OBI v registru dárců krve FN Brno Pacasová R., Tesařová E., Křížová E. Transfuzní a tkáňové oddělení FN Brno 8. Střešovický transfuzní den, Praha 26.11.2014
Virus hepatitidy B Virus hepatitidy B (HBV) čeleď Hepadnaviridae Malý obalený DNA virus (32-40 nm), infikuje jaterní buňky (hepatocyty) DNA HBV - dvouvláknová, kruhová (cirkulární) s jednovláknovým úsekem cca 600-2100 nukleotidů (celý genom cca 3200 nukleotidů)
Virus hepatitidy B DNA HBV v jádře hostitelské buňky vytváří cccdna (covalently closed circular DNA) - templátovou matrici pro transkripci čtyř y virových mrna Produkty transkripce o HBsAg - povrchový antigen kapsidu (virového obalu), jako první z virových antigenů ů se objevuje j v časné éfázi iinfekce (asi i6týd týdnů ů po infekci) o HBeAg antigen dřeně viru, v průběhu akutní infekce o HBcAg antigen dřeně viru (nelze detekovat v séru) Protilátky proti antigenům o anti-hbs o anti-hbc o anti-hbe
Historie 1885 Bremen první popsaná epidemie i hepatitidy B 1963 - Blumberg - objev Ab v séru australských Aboriginů Australský antigen - Au 1967 identifikace virového antigenu Au = HBsAg 1970 průkaz Dane particles (D.S.Dane, el. mikroskopu (dřeňovýň HBcAg) 1973 objev dřeňového HBeAg, testování HBsAg u DK 1976 Nobelova cena pro Barucha Samuela Blumberga 80. léta první vakcíny derivované z krevní plazmy (1981) a sekvenování genomu 2001 plošná vakcinace v ČR 2007 Světový den hepatitid 28.7. pro prevenci, diagnostiku a léčbu
Screening DK ve FN Brno 1973 HBsAg / anti-hbs o imunoprecipitační metody a doplňující testy anti - HBs elektroforezou 1980-1985 HBsAg o pasivní reverzní hemaglutinace, enzymová imunoanalýza EIA 1986-1987 HBsAg o EIA na mikrotitračních plotnách, konfirmační test Elisa 1993 HBsAg o poloautomatická linka - EIA 2003 HBsAg o enzymová imunoanalýza na mikročásticích - MEIA 2007 HBsAg o chemiluminiscence na mikročásticích - CMIA 2010 HBsAg o elektrochemiluminiscenční imunoanalýza - ECLIA 2012 HBV DNA o real time PCR analýza HBV DNA
Infekce HBV Celosvětově ě infikováno HBV více než 2,6 miliardy lidí, chronická infekce u více než 400 milionů osob Příčina smrti u více než 500 tisíc osob/ rok Prevalence infekce od > 8% (Čína, Brazílie, Korea) po < 2%(USA, severní Evropa, Austrálie) ČR - nízká prevalence, chronicky infikováno 0,56 % populace. Výskyt má trvale klesající trend (vakcinace, screening DK, jednorázová injekční technika) Vzrůstá význam přenosu sexuálním stykem, tetováním/ pearsingem, nitrožilními uživateli drog
Infekce HBV Akutní hepatitida B Inkubační doba je průměrně 120 dní (rozmezí 45-160 dní) Probíhá bezpříznakově nebo s mírnými příznaky o nevolnost, zvracení, bolest břicha a žloutenka, kožní vyrážka, bolestivost kloubů a artritida 0,1-1 % fulminantní formě s vysokou mortalitou Akutní infekce HBV přechází v chronickou infekci o 90 % novorozenců o 30 % infekcí dětského věku o 6-10 % dospívajících o 1-5 % dospělých pacientů
Infekce HBV Chronická hepatitida B Infekce trvá > 6 měsíců (často mnoho let) Způsobuje chronické onemocnění jater, fibrózu, cirhózu a hepatocelulární karcinom (HCC) Skupiny pacientů: o HBsAg + pacienti s perzistující aktivní virovou replikací (HBV DNA > 10 5 kopií/ ml) o HBsAg + pacienti s útlumem virové replikace v důsledku: Koinfekce s virem hepatitidy D, (HBV DNA < 10 3 kopií/ ml) Koinfekce s virem hepatitidy C, (anti-hcv, HBV DNA < 10 5 kopií/ml) Inaktivní nosičství HBsAg (anti-hbe, HBV DNA < 10 3-10 5 kopií/ml možná reaktivace) Střídání aktivní replikace a klidu (HBeAg minus mutanti) o HBsAg pacienti s okultní infekcí virem hepatitidy B (OBI)
OBI HBV HBsAg nelze prokázat v séru anti-hbc / nebo anti-hbs v séru přítomny NEBO i bez jejich přítomnosti (i WP!) HBV DNA v játrech vždy prokazatelná HBV DNA v séru (nižší než 20 25 IU/ml) Pravděpodobnost d výskytu ýk je přímo úměrnáě prevalenci infekce HBV v populaci F k d t k OBI á i í i žitý h Frekvence detekce OBI závisí i na použitých screeningových testech
OBI HBV? Frekvence výskytu OBI HBV u dárců krve?? Riziko OBI HBV infekce jako TTI?
