VITAMIN D3 V PRAXI J. Čepová,, M. Pechová,, J. Kolářov ová Ústav klinické biochemie a patobiochemie UK 2.LF a FN Motol Pracovní dny uživatelů analytických systémů Roche - 2010
Whistler
VITAMIN D - účinky - Resorpce kalcia ze střeva - Mobilizace Ca z kosti v době,, kdy není adekvátn tní příjem Ca potravou - Inhibice produkce keratinocytů,, fibroblastů, - Indukce produkce IL 1 u monocytů - Inhibice produkce PTH a IL2
VITAMIN D Název pro 2 molekuly Ergokalciferol (vitamin D2) ozářen ením rostlinného sterolu ergosterolu. Cholekalciferol (vitamin D3) ze 7-dehydrocholesterolu v kůžk ůži působením m slunečního zářenz ení.
VITAMIN D V játrech j probíhá enzymatická aktivace biologicky neúčinn inného cholekalciferolu na 25- hydroxykalciferol - 25(OH)D fyziologicky neúčinný. V ledvinách dochází k regulované přeměně na dva metabolity: - 1,25(OH) 2 D účinná látka - 24,25(OH) 2 D V plazmě se různr zné metabolity Vitaminu D vážou v na transportní bílkovinu VDBP (vitamin D binding protein).
7-dehydrocholesterol vitamin D 3 kůže, UV játra, 25-OH hydroxyláza 25(OH) D 3 ledviny, 24-OH 24,25(OH) 2 D 3 ledviny: 1α-OH Ca, PTH, PO 4 1,25(OH) D 3 cílové tkáně ledviny: 24-OH + 1,25-(OH) 2 D 3 1,24,25,(OH) 3 D 3 oxidace, štěpení postranních řetězců kyselina kalcitroová
Historie stanovení vitaminu D3 ve FN Motol Původně ELISA kit Octeia od IDS Zkřížen ené reakce s 25(OH)D 2 a 24,25 (OH) 2 D3 Velké problémy se stabilitou vzorku nutno dodávat na ledu a ihned zpracovat nebo zamrazit. Nutnost naplnit aspoň polovinu destičky zpracování 1x týdně
Vitamin D3 - současnost 19.12.2007 přechod p na stanovení Elecsys Vitamin D3 (25-OH) - původně na Elecsysu 2010, nyní Cobas e411 Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA Kompetiční test Vzorky sérum s nebo plazma (Li-heparin, K 2 - a K 3 -EDTA) Rozsah měřm ěření 10 250 nmol/l
Vitamin D3 stabilita vzorku Z příbalovp balového letáku: 8 hodin při p i 18-25 25 C, 4 dny při p i 2-8 C, 2 6 měsícům při -20 C. jen Li-heparin plazma 8 hodin při p 18-25 25 C, 1 den při p i 2-8 C 2 - nemrazit Naše e studie tyto hodnoty pro vzorky séra ověř ěřila a potvrdila.
Vitamin D3 kalibrace teorie Frekvence kalibrace (z příbalovp balového letáku): Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži. Obnovena po 28 dnech při p i používání stejné šarže e nebo po 7 dnech při p i používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru nebo dle potřeby (výsledky kontrol mimo určen ené rozmezí).
Vitamin D3 kalibrace praxe Do 4.1.2010 (tj. cca za 2 roky provozu): 85 kalibrací celkem pro 12 šarží Do šarže e 155 233 prakticky kalibrace pro každou novou soupravu bez ohledu na šarži. Od 4.1.2010 počet rekalibrací: : 0 Důvody zlepšen ení: : optimalizace standardizace
Vitamin D3 kontrola kvality IKK - používáme firemní PreciControl Bone Výhoda: 3 hladiny, dobrá stabilita Nevýhoda: změna hodnot pro každou šarži (nutnost častých změn n v programu kvality) BioRad - Liquichek Specialty Immunoassay Control Výhoda: nezávisl vislá kontrola Nevýhoda: nemá beta-crosslaps, nutnost další kontroly EKK DGKL, CAP
Vitamin D 90% vitaminu D pochází v přírodp rodě z ozářen ení kůže e sluncem. Se stárnut rnutím m klesá postupně schopnost pokožky ky tvořit vitamin D aža o ¾. Uvádí se, že e v současnosti je deficitem vitaminu D v Evropě a v USA ohroženo 30-50% populace.
