[K 17 odst. 3 písm. c) zákona]

Transkript

1 ČÁST B ŽÁDOST O UDĚLENÍ POVOLENÍ K UVÁDĚNÍ DO ŽIVOTNÍHO PROSTŘEDÍ PRO ÚČELY KLINICKÉHO HODNOCENÍ LÉČIVÝCH PŘÍPRAVKŮ [K 17 odst. 3 písm. c) zákona] 1. Název projektu: Klinické hodnocení fáze I-IIa k posouzení bezpečnosti a protinádorové aktivity autologních CAR T-buněk CD44v6 u akutní myeloidní leukémie a mnohočetného myelomu s expresí CD44v6 2. Žadatel 2.1. Jméno nebo název anebo obchodní firma, je-li žadatelem fyzická osoba oprávněná k podnikání: nevztahuje se 2.2. Název nebo obchodní firma a právní forma, je-li žadatelem právnická osoba: Fakultní nemocnice Ostrava 17. listopadu 1790/ Ostrava- Poruba Adresa sídla a adresa bydliště (u fyzických osob): nevztahuje se 2.5. IČO : Údaje o léčivém přípravku a léčebném postupu 5.1. Léčivý přípravek obsahuje geneticky modifikovaný organismus : ano terapeutický vektor: 5.2. Léčebný postup je: genová terapie (in vivo nebo ex-vivo) : genová terapie ex-vivo somatobuněčná terapie: jiné (uveďte): 6. Charakteristika geneticky modifikovaného organismu nebo terapeutického vektoru v léčivém přípravku 6.1. Geneticky modifikovaný organismus v léčivém přípravku je: virus : bakterie: buněčná linie: jiný (upřesněte): geneticky modifikované humánní autologní lymfocyty Charakteristika nakládání s geneticky modifikovaným organismem 7.1. Účel uvádění do životního prostředí GMO (MLM-CAR44.1 T-buňky) jsou definovány jako kryogenně zmrazené T-lymfocyty pacienta geneticky modifikované tak, aby exprimovaly CD44v6-specifický CAR (CAR CD44v6ΔNL) a HSV-TK Mut2 sebevražedný gen, který kóduje mutovanou formu thymidin kinázy viru herpes simplex I (HSV-TK). Je určen pro léčbu pacientů s AML (akutní myeloidní leukémie) nebo mnohočetným myelomem (MM). 8. Doba uvádění do životního prostředí 8.1. Celková doba uvádění geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí a datum jeho předpokládaného zahájení 10 let od zahájení v březnu Plánuje žadatel uvádění stejného geneticky modifikovaného organismu do

2 životního prostředí v některém členském státě Evropské unie nebo mimo její území? Pokud ano, uveďte: 9.1. stát, v němž žadatel uvádění do životního prostředí plánuje Klinická studie se stejným GMO bude provedena v Německu, Španělsku a Itálii 9.2. předpokládanou dobu zahájení a trvání uvádění do životního prostředí 10 let od března Podal žadatel žádost pro uvádění stejného geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí v jiném členském státě Evropské unie? Pokud ano, uveďte: stát, ve kterém byla žádost podána: Německo, Španělsko a Itálie datum podání a číslo nebo jiné označení žádosti Německo: 11. ledna 2019 Španělsko: 16. ledna 2019 Itálie: 13. prosince datum a označení povolení, bylo-li vydáno Všechny tři žádosti jsou ve fázi hodnocení období, na které se povolení vztahuje: ní použitelné 11. Podal žadatel žádost pro uvádění stejného geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí nebo na trh mimo území Evropské unie? Pokud ano, uveďte: stát, ve kterém byla žádost podána datum podání a číslo nebo jiné označení žádosti datum a označení povolení, bylo-li vydáno období, na které se povolení vztahuje 12. Hodnocení rizika uvádění geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí Shrnutí hodnocení