Syllabus pro dosažení kvalifikace klinického embryologa

Transkript

1 Syllabus pro dosažení kvalifikace klinického embryologa Blok 1. Základní pojmy: buněčná biologie, molekulární biologie a genetika 1.1 Buňka Vnitřní organizace Řízení buněčného cyklu, kontrolní body Mitóza a meióza Reprodukční buňky: spermie a oocyty 1.2 Mezibuněčné vztahy Membránové receptory; funkce, typy, regulace Signalizace Spojení 1.3 Základní genetika buňky DNA, chromatin, chromozómy Koncepce genu Mutace Epigenetika 1.4 Základy genové regulace Translace. Transkripce. Exprese Imprinting 1.5 Základy genetiky Genotyp. Fenotyp. Základní Mendelova pravidla dědičnosti Monogenní choroby Chromozómové abnormality: numerické, strukturní Interpretace rodokmenu 1.6 Genetická analýza Jak a proč Základní metody: Cytogenetika (karyotypizace, FISH,..), Molekulární genetika (PCR, ) 1.7 Embryonální kmenové buňky Původ. Definice. Charakteristika Blok 2. Mužská reprodukce 2.1 Fetální testis Faktory regulující vývoj Primordiální buňky Migrace buněk Časové schéma (dny /týdny) 2.2 Anatomie a funkce mužského reprodukčního systému včetně přídatných systémů včetně funkce orgánů 2.3 Spermatogenéza Regulující faktory CNS, hypofýza FSH, LH, T, zpětná vazba Leydigovy a Sertoliho buňky Zrání Biochemie a metabolizmus spermií 1

2 Morfologie/struktura spermií Funkce jednotlivých struktur 2.4 Vyšetření vzorku spermií spermiogram Funkční analýza Mikroskopická analýza WHO směrnice CASA systém apod. Blok 3 Ženská reprodukce 3.1 Fetální ovarium Faktory regulující vývoj Primordiální buňky Migrace buněk Časové schéma (dny /týdny) 3.2 Anatomie a funkce ženského reprodukčního systému včetně přídatných systémů včetně funkce orgánů 3.3 Oogenéza Regulující faktory CNS, hypofýza FSH, LH, E, zpětná vazba Thekální a granulózové buňky Zrání oocytu Biochemie a metabolizmus oocytu Morfologie / struktura oocytu Funkce všech struktur 3.4 Oocyt známky kompetence Jaderná zralost Cytoplazma Polární tělíska Zona pellucida Kumulární buňky Blok 4 Časný vývoj embrya časná gravidita 4.1 Od interakce gamet po první dělení Oplození Acrozomální reakce Signalizace mezi oocytem a spermií Dekondenzace spermie Aktivace oocytu Meióza II, prvojádra, formování dělícího vřeténka 4.2 Embryonální vývoj- od prvního dělení po implantaci Metabolizmus, poloha buněk, embryonální osa Kinetika, časování, regulace Apoptóza 4.3 Implantace Hatching, adheze, invaze, endometrium 4.4 Postimplantační embryologie Gastrulace Organogeneze 2

3 Diferenciace pohlaví 4.5 Výsledek IVF Produkce hcg, těhotenský test Implantation rate, ultrasonografie (váčky, srdeční akce) 4.6 Selhání časné gravidity Mimoděložní těhotenství, spontánní potraty embryonální faktory vs. děložní faktory Blok 5 Důvody neplodnosti, laboratorní vyšetření a léčba 5.1 Neplodný pár Důvody medicínské, genetické, hormonální, fyzikální Příčiny a následky Definice, primární sterilita, sekundární sterilita, ženská vs. mužská 5.2 Screening pacientů Fyzikální / sérologický Které testy se používají? Po čem se má pátrat? Screening dárců 5.3 Typ a volba léčby Chirurgická Hormonální stimulace Inseminace IVF / ICSI Darování spermií Darování oocytů 5.4 Ovariální hyperstimulace Základní principy Typy podávaných léků Protokoly stimulace (typy, principy) OHSS 5.5 Výsledky Zdraví dětí Rizikové faktory Mateřské faktory Otcovské faktory Mnohočetná těhotenství Chromozomální faktory Malformace Imprinting atd. Blok 6. Laboratorní procedury - praxe od získání oocytu po transfer Proč děláme věci tímto způsobem / v tomto pořadí? 6.1 Strategie výběru způsobu fertilizace IVF nebo ICSI, kritéria IVM PESA, TESA, TESE, dárcovské spermie Vztah k výsledku sérologických testů (diferencované zacházení a uchovávání) 6.2 Vzorek spermií metody přípravy Centrifugace, swim-up, swim-out, atd. Funkční 3