Doporučen ené množstv ství vitaminu D Z běžb ěžné potravy se získz skává 50-150 IU denně Doporučen ená denní dávka je 800 1000 IU/ den Tolerovaná horní hranice příjmu p vitaminu D je 2000 IU/den
Referenční rozmezí a varovné meze Vitamin 25 (OH) D3D - kalcidiol Min. dopor. hodnoty - nad 40-50nmol/l. Vitamin 1,25(OH)2D3 - kalcitriol 43 149 pmol/l (dospělí) 96 240 pmol/l (děti)
Vitamin D Deficit vitaminu D pod 40 nmol/l vede k sekundárn rnímu zvýšen ení PTH a zvýšen ené kostní resorpci Pokles koncentrace vitaminu D pod 30 nmol/l vede k poklesu svalové síly
Vitamin D3 - v roce 2009 Celkový počet pacientských vzorků: : 4 257 z toho mužů žů: : 937 žen: 3 320 děti d do 18 let: 863 Hodnoty: < 40 nmol/l: muži 314 (33,51%) ženy 808 (24,33 %) > 70 nmol/l: muži 205 (21,88%) ženy 741 (22,32 %) > 100 nmol/l: muži 51 ženy eny 48 děti - 43 Nejvyšší naměř ěřené hodnoty: 4 x >250 nmol/l, chlapec 4 roky 203,2 nmol/l (po transplantaci jater), dívka d 9 let 233,9 nmol/l (CCF), naši i pacienti z ambulance (pentasacharid-idraparinux idraparinux + warfarin ).
Vitamin D3 - v roce 2009 Nejčast astější zákazníci: Metabolická ambulance ÚKBP - většina Imunologie cca 250 vyšet etření Interní klinika cca 200 vyšet etření Centrum CF cca 170 vyšet etření Pediatrická klinika cca 250 vyšet etření Onkologie 5 vyšet etření LDN - 0
Metabolická ambulance Historie Počet pacientů: : cca 4000 Popis pacientů : DLP, nutrice, osteologická problematika Studie Vzdělávac vací akce
Sezónn nní výkyvy hladin vitaminu D v populaci zdravých a osteoporotických pacientů Studie z roku 2008 5 skupin: Muži Premenopauzáln lní ženy Pacientky s osteopéni nií Postmenopauzáln lní ženy s osteoporózou Postmenopauzáln lní ženy bez osteoporózy a bez léčby l vitaminem D
Hladiny vitaminu D u mužů Hladiny vitamínu D u mužů 70 60 Vitamín D (nmol/l) 50 40 30 20 Jaro Podzim 10 0 Jaro Roční období Podzim
Hladiny vitaminu D u muž ů Počet mužů ve skupině : 25 Průměrný rný věk v k mužů : 40,3 (18-53)r. Jaro hladiny vit.d Podzim hladiny vit.d Minimum 23,39 (1973) 17,64 (1975) Maximum 74,85 (1965) 96,1 (1957) Průměrn rná hodnota 47,89 55,12
Hladiny vitaminu D u premenopauzáln lních žen Hladiny vitamínu D u premenopauzálních žen 80 70 Vitamín D (nmol/l) 60 50 40 30 20 10 Jaro Podzim 0 Jaro Roční období Podzim
Hladiny vitaminu D u premenopauzáln lních žen Počet žen ve skupině : 25 Průměrný rný věk v žen : 36,6 (18-54) r. Jaro - hladiny vit. D Podzim Hladiny vit D Minimum 23,3 (1966) 21,3 (1955) Maximum 114,8 (1984) 129,7 (1985) Průměrn rná hodnota 51,85 64,52
Hladiny vitaminu D u pacientek s osteopénii na Vigantolu Pacientky s osteopenií na vigantolu V itam ín D (nm ol/l) 62 61 60 59 58 57 56 55 54 53 52 Jaro Roční období Podzim Jaro Podzim