rizika V rámci hodnocení rizika využití MLM-CAR44.1 buněk v léčebné terapii pacientů s mnohočetným myleomem nebo akutní myeloidní leukémie byly identifikovány následující možné hrozby: a) Přenos MLM-CAR44.1 buněk do jiného než cílového lidského subjektu b) Přenos MLM-CAR44.1 buněk maligně transformovaných při vnášení genů in vitro c) Horizontální přenos genu pro thyminovou kinázu HSV-TK Mut2 d) Horizontální přenos genu pro CAR CD44v6ΔNL do jiných organizmů Pravděpodobnost výskytu těchto událostí při dodržení všech stanovených podmínek byla vyhodnocena jako velmi nízká až nepravděpodobná a potencionální škodlivý účinek na lidský organizmus a životní prostředí jako nízký nebo velmi nízký. 13. Údaje o příjemci, případně, kde je to aplikovatelné, rodičovském organismu Organismus je virus bakterie buněčná linie jiný (upřesněte): humánní lymfocyty České a latinské rodové a druhové jméno organismu s přesným určením rasy (plemene, formy, kmene, buněčné linie, patovaru) Chordata (obratlovci), savci, primáti, člověk, Homo sapiens, běžný název lymfocytů

3 Výskyt a životní podmínky Geografické rozšíření, přirozený výskyt organismu ní použitelné Je organismus běžně používán v České republice / v Evropské unii? Metody identifikace a detekce organismu Metody detekce včetně údajů o jejich citlivosti, spolehlivosti a specifičnosti ní použitelné Metody identifikace včetně údajů o jejich citlivosti, spolehlivosti a specifičnosti Humánní lymfocyty mohou být identifikovány pro expresi linie specifických markerů, jako je CD3 pomocí imunofluorescence se specifickou protilátkou nebo pomocí molekulárních technik, jako je PCR Je organismus zařazen podle jiného právního předpisu upravujícího ochranu zdraví zaměstnanců při práci 10)? Pokud ano, uveďte příslušnou skupinu. Biologická bezpečnost úroveň Uveďte, zda je organismus patogenní nebo jiným způsobem škodlivý (živý nebo neživý, včetně mimobuněčných produktů). Pokud ano, uveďte, zda vzhledem k lidem, zvířatům, rostlinám nebo jinak. Škodlivost vždy jednoznačně identifikujte. Týkají se patogenní nebo škodlivé vlastnosti sekvencí použitých při genetické modifikaci? Pokud ano, jednoznačně identifikujte možné charakteristiky: patogenita: nakažlivost, infekčnost, virulence alergenní účinky toxické účinky nosič patogenu možné vektory, oblast hostitelů včetně necílového organismu možnost aktivace latentních virů (provirů) schopnost pronikat do jiných organismů či kolonizovat jiné organismy odolnost vůči antibiotikům a potenciální využití těchto antibiotik pro profylaxi a léčbu onemocnění u lidí a zvířat jiné Rozmnožování ní použitelné Generační doba v přirozeném prostředí Způsob rozmnožování (pohlavní, nepohlavní) Specifické faktory, které ovlivňují rozmnožování (pokud existují) Schopnost přežití Schopnost vytvářet odolné přežívající formy: endospory cysty jiné (jednoznačně identifikujte) Šíření v prostředí týká se tohoto produktu, protože humánní lymfocyty jsou schopné přežití pouze v lidském těle nebo ve velmi specifických in vitro podmínkách v přítomnosti cytokinů Způsob a rozsah šíření Specifické faktory ovlivňující šíření (pokud existují) týká se tohoto produktu, protože není známo, že humánní lymfocyty přenáší genetický materiál na jiný organismus

