Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci. reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/
|
|
- Rostislav Liška
- před 7 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/
2 Metodické základy patologie Moderní metody vizualizace buněk a tkání Ing. Bc. Ivo Überall, Ph.D. Ústav klinické a molekulární patologie LF UP v Olomouci Ústav histologie a embryologie LF UP v Olomouci Olomouc 2013
3 Vizualizace znázornění původně skryté skutečnosti V přírodních vědách tři přístupy 1) zvětšení struktur např. lupy, optická mikroskopie 2) zvýraznění struktur např. CT, PET, NMR 3) kombinace obou přístupů např. fluorescenční mikroskopie a její modifikace Vizualizace v patologii omezené spektrum metodik (diagnostika lege artis, pojišťovny) Patologie klinická vs. patologie experimentální (výzkumná) Program přednášky: 1) Trochu historie 2) Světelná mikroskopie a její modifikace 3) Konfokální mikroskopie a její modifikace 4) Dvoufotonová mikroskopie 5) Elektronová mikroskopie 6) Mikroskopie atomárních sil 7) Virtuální mikroskopie 8) Analýza obrazu v patologii
4 1. Trochu historie. výraz mikroskop začali jako první používat členové učené společnosti Academia dei Lincei otec a syn Janssenové, první mikroskop 1676 A. van Leeuwenhoek (zvětšení 270 x, vyrobil 500 mikroskopů) 1826 první mikroskop v našem slova smyslu, J.J. Lister 1847 průmyslová výroba mikroskopů firmou Zeiss 1893 tzv. Köhlerův princip, základy mikroskopické fotografie 1911 C. Reichert, fluorescenční mikroskop s UV excitací 1932 F. Zernick, fázový kontrast (Nobelova cena) 1955 Nomarski, diferenciální interferenční kontrast 1968 rastrovací tandemový konfokální mikroskop 1978 laserový konfokální rastrovací mikroskop
5 2) Světelná mikroskopie (m.) její modifikace - maximální rozlišovací mez světelných m. je cca nm - detaily musí být vůči pozadí dostatečně kontrastní 2a) m. v procházejícím světle objekty do 1 μm (nejpoužívanější) světlo prochází objektem - Objekty vidíme díky tomu, že jsou schopny absorpcí zeslabovat intenzitu procházejícího záření. Tato metoda je proto vhodná jen pro objekty buď zcela nepropustné, nebo alespoň barevné. 2b) m. v temném poli (ultramikroskopie) světlo neprochází objektivem Diferenciální interferenční kontrast (DIF) též. Nomarski světelné vlny odražené od nerovností povrchu se odlišují v délce dráhy, případně intenzitě. Lidské epiteliální buňky
6 2c) Fluorescenční mikroskopie -je založena na poznatku, že některé látky po absorbci krátkovlnného záření emitují záření o větší vlnové délce tedy jiné barvy - fluorescenční pigmenty a fluorescenční barviva ( Základní součásti fluorescenčního mikroskopu -světelný zdroj krátkovlnného světla Hg. Výbojka - selekční filtry propouštějí pouze krátkovlnné světlo - tepelné filtry zabraňují přehřátí preparátu - bariérové filtry odstraňují UV a vytvářejí pozadí fluorescence - optika mikroskopu speciální objektivy (FLUOR) -Nevýhody f.m. - zhášení preparátu -Výhody f. m citlivost, specifita, slabé ovlivňování buněčných pochodů barvení in situ
7 Aplikace fluorescenční m. 1) Studium uspořádání genomu (více viz Dr. Kořínková ) - FISH Fluorescent In Situ Hybridization) Schéma metody FISH Interfázní jádra s detekcí genů pomocí FISH Metafázní chromozómy s detekcí genové přestavby u CML
8 - GISH - Genomic In Situ Hybridization) PRINS - PRimed IN Situ labelling Metafáze chromozomů barvených celochromozomomi sondami GISH Schéma metody PRINS Metafáze chromozomů s detekcí jednoho genu pomocí PRINS
9 2) Studium genové exprese, in vivo traffickingu a kolokalizaci proteinů Aequorea victoria (Pohárkovka) GFP Green Fluorescein Protein - sekvenci DNA kódující tento protein lze přenést na libovolné místo genomu jiného organizmu. Pokud jsou tyto konstrukty v živých buňkách můžeme identifikovat zelený protein v konkrétních buňkách a studovat jeho lokalizaci nebo pokud je tato sekvence spojena s promotorem genu, můžeme rozpoznat co gen produkuje
10 Mitochondrie značené GFP Myška značená GFP Listy Saintpaulia mutované genem s GFP
11 3) Barvení cytologických struktur a kompartmentů - barvení jednoho objektu na preparátu JÁDRO MITOCHONDRIE Počítačové seskupení obrazu CYTOSKELET
12 a klinika..? Depozita IgM - glomerulonefritidy Tetracyklinové linie renální osteopatie Vyšetření amplifikace HER2/neu za použití FISH provedené na tkáni fixované formalinem a zalité v parafinu s přímo značenými sondami HER2/neu (červená) a CEP17 (zelená). HER2/neu je amplifikován, jestliže poměr mezi počty HER2/neu a CEP17 je > 2.
13 - vícenásobné barvení lokalizace receptorů a jejich ligandů hipokampus potkana Metody vícenásobného barvení si vyžádaly rozvoj pokročilých zobrazovacích metod (umožnění stanovení podílu jednotlivých emisí v celkovém vzorku) metody hyperspektrálního zobrazování (dálkový průzkum Země)
14 4) Charakteristika intracelulárního prostředí buněk Intracelulární ph SNARF Intracelulární Ca Rhod-3 Intracelulární lipidy Lipid-TOX
15 Speciální metody fluorescenční mikroskopie někdy jsou přidruženy k systému konfokálnímu - slouží zejména ke studiu dynamiky buněčných struktur - podmínkou je navození stavu, kdy je pouze určitá část fluorescenčních molekul aktivní - této aktivity se docílí dvěma způsoby: 1) vybělením fotodegradací fluorescence 2) fotoaktivací fluorescence AD1) ozáření fluorochromu (GFP) v buňce ztráta fluorescence - obnovení fluorescence ve vyběleném objemu FRAP - ztráta fluorescence v okolí vyběleného objemu - FLIP FRAP analýza pohybu jednoho ze sestřihových faktorů nahromaděného v jaderných skvrnách (speckles v živé buňce. Na obrázcích je jádro savčí buňky před (A) a ihned po (B; v čase t = 0 s) vybělení fluorescence v oblasti odpovídající jedné jaderné skvrně (v bílém kroužku), následně pak v průběhu (C) a po dokončení (D) obnovy fluorescenčního signálu ve vybělené oblasti.
16 AD2 fotoaktivace fluorescence Příkladem je fotoaktivovatelná varianta GFP (PA-GFP). Ta je v buňkách syntetizována ve stavu, ve kterém nevykazuje žádnou fluorescenci v oblasti viditelného světla. Jestliže ji však osvítíme intenzivním zářením o krátké vlnové délce ( nm), struktura molekuly PA-GFP se změní, a tím se aktivuje fluorescence v oblasti zeleného světla, obdobná jako u klasického GFP. Tato metoda tak umožňuje označit molekuly, které se během fotoaktivace nacházejí ve vybrané oblasti a je tak velmi vhodná pro pozorování pohybu molekul mezi buňkami v tkáních či mezi jednotlivými strukturami v rámci jedné buňky. Fotoaktivovatelný GFP (PA-GFP). CFP a PA-GFP byly připojeny k bílkovinám, které se nacházejí ve specifických jaderných strukturách Cajalových tělískách. Zatímco CFP je snadno viditelný, PA-GFP je před aktivací v podstatě nedetekovatelný. Po fotoaktivaci laserem o vlnové délce 405 nm se molekuly PA-GFP v místě aktivace rozsvítí a lze pozorovat jejich pohyb v buněčném jádře. Měřítko: 5 μm.
17 Nezářivý přenos excitační energie (FRET) Fluorescence Resonance Energy Transfer, který popsal T. Förster v polovině 20. století. V principu jde o přenos energie mezi dvěma vhodnými fluorochromy nacházejícími se v příhodné orientaci a vzdálenosti. Pokud se molekuly fluorochromů CFP a YFP k sobě dostatečně přiblíží (typická vzdálenost pro FRET je 5 nm) a vhodně se vůči sobě natočí, je pravděpodobné, že po excitaci molekuly CFP tato molekula získanou energii nezářivě předá blízké molekule YFP, takže místo modrozelené fluorescence pozorujeme fluorescenci žlutou Nezářivý přenos excitační energie (FRET) v buněčném jádře. A CFP a YFP byly připojeny k bílkovinám, které spolu v buňce interagují. Tyto bílkoviny se hromadí v Cajalových tělískách. FRET byl měřen nepřímou metodou. (Po fotodestrukci akceptoru (YFP) ve vybrané oblasti buňky o velikosti asi 4 5 μm (bílý obdélník) se FRET projeví jako zvýšený signál donoru (CFP) v dané oblasti. Buněčné jádro je naznačeno přerušovanou čárou. B Pohled na stejnou buňku jako na obrázku A. Profily intenzit donoru před fotodestrukcí akceptoru a po ní jasně ukazují zvýšení fluorescence pouze v tělískách, ve kterých byl akceptor zničen (bílé šipky). Měřítko: 5 μm.
18 Speciální metody fluorescenční mikroskopie někdy jsou přidruženy k systému konfokálnímu Polarizovaná fluorescenční mikroskopie pomocí lipofilních sond (difenylhexatrienu) zabudovaných do buněčných membrán slouží ke sledování dynamiky membránových lipidů. Fluorescence Lifetime Imaging (FLIM) - metody stanovení dob dohasínání fluorescence. Měříme intenzitu fluorescence jako odezvu na změnu interakcí sondy s jejím okolím metoda pracuje na principu Fluorescence Resonance Energy Transfer FRET nezářivém přenosu excitační energie) využívá se pro studium prostorového uspořádání membránových receptorů nebo interakci proteinů
19 Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) modifikace využívající totální odraz excitačního záření fluorescenci zkoumaných vzorků budí v tomto případě postupně mizející světelná vlna, která vystupuje ze skla do vzdálenosti cca 100 nm a my vidíme pouze membránové struktury přilehlé k podložnímu sklíčku a jejich nejbližších okolí
20 Fluorescence recovery after photobleaching (FRAP) - metoda vyvinutá původně pro zobrazování laterální difůze molekul v membránách. Fluorescenční molekula je fúzována se zkoumaným proteinem nebo membránovými lipidy. Po ozáření vybraného místa silným excitačním světlem je fluorescence molekul cíleně vysvícena. Pozorujeme dynamiku obnovení fluorescence ve vysvíceném místě, které svědčí o laterálním pohybu molekul v membránách, kontinuitě membránových organel (ER nebo GA), pohybu zkoumaných molekul nebo transportu molekul (cytoskelet, vápníkové ionty). Bioluminiscence resonance energy transfer (BRET) - slouží ke sledování interakcí molekul v živých organismech podobně jako u FRET, ale aspoň jeden z fluorochromů se v daném organismu vyskytuje přirozeně. Co si netřeba pamatovat: PALM, FPALM, BFPALM, PALMIRA, TFPALM, RPM, SPDM, STORM, SALM
21 Multifotonová mikroskopie - je založena na principu snímání světlem, jehož energie je příliš nízká pro excitaci fluorochromu. V místě fokusu dochází k setkání dvou nebo tří nízkoenergetických paprsků (fotonů) a výsledná sečtená energie se stává dostatečnou pro excitaci daného fluorochromu, a to pouze v místě zaostření. Pro osvětlení vzorku se využívá světlo s vlnovou délkou, která je násobkem absorpčního maxima použitého fluorochromu. Např. při dvoufotonové excitaci fluoresceinu (absorpční maximum při 500 nm) osvětlení laserem o vlnové délce 1000 nm vede k absorpci 2 fotonů v místě zaostření. Výhodou metody je menší rozptyl světla při vyšších vlnových délkách, nevysvěcování fluorochromu z neozářených částí vzorku, vysoká rozlišovací schopnost a vysoká citlivost. V současnosti se běžně používá dvou- či třífotonová excitace, s výhodou pro tlusté vzorky (více než 100 µm). Multiple-beam - konfokální systémy s paralelním skenováním více laserovými paprsky (nejčastěji uspořádány v linii), které zrychlují skenování limitované dobou saturace fluorochromu. Většina těchto systémů opticky rekonstruuje obraz za použití vysoce citlivých CCD detektorů. Vhodné pro velmi rychlé buněčné děje, např. studium vápníkových kanálů.
22 Fluorescence Resonance Energy Transfer (FRET) - mnohostranná metoda vhodná pro zobrazení interakcí molekul při suboptických rozlišeních, využívaná i ke kvantitativním analýzám (měření nanometrových vzdáleností a jejich změn mezi molekulami in vivo a in vitro). První fluorochrom (donor) je excitován specifickou vlnovou délkou, energie je přenesena na druhý fluorochrom (akceptor), který vyzáří přijatou energii ve formě fluorescence. Základní podmínky pro FRET: 1/ Donorový a akceptorový fluorochrom, absorpční spektrum akceptoru se musí překrývat s emisním spektrem donoru. 2/ Aby došlo k přenosu energie, musí být donorový a akceptorový fluorochrom velmi blízko (většinou A). Jednou z technik stanovení účinnosti FRET je měření vzrůstu fluorescence donoru po kompletním vysvícení akceptoru. Experimenty jsou založeny na změnách poměru fluorescence emitované oběma fluorochromy, které se stanovují ve vybraných oblastech vzorku. Rozšíření FRET podpořila dostupnost vhodných fluorochromů, dokonalejší mikroskopické systémy, metody pro korekci spektrálního prosvěcování a možnosti kombinací s dalšími technikami. FRET a FLIM jsou aplikovány při studiu interakcí protein-protein, protein-dna, studiu konformačních změn proteinů, polynukleotidů, DNA, analýze vazebných sekvencí nebo vysokovýkonném rastrování.
23 3) Konfokální mikroskopie a její modifikace Konfokální označuje se to, co je sdružené s ohniskem (konjugovaný + fokální = konfokální) Princip konfokální mikroskopie byl patentován r Marvinem Minskym (1965 mikroskop s dvojitým řádkováním, Hadravský a Petráň) V případě konfokálního mikroskopu je s ohniskem čočky objektivu (tj. místem zaostření ve vzorku) sdružená jak optická soustava, která osvětluje, tak i ta, která zobrazuje = do téhož bodu je zaostřen paprsek osvětlovací i paprsek zprostředkující pozorování Buněčné struktury, které chceme pozorovat, obarvíme fluorochromem. Laserový paprsek je zaostřen do zvolené roviny, která buňkou prochází jako imaginární řez.v této zvolené rovině dojde k osvícení preparátu laserovým paprskem a fluorochrom emituje viditelné záření. Získaný obraz je zaznamená počítačem. Postupnou změnou zaostření je možné získat obraz z více rovin (imaginárních řezů) od vršku až ke spodu buňky. Zde je nejlépe patrný rozdíl proti klasické fluorescenční mikroskopii, kde září fluorochrom ve všech optických rovinách najednou (nelze tedy určit, co je nahoře a co je dole, uprostřed, atd.).
24 Princip laserové řádkovací konfokální mikroskopie (LSCM) Úzký svazek laseru (intenzivní bodový zdroj světla) směřuje skrz první konfokální clonku na dichromatické zrcadlo, které jej objektivem zaměřuje na určitý bod preparátu, jehož průměr odpovídá difrakční (= rozlišovací) mezi. Preparát je umístěn v ohniskové rovině, kterou vybírá počítač, resp. skenovací zařízení. Odražené (= emitované) světlo prochází opět objektivem, dichroickým zrcadlem, bariérovým filtrem, druhou konfokální clonkou a nakonec dopadá před fotonásobič. Druhá clonka filtruje světlo pocházející z oblasti mimo ohniskovou rovinu. Výsledné informace o preparátu jsou nakonec předány do skenovacího zařízení, kde jsou uloženy také informace o souřadnicích X-Y daného bodu, díky nimž je potom počítač schopen sestavit obraz celého preparátu. Základním principem LSCM je to, že netvoří obraz najednou, ale řádkováním bod po bodu. Tak jsou snímány jednotlivé optické body v rovině XY a navíc díky přesně definovanému posunu v ose Z i jednotlivé optické řezy. Obraz celé zaostřené roviny XY lze získat rastrováním bod po bodu některým z těchto postupů: 1/ rozmítání laserového paprsku 2/příčný posuv vzorku před objektivem 3/ posuv objektivu.
25 Konfokální mikroskop firmy Olympus
26 Typy konfokálních mikroskopů Laserový řádkovací (= rastrovací) KM využívá jako zdroj světla laserový paprsek, který je přes systém clonek zaměřován přímo na pozorovaný preparát, resp. bod preparátu. Preparát je tedy skenován bod po bodu tak, že je buď zdroj světla statický a preparát se pohybuje ( stage scanning ) nebo se naopak pohybuje zdroj světla a statický je preparát ( beam scanning ). LSCM je vhodný především pro zobrazování fixovaných preparátů. Jiným principem skenování preparátu je rotující disk (= spinning disc) známý také jako Nipkowovův kotouč, což je rychle rotující perforovaná destička, na které je mnoho vzájemně oddělených clonek a přes kterou je světlo zaměřováno na studovaný objekt. Umožňuje zobrazovat několik bodů preparátu najednou - snímání je tedy rychlé a na pozorovaný objekt působí světlo s nižší intenzitou. Proto je tato metoda vhodná pro pozorování rychlých dějů v živých buňkách.
27 Přednosti konfokální mikroskopie Vysoké axiální rozlišení při vysoké ostrosti obrazu Možnost optických řezů a pozorování průhledných vzorků i pod povrchem Konstrukce trojrozměrných obrazců Bezkontaktní povrchová profilometrie (i málo odrazivých materiálů) Možnost snímání barevného obrazu ve skutečných barvách Možnost pozorování nevodivých materiálů Možnost pozorování porézních materiálů není potřeba vytvoření vakua Možnost použití obrazové analýzy Možnost využití klasických metod světelné mikroskopie (světlé a tmavé pole, nomarského diferenciální kontrast, fázový kontrast, polarizační a fluorescenčnímikroskopie atd.) Možnost pozorování živých exemplářů bez nutnosti jejich usmrcení. Nedochází k degradaci vzorku Jednoduchá výměna vzorků Jednoduchá obsluha
28 Porovnání fluorescenční (nahoře) a konfokální mikroskopie (dole) Konfokální mikroskopie dělících se buněk
29 3D rekonstrukce konfokálních snímků
30 4) Dvoufotonová mikroskopie Watt W. Webb z Cornellovy univerzity na Ithace - na rozdíl od jednofotonové konfokální mikroskopie využívá laser k excitaci dvěma fotony, které jsou absorbovány s prodlevou cca 100 fs - pravděpodobnost dvoufotonové excitace je nejvyšší v rovině zaostření nepotřebujeme konfokální clonku - větší hloubka proostření (400 μm) - zvýšený podíl signálu vůči šumu kontrastnější zaostření Obrázky buněk získané nově vyvinutým mikroskopem. Změny tvarů molekul v buňce se projevují změnami červeného/žlutého/zeleného zabarvení buněk
31 5) Elektronová mikroskopie 5a) Rastrovací (scanovací) elektronová mikroskopie - vzorek se pokryje tenkou vrstvou kovu od které se odrážejí elektrony - dochází k detekci elektronů, a to jak dopadených, tak rozptýlených - z tohoto signálu se potom rekonstruuje povrch vzorku Elektronový mikroskop JSM 6700F s ultravysokým rozlišením Nádorová buňka melanomu. Rakovinné stadium je charakteristické dendritickými výběžky, okolo melanomové buňky jsou kulovité zdravé leukocyty
32 5b) Transmisní (prozařovací) elektronová mikroskopie - je elektronovou obdobou světelného mikroskopu, kdy je velmi tenký vzorek prozařován svazkem elektronů Analytický transmisní elektronový mikroskop FEI Tecnai X-Twin F20
33 5c) Elektronová kryomikrokopie -využívá tzv. vitrifikace - vzorek zchladí (a tedy fixuje) během několika desítek mikrosekund - vzniká nekrystalické pevné skupenství vody, amorfní led, který nemá na strukturu vzorku vliv Elektronová kryomikroskopie izolovaného chromatinu. DNA se v buněčném jádře nachází v komplexu s množstvím proteinů, zejména histonů, které tvoří malé proteinové cívky nukleozomy, okolo nichž je DNA v pravidelných intervalech navinuta a vytváří chromatinové vlákno. Jednotlivé části snímku představují segmenty různé velikosti tohoto vlákna. Protože jsou zachovány ve své původní trojrozměrné konformaci, jsou nukleozomy zachyceny v různých projekcích (příklad pohledu zpředu je označen šipkou, příklad pohledu z boku hvězdičkou). Měřítko: 20 nm. B Snímek minikroužku DNA pořízený elektronovým kryomikroskopem; 156 párů bází dlouhá molekula DNA uzavřená do cirkulární formy a vytvářející miniaturní obruč o průměru přibližně 16 nm. Protože ve vitrifikované vrstvě může být volně orientovaná, lze najít i projekce čistě boční, kde se kruh mění v úsečku.
34 6) Mikroskopie atomárních sil Mikroskopie atomárních sil (AFM z anglického atomic force microscopy) je mikroskopická technika, která se používá k trojrozměrnému zobrazování povrchů. Prvně ji realizovali v roce 1986 Binnig, Quate a Gerber. Obraz povrchu se zde sestavuje postupně, bod po bodu. Metoda dosahuje velmi vysokého rozlišení může zobrazovat i atomy. Techniku AFM lze použít nejen k zobrazování, ale také k tvorbě struktur či zpracování povrchů v nanometrové oblasti. V principu je AFM podobná metoda jako tunelová mikroskopie. K detekci však neslouží elektrický proud, ale vzájemná meziatomová přitažlivost. Detekuje se pohyb zkoumacího hrotu při průchodu nad vzorkem. Umí zobrazovat i nevodivé vzorky. Nazývá se někdy také SFM (scanning force microscopy). Základem AFM je velmi ostrý hrot, který je upevněn na ohebném nosníku (angl. cantilever, tento termín se používá i v češtině).
35 7) Virtuální mikroskopie - virtuální mikroskopie je obor, který kombinuje metody klasické mikroskopie a metody digitálního zpracování obrazu (digitální mikroskopie) Computer Science Department at University of Maryland and the Pathology Department at Johns Hopkins Hospital, Baltimore, Maryland první systém virtuální mikroskopie - v současnosti dynamicky se rozvíjející obor s mnoha aplikacemi Instrumentárium virtuální mikroskopie - mikroskop vybavený kvalitní CCD kamerou s vysokým rozlišením - výkonná PC stanice s příslušným programem analýzy obrazu - přidružené periferie (např. podavač preparátů) - úložiště digitalizovaných snímků s dostatečnou kapacitou - IT platforma (server, rozvody, periferní PC stanice.)
36 Systém virtuální mikroskopie Tissue Gnostic Systém virtuální mikroskopie dotslide fy. Olympus
37 Hlavní výhody virtuální mikroskopie - možnost opakovatelného hodnocení snímků - lepší reprodukovatelnost a kvalita - menší nároky na personální zabezpečení - práce s větším souborem objektů (buněk) - lepší standardizace a mezilaboratorní porovnávání Systémy virtuální mikroskopie a analýza obrazu poskytují prostor pro zdokonalování v těchto oblastech zdravotnictví: - vytváření databáze virtuálních snímků - diagnostika, prognóza a predikce lékařská praxe - e-teaching, e-learning, telepatologie - vzdělávání Záludnosti virtuální mikroskopie - v první fázi vysoké finanční nároky, které se však časem vrátí - citlivost systému nutné zaškolení - kvalitně připravené preparáty (kontrast, tloušťka.) - dostatečná kapacita úložného zařízení!! - dobrá spolupráce s odborníky na IT - časová náročnost (se vzrůstající kvalitou snímků, vzrůstá vedle objemu dat i čas scanování) - správné nastavení celého scanovacího systému (kalibrace.)
38 Inovace výuky mikroskopické morfologie v hematologii zavedením internetové virtuální interaktivní metody Parametry digitalizovaného snímku Slovní nebo audio popis nálezu - editace hematologických nálezů v prohlížeči OlyVIA
39 8) Analýza obrazu v patologii Analýza obrazu je moderní metoda, která vznikla ve snaze o objektivizaci posuzování jakosti výrobků. Nahrazuje vizuální subjektivní hodnocení, při kterém může právě dojít k rozdílnému ohodnocení určitého znaku zkoumaného předmětu. Oblast použití analýzy obrazu v technologii masa je velice rozmanitá, umožňuje přizpůsobivost a opakovatelnost rozboru, nedochází k destrukci vzorku, vyžaduje však výkonné počítačové vybavení. Analýza obrazu pracuje s barevnými prostory RGB i CIELab. Princip analýzy obrazu spočívá v počítačovém vyhodnocení digitálního obrazu sledovaného objektu sejmutého digitální kamerou, digitálním fotoaparátem nebo scannerem. Obraz (rozdělený na jednotlivé body pixely) lze rovnou zpracovat přímo ve formátu *.jpg, nebo jej příslušný software (LUCIA 5.20, NIS- Elements 2.20) převede na grafický soubor *.lim.) Kvantifikace zastoupení zánětlivých buněk u BHP
40 TissueFAXS kvantifikace exprese fluorescenčně značených proteinů
41 HistoFAXS kvantifikace exprese fluorescenčně značených proteinů
42 Děkuji za pozornost
Optická konfokální mikroskopie a mikrospektroskopie. Pavel Matějka
Optická konfokální mikroskopie a Pavel Matějka 1. Konfokální mikroskopie 1. Princip metody - konfokalita 2. Instrumentace metody zobrazování 3. Analýza obrazu 2. Konfokální 1. Luminiscenční 2. Ramanova
VíceFluorescenční mikroskopie. -fluorescenční mikroskopie -konfokální mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie -fluorescenční mikroskopie -konfokální mikroskopie Fluorescence a fluorofory Schéma konvenčního fluorescenčního mikroskopu -Na fluorescenčně značený vzorek dopadá pouze světlo
VíceViková, M. : MIKROSKOPIE V Mikroskopie V M. Viková
Mikroskopie V M. Viková LCAM DTM FT TU Liberec, martina.vikova@tul.cz Hloubka ostrosti problém m velkých zvětšen ení tloušťka T vrstvy vzorku kolmé k optické ose, kterou vidíme ostře zobrazenou Objektiv
VícePrincip rastrovacího konfokálního mikroskopu
Konfokální mikroskop Obsah: Konfokální mikroskop... 1 Princip rastrovacího konfokálního mikroskopu... 1 Rozlišovací schopnost... 2 Pozorování povrchů ve skutečných barvách... 2 Konfokální mikroskop Olympus
VíceElektronová mikroskopie SEM, TEM, AFM
Elektronová mikroskopie SEM, TEM, AFM Historie 1931 E. Ruska a M. Knoll sestrojili první elektronový prozařovací mikroskop 1939 první vyrobený elektronový mikroskop firma Siemens rozlišení 10 nm 1965 první
VíceMetoda Live/Dead aneb využití fluorescenční mikroskopie v bioaugmentační praxi. Juraj Grígel Inovativní sanační technologie ve výzkumu a praxi
Metoda Live/Dead aneb využití fluorescenční mikroskopie v bioaugmentační praxi Juraj Grígel Inovativní sanační technologie ve výzkumu a praxi Co je to vlastně ta fluorescence? Některé látky (fluorofory)
VíceFluorescenční mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1 VYUŽITÍ FLUORESCENCE, PŘÍMÁ FLUORESCENCE, PŘÍMÁ A NEPŘÍMA IMUNOFLUORESCENCE, BIOTIN-AVIDINOVÁ METODA IMUNOFLUORESCENCE
VíceFluorescenční mikroskopie
Luminiscence jev, kdy látka vysílá do prostoru světlo chemická reakce chemiluminiscence (např. světluška) světlo fotoluminiscence fluorescence (emisní záření jen krátkou dobu po skončení exitačního záření)
VíceMIKROSKOP. Historie Jeden z prvních jednoduchých mikroskopů sestavil v roce 1676 holandský obchodník a vědec Anton van Leeuwenhoek.
MIKROSKOPIE E- mailový zpravodaj MIKROSKOP firmy Olympus Journal of Scanning Probe Microscopy (http://www.aspbs.com/jspm.html) Materials Today, 2008, New Microscopy Special Issue MIKROSKOP Historie Jeden
VíceProč elektronový mikroskop?
Elektronová mikroskopie Historie 1931 E. Ruska a M. Knoll sestrojili první elektronový prozařovací mikroskop,, 1 1939 první vyrobený elektronový mikroskop firma Siemens rozlišení 10 nm 1965 první komerční
VíceMIKROSKOPIE JAKO NÁSTROJ STUDIA MIKROORGANISMŮ
Mikroskopické techniky MIKROSKOPIE JAKO NÁSTROJ STUDIA MIKROORGANISMŮ Slouží k vizualizaci mikroorganismů Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723) Čočka zvětšující 300x Různé druhy mikroskopů, které se liší
VíceTechniky mikroskopie povrchů
Techniky mikroskopie povrchů Elektronové mikroskopie Urychlené elektrony - šíření ve vakuu, ovlivnění dráhy elektrostatickým nebo elektromagnetickým polem Nepřímé pozorování elektronového paprsku TEM transmisní
VíceFluorescenční rezonanční přenos energie
Fluorescenční rezonanční přenos energie Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1 Přenos excitační energie Přenos elektronové energie se uskutečňuje mechanismy zářivými nebo
VíceFLUORESCENČNÍ MIKROSKOP
FLUORESCENČNÍ MIKROSKOP na gymnáziu Pierra de Coubertina v Táboře Pavla Trčková, kabinet Biologie, GPdC Tábor Co je fluorescence Fluorescence je jev spočívající v tom, že některé látky (fluorofory) po
Více-fluorescenční mikroskopie. -konfokální mikroskopie -multifotonová konfokální mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie -fluorescenční mikroskopie -konfokální mikroskopie -multifotonová konfokální mikroskopie Fluorescence a fluorofory Schéma konvenčního fluorescenčního mikroskopu -Na fluorescenčně
VíceZoologická mikrotechnika - FLUORESCENČNÍ MIKROSKOPIE
Fluorescence Fluorescence je jev, kdy látka absorbuje ultrafialové záření nebo viditelné světlo s krátkou vlnovou délkou a emituje viditelné světlo s delší vlnovou délkou než má světlo absorbované Emitace
VíceLuminiscence. emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence. chemicky (chemiluminiscence)
Luminiscence Luminiscence emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence chemicky (chemiluminiscence) teplem (termoluminiscence) zvukem (sonoluminiscence)
VíceZákladní pojmy a vztahy: Vlnová délka (λ): vzdálenost dvou nejbližších bodů vlnění kmitajících ve stejné fázi
LRR/BUBCV CVIČENÍ Z BUNĚČNÉ BIOLOGIE 1. SVĚTELNÁ MIKROSKOPIE A PREPARÁTY V MIKROSKOPII TEORETICKÝ ÚVOD: Mikroskopie je základní metoda, která nám umožňuje pozorovat velmi malé biologické objekty. Díky
VícePokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii
Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1/1 Proč biofyzikální metody? Biofyzikální metody využívají fyzikální principy ke studiu biologických systémů Poskytují kvantitativní
VíceFluorescence (luminiscence)
Fluorescence (luminiscence) Patří mezi luminiscenční metody fotoluminiscence. Luminiscence efekt, kdy excitované molekuly či atomy vyzařují světlo při přechodu z excitovaného do základního stavu. Podle
VíceODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY
ODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY s názvem KONFOKÁLNÍ MIKROSKOPIE - CEITEC MU II. ČÁST 2 vyhotovené podle 156 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách, v platném znění (dále jen Zákon o VZ) 1. ODŮVODNĚNÍ
VíceF l u o r e s c e n c e
F l u o r e s c e n c e Fluorescenční mikroskopie Luminiscence jev, kdy látka vysílá do prostoru světlo chemická reakce chemiluminiscence světlo fotoluminiscence Vyvolávající záření exitační fluorescence
Vícelní mikroskop LEXT OLS 3100
Moderní technologie ve studiu aplikované fyziky reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/07.0018. Laserový rastrovací konfokáln lní mikroskop LEXT OLS 3100 Hana Šebestová Společná laboratoř optiky Univerzity Palackého
VíceViková, M. : MIKROSKOPIE II Mikroskopie II M. Viková
II Mikroskopie II M. Viková LCAM DTM FT TU Liberec, martina.vikova@tul.cz Osvětlovac tlovací soustava I Výsledkem Köhlerova nastavení je rovnoměrné a maximální osvětlení průhledného preparátu, ležícího
VíceOptické metody a jejich aplikace v kompozitech s polymerní matricí
Optické metody a jejich aplikace v kompozitech s polymerní matricí Doc. Ing. Eva Nezbedová, CSc. Polymer Institute Brno Ing. Zdeňka Jeníková, Ph.D. Ústav materiálového inženýrství, Fakulta strojní, ČVUT
VíceModerní nástroje pro zobrazování biologicky významných molekul pro zajištění zdraví. René Kizek
Moderní nástroje pro zobrazování biologicky významných molekul pro zajištění zdraví René Kizek 12.04.2013 Fluorescence je fyzikálně chemický děj, který je typem luminiscence. Luminiscence se dále dělí
VíceMikroskopické metody Přednáška č. 3. Základy mikroskopie. Kontrast ve světelném mikroskopu
Mikroskopické metody Přednáška č. 3 Základy mikroskopie Kontrast ve světelném mikroskopu Nízký kontrast biologických objektů Nízký kontrast biologických objektů Metodika přípravy objektů pro světelnou
VíceLuminiscence. Luminiscence. Fluorescence. emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) chemicky (chemiluminiscence)
Luminiscence Luminiscence emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence chemicky (chemiluminiscence) teplem (termoluminiscence) zvukem (sonoluminiscence)
VíceMetody charakterizace
Metody y strukturní analýzy Metody charakterizace nanomateriálů I Význam strukturní analýzy pro studium vlastností materiálů Experimentáln lní metody využívan vané v materiálov lovém m inženýrstv enýrství:
VíceKvantové tečky. a jejich využití v bioanalýze. Jiří Kudr SPOLEČNĚ PRO VÝZKUM, ROZVOJ A INOVACE CZ/FMP.17A/0436
SPOLEČNĚ PRO VÝZKUM, ROZVOJ A INOVACE CZ/FMP.17A/0436 Kvantové tečky a jejich využití v bioanalýze Jiří Kudr Datum: 9.4.2015 Hvězdárna Valašské Meziříčí, p.o, Vsetínská 78, Valašské Meziříčí, Nanotechnologie
VíceMikroskopie se vzorkovací sondou. Pavel Matějka
Mikroskopie se vzorkovací sondou Pavel Matějka Mikroskopie se vzorkovací sondou 1. STM 1. Princip metody 2. Instrumentace a příklady využití 2. AFM 1. Princip metody 2. Instrumentace a příklady využití
VíceVybrané spektroskopické metody
Vybrané spektroskopické metody a jejich porovnání s Ramanovou spektroskopií Předmět: Kapitoly o nanostrukturách (2012/2013) Autor: Bc. Michal Martinek Školitel: Ing. Ivan Gregora, CSc. Obsah přednášky
VíceZPRACOVÁNÍ OBRAZU přednáška 3
ZPRACOVÁNÍ OBRAZU přednáška 3 Vít Lédl vit.ledl@tul.cz TECHNICKÁ UNIVERZITA V LIBERCI Fakulta mechatroniky, informatiky a mezioborových studií Tento materiál vznikl v rámci projektu ESF CZ.1.07/2.2.00/07.0247,
VíceABSORPČNÍ A EMISNÍ SPEKTRÁLNÍ METODY
ABSORPČNÍ A EMISNÍ SPEKTRÁLNÍ METODY 1 Fyzikální základy spektrálních metod Monochromatický zářivý tok 0 (W, rozměr m 2.kg.s -3 ): Absorbován ABS Propuštěn Odražen zpět r Rozptýlen s Bilance toků 0 = +
VíceSpektrální charakteristiky
Spektrální charakteristiky Cíl cvičení: Měření spektrálních charakteristik filtrů a zdrojů osvětlení 1 Teoretický úvod Interakcí elektromagnetického vlnění s libovolnou látkou vzniká optický jev, který
Více3. Vlastnosti skla za normální teploty (mechanické, tepelné, optické, chemické, elektrické).
PŘEDMĚTY KE STÁTNÍM ZÁVĚREČNÝM ZKOUŠKÁM V BAKALÁŘSKÉM STUDIU SP: CHEMIE A TECHNOLOGIE MATERIÁLŮ SO: MATERIÁLOVÉ INŽENÝRSTVÍ POVINNÝ PŘEDMĚT: NAUKA O MATERIÁLECH Ing. Alena Macháčková, CSc. 1. Souvislost
VíceBioimaging rostlinných buněk, CV.2
Bioimaging rostlinných buněk, CV.2 Konstrukce mikroskopu (optika, fyzikální principy...) Rozlišení - kontrast Live cell microscopy Modulace kontrastu (Phase contrast, DIC) Videomikroskopia Nízký kontrast
VíceKonfokální mikroskop vybavený FLIM modulem pro detekci interakce molekul u živých buněk
Písemná zpráva zadavatele zpracovaná podle ust. 85 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách, ve znění pozdějších předpisů Veřejná zakázka na dodávky, ev. č. 527942 zadávaná podle 21 odst. 1 písm.
VíceSpektroskopické é techniky a mikroskopie. Spektroskopie. Typy spektroskopických metod. Cirkulární dichroismus. Fluorescence UV-VIS
Spektroskopické é techniky a mikroskopie Spektroskopie metody zahrnující interakce mezi světlem (fotony) a hmotou (elektrony a protony v atomech a molekulách Typy spektroskopických metod IR NMR Elektron-spinová
VíceOptická mikroskopie a spektroskopie nanoobjektů. Nanoindentace. Pavel Matějka
Optická mikroskopie a spektroskopie nanoobjektů Nanoindentace Pavel Matějka Optická mikroskopie a spektroskopie nanoobjektů 1. Optická mikroskopie blízkého pole 1. Princip metody 2. Instrumentace 2. Optická
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceDnešní mikroskopie v biomedicíně
MIKROSKOPIE Dnešní mikroskopie v biomedicíně Pohyb molekul v přímém přenosu z živé buňky a další kouzla 1) V případě eukaryotických buněk se do buněčného jádra vpraví DN, která obsahuje genetický kód pro
Více7. Měření fluorescence při excitaci kontinuálním světlem ( steady-state )
7. Měření fluorescence při excitaci kontinuálním světlem ( steady-state ) Steady-state měření Excitujeme kontinuálním světlem, měříme intenzitu emise (počet emitovaných fotonů) Obvykle nedetekujeme všechny
VíceZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ
ZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ (c) -2008, ACH/IM BLOKOVÉ SCHÉMA: (a) emisní metody (b) absorpční metody (c) luminiscenční metody U (b) monochromátor často umístěn před kyvetou se vzorkem. Části
Více- Rayleighův rozptyl turbidimetrie, nefelometrie - Ramanův rozptyl. - fluorescence - fosforescence
ROZPTYLOVÉ a EMISNÍ metody - Rayleighův rozptyl turbidimetrie, nefelometrie - Ramanův rozptyl - fluorescence - fosforescence Ramanova spektroskopie Každá čára Ramanova spektra je svými vlastnostmi závislá
VíceCÍLE CHEMICKÉ ANALÝZY
ANALYTICKÉ METODY CÍLE CHEMICKÉ ANALÝZY Získat maximum informací dostupným přírodovědným průzkumem o památce. Posoudit poruchy a poškození materiálů. Navrhnout nejvhodnější technologii restaurování. Určit
VíceTechnická specifikace předmětu veřejné zakázky
předmětu veřejné zakázky Příloha č. 1c Zadavatel požaduje, aby předmět veřejné zakázky, resp. přístroje odpovídající jednotlivým částem veřejné zakázky splňovaly minimálně níže uvedené parametry. Část
VíceFRET FRET. FRET: schéma. Základní vztahy. Základní vztahy. Fluorescence Resonance Energy Transfer
Fluorescence Resonance Energy Transfer je Fluorescence Resonance Energy Transfer Fluorescenční rezonanční energetický transfér podle objevitele Főrster nazýván také Förster Resonance Energy Transfer přenos
VíceVyužití a princip fluorescenční mikroskopie
Využití a princip fluorescenční mikroskopie fyzikálně chemický děj Fluorescence typem luminiscence (elektroluminiscence, fotoluminiscence, radioluminiscence a chemiluminiscenci) patří mezi fotoluminiscenční
VíceAnalýza vrstev pomocí elektronové spektroskopie a podobných metod
1/23 Analýza vrstev pomocí elektronové a podobných metod 1. 4. 2010 2/23 Obsah 3/23 Scanning Electron Microscopy metoda analýzy textury povrchu, chemického složení a krystalové struktury[1] využívá svazek
VícePrincipy a instrumentace
Průtoková cytometrie Principy a instrumentace Ing. Antonín Hlaváček Úvod Průtoková cytometrie je moderní laboratorní metoda měření a analýza fyzikálních -chemických vlastností buňky během průchodu laserovým
VíceZáklady mikroskopie. Úkoly měření: Použité přístroje a pomůcky: Základní pojmy, teoretický úvod: Úloha č. 10
Úloha č. 10 Základy mikroskopie Úkoly měření: 1. Seznamte se základní obsluhou třech typů laboratorních mikroskopů: - biologického - metalografického - stereoskopického 2. Na výše jmenovaných mikroskopech
VíceMETODY ANALÝZY POVRCHŮ
METODY ANALÝZY POVRCHŮ (c) - 2017 Povrch vzorku 3 definice IUPAC: Povrch: vnější část vzorku o nedefinované hloubce (Užívaný při diskuzích o vnějších oblastech vzorku). Fyzikální povrch: nejsvrchnější
VíceMOLEKULÁRNÍ METODY V EKOLOGII MIKROORGANIZMŮ
MOLEKULÁRNÍ METODY V EKOLOGII MIKROORGANIZMŮ (EKO/MMEM) FLUORESCENČNÍ MIKROSKOPIE A ANALÝZA OBRAZU Použití fluorescenční mikroskopie je založeno na detekci objektů pomocí fluorochromů látek, jež se specificky
VíceBarevné hry se světlem - co nám mohou říci o biomolekulách?
Barevné hry se světlem - co nám mohou říci o biomolekulách? Martin Kubala Univerzita Palackého v Olomouci Přírodovědecká fakulta, katedra biofyziky Tato prezentace je spolufinancována Evropským sociálním
VíceBarevné principy absorpce a fluorescence
Barevné principy absorpce a fluorescence Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 27.9.2007 2 1 Světlo je elektromagnetické vlnění Skládá se z elektrické složky a magnetické
VíceSpolečná laboratoř optiky. Skupina nelineární a kvantové optiky. Představení vypisovaných témat. bakalářských prací. prosinec 2011
Společná laboratoř optiky Skupina nelineární a kvantové optiky Představení vypisovaných témat bakalářských prací prosinec 2011 O naší skupině... Zařazení: UP PřF Společná laboratoř optiky skupina nelin.
VíceMikroskopie rastrující sondy
Mikroskopie rastrující sondy Metody charakterizace nanomateriálů I RNDr. Věra Vodičková, PhD. Metody mikroskopie rastrující sondy SPM (scanning( probe Microscopy) Metody mikroskopie rastrující sondy soubor
VíceVÝUKOVÝ SOFTWARE PRO ANALÝZU A VIZUALIZACI INTERFERENČNÍCH JEVŮ
VÝUKOVÝ SOFTWARE PRO ANALÝZU A VIZUALIZACI INTERFERENČNÍCH JEVŮ P. Novák, J. Novák Katedra fyziky, Fakulta stavební, České vysoké učení technické v Praze Abstrakt V práci je popsán výukový software pro
VíceBi4170 Bi417 Optické kon Optic trastn ké kon trastn a zobrazova a zob razova metody metody
Bi4170 Optické kontrastní a zobrazovací metody Fluorescence a Konfokální mikroskopie Šárka Mašová 1 Podzim 2014 Fluorescenční mikroskopie Excitace a pozorovní fluorescenčních molekul Velmi často používaná:
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceTechnické parametry příloha č. 2 k veřejné zakázce s názvem: Mikroskopy pro Centrum modelových organismů
Technické parametry příloha č. 2 k veřejné zakázce s názvem: Mikroskopy pro Centrum modelových organismů Část 1 veřejné zakázky: Super-rezoluční mikroskop s možností zobrazování živých dějů - invertovaný
VíceFunkční a biomechanické vlastnosti pojivových tkání (sval, vazy, chrupavka, kost, kloub)
Publikováno z 2. lékařská fakulta Univerzity Karlovy v Praze ( https://www.lf2.cuni.cz) Biofyzika Napsal uživatel Marie Havlová dne 9. Leden 2013-0:00. Sylabus předmětu BIOFYZIKA pro letní semestr 1. ročníku,
VíceOptika pro mikroskopii materiálů I
Optika pro mikroskopii materiálů I Jan.Machacek@vscht.cz Ústav skla a keramiky VŠCHT Praha +42-0- 22044-4151 Osnova přednášky Základní pojmy optiky Odraz a lom světla Interference, ohyb a rozlišení optických
VíceLaboratorní úloha č. 6 - Mikroskopie
Laboratorní úloha č. 6 - Mikroskopie Úkoly měření: 1. Seznamte se s ovládáním stereoskopického mikroskopu, digitálního mikroskopu a fotoaparátu. 2. Studujte pod mikroskopem různé preparáty. Vyberte vhodný
VíceSpektroskopické metody. převážně ve viditelné, ultrafialové a blízké infračervené oblasti
Spektroskopické metody převážně ve viditelné, ultrafialové a blízké infračervené oblasti Elektromagnetické záření Elektromagnetické záření je postupné vlnění elektromagnetického pole složeného z kombinace
VíceZákladem AFM je velmi ostrý hrot, který je upevněn na ohebném nosníku (angl. cantilever, tento termín se používá i v češtině).
AFM mikroskop Obsah: AFM mikroskop... 1 Režimy snímání povrchu... 1 Konstrukce AFM... 3 Vlastnosti AFM... 3 Rozlišení AFM... 3 Historie AFM... 4 Využití AFM... 4 Modifikace AFM... 5 Závěr... 5 Literatura
VíceMetody skenovací elektronové mikroskopie SEM a analytické techniky Jiří Němeček
Metody skenovací elektronové mikroskopie SEM a analytické techniky Jiří Němeček Druhy mikroskopie Podle druhu použitého paprsku nebo sondy rozeznáváme tyto základní druhy mikroskopie: Světelná mikrokopie
VíceStudium vybraných buněčných linií pomocí mikroskopie atomárních sil s možným využitím v praxi
Studium vybraných buněčných linií pomocí mikroskopie atomárních sil s možným využitím v praxi Petr Kolář, Kateřina Tománková, Jakub Malohlava, Hana Kolářová, ÚLB Olomouc 2013 atomic force microscopy mikroskopie
VíceTestování nanovlákenných materiálů
Testování nanovlákenných materiálů Eva Košťáková KNT, FT, TUL Obsah přednášky Testování nanovlákenných materiálů -Vizualizace (zobrazování nanovlákenných materiálů) -Chemické složení nanovlákenných materiálů
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceModerní metody rozpoznávání a zpracování obrazových informací 15
Moderní metody rozpoznávání a zpracování obrazových informací 15 Hodnocení transparentních materiálů pomocí vizualizační techniky Vlastimil Hotař, Ondřej Matúšek Katedra sklářských strojů a robotiky Fakulta
VíceMikroskopie, zobrazovací technika. Studentská 1402/2 461 17 Liberec 1 tel.: +420 485 353 006 cxi.tul.cz
Mikroskopie, zobrazovací technika Vizualizační technika Systém pro přímé sledování dějů ve spalovacím motoru AVL VISIOSCOPE, součástí zařízení je optické měřící zařízení pro měření teplot (VISIOFEM Temperature
VíceLupa a mikroskop příručka pro učitele
Obecné informace Lupa a mikroskop příručka pro učitele Pro vysvětlení chodu světelných paprsků lupou a mikroskopem je nutno navázat na znalosti o zrcadlech a čočkách. Hodinová dotace: 1 vyučovací hodina
VíceZobrazovací metody v nanotechnologiích
Zobrazovací metody v nanotechnologiích Optická mikroskopie Z vlnové povahy světla plyne, že není možné detekovat menší podrobnosti než polovina vlnové délky světla. Viditelné světlo má asi 500 nm, nejmenší
VícePříloha C. zadávací dokumentace pro podlimitní veřejnou zakázku Mikroskopy pro LF MU 2013. TECHNICKÉ PODMÍNKY (technická specifikace)
Příloha C zadávací dokumentace pro podlimitní veřejnou zakázku Mikroskopy pro LF MU 2013 TECHNICKÉ PODMÍNKY (technická specifikace) 1. část VZ: Laboratorní mikroskop s digitální kamerou a PC Položka č.1
Více1.1 Zobrazovací metody v optické mikroskopii
1 1.1 Zobrazovací metody v optické mikroskopii 1.1.1 Světlé pole Původní metoda optické mikroskopie. Světelný kužel prochází (v procházejícím světle) nebo se odráží (v odrážejícím světle) a vstupuje do
VíceLuminiscence. Luminiscence. Fluorescence. emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) chemicky (chemiluminiscence)
Luminiscence Luminiscence emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence chemicky (chemiluminiscence) teplem (termoluminiscence) zvukem (sonoluminiscence)
VíceBioscience Imaging Centre
Bioscience Imaging Centre (Středisko mikroskopie) zajišťujeme moderní mikroskopické zařízení a softwary pro analýzu obrazu poradíme s plánováním experimentů (histologie, detekce proteinů a mrna) pomůžeme
Více1. Teorie mikroskopových metod
1. Teorie mikroskopových metod A) Mezi první mikroskopové metody patřilo barvení biologických preparátů vhodnými barvivy, což způsobilo ovlivnění amplitudy světla prošlého preparátem, který pak byl snadno
VíceObsah přednášky Metody používané v cytologii Metody založené na barvení buněk
Obsah přednášky Metody používané v cytologii Metody založené na barvení buněk Nejčastěji používané mikroskopické techniky Imunofluorescenční značení Příklady a využití Konfokální mikroskopie Princip metody
VícePřednáška IX: Elektronová spektroskopie II.
Přednáška IX: Elektronová spektroskopie II. 1 Försterův resonanční přenos energie Pravděpodobnost (rychlost) přenosu je určená jako: k ret 1 = τ 0 D R r 0 6 0 τ D R 0 r Doba života donoru v excitovaném
VícePŘEHLED KLASICKÝCH A MODERNÍCH MIKROSKOPICKÝCH METOD
PŘEHLED KLASICKÝCH A MODERNÍCH MIKROSKOPICKÝCH METOD Jan Hošek Ústav přístrojové a řídící techniky, Fakulta strojní, ČVUT v Praze, Technická 4, 166 07 Praha 6, Česká republika Ústav termomechaniky AV ČR,
VíceC Mapy Kikuchiho linií 263. D Bodové difraktogramy 271. E Počítačové simulace pomocí programu JEMS 281. F Literatura pro další studium 289
OBSAH Předmluva 5 1 Popis mikroskopu 13 1.1 Transmisní elektronový mikroskop 13 1.2 Rastrovací transmisní elektronový mikroskop 14 1.3 Vakuový systém 15 1.3.1 Rotační vývěvy 16 1.3.2 Difúzni vývěva 17
VíceHistochemie a imunohistochemie, elektronová mikroskopie
Histochemie a imunohistochemie, elektronová mikroskopie Příprava histologických preparátů pro vyšetření světelným mikroskopem je sled pracovních úkonů v laboratoři, které mají za cíl vytvořit co nejlépe
VíceDPZ - IIa Radiometrické základy
DPZ - IIa Radiometrické základy Ing. Tomáš Dolanský Definice DPZ DPZ = dálkový průzkum Země Remote Sensing (Angl.) Fernerkundung (Něm.) Teledetection (Fr.) Informace o objektu získává bezkontaktním měřením
VíceOptické spektroskopie 1 LS 2014/15
Optické spektroskopie 1 LS 2014/15 Martin Kubala 585634179 mkubala@prfnw.upol.cz 1.Úvod Velikosti objektů v přírodě Dítě ~ 1 m (10 0 m) Prst ~ 2 cm (10-2 m) Vlas ~ 0.1 mm (10-4 m) Buňka ~ 20 m (10-5 m)
VíceIntegrita povrchu a její význam v praktickém využití
Integrita povrchu a její význam v praktickém využití Michal Rogl Obsah: 7. Válečkování články O. Zemčík 9. Integrita povrchu norma ANSI B211.1 1986 11. Laserová konfokální mikroskopie Válečkování způsob
VíceMikroskopie a zobrazovací technika. Studentská 1402/ Liberec 1 tel.: cxi.tul.cz
Mikroskopie a zobrazovací technika Oddělení vozidel a motorů Vizualizační technika Sledování dějů ve spalovacím motoru Systém pro přímé sledování dějů ve spalovacím motoru AVL VISIOSCOPE, součástí zařízení
VíceVyužití magneticko-rezonanční tomografie v měřicí technice. Ing. Jan Mikulka, Ph.D. Ing. Petr Marcoň
Využití magneticko-rezonanční tomografie v měřicí technice Ing. Jan Mikulka, Ph.D. Ing. Petr Marcoň Osnova Podstata nukleární magnetické rezonance (MR) Historie vývoje MR Spektroskopie MRS Tomografie MRI
Vícenano.tul.cz Inovace a rozvoj studia nanomateriálů na TUL
Inovace a rozvoj studia nanomateriálů na TUL nano.tul.cz Tyto materiály byly vytvořeny v rámci projektu ESF OP VK: Inovace a rozvoj studia nanomateriálů na Technické univerzitě v Liberci Experimentální
VíceÚstav experimentální medicíny AV ČR úspěšně rozšířil přístrojové vybavení pro vědce z peněz evropských fondů
Ústav experimentální medicíny AV ČR úspěšně rozšířil přístrojové vybavení pro vědce z peněz evropských fondů Ústav úspěšně dokončil realizaci dvou investičních projektů s využitím prostředků z Operačního
VíceSpektrometr pro měření Ramanovy optické aktivity: proč a jak. Optická sestava a využití motorizovaných jednotek.
Spektrometr pro měření Ramanovy optické aktivity: proč a jak. Optická sestava a využití motorizovaných jednotek. Josef Kapitán Centrum digitální optiky Digitální Ramanova spektroskopie a Ramanova optická
VíceIMUNOFLUORESCENCE. Mgr. Petr Bejdák Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny a Lékařská fakulta MU
Mgr. Petr Bejdák Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny a Lékařská fakulta MU Luminiscence jev, při kterém látka emituje záření po absorpci excitačního záření (fotoluminiscence)
VíceDifrakce elektronů v krystalech a zobrazení atomů
Difrakce elektronů v krystalech a zobrazení atomů Ondřej Ticháček, PORG, ondrejtichacek@gmail.com Eva Korytiaková, Gymnázium Nové Zámky, korpal@pobox.sk Abstrakt: Jak vypadá vnitřek hmoty? Lze spatřit
Více(Umělé) osvětlování pro analýzu obrazu
(Umělé) osvětlování pro analýzu obrazu Václav Hlaváč České vysoké učení technické v Praze Centrum strojového vnímání (přemosťuje skupiny z) Český institut informatiky, robotiky a kybernetiky 166 36 Praha
VíceFluorescenční a konfokální mikroskopie
Fluorescenční a konfokální mikroskopie Hana Sehadová, Biologické centrum AVČR, České Budějovice, 2011 Co je to fluorescence? některé látky (fluorofory) po ozáření (excitaci) světlem jsou schopny absorbovat
VíceÚstav molekulární a translační medicíny LF UP holografický transmisní mikroskop
ODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY ve smyslu ust. 156 zákona č. 137/2006 Sb., ve znění pozdějších předpisů (dále jen zákon ) a v souladu s ust. 2 až 8 vyhlášky č. č. 232/2012 Sb. (dále jen vyhláška) VEŘEJNÁ ZAKÁZKA
VíceMikroskopy. Světelný Konfokální Fluorescenční Elektronový
Mikroskopy Světelný Konfokální Fluorescenční Elektronový Světelný mikroskop Historie 1590-1610 - Vyrobeny první přístroje, které lze považovat za použitelný mikroskop (Hans a Zaccharis Janssenové z Middleburgu
VíceDiagnostika amyloidózy z pohledu patologa Látalová P., Flodr P., Tichý M.
Diagnostika amyloidózy z pohledu patologa Látalová P., Flodr P., Tichý M. Ústav klinické a molekulární patologie LF UP a FN Olomouc Úvodem -vzácná jednotka i pro patologa Statistika Ústavu klinické a
Více