Luděk Jančář, Irena Jančářová

Application of the Multicomponent Analysis on Food Dyes Content Determination in Three-Componental Systems Aplikace multikomponentní analýzy na stanovení obsahu potravinářských barviv v třísložkových systémech Luděk Jančář, Irena Jančářová Abstract: The problems of the multicomponent analysis in determined and over determined systems of three components are described in this work. Theoretical knowledge of the threecomponental analysis and the choose of wavelengths are applied on the practical spectrophotometric multicomponent determination of the synthetic food dyes content in chosen samples of sirups and instant drink in determined and over determined systems. With respect to the accessibility of the analysed drinks is possible to execute these determinations also in laboratory trainings from analytical chemistry. Keywords: Multicomponent analysis, spectrophotometry, determination, synthetic food dyes, drinks. Abstrakt: V práci je podrobně popsána problematika multikomponentní klasické analýzy v přesně určených a přeurčených systémech tří složek. Teoretické poznatky třísložkové analýzy a výběru vlnových délek jsou aplikovány na praktické spektrofotometrické multikomponentní stanovení obsahu syntetických potravinářských barviv ve vybraných vzorcích sirupů a instantního nápoje a to jak v přesně určených, tak v přeurčených systémech. Vzhledem k běžné dostupnosti analyzovaných nápojů je možné provádět stanovení i v laboratorních cvičeních z analytické chemie. Klíčová slova: Multikomponentní analýza, spektrofotometrie, stanovení, syntetická potravinářská barviva, nápoje. Úvod Multikomponentní (vícesložková) analýza je velmi aktuální metodou chemických stanovení. Problematiku multikomponentní analýzy lze názorně vysvětlit např. na jednoduché a snadno pochopitelné metodě spektrofotometrické třísložkové analýzy. Zásadní vliv na správnost stanovení koncentrací jednotlivých komponent v analyzovaném systému má správný výběr a dostatečný počet vlnových délek, zejména v oblasti absorpčních maxim jednotlivých komponent. 2 Multikomponentní analýza Úkolem multikomponentní (např. spektrofotometrické) analýzy je současné stanovení koncentrací několika látek (složek, komponent, částic) v roztoku vedle sebe (tzn. bez předchozí separace). Metody multikomponentní analýzy je možno rozdělit do dvou základních skupin:. Klasické metody multikomponentní analýzy vyžadují pro nalezení uspokojivě správných hodnot koncentrací složek platnost Bouguer-Lambert-Beerova zákona pro každou ze složek v uvažovaném rozsahu koncentrací a vzájemně se neovlivňující složky, 2. Moderní metody multikomponentní analýzy jsou schopné řešit problematiku multikomponentní analýzy i při omezené platnosti Bouguer-Lambert-Beerova zákona a případné interakci složek. XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204

