRION PROTEINS USING QUANTUM DOTS
FEMTOGRAM ELECTROCHEMICAL SENSING OF PRION PROTEINS USING QUANTUM DOTS FEMTOGRAMOVÉ ELEKTROCHEMICKÉ STANOVENÍ PRIONOVÝCH PROTEINŮ POMOCÍ KVANTOVÝCH TEČEK Šobrová P. 1, Zítka O. 1, 2, Ryvolová M. 1, 2,
VíceGalvanický článek. Li Rb K Na Be Sr Ca Mg Al Be Mn Zn Cr Fe Cd Co Ni Sn Pb H Sb Bi As CU Hg Ag Pt Au
Řada elektrochemických potenciálů (Beketova řada) v níž je napětí mezi dvojicí kovů tím větší, čím větší je jejich vzdálenost v této řadě. Prvek více vlevo vytěsní z roztoku kov nacházející se vpravo od
VíceElektrochemická redukce korozních produktů na stříbře a jeho slitinách
E (V) / ACLE Elektrochemická redukce korozních produktů na stříbře a jeho slitinách (Využití metody pro určování agresivity prostředí ve výstavních prostorách a depozitářích) Úvod Vyhodnocení agresivity
VícePrincipy chemických snímačů
Principy chemických snímačů Název školy: SPŠ Ústí nad Labem, středisko Resslova Autor: Ing. Pavel Votrubec Název: VY_32_INOVACE_05_AUT_99_principy_chemickych_snimacu.pptx Téma: Principy chemických snímačů
VíceProtinádorová aktivita polymerních konjugátů s navázanými taxany
Protinádorová aktivita polymerních konjugátů s navázanými taxany M. Šírová 1, T. Etrych 2, P. Chytil 2, K. Ulbrich 2, B. Říhová 1 1 Mikrobiologický ústav AVČR, v.v.i., Praha 2 Ústav makromolekulární chemie
VícePřehled finančně podpořených témat prací SOČ pro rok 2011/2012. vedoucí
Přehled finančně podpořených témat prací SOČ pro rok 2011/2012 název instituce vedoucí jméno řešitel škola 1 2 3 Souboj osteoblastů a osteoklastů při remodelaci kostí Návrh polohovacího zařízení řízené
VíceOdměrná analýza, volumetrie
Odměrná analýza, volumetrie metoda založená na měření objemu metoda absolutní: stanovení analytu ze změřeného objemu roztoku činidla o přesně známé koncentraci, který je zapotřebí k úplné a stechiometricky
VíceTRANSPORT PŘES MEMBRÁNY, MEMBRÁNOVÝ POTENCIÁL, OSMÓZA
TRANSPORT PŘES MEMBRÁNY, MEMBRÁNOVÝ POTENCIÁL, OSMÓZA 1 VÝZNAM TRANSPORTU PŘES MEMBRÁNY V MEDICÍNĚ Příklad: Membránový transportér: CFTR (cystic fibrosis transmembrane regulator) Onemocnění: cystická fibróza
VíceChem. Listy 105, s3 s9 (2011) Cena Merck 2011
STANOVENÍ GENOTOXICKÉHO 4-NITROINDANU POMOCÍ POLAROGRAFIC- KÝCH A VOLTAMETRICKÝCH METOD NA RTUŤOVÝCH A STŘÍBRNÝCH PEVNÝCH AMALGÁMOVÝCH ELEKTRODÁCH VENDULA BURDOVÁ, VLASTIMIL VYSKOČIL a JIŘÍ BAREK Univerzita
VíceHmotnost atomů a molekul 6 Látkové množství 11. Rozdělení směsí 16 Separační metody 20. Hustota, hmotnostní a objemový zlomek 25.
Obsah Obecná chemie II. 1. Látkové množství Hmotnost atomů a molekul 6 Látkové množství 11 2. Směsi Rozdělení směsí 16 Separační metody 20 3. Chemické výpočty Hustota, hmotnostní a objemový zlomek 25 Koncentrace
VíceJednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MELAMINU A KYSELINY KYANUROVÉ METODOU LC-MS
Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU MELAMINU A KYSELINY KYANUROVÉ METODOU LC-MS 1 Rozsah a účel Postup je určen pro stanovení obsahu melaminu a kyseliny kyanurové v krmivech. 2 Princip
VíceUSING OF METALLOTHIONEIN MODIFIED ELECTRODE SURFACE AS A SENSITIVE HEAVY METAL IONS BIOSENSOR FOR AN EVALUATION OF BEVERAGES QUALITY
USING OF METALLOTHIONEIN MODIFIED ELECTRODE SURFACE AS A SENSITIVE HEAVY METAL IONS BIOSENSOR FOR AN EVALUATION OF BEVERAGES QUALITY POUŽITÍ METALOTHIONEINEM MODIFIKOVANÉ ELEKTRODY JAKO CITLIVÉHO BISOENZORU
VíceVYUŽITÍ A VALIDACE AUTOMATICKÉHO FOTOMETRU V ANALÝZE VOD
Citace Kantorová J., Kohutová J., Chmelová M., Němcová V.: Využití a validace automatického fotometru v analýze vod. Sborník konference Pitná voda 2008, s. 349-352. W&ET Team, Č. Budějovice 2008. ISBN
Více