laboratoři i s podobnými záhadami?



Podobné dokumenty
Funkční testy: BasoFlowEx Kit FagoFlowEx Kit

METODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY. Veřejné zdravotnictví

Mnohobarevná cytometrie v klinické diagnostice

Imunologické metody fagocytóza, stanovení oxidačního metabolismu, chemiluminiscence, baktericidní test

Fagocytóza je proces pohlcení a degradace částic větších než 0,5 µm.

Interpretace výsledků měření základních lymfocytárních subpopulací očima (průtokového J ) cytometristy a klinického imunologa

Veronika Janů Šárka Kopelentová Petr Kučera. Oddělení alergologie a klinické imunologie FNKV Praha

Aglutinace Mgr. Jana Nechvátalová

Marcela Vlková Jana Nechvátalová. FN u sv. Anny v Brně LF MU Brno

Imunitní odpověd - morfologie a funkce, nespecifická odpověd, zánět. Veřejné zdravotnictví

Nespecifické složky buněčné imunity. RNDr. Jan Lašťovička, CSc. Ústav imunologie 2.LF UK, FN Motol

Mechanismy a působení alergenové imunoterapie

Průtoková cytometrie Flow Cytometry

Intracelulární detekce Foxp3

Imunitní systém.

Změny v parametrech imunity v průběhu specifické alergenové imunoterapie. Vlas T., Vachová M., Panzner P.,

Stanovení cytokinového profilu u infertilních žen. Štěpánka Luxová 2. ročník semináře reprodukční medicíny

Metody testování humorální imunity

IMUNOGENETIKA I. Imunologie. nauka o obraných schopnostech organismu. imunitní systém heterogenní populace buněk lymfatické tkáně lymfatické orgány

Podrobný seznam vyšetření - imunologie

Identifikace postupu vyšetření Klinická biochemie SOP-OKB-01 SOP-OKB-03 SOP-OKB-04 SOP-OKB-05 SOP-OKB-06 SOP-OKB-07

Protinádorová imunita. Jiří Jelínek

SKANÁ imunita. VROZENÁ imunita. kladní znalosti z biochemie, stavby membrán n a fyziologie krve. Prezentace navazuje na základnz

Rozdělení imunologických laboratorních metod

Progrese HIV infekce z pohledu laboratorní imunologie

Metody testování humorální imunity

Co jsou imunodeficience? Imunodeficience jsou stavy charakterizované zvýšenou náchylností k infekcím

Využití průtokové cytometrie při monitorování pacientů na biologické léčbě

Funkce imunitního systému

Podrobný seznam vyšetření - imunologie

Precipitace, radioimunodifúze (RID), nefelometrie, turbidimetrie

Specifická imunitní odpověd. Veřejné zdravotnictví

2) Vztah mezi člověkem a bakteriemi

Vybrané imunologické metody

SPECIFICKÁ A NESPECIFICKÁ IMUNITA

Nové metody v průtokové cytometrii. Vlas T., Holubová M., Lysák D., Panzner P.

VYŠETŘENÍ FETOMATERNÁLNÍ HEMORRHAGIE POMOCÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE

Precipitace, radioimunodifúze (RID), nefelometrie, turbidimetrie

Variabilita takto vytvořených molekul se odhaduje na , což je více než skutečný počet sloučenin v přírodě GENETICKÝ ZÁKLAD TĚŽKÉHO ŘETĚZCE

Přínos metody ELISPOT v diagnostice lymeské boreliózy

KAZUISTIKY V BUNĚČNÉ IMUNOLOGII. UŽIVATELSKÉ SETKÁNÍ PRŮTOKOVÉ CYTOMETRIE BECKMAN COULTER Ing. Pavla Plačková

nejsou vytvářeny podle genetické přeskupováním genových segmentů Variabilita takto vytvořených což je více než skutečný počet sloučenin v přírodě

Poruchy metabolismu lipidů. Ateroskleróza. (C) MUDr. Martin Vejražka, Ústav lékařské biochemie 1.LF UK Praha 1

Nespecifické složky buněčné imunity. M.Průcha

Zuzana Vančíková Pediatrická klinika 2. LF UK a FN Motol,Praha

CentroLab s.r.o. Sokolovská 810/304, Praha 9

Aplikace průtokové cytometrie v klinické imunologii a hematologii

IMALAB s.r.o. U Lomu 638, Zlín

Seznam laboratorních vyšetření Hematologicko-transfúzního oddělení

RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. Katedra zoologie, PřF UP Olomouc

Metody vyšetření imunity

Základy imunologických metod: interakce antigen-protilátka využití v laboratorních metodách

IMUNITA A PORUCHY PLODNOSTI

Komplexní pohled na laboratorní diagnostiku Chlamydia pneumoniae

OBMI OKBHI Laboratorní příručka OKBHI Příloha č. 3 Podrobný seznam vyšetření - IMUNOLOGIE

Morfologie krvinek 607

Studie zdravotního stavu dětí

ÚVOD DO TRANSPLANTAČNÍ IMUNOLOGIE

Výskyt MHC molekul. RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. ajor istocompatibility omplex. Funkce MHC glykoproteinů

Laboratorní di agnostik HBV HCV a Vratislav Němeček Státní zdravotní stav ústav

OBRANNÝ IMUNITNÍ SYSTÉM

Antiparalelní beta list

Parvovirus B 19. Renata Procházková

Jaké máme leukémie? Akutní myeloidní leukémie (AML) Akutní lymfoblastická leukémie (ALL) Chronické leukémie, myelodysplastický syndrom,

Precipitační a aglutinační reakce

Mimodřeňová expanze plazmocytů do CNS u mnohočetného myelomu

Využití mnohobarevné průtokové cytometrie pro vyšetření lymfocytárních subpopulací Jana Nechvátalová

Jan Krejsek. Funkčně polarizované T lymfocyty regulují obranný i poškozující zánět

Příloha je