2. Klasické metody multikomponentní analýzy Obsahuje-li roztok větší počet absorbujících složek, které vzájemně neinteragují a pro každou složku samostatně platí Bouguer-Lambert-Beerův zákon, je výsledná absorbance A i (při dané vlnové délce i, kde i,, m) dána součtem všech dílčích absorbancí jednotlivých složek j ( j,, p ): A p ε c l () i ij j j A ε c l+ ε c l+ + ε c l (2) ij i i i2 2 ip p kde A i je absorbance roztoku při i-té vlnové délce, i označení zvolené vlnové délky pro měření, j označení zvolené složky, p počet složek (komponent), m počet vlnových délek, l optická délka kyvety, j,, p při vlnových délkách ( i,, m), ε absorpční koeficienty složek ( ) c,, cp obecně vyjádřené koncentrace jednotlivých složek. Zápis (, 2) je soustavou m rovnic o p neznámých. Pokud m p, je možné stanovit koncentrace jednotlivých složek tehdy, změříme-li absorbanci neznámého roztoku (vzorku) směsi při:. tolika vlnových délkách, kolik je absorbujících složek ve směsi, tj. m p (přesně určené systémy), 2. více vlnových délkách než je počet absorbujících složek ve směsi, tj. m> p (přeurčené systémy). Přeurčené systémy mají oproti přesně určeným systémům určité výhody. Měříme-li pouze pro tolik vlnových délek, kolik je počet složek ( m p), pak experimentální chyba v měřené hodnotě absorbance ovlivní konečný výsledek multikomponentní spektrofotometrické analýzy relativně podstatně více než při měření v přeurčených systémech ( m > p). Rovněž v případech, kdy jednotlivé složky mají spektra s více absorpčními maximy, je pro dosažení správnějších výsledků výhodnější měřit hodnoty absorbancí při vlnových délkách všech těchto absorpčních maxim ( λ ), tedy v přeurčených systémech (Jančářová, 202). max 2.. Přesně určené systémy třísložkový systém Změříme absorbance čistých složek a neznámého vzorku při vlnových délkách (nejlépe v λ max jednotlivých složek). Z naměřených absorbancí jednotlivých složek vypočteme ze znalosti koncentrací jednotlivých složek hodnoty příslušných absorpčních koeficientů. Sestavíme pak soustavu rovnic o neznámých: A ε c + ε c + ε c () 2 2 A ε c + ε c + ε c (4) 2 2 22 2 2 A ε c + ε c + ε c (5) 2 2 XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 2

Soustava (), (4), (5) je soustavou tří rovnic o třech neznámých, kterou vyřešíme libovolným vhodným způsobem, např.:. pomocí programu Excel (např. metodou inverze matic), 2. metodou dosazovací,. Gaussovou eliminační metodou, 4. výpočtem z následujících rovnic (z metody determinantů Cramerovo pravidlo): A ε 22 ε + A ε2 ε2 + A2 ε ε2 A ε ε22 A ε2 ε2 A2 ε2 ε c (6) ε ε ε + ε ε ε + ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε c c 2 22 2 2 2 2 22 2 2 2 2 A2 ε ε + A ε2 ε + A ε ε2 A2 ε ε A ε ε2 A ε2 ε ε ε ε + ε ε ε + ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε 22 2 2 2 2 22 2 2 2 2 A ε ε22 + A2 ε2 ε + A ε2 ε2 A ε22 ε A2 ε ε2 A ε2 ε2 ε ε ε + ε ε ε + ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε ε 22 2 2 2 2 22 2 2 2 2 2..2 Přeurčené systémy třísložkový systém Spektrofotometrická data, naměřená v přeurčených systémech ( m > p), mohou být zpracována různými způsoby, velmi často např. metodou vícenásobné lineární regrese (Multiple Linear Regression MLR). Jedná se o jednoduchou a názornou metodu, při níž se využívá metoda inverze matic nebo zejména tzv. metoda nejmenších čtverců. Tato metoda nahrazuje skutečné hodnoty hodnotami vypočtenými, přičemž se toto