OBI u DK Region Měsíce Počet DK Test NAT Záchyt* Výskyt Publikováno Japonsko 36 17.314.486 MP50-NAT 50 1:665.941 Canada 18 493.344 MP6-NAT 29 1:69.300 Čína 18 41.301 MP8-NAT 2 1:20.650 Španělsko 24 383.267 MP8-NAT/ ID-NAT 18 1:21.282 MP1:51.011 ID1:9.862 USA 12 6.460.000 MP6-NAT 142 1:45.493 Austrálie 24 2.673.521 MP-NAT 50 1:53.470 Transfusion 2007 47(7):1162-7 Transfusion 2007 47(10):1809-1515 Transfus Apher Sci 2009 41(1):3-7 Transfusion 2010 50(1):221-30 Transfusion 2012 52(2):440-6 Transfusion 2014 54(8):2084-91 *HBsAg negativní, anti-hbc +/-, anti-hbs +/-
OBI u DK Region Měsíce Počet DK Test NAT Záchyt* Výskyt Publikováno Japonsko 36 17.314.486 MP50-NAT 50 1:665.941 Canada 18 493.344 MP6-NAT 29 1:69.300 Čína 18 41.301 MP8-NAT 2 1:20.650 Španělsko 24 383.267 MP8-NAT/ ID-NAT 18 1:21.282 MP1:51.011 ID1:9.862 USA 12 6.460.000 MP6-NAT 142 1:45.493 Austrálie 24 2.673.521 MP-NAT 50 1:53.470 ČR TTO FN Brno Transfusion 2007 47(7):1162-7 7 Transfusion 2007 47(10):1809-15 Transfus Apher Sci 2009 41(1):3-7 Transfusion 2010 50(1):221-30 Transfusion 2012 52(2):440-6 Transfusion 2014 54(8):2084-91 39 88.932 MP6-NAT 3 1:29.644 8. střešovický TD *HBsAg negativní, anti-hbc +/-, anti-hbs +/-
OBI u DK Region Měsíce Počet DK Test NAT Záchyt* Výskyt WP* vs. OBI Japonsko 36 17.314.486 MP50-NAT 50 1:665.941 6x mutace viru Canada 18 493.344 MP6-NAT 29 1:69.300 29x OBI Čína 18 41.301 MP8-NAT 2 1:20.650 2x OBI MP8-NAT/ 1:21.282 Španělsko 24 383.267 18 MP1:51.011 ID-NAT ID1:9.862 USA 12 6.460.000 MP6-NAT 142 1:45.493 Austrálie 24 2.673.521 MP-NAT 50 1:53.470 ČR TTO FN Brno 39 88.932 MP6-NAT 3 1:29.644 5x WP** 13x OBI (6x anti-hbc neg) 12x WP** 130x OBI 8x WP** 42x OBI 1x WP** 2x OBI *HBsAg negativní, anti-hbc +/-, anti-hbs +/- ** WP imunologické okno, časná fáze infekce HBV
OBI u DK FN Brno 2x DK - oba pravidelní DK (chronická HBV - OBI) 62 odběrů o oba HBsAg NEGATIVNÍ o oba HBV DNA POZITIVNÍ o oba anti-hbc POZITIVNÍ (dodatečně) o 1. DK anti-hbs 436,5 miu/ml (očkován) o 2. DK anti-hbs negativní, 6,22 miu/ml (nebyl očkován) 1x DK - prvodárce (nová HBV infekce kandidát OBI?) o HBV DNA POZITIVNÍ o 1. vyšetření (21.3.2011) HBsAg POZITIVNÍ SLABĚ (COI 2,98) anti-hbc NEGATIVNÍ o 2. vyšetření (17.5.2011) HBsAg NEGATIVNÍ, anti-hbc POZITIVNÍ
OBI HBV? Riziko OBI HBV infekce jako TTI?
