Interakce viru klíšťové encefalitidy s hostitelským organismem a patogeneze infekce

HTML
DOWNLOAD

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Interakce viru klíšťové encefalitidy s hostitelským organismem a patogeneze infekce"

Lucie Havlová
před 9 lety
Počet zobrazení:

1 Parazitologický ústav, Akademie věd České republiky Laboratoř interakcí vektor-hostitel České Budějovice Interakce viru klíšťové encefalitidy s hostitelským organismem a patogeneze infekce Daniel Růžek, Jiří Salát, Martin Palus, Jana Širmarová, Jan Kopecký Seminář Klíšťová encefalitida a jiné infekce přenášené klíšťaty. Lékařský dům, Praha, 24. května 2011

patogeneze infekce Daniel Růžek, Jiří Salát, Martin Palus, Jana Širmarová, Jan Kopecký

2 Replication in other organs and tissues viremia Skin Replication Blood-brain barrier Blood stream Donoso Mantke, O., Karan, L.S., and Růžek, D In: Růžek, D. (editor) Encephalitis. InTech, Rijeka, ISBN:

Mantke, O., Karan, L.S., and Růžek, D. 2011.

3 Zvířecí modely pro studium patogeneze KE -Laboratorní myš -Laboratorní potkan (TBEV infekce pouze u sajících jedinců po intracerebrálni inokulaci) -Syrský křeček (u dospělých jedinců klesá citlivost k infekci) -Opice (bezpříznaková infekce po subkutánním podání) -Lidské in vitro modely Lidské primární neurony ex vivo infikované virem KE

dospělých jedinců klesá citlivost k infekci) -Opice (bezpříznaková infekce po

4 Růžek et al., Travel Med. Infect. Dis.

5 Replication in other organs and tissues viremia Skin Replication Blood-brain barrier Blood stream

6 * * p<0.05

7 * * *

8 * * *

9 Replication in other organs and tissues viremia Skin Replication Blood-brain barrier Blood stream

10 Balb/c SCID C57Bl/6 CD8-/- Vypadají podobně, ale jsou jiné

15 Test of neuroinvasiveness after subcutaneous inoculation of 100 pfu of Hypr strain. Růžek et al. Virology 2009

16 SCID Isolation of CD8+ T- cells Balb/c Isolation of CD4+ T- cells

17 Ala Ser73 of NS3 Růžek et al., Virology 2008 Růžek et al., Virology 2009

18 Serum Brain Spleen Růžek et al., Virology 2009

19 Replication in other organs and tissues viremia Skin Replication Blood-brain barrier Blood stream

20 Paul Ehrlich (Ehrlich, 1885; Goldmann, 1913)

21 Stáří 6 týdnů; inokulace 100 pfu s.c. kmene Neudoerfl/IRE Růžek et al., 2011, PLoS One

22 # BALB/c p< C57Bl/6 p<0.05 Změny v hmotnosti těla Růžek et al., 2011, PLoS One

23 # BALB/c p< C57Bl/6 p<0.05 Růžek et al., 2011, PLoS One

24 BALB/c C57Bl/6 Titr viru stanovován metodou plakové titrace na buňkách PS Růžek et al., 2011, PLoS One

25 C57Bl/6 Sodium-fluorescein i.p. Růžek et al., 2011, PLoS One

26 + p<0.05 Růžek et al., 2011, PLoS One

27 + p<0.05 Růžek et al., 2011, PLoS One

28 Stanoveno metodou kvantitativní real-time RT-PCR a normalizováno vůči expresi housekeepingového genu Růžek et al., 2011, PLoS One

29 CD8-/- Růžek et al., 2011, PLoS One

30 Stanoveno metodou kvantitativní real-time RT-PCR a normalizováno vůči expresi housekeepingového genu

31 Hematoencefalická bariéra a virus KE u člověka? Neg. kontrola Kultura lidských primárních endoteliálních mozkových mikrokapilárních buněk infikováno virem KE, kmen Neudoerl o m.o.i. = 1 Obrázky zachycují stav druhý den po infekci.

32 Replication in other organs and tissues viremia Skin Replication Blood-brain barrier Blood stream Genetika?

33 Komplexní kontrola vývoje onemocnění patogen virulence a titr hostitel věk, pohlaví,, nutričnía imunitn itnístatus, stres, genotyp Lipoldová a Demant, 2006 Nature Rev. Genetics

34 Variability in the 2 5 -Oligoadenylate Synthetase Gene Cluster Is Associated with Human Predisposition to Tick- Borne Encephalitis Virus-Induced Disease J Infect Dis. (2010) 202(12): A Functional Toll-Like Receptor 3 Gene (TLR3) May Be a Risk Factor for Tick-borne Encephalitis Virus (TBEV) Infection J Infect Dis. (2011) 203(4):

35 Překonání potíží lidských asociačních studií Naše strategie: 2 kroky Lidské chromosomy 1) Použití robustního myšího modelu k nalezení kontrolních genů (lokusů) 2) Využití homologie mezi myším a lidským genomem k nalezení nových genů Myší homologie Lipoldová a Demant, 2006 Nature Rev. Genetics

36 Recombinantní kongenní kmeny myší BALB/c-c-STS/Dem = CcS/Dem series: 12.5% STS % BALB/c Lipoldová a Demant, 2006 Nature Rev. Genetics

38 STS CcS-11 BALB/c Balb/c STS

39 Intracerebrální inokulace 10 pfu, kmen Neudoerfl p<0.05

40 Titr viru v mozkové tkáni po intracerebrální inokulaci

41 IFNg TNFa MCP1 MIP-1b

43 Sliny klíštěte Přímé poškození nervových buněk Růžek et al., J. Gen. Virol. Imunopatologická role CD8+ T- lymfocytů Růžek et al Virology Porušení hematoencefalické bariéry Růžek et al., 2011 PLoS One Apoptóza a nekróza neuronů Biologické vlastnosti viru, dávka, stáří a genotyp hostitele

44 Parazitologický ústav AVČR RNDr. Patrik Kilian Doc. RNDr. Jan Kopecký, CSc. Bc. Martin Palus RNDr. Daniel Růžek, Ph.D. Bc. Jana Širmarová Poděkování Výzkumný ústav veterinárního lékařství Brno RNDr. Jiří Salát, Ph.D. Ústav molekulární genetiky AVČR Doc. Marie Lipoldová, CSc. RNDr. Jarmila Vojtíšková, CSc. Centre for Cellular and Molecular Biology, Hyderabad, Indie Dr.rer.nat. Sunit K. Singh P302/10/P438 P502/11/2116 Děkuji za pozornost!

Podobné dokumenty

Genetické mapování. v přírodních populacích i v laboratoři

Genetické mapování. v přírodních populacích i v laboratoři Genetické mapování v přírodních populacích i v laboratoři Funkční genetika Cílem je propojit konkrétní mutace/geny s fenotypem Vzniklý v laboratoři pomocí mutageneze či vyskytující se v přírodě. Forward