nahrazení provádí tak, aby součet druhých mocnin (čtverců) odchylek mezi skutečnou a vypočtenou (ideální, nahrazující) hodnotou byl co nejmenší: m i ( ) 2 i,vyp i,exp U A A min. (9) V našem případě skutečnými hodnotami jsou naměřené absorbance počítanými jsou absorbance A i,vyp i,vyp i i2 2 ip p vypočtené podle vztahu: A i,exp (7) (8), zatímco hodnotami A ε c l+ ε c l+ + ε c l (0) Hodnoty ε ij známe (vypočteme z naměřených spekter čistých látek), hodnota l je optická délka kyvety (pro zjednodušení volíme l cm, proto se hodnota l v dalším textu neobjevuje). Hodnoty c až c jsou hledané koncentrace složek. p Vzhledem k tomu, že analyzovaný vzorek obsahuje složky (např. potravinářská barviva), budeme hledat pouze hodnoty koncentrací c, c, c. 2 Pro nejsprávnější hledané hodnoty, a c tedy musí obdobně platit: c c2 ( ) ( ) ( m m ) 2 2 2,vyp,exp 2,vyp 2,exp,vyp,exp min. U A A + A A + + A A () Po dosazení (0) s přihlédnutím ke skutečnosti, že l, dostaneme: ( ε ε2 2 ε, exp ) ( ε2 ε22 2 ε2 2, exp ) 2 + ( εm c+ εm2 c2 + εm c Am,exp) min. 2 2 U c + c + c A + c + c + c A + + (2) XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204

Požadavku, že daný součet musí být co nejmenší číslo (označeno min.), vyhovíme tak, že vztah (2) zderivujeme, výsledek položíme roven nule a výslednou rovnici vyřešíme. Protože hledáme tři neznámé, musíme derivování provést třikrát (zvlášť pro každou koncentraci, c2, c ) a na závěr vyřešit soustavu tří rovnic o třech neznámých. Derivováním obdržíme: U 2 ( ε c + ε2 c2 + ε c A, exp ) ε + 2 ( ε2 c + ε22 c2 + ε2 c A2, exp ) ε2 + c 2 ( c c c A ) + + 2 ε + ε + ε ε 0 m m2 2 m m,exp m U 2 ( ε c + ε2 c2 + ε c A, exp ) ε2 + 2 ( ε2 c + ε22 c2 + ε2 c A2, exp ) ε22 + c ( c c c A ) + + 2 ε + ε + ε ε 0 m m2 2 m m,exp m2 U 2 ( ε c + ε2 c2 + ε c A, exp ) ε + 2 ( ε2 c + ε22 c2 + ε2 c A2, exp ) ε2 + c ( c c c A ) + + 2 ε + ε + ε ε 0 m m2 2 m m,exp m ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A + ε ε c + ε ε c + ε ε c c () (4) (5) Řešením výše uvedené soustavy tří rovnic o třech neznámých (), (4) a (5) získáme hledané co nejlepší hodnoty,, c. c c2 Úpravou (vydělením číslem 2 a roznásobením) dostaneme: 2 2, exp 2 2 2 22 2 2 2 ε A + + ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A 2 2, exp m m m m2 2 m m m m, exp 0 (6) ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A + ε ε c + ε ε c + ε ε c 2 2 2 2 2 2, exp 2 22 22 22 2 22 2 ε A + + ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A 22 2, exp m m2 m2 m2 2 m2 m m2 m, exp 0 ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A + ε ε c + ε ε c + ε ε c 2 2, exp 2 2 22 2 2 2 2 ε A + + ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A 2 2, exp m m m2 m 2 m m m m, exp 0 Seřazením podle neznámých (koncentrace c, c 2, c ) a jejich vytknutím dostaneme: ( ε ε ε ε εm εm ) c ( ε ε ε ε εm εm ) ( ε ε ε ε ε ε ) ε ε ε + + + + + + + c + 2 2 2 2 22 2 2 + + + + c A + A + + A 2 2 m m, exp 2 2, exp m m, exp ( ε ε ε ε εm εm ) c ( ε ε ε ε εm εm ) ( ε ε ε ε ε ε ) ε ε ε + + + + + + + c + 2 22 2 2 2 2 22 22 2 2 2 + + + + c A + A + + A 2 22 2 m2 m 2, exp 22 2, exp m2 m, exp ( ε ε ε ε εm εm ) c ( ε ε ε ε εm εm ) ( ε ε ε ε ε ε ) ε ε ε + + + + + + + c + 2 2 2 2 22 2 2 + + + + c A + A + + A 2 2 m m, exp 2 2, exp m m, exp (7) (8) (9) (20) (2) Nahrazením zápisu součtů ve výše uvedených rovnicích obvyklou symbolikou pro sumy dostaneme (i je označení vlnové délky, při níž bylo provedeno měření): m m m m ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A i i i i2 2 i i i i,exp i i i i m m m m εi2 εi c+ ε2 εi2 c2 + εi2 εi c εi2 Ai,exp (2) i i i i (22) XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 4

m m m m ε ε c + ε ε c + ε ε c ε A (24) i i i i2 2 i i i i,exp i i i i Hodnoty jednotlivých součtů (sum) určíme snadno některým tabulkovým procesorem, např. programem Excel nebo výpočtem. Výsledkem je vždy nějaké číslo (suma). Označme si je např. až S. Výše uvedené rovnice pak můžeme zjednodušeně zapsat ve tvaru: S 2 S c+ S2 c2 + S c S4 (25) S5 c+ S6 c2 + S7 c S8 (26) S9 c+ S0 c2 + S c S2 (27) Soustava (25), (26), (27) je soustava tří rovnic o třech neznámých, kterou vyřešíme libovolným vhodným způsobem, např.:. pomocí programu Excel (např. metodou inverze matic), 2. metodou dosazovací,. Gaussovou eliminační metodou, 4. výpočtem z následujících rovnic (z metody determinantů Cramerovo pravidlo): S4 S6 S + S2 S2 S7 + S8 S S0 S2 S S6 S4 S7 S0 S8 S2 S c (28) S S S + S S S + S S S S S S S S S S S S c c 2 6 2 7 9 5 0 6 9 7 0 2 5 S8 S S+ S4 S7 S9 + S2 S S5 S8 S S9 S2 S S7 S4 S5 S (29) S S S + S S S + S S S S S S S S S S S S 6 2 7 9 5 0 6 9 7 0 2 5 S S S + S S S + S S S S S S S S S S S S S S S + S S S + S S S S S S S S S S S S 2 6 8 2 9 4 5 0 4 6 9 8 0 2 2 5 6 2 7 9 5 0 6 9 7 0 2 5 2.. Výběr vlnových délek třísložkový systém V přesně určených systémech volíme vlnové délky (obvykle v λ max spekter jednotlivých složek). V přeurčených systémech volíme vlnové délky tak, abychom pro každou složku vybrali nejméně vlnové délky. Většinou volíme jednu vlnovou délku v λ max spekter jednotlivých složek a ostatní pokud možno tak, aby v nich ostatní složky absorbovaly co nejméně. Pro složky vybíráme zpravidla tedy 9 vlnových délek. Na správném výběru vlnových délek v třísložkovém systému závisí správnost dosažených výsledků. 2.2 Modifikace klasických metod multikomponentní analýzy Popsané klasické metody multikomponentní analýzy používají jako vstupních dat hodnot absorpčních koeficientů vypočtených z kalibračních závislostí v jednosložkových systémech, a proto dávají uspokojivé výsledky jen v případě přísné aditivity absorbancí, kdy se jednotlivé složky vzájemně neovlivňují. V případě odchylek od linearity lze jednotlivé postupy modifikovat tak, aby byly pomocí stejných algoritmů počítány nejprve korigované hodnoty absorpčních koeficientů jednotlivých složek pro dané vlnové délky, a to z naměřených hodnot absorbancí několika vhodně připravených směsí kalibračních roztoků. Tímto způsobem bývá dosaženo často správnějších (0) XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 5