OBI u DK FN Brno 2008 a 2009 oznámeno podezření na přenos HBV u 3 pacientů po aplikaci TP, vydaných k hemoterapii z TTO FN Brno v NRL pro virové hepatitidy SZÚ Praha bylo vyšetřeno celkem 63 dárců krve, z nichž 3 dárci krve prodělali HBV!
OBI u DK FN Brno pravidelný dárce krve, muž, 40 let, dárce trombocytů po dobu 15 let v pravidelných měsíčních intervalech (107 odběrů), HBV DNA 0,5 2,0 IU/ml (DK 1, OBI) pravidelný dárce krve, muž, 40 let, (44 odběrů) HBV DNA 464 IU/ml (DK 2) pravidelná dárkyně krve, žena, 25 let, (12 odběrů) anti-hbs 726,4 miu/ml (DK 3)
OBI u DK FN Brno 3 pacienti s HBV TTI - maligním onemocněním o žena, 50 let 2TUplazmy(HBV DNA 0,5 2,0 IU/ml; DK 1, OBI) 1 TU erytrocytů (anti-hbs 726,4 IU/ml; DK 3) o muž, 50 let 4 TU plazmy (HBV DNA 0,5 2,0 IU/ml; DK 1, OBI) o muž, 60 let 2TUplazmy(HBV DNA 0,5 2,0 IU/ml; DK 1, OBI) 1 TU erytrocytů (HBV DNA 464 IU/ml; DK 2) plazma propuštěna pro klinické použití po karanténě šesti měsíců výsledky HBsAg: opakovaně NEGATIVNÍ
Závěr Pravděpodobnost výskytu OBI je přímo úměrná prevalenci infekce HBV v populaci o od 1:10.000 do 1:600.000 Frekvence záchytu OBI závisí i na použitých screeningových testech o Doporučení ukončit testování HBsAg o Zavést testování HBV DNA a anti-hbc o Pravděpodobnost záchytu OBI se snižuje s rostoucí velikostí minipoolu při vyšetření HBV DNA Přenos HBV infekce TP od DK s OBI HBV je možný o Vyšší pravděpodobnost při HBsAg neg/ HBV DNA poz/ anti-hbc poz/ anti-hbs neg o Vyšší pravděpodobnost přenosu je u imunosuprimovaných příjemců amůže být potencován objemem podaných TP
A co více OBI infekce byla zjištěna u 30 % krevních vzorků a 50 % jaterních biopsií pacientů s chronickou hepatitidou C nízký záchyt OBI HBV i díky screeningu anti-hcv u DK od roku 1992? (Nishikawa H., Osaki Y., J Cancer 2013, 4(6):473-480) Infekce HBV u očkovaných Infekce HBV u očkovaných osob podporuje vznik OBI nárůst případů OBI HBV? (Gerlich WH. et al., Dig Dis 2010, 28(1):116-25)
A co více OBI infekce byla zjištěna u 30% krevních vzorků a 50% jaterních biopsií pacientů s chronickou hepatitidou C nízký výskyt OBI HBV i díky vylučování anti-hcv pos DK (od roku 1992!)? (J Cancer 2013, 4(6):473-480) 480) Infekce HBV u očkovaných osob podporuje vznik OBI nárůst případů OBI HBV? (Dig Dis 2010, 28(1):116-25)
Děkuji za pozornost