4 Předchozí genetické modifikace příjemce nebo rodičovského organismu povolené v České republice (včetně data a čísla jednacího rozhodnutí) 14. Údaje o genetické modifikaci organismu Typ genetické modifikace: vnesení cizorodého dědičného materiálu: ano vynětí části dědičného materiálu kombinace vynětí a vnesení dědičného materiálu buněčná fúze jiný (jednoznačně identifikujte) Zamýšlený výsledek genetické modifikace Pro získání exprese dvou transgenů pomocí MLM-CAR44.1 T-buněk: 1) chimérický antigenní receptor (CAR) CD44v6ΔNL specifický pro antigen CD44v6 exprimovaný na nádorových buňkách; 2) sebevražedný gen HSV-TK Mut2, který umožní usmrcení transdukovaných buněk podáním GCV, pokud nastane nežádoucí příhoda. CARexprimující MLM-CAR44.1 T-buňky vykazují své efektorové funkce, jako je produkce cytokinů a cytotoxicita, které nakonec vedou k eliminaci nádorových buněk Byl při genetické modifikaci použit vektor? Retrovirový vektor používaný pro ex-vivo transdukci je definovaný jako CAR- CD44v6 NL a kóduje: mutovanou formu HSV-TK (HSV-TK Mut2), která umožní kontrolu nežádoucích vedlejších účinků CAR CD44v6 NL, chimérický antigenní receptor specificky zacílený proti variantě 6 adhezní molekuly CD Je vektor zcela nebo částečně přítomen ve výsledném geneticky modifikovaném organismu? Ano Pokud vektor není ani částečně přítomen, pokračujte bodem Typ vektoru: plasmid bakteriofág virus: Ano kosmid phasmid transposon jiný vektor (jednoznačně identifikujte) Identita vektoru (původ, plné vědecké jméno, triviální jméno) CAR-CD44v6ΔNL je replikačně defektní gama-retrovirový vektor odvozený od LXSN vektoru na bázi Moloneyova murinního viru leukémie (MoMuLV) a pseudotypizovaného pomocí obálky GaLV (viru leukémie gibonů), který je schopný transdukce savčích buněk, včetně lidských buněk s výjimkou myších buněk Spektrum hostitelů vektoru (přirození hostitelé, rezervoáry) Hostitelské spektrum rekombinantních MoMuLV vektorů závisí na specificitě virové obálky. GaLV (virus leukémie gibbonů) umožní infekci širokého spektra savčích buněk, včetně humánních buněk s výjimkou myších buněk Přítomnost sekvence v dotyčném vektoru, která předává výběrový (selektovatelný) nebo identifikovatelný fenotyp: odolnost vůči antibiotikům (uvést přesný název léčivé látky) V integrovaném proviru není žádný gen rezistence k antibiotikům jiné (jednoznačně identifikujte) virový LTR identifikovatelný pomocí PCR Dílčí fragmenty vektoru a jejich přítomnost ve výsledném geneticky modifikovaném organismu

5 Genetický element Pozice Funkce 5 LTR (dlouhý terminální Repeat) Transkriční promotér Ψ+ gag Virové sekvence obsahující Ψ+ signál odpovědný za tvorbu kompletních virionů, (Miller a Rosman 1989) a 700bp MoLV gag genu, který nevytváří žádný funkční transkript, protože ATG startující kodon byl modifikovaný na TAG stop kodon HSV-TK Mut2 SV40 (Simian Virus 40) CAR CD44v6ΔNL (ORF) Virová sekvence a 3 LTR Sebevražedný gen Transkriční promotér Terapeutický a selekční gen Transkripční ukončení a polyadenylace Metody vnesení vektoru do organismu příjemce: transformace elektroporace makroinjekce mikroinjekce infekce: Ano jiné (upřesněte) Pokud nebyl při genetické modifikaci použit vektor, metoda vnesení insertu do organismu příjemce: transformace mikroinjekce mikroenkapsulace makroinjekce jiná (jednoznačně identifikujte) Údaje o insertu Údaje o každé části insertu, případně o každé vyňaté části dědičného materiálu, se zvláštním zřetelem k jakýmkoli známým škodlivým sekvencím Velikost Sekvence Původ Funkční charakteristika Dlouhé terminální repetice (Long Terminal Repeats, LTR): Strukturální geny se skládají z 420 bp fragmentu gag genu a Ψ+ balicího signálu a jsou oba retrovirového původu. HSV-TK Mut2 sebevražedný gen kóduje mutovanou formu thymidin kinázy viru herpes simplex I kmen CL101 (Abelson et al. Cancer Res, 1970). SV40 region podporuje expresi CAR CAR CD44v6ΔNL genu. CAR CD44v6ΔNL - rekombinantní fúzní protein zahrnující: i) Jednořetězcový variabilní fragment (scfv) ii) Spacer tvořený extracelulární doménou humánního receptoru nervového růstového faktoru s nízkou afinitou (ΔLNGFR), iii) Transmembránová a intracelulární doména humánní kostimulační molekuly CD28, iv) Intracelulární signalizační doména humánního CD3ζ řetězce, který je nezbytný pro aktivaci T buněk Umístění insertu v organismu příjemce: na volném plasmidu

6 insert integrován do chromozómu: Ano jiné (jednoznačně identifikujte) Obsahuje insert části, jejichž produkty nebo funkce nejsou známé? Informace o dárcovském organismu (organismu, ze kterého je insert odvozen) Dárcovský organismus je: viroid RNA virus DNA virus: cdna kódující HSV-TKMut bakterie houba (vláknitá mikromyceta, kvasinka) jiný mikroorganismus živočich (uveďte třídu) jiný organismus (upřesněte jaký) České a latinské rodové a druhové jméno dárcovského organismu s přesným určením kultivaru (odrůdy, rasy, plemene, linie, formy, hybridu, kmene, patovaru) týká se tohoto produktu Uveďte, zda je dárcovský organismus patogenní nebo jiným způsobem škodlivý (živý nebo neživý, včetně mimobuněčných produktů). Pokud ano, uveďte, zda vzhledem k lidem, zvířatům, rostlinám nebo jinak. Škodlivost vždy jednoznačně identifikujte. Týkají se patogenní nebo škodlivé vlastnosti sekvencí použitých při genetické modifikaci? Pokud ano, jednoznačně identifikujte možné charakteristiky: patogenita: nakažlivost, infekčnost, virulence alergenní účinky toxické účinky nosič patogenu možné vektory, oblast hostitelů včetně necílového organismu možnost aktivace latentních virů (provirů) schopnost pronikat do jiných organismů či kolonizovat jiné organismy odolnost vůči antibiotikům a potenciální využití těchto antibiotik pro profylaxi a léčbu onemocnění u lidí a zvířat jiné Je dárcovský organismus zařazen podle jiného právního předpisu upravujícího ochranu zdraví zaměstnanců při práci 8)? ní použitelné, protože používá cdna kódující HSV-TKMut2, ale nikoli dárcovský organismus (tj. HSV I kmen CL101) Pokud ano, uveďte příslušnou skupinu Vyměňují si příjemce a dárcovský organismus genetický materiál přirozeným způsobem? 17. Údaje o výsledném geneticky modifikovaném organismu Popis dědičných vlastností a fenotypových znaků, které byly změněny v důsledku genetické modifikace Liší se geneticky modifikovaný organismus od příjemce ve schopnosti přežití? Pokud ano, jednoznačně identifikujte Liší se geneticky modifikovaný organismus od příjemce ve způsobu nebo rychlosti reprodukce? Pokud ano, jednoznačně identifikujte.