výsledků, neboť korigované hodnoty absorpčních koeficientů částečně simulují vzájemné ovlivňování jednotlivých složek či jiné odchylky od linearity. 2. Moderní metody multikomponentní analýzy Pokud nemůžeme předpokládat přesnou platnost Bouguer-Lambert-Beerova zákona nebo pokud složky vzorku spolu interagují, mohou klasické metody selhat. K získání výsledků zatížených velkou chybou jsou náchylná data také v případě multikolinearity (např. značná podobnost či překryv absorpčních spekter jednotlivých složek). V takových případech se dají s výhodou využít novější, složitější, avšak spolehlivější metody multikomponentní analýzy. Mezi tyto metody řadíme např. různé postupy obecné (nelineární) regrese, metody faktorové analýzy a řadu jiných projekčních metod, jako je např. regrese hlavních komponent (PCR Principal Component Regression), Partial least squares (PLS), popř. metody Kalmanova filtru (KF) a jiné (Jančář, 99). Stanovení obsahu syntetických potravinářských barviv Byly analyzovány praktické vzorky: sirup Černý rybíz, Albert, ČR, sirup s příchutí kiwi, CBA, Neli, a. s., Vyškov, ČR (Kiwi CBA), sirup Kiwi, Neli, a. s., Vyškov, ČR (Kiwi), instantní nápoj v prášku Fruttco tropical, Surya International, Changodar, India. Vzorky obsahovaly různé směsi syntetických potravinářských barviv (Azorubin AZO, BM, Chinolinová žluť CHŽ, Ponceau 4R PON, Tartrazin TAR, ŽSY).. Syntetická potravinářská barviva Absorpční spektra jednotlivých syntetických potravinářských barviv (Tartrazin E02, Chinolinová žluť E04, E0, Azorubin E22, Ponceau 4R E24, E) jsou uvedena na obrázku. Obr. : Absorpční spektra jednotlivých syntetických potravinářských barviv XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 6

Absorpční maxima ( λ max ) jednotlivých potravinářských barviv jsou uvedena v tabulce. Tab. : Absorpční maxima jednotlivých syntetických potravinářských barviv Barvivo CHŽ TAR ŽSY PON AZO BM λ max [nm] 4 428 480 508 55 60.2 Sirupy a instantní nápoj Zastoupení syntetických potravinářských barviv v jednotlivých vzorcích sirupů (Černý rybíz, Kiwi) a instantního nápoje (Fruttco tropical) je uvedeno v tabulce 2..2. Absorpční spektra a výběr vlnových délek Absorpční spektra jednotlivých vzorků sirupů (Černý rybíz, Kiwi) a instantního nápoje (Fruttco tropical) jsou uvedena na obrázku 2. Obr. 2: Absorpční spektra vzorků sirupů a instantního nápoje Vlnové délky pro jednotlivé vzorky byly voleny tak, že byly brány vždy vlnové délky v oblasti absorpčního maxima příslušného syntetického potravinářského barviva obsaženého ve vzorku (tabulka 2). Hodnoty absorbancí u jednotlivých vzorků tak byly měřeny celkem pro 9 vlnových délek. XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 7

Tab. 2: Zastoupení syntetických potravinářských barviv ve vzorcích a vybrané vlnové délky Vzorek. barvivo 2. barvivo. barvivo Černý rybíz Albert Kiwi CBA Kiwi Fruttco tropical Ponceau 4R 480, 490, 508 nm Chinolinová žluť 400, 4, 428 nm Chinolinová žluť 400, 4, 428 nm Tartrazin 400, 428, 440 nm Azorubin 500, 55, 50 nm 470, 480, 490 nm 470, 480, 490 nm 470, 480, 490 nm 620, 60, 640 nm 620, 60, 640 nm 620, 60, 640 nm Azorubin 500, 55, 50 nm Na obrázku je ukázán vhodný výběr vlnových délek pro vzorek instantního nápoje (Fruttco tropical). Obr. : Hodnoty absorbancí pro vybrané vlnové délky pro potravinářská barviva a instantní nápoj. Výsledky stanovení Naměřená data byla vyhodnocena pomocí programu MULA v Microsoft Excel, rozšířeného a upraveného pro komponenty. Výsledky stanovení potravinářských barviv v jednotlivých vzorcích sirupů a instantního nápoje v přeurčených systémech (9 vlnových délek) a přesně určených systémech * ( vlnové délky v λ max jednotlivých komponent) jsou uvedeny v tab.. XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 8