Hladiny vitaminu D u pacientek s osteopénii na Vigantolu Počet pacientek ve skupině : 25 Průměrný rný věk v k pacientek : 67 (54-84) r. Jaro - hladiny vit. D Podzim Hladiny vit D Minimum 29,2 (1932) 33,5 (1924) Maximum 92,4 (1949) 87,2 (1950) Průměrn rná hodnota 57,12 59,88
Postmenopauzáln lní ženy s OP na Vigantolu Postmenopauzální ženy s osteoporózou na vigantolu 65,5 65 Vitamin D (nmol/l) 64,5 64 63,5 63 62,5 Jaro Roční období Podzim
Postmenopauzáln lní ženy s OP na Vigantolu Počet pacientek ve skupině : 25 Průměrný rný věk v k pacientek : 69,08 (56-86) r. Jaro - hladiny vit. D Podzim Hladiny vit D Minimum 36,1 (1946) 49,4 (1951) Maximum 104,7 (1926) 88,5 (1952) Průměrn rná hodnota 64,58 63,78
Postmenopauzáln lní ženy bez OP a medikace Hladiny vitamínu D u postmenopauzálních žen 70 60 Vitamín D (nmol/l) 50 40 30 20 10 Jaro Podzim 0 Jaro Roční období Podzim
Postmenopauzáln lní ženy bez OP a medikace Počet pacientek ve skupině : 25 Průměrný rný věk v k pacientek : 63,29 (52-72) r. Jaro - hladiny vit. D Podzim Hladiny vit D Minimum 16,84 (1953) 28,65 ( 1951) Maximum 84,36 (1946) 88 (1943) Průměrn rná hodnota 45,16 55,97
Sezónn nní výkyvy hladin vitaminu D v populaci zdravých a osteoporotických pacient ů - závěr U mužů žů,, pacientek s osteopéni nií na léčběl Vigantolem a u postmenopauzáln lních žen s osteoporózou (léčených) nebyla zjištěna statisticky významná odchylka. U premenopauzáln lních žen a u postmenopuzáln lních žen bez osteoporózy a bez léčby l vitaminem D byla zjištěna statisticky významná odchylka.
Sezónn nní výkyvy hladin vitaminu D v populaci zdravých a osteoporotických pacientů - závěr V běžné populaci se nacházej zejí skupiny náchylnější ke vzniku osteoporózy. Jedná se o zatím m zdravé lidí s hodnotami vitaminu D3 okolo 40 nmol/l. U řady pacientů nedošlo k významným změnám m hladin vitaminu D ani v průběhu roku, neprojevil se vliv slunečního zářenz ení.
A co se změnilo v roce 2010? V měsíci m lednu jsme stanovili hladinu vitaminu D u 150 náhodnn hodně vybraných pacientek s osteoporózou a s trvalou substitucí vitaminem D ( Vigantol 1000 IU/den).
Rok 2010 - hladiny vitaminu D Průměrn rná hodnota Nejvyšší hodnota Nejnižší hodnota Zima 2009 Podzim 2009 Zima 2010 46,92 67,81 34,05 105,5 111,2 72,7 <10 28,7 <10
Na závěr. z Doba slunečního svitu byla v lednu 2010 ( na Karlově) 35,8 hodin oproti roku 2009, kdy bylo 42,4 hodin slunečního svitu. Pacientky měly m stále stejnou, doporučenou terapeutickou dávku d Vigantolu -22 kapky, tedy 1000 IU/den. Kde se tedy stala chyba?
Na závěr. z I přes p nedokonalost stanovení (není definován žádný mezinárodn rodní standard) a počáte teční problémy je stanovení vitaminu D3 cenným přínosem p pro sledování kostních markerů u pacientů. Výhodou je stanovení kostních markerů (osteokalcin, CTx, PTH, vitaminu D3 a P1NP) z jedné zkumavky a takřka ka v reáln lném čase.
Děkuji za pozornost