7 Liší se geneticky modifikovaný organismus od příjemce ve schopnosti šíření? Pokud ano, jednoznačně identifikujte Liší se geneticky modifikovaný organismus od příjemce v patogenitě? Pokud ano, jednoznačně identifikujte Genetická stabilita geneticky modifikovaného organismu Opatření k zajištění genetické stability, faktory, které tuto stabilitu ovlivňují Metody ověřování genetické stability Exprese transgenu byla testována po 6 měsících uchovávání při teplotě < -130 C. Kromě toho údaje z literatury ukázaly, že velmi podobné GMO (tj. humánní lymfocyty transdukované stejným vektorem na bázi LXSN, který kóduje HSV-TK Mut2 a marker buněčného povrchu ΔLNGFR namísto CAR (tj. Zalmoxis, buněčná pokročilá léčba schválená EK v rámci podmínečné registrace (EU/1/16/1121), jsou geneticky stabilní 14. rok po in vivo podání pacientům (Oliveira G, Sci. Transl. Med 2015) Vlastnosti geneticky modifikovaného organismu, které mají vliv na jeho přežívání, rozmnožování a šíření v životním prostředí Geneticky modifikované MLM-CAR44.1 T-buňky jsou schopné přežití pouze v lidském těle nebo ve velmi specifických in vitro podmínkách v přítomnosti cytokinů Uveďte, zda je geneticky modifikovaný organismus patogenní nebo jiným způsobem škodlivý (živý nebo neživý, včetně mimobuněčných produktů). Pokud ano, uveďte, zda vzhledem k lidem, zvířatům, rostlinám nebo jinak. Škodlivost vždy jednoznačně identifikujte. Týkají se patogenní nebo škodlivé vlastnosti sekvencí použitých při genetické modifikaci? Pokud ano, jednoznačně identifikujte možné charakteristiky: patogenita: nakažlivost, infekčnost, virulence alergenní účinky toxické účinky nosič patogenu možné vektory, oblast hostitelů včetně necílového organismu možnost aktivace latentních virů (provirů) schopnost pronikat do jiných organismů či kolonizovat jiné organismy odolnost vůči antibiotikům a potenciální využití těchto antibiotik pro profylaxi a léčbu onemocnění u lidí a zvířat jiné (jednoznačná charakteristika) Popis metod identifikace a detekce geneticky modifikovaného organismu Metody používané k detekci geneticky modifikovaného organismu, včetně ověřené metodiky detekce Metody používané k identifikaci geneticky modifikovaného organismu v prostředí, včetně ověřené metodiky identifikace a údajů o spolehlivosti a citlivosti metod V důsledku povahy produktu a jeho zamýšleného použití pouze u specifických pacientů v nemocnicích se neočekává uvolnění GMO do prostředí. V případě potřeby však může být přítomnost GMO v životním prostředí monitorována prostřednictvím analýz vložených genů. Vzorky buněk mohou být analyzovány pomocí: Exprese CAR CD44v6 pomocí analýzy FACS pro LNGFR spacer; Detekce specifických transgenních sekvencí pomocí PCR. Výtěry nebo tekutiny mohou být analyzovány pomocí PCR pro detekci specifických transgenních sekvencí.

8 Relevantní údaje o předchozích případech uvádění stejného geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí, pokud existují, zejména ve vztahu k možným účinkům této činnosti na zdraví lidí a zvířat, životní prostředí a biologickou rozmanitost Studie hodnotící tuto specifickou GMO expresi CD44v6 CAR a sebevražedný gen HSV- TKMut2 nejsou k dispozici, protože první léčba u člověka se plánuje v dalších měsících. Byly však provedeny studie s humánními geneticky modifikovanými lymfocyty s retrovirovými faktory kódujícími CAR nebo HSV-TK geny. Zvláště geneticky upravené lymfocyty s RV vektorem na bázi LXSN, jako v tomto GMO, byly použity pro klinický vývoj (fáze I/II a fáze III) přípravku Zalmoxis, což je buněčná pokročilá terapie, které byla udělena podmínečná registrace Evropskou komisí (EU/1/16/1121). U těchto studií se neočekávají žádné negativní důsledky pro osoby a prostředí. 18. Informace o místě, na němž bude uvádění do životního prostředí probíhat Pracoviště, na němž bude uvádění do životního prostředí probíhat Fakultní nemocnice Ostrava, Klinika hematoonkologie Centrum buněčné terapie a diagnostiky Adresa pracoviště 17. listopadu 1790/5, Ostrava-Poruba 19. Popis nakládání s léčivým přípravkem obsahujícím geneticky modifikovaný organismus Přibližné množství geneticky modifikovaných organismů, které má být použito, počet subjektů a dávek MLM-CAR44.1 T-buňky podávané v jedné dávce pacientům se mění od minimálního počtu 0,5x10 6 buněk do maximálního počtu 2x10 6 buněk/kg Opatření k ochraně zdraví osob, které nakládají s léčivým přípravkem nebo jsou v kontaktu se subjekty klinického hodnocení Všechny osoby, které nejsou léčeny pomocí MLM-CAR44.1 T-buněk, ale mohou být exponovány MLM-CAR44.1 T-buňkám, mohou být považovány za necílové organismy. Protože MLM-CAR44.1 T-buňky nejsou uvolňovány do prostředí, nemohou být žádné jiné organismy necílovými organismy. Přenos MLM-CAR44.1 T-buněk na necílové jedince může nastat náhodným kontaktem. V tomto smyslu je podání pacientovi nejkritičtější fází a nemocniční personál může být potenciálně exponován. U zdravých jedinců se však při kontaktu s MLM-CAR44.1 T- buňkami náhodným kontaktem s krví nebo expozicí sliznic očekává, že eliminují buňky, protože imunitní systém jedince rozpozná dárcovské buňky jako ty, které nejsou tělu vlastní. Šance, že dvě osoby budou mít identický HLA systém, je extrémně nízká. Osoby s porušenou imunitou se nemohou účastnit podávání MLM-CAR44.1 T-buněk Popis dalšího nakládání s léčivým přípravkem a odpady, včetně jejich likvidace Popis opatření po skončení klinického hodnocení Po podání léčivého přípravku jsou rezidua a odpad inaktivovány a odstraněny podle informací v odstavci Způsob likvidace geneticky modifikovaných organismů a kontroly její účinnosti Po inaktivaci, jak je uvedeno v odstavci , bude veškerý odpadní materiál považován za infekční biologicky nebezpečný odpad kategorie Plán kontrol a dohledu Viz odstavec a a postupy klinického centra pro manipulaci s

9 biologicky nebezpečným odpadem Druhy vytvořených odpadů a jejich předpokládané množství Pevné a tekuté odpady Možná rizika vyplývající z nakládání s odpady mocniční personál je náležitě instruován o nejlepších postupech pro manipulaci s produktem před a během infuze a pro zacházení s opadem. Použitý materiál je pak inaktivován chemicky dle platného desinfekčního řádu Fakultní nemocnice Ostrava a dále je s ním nakládáno dle pravidel FNO pro infekční biologický materiál kategorie Inaktivovaný odpad je vložen do samostatného kontejneru označeného Biohazard a odstraňován společností OZO dle platen smlouvy Popis zneškodnění odpadů a metody kontroly jeho účinnosti Pevný odpad: veškerý materiál, který byl v kontaktu s GMO je po práci inaktivován chemicky dle platného desinfekčního řádu FNO. Po inaktivaci je umístěn do samostatného kontejneru označeného Biohazard. Odpad je odstraňován jako katalogové číslo Odvoz zajišťuje dle platné smlouvy společnost OZO Ostrava, Frýdecká 680/444, Ostrava Údaje o možných interakcích mezi geneticky modifikovaným organismem a životním prostředím a jeho vlivu na životní prostředí Předpokládaný mechanismus a výsledek interakcí s dalšími organismy v životním prostředí, které mohou být významné Pravděpodobnost, že dojde k selekci po uvedení do životního prostředí Možnost prudkého nárůstu populace geneticky modifikovaného organismu v životním prostředí a podmínky, za kterých by k tomuto nárůstu mohlo dojít Cesty biologického šíření geneticky modifikovaného organismu, známé nebo možné způsoby interakce s rozšiřujícími agens Typy ekosystémů, do kterých se geneticky modifikovaný organismus může rozšířit z místa uvádění do životního prostředí a ve kterých se může usídlit Možnost přenosu dědičného materiálu z geneticky modifikovaného organismu do jiného organismu po uvedení geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí a důsledky takového přenosu Možnost přenosu dědičného materiálu z přirozeně se vyskytujícího organismu do geneticky modifikovaného organismu po uvedení geneticky modifikovaného organismu do životního prostředí a důsledky takového přenosu Výsledky studií chování a vlastností geneticky modifikovaných organismů a jejich ekologických vlivů prováděných v simulovaném přirozeném prostředí Další možné účinky na životní prostředí a biologickou rozmanitost (jednoznačně identifikujte) očekávají se žádná onemocnění zvířat a rostlin, včetně toxických nebo alergenních účinků. MLM-CAR44.1 T-buňky nejsou schopné přežití v životním prostředí. očekávají se žádné nežádoucí účinky použití MLM-CAR44.1 T-buněk na dynamiku a genetickou diverzitu populací v prostředí a není možná žádná změněná citlivost populací patogenů podporující šíření infekčních onemocnění a/nebo vytvoření nových rezervoárů nebo vektorů. jsou ohrožena žádná preventivní nebo terapeutická medicínská, veterinární nebo rostlinná ochranná opatření. Biochemie není ovlivněna. 21. Monitoring Metody zjišťování přítomnosti geneticky modifikovaného organismu Přítomnost geneticky modifikovaného organismu může být detekována pomocí: Exprese LNGFR pomocí analýzy FACS; Detekce specifických transgenních sekvencí pomocí PCR; GCV citlivosti v důsledku exprese HSV TKMut2;

10 Kromě toho byla také provedena detekce GaLV+ virových částic pro vyhodnocení jakékoli možné mobilizace sekvencí virových vektorů. Test bude proveden při výchozím stavu, v M3, M6 a M12 po podání. Každý následující rok po dobu 5 let budou také odebrány a uchovány vzorky. Tento plán je v souladu s doporučením popsaným v dokumentu FDA/CBER (FDA-CBER, 2006) Specificita metod identifikace geneticky modifikovaného organismu a odlišení geneticky modifikovaného organismu od dárcovského organismu, příjemce, případně rodičovského organismu; citlivost a spolehlivost těchto metod Identifikační metody hlášené v odstavci 21.1 jsou specifické pro geneticky modifikovaný organismus, protože specificky detekují transgenní produkty Techniky (metody) detekce přenosu vloženého dědičného materiálu na další organismy Přenos darovaného genetického materiálu z GMO na další organismy není možný. Avšak v případě potřeby by byla konstituční exprese vloženého genu analyzována pomocí: Exprese LNGFR pomocí analýzy FACS; Detekce specifických transgenních sekvencí pomocí PCR; Citlivost GCV; Metody zjišťování účinků geneticky modifikovaného organismu na necílové organismy V důsledku povahy produktu a jeho zamýšleného použití pouze u specifických pacientů v nemocnicích nebyly provedeny speciální opatření pro monitorování ekosystému. V případě potřeby však může být ekosystém monitorován prostřednictvím analýz vložených genů. Vzorky buněk mohou být analyzovány pomocí: Exprese LNGFR pomocí analýzy FACS; Detekce specifických transgenních sekvencí pomocí PCR. Výtěry nebo tekutiny mohou být analyzovány pomocí PCR pro detekci specifických transgenních sekvencí Místa, na kterých bude monitoring prováděn Doba trvání monitoringu Četnost monitoringu ní použitelné. Zamýšlené použití produktu je pouze pro specifické pacienty v nemocnicích V Ostravě