Tab. : Obsah syntetických potravinářských barviv ve vzorcích sirupů a instantního nápoje Vzorek. barvivo 2. barvivo. barvivo Černý rybíz Albert Kiwi CBA Kiwi Fruttco tropical Ponceau 4R,47 mg/l 22,98 mg/l* Chinolinová žluť 4,0 mg/l 9,0 mg/l* Chinolinová žluť 50,99 mg/l 48,9 mg/l* Tartrazin,79 mg/g,76 mg/g* Azorubin 94,56 mg/l 79,5 mg/l* 44,42 mg/l 44,02 mg/l* 46,92 mg/l 46,4 mg/l* 4,54 mg/g 4,59 mg/g* 2, mg/l 2,4 mg/l* 9,54 mg/l 9,2 mg/l* 0, mg/l 9,98 mg/l* Azorubin,52 mg/g,48 mg/g* Jak je patrné z tabulky, přesně určené systémy nelze použít pro analýzu vzorků obsahujících potravinářská barviva s velmi blízkými hodnotami absorpčních maxim (viz sirup Černý rybíz, Albert Ponceau 4R 508 nm, Azorubin 55 nm). Správnost výsledků obsahu potravinářských barviv v přeurčených systémech byla potvrzena metodou standardního přídavku. 4 Aplikace ve výuce chemie Uvedenou problematiku současného multikomponentního stanovení pro složky lze použít nejen v rámci výuky teoretických základů předmětů Analytická chemie a Základy chemometrie, ale rovněž v praktické výuce v předmětech Laboratorní cvičení z analytické chemie a Analýza potravin (viz kap. 4.). 4. Úlohy do laboratorního cvičení 4.. Stanovení syntetických potravinářských barviv v sirupu Pracovní postup: a) Ze zásobních roztoků potravinářských barviv připravíme vždy 00 ml roztoku ponceau 4R a azorubinu o c m 0,06 g/l a brilantní modři o c m 0,004 g/l. Do odměrné baňky odpipetujeme 5 ml vzorku sirupu (Černý rybíz, Albert) a doplníme destilovanou vodou na objem 00 ml. Absorbance těchto 4 roztoků změříme proti destilované vodě při vlnových délkách 480, 490, 500, 508, 55, 50, 620, 60 a 640 nm. b) Ze zásobních roztoků potravinářských barviv připravíme vždy 00 ml roztoku chinolinové žluti a žluti SY o c m 0,06 g/l a brilantní modři o c m 0,004 g/l. Do odměrné baňky odpipetujeme 0 ml vzorků sirupů (Kiwi), doplníme destilovanou vodou na objem 00 ml a zfiltrujeme. Absorbance těchto roztoků změříme proti destilované vodě při vlnových délkách 400, 4, 428, 470, 480, 490, 620, 60 a 640 nm. 4..2 Stanovení syntetických potravinářských barviv v instantním nápoji Pracovní postup: Ze zásobních roztoků potravinářských barviv připravíme vždy 00 ml roztoku tartrazinu, žluti SY a azorubinu o c m 0,06 g/l. Na analytických vahách navážíme 200 mg (přesnou hmotnost si poznačíme) instantního nápoje (Fruttco tropical), po rozpuštění doplníme na objem 00 ml destilovanou vodou a zfiltrujeme. Absorbance těchto 4 roztoků změříme proti destilované vodě při vlnových délkách 400, 428, 440, 470, 480, 490, 500, 55 a 50 nm. XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 9