4 Kdy co použít, proč, rozdíly 6.3 IVF Účelnost IVF a ICSI Pick-up, manipulace s oocyty, inseminace 6.4 ICSI Denudace Inječní procedura 6.5 Hodnocení (skórování) embryí, 1. až 6. den Hodnocení prvojader, Morfologická kritéria Kinetika, genetika, fyziologie (např. aminokyseliny, metabolizmus kyslíku) Důsledky (kryokonzervace, transfer) 6.6 Podmínky kultivace Media Kultivační systémy Požadavky na živiny Fyzikálně chemické parametry (teplota, ph, osmolality) Požadavky specifické pro jednotlivá stadia 6.7 Vybavení Kalibrace Validace, monitorování, pracovní deníky, údržba a kontrola 6.8 Mikroskopy Principy optických systémů, kalibrace, údržba a kontrola 6.9 Transfer embrya Ověřování identity Počty embryí Plnění a kontrola katetru 6.10 Biopsie blastomer Otvírání zony (pro a proti) Různé typy biopsie, počty buněk Blok 7 Program kryokonzervace 7.1 Principy mrazení a tání buněk Základy kryobiologie Kryoprotektiva, additiva Pomalé mrazení Vitrifikace, časování Přednosti a nedostatky různých metod 7.2 Mrazení a tání spermií 7.3 Mrazení a tání oocytů 7.4 Mrazení a tání embryí 7.5 Mrazení a tání ovariální tkáně 4

5 7.6 Mrazení a tání testikulární tkáně 7.7 Vybavení Přístroje Pejety/ampule Media, contamination from storage medium (What a Why) Minimal safety requirements Security 7.8 Cyklus s kryoembryotranferem Monitorování a časování cyklu s kryoembryotranferem Přirozené cykly Blok 8 Hodnocení kvality, statistiky, zpracování dat, etika, legislativa 8.1 Data pacientů Ověřování identity Diskrétnost Vedení záznamů Bezpečnost Kódování 8.2 Zabezpečení kvality Identifikační postupy Hodnocení kvality, ukazatelé SOP Sledovatelnost Ověřování Monitorování, využití ukazatelů kvality Pracovní deníky Zavádění nové metody (když, jak, kdy) 8.3 Statistická analýza Stanovení velikosti výběru Uspořádání studie Statistický rozptyl Interpretace výsledků 8.4 Legislativa Národní legislativa (co je dovoleno v ČR) Etické úvahy Soubor zásad 8.5 Direktiva EU Příklady toho, co direktiva pokrývá Implementace v ČR 8.6 Nerutinní metody IVM PGS AHA Blok 9 Rizika 9.1 Kontaminované vzorky Zpracování a uchovávání vzorku, o němž je známo (je podezřelý), že je infikován 9.2 Ochrana pracovníků Hygiena, 5

6 Pravidla a předpisy, Ochranná opatření (rukavice, masky atd.) Opatření proti zranění 9.3 Nežádoucí příhody, záchranné strategie Jak zabránit, co dělat? Např. záměna gamet, ztráta nebo poškození během manipulace Transfer špatných embryí Poškození přístrojů, záchranné strategie 9.4 Vyhledávání závad 6