Ukázka vyhodnocení pomocí modifikovaného programu MULA v Microsoft Excel je uvedena v následujícím výpisu: Multikomponentní analýza směsi barviv Datum: 7.2.204 Fruttco tropical Hmotnost vzorku: 0,2067 g Objem vzorku: 00,0 ml Tartrazin Azorubin vzorek Tartrazin Azorubin nm A i, A i,2 A i, A i ε i, ε i,2 ε i, 400 0,562 0,270 0,54 0,468 5,25 6,875 9,625 428 0,660 0,6 0,68 0,540 4,250 9,750 0,500 440 0,64 0,80 0,92 0,569 9,625 2,750 2,000 470 0,4 0,674 0,9 0,69 2,48 42,25 24,48 480 0,224 0,7 0,479 0,65 4,000 45,8 29,98 490 0,099 0,720 0,56 0,582 6,88 45,000 5,06 500 0,00 0,686 0,6 0,54,875 42,875 9,48 55 0,004 0,527 0,695 0,447 0,29 2,98 4,48 50 0,000 0,78 0,648 0,27 0,000,25 40,500 koncentrace komponent c [g/l] 0,06 0,06 0,06 (ε i, ) 2 (ε i,2 ) 2 (ε i, ) 2 ε i,. ε i,2 ε i,. ε i, ε i,2. ε i, ε i,. A i ε i,2. A i ε i,. A i 2,766 284,766 92,64 592,74 8,078 62,422 6,49 7,898 4,505 70,56 90,06 0,250 84,688 4,25 207,75 22,275 0,665 5,670 570,4 564,06 44,000 94,094 475,500 285,000 22,547,54 6,828 459,566 774,56 597,9 90,055 52,879 029,40,699 26,98 5,66 96,000 2098,785 896,254 64,75 49,25 7,52 8,890 29,09 9,00 8,285 2025,000 229,79 278,48 26,949 577,8,60 26,90 20,406,56 88,266 555,6 80,9 7,945 690,88,04 2,95 2,6 0,048 084,879 886,86 7,205 9,502 40,72 0,098 4,72 9,47 S S6 S S2 S5 S S9 S7 S0 S4 S8 S2 5202,884 0060,6 65,848 4258,979 2490,04 7755,56 88,562 52,94 2,787 S. c + S2. c 2 + S. c S4 S5. c + S6. c 2 + S7. c S8 S9. c + S0. c 2 + S. c S2 S S. C B B c c 2 c b 5202,884 4258,979 2490,04 88,562 4258,979 0060,6 7755,56 52,94 2490,04 7755,56 65,848 2,787 S C S. B 4,50E-04-7,E-04 6,69E-04 Tartrazin c 0,00780 g/l -7,E-04 2,2E-0-2,49E-0 c 2 0,009926 g/l 6,69E-04-2,49E-0 2,87E-0 Azorubin c 0,00400 g/l Obsah barviv v instantním nápoji: Tartrazin c,79mg/g c 2 4,54mg/g Azorubin c,52mg/g XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204 0

5 Závěr Teoretické předpoklady výběru vlnových délek v multikomponentním stanovení v systémech komponent byly aplikovány na praktické vzorky třísložkového stanovení potravinářských barviv ve vzorcích sirupů a instantního nápoje. Zjištěné koncentrace barviv ve vzorcích jsou vzhledem k doporučenému ředění v souladu s nejvyšším povoleným množstvím. Současně byly také navrženy 2 laboratorní úlohy do výuky v předmětech Laboratorní cvičení z analytické chemie a Analýza potravin. Použité zdroje JANČÁŘ, Luděk a Wolfhard WEGSCHEIDER, 99. Effect of Scaling Regimes on the Prediction of Analytical Results from Multivariate Calibration. Anal. Chim. Acta. 99, vol. 248, issue 2, s. 459 472. DOI: 0.06/S000-2670(00)8466-2. JANČÁŘOVÁ, Irena a Luděk JANČÁŘ, 202. Anorganická a analytická chemie: laboratorní cvičení. Brno: Mendelova univerzita, 202. 62 s. ISBN 978-80-775-640-6. doc. RNDr. Luděk Jančář, CSc. Katedra fyziky, chemie a odborného vzdělávání, Pedagogická fakulta, Masarykova univerzita Poříčí 7, 60 00 Brno, Česká republika E-mail: jancar@ped.muni.cz Telefon: +420 549 494 7 Ing. Irena Jančářová, CSc. Ústav chemie a biochemie, Agronomická fakulta, Mendelova univerzita v Brně Zemědělská, 6 00 Brno, Česká republika E-mail: janc@node.mendelu.cz Telefon: +420 545 28 XXXII International Colloquium, Brno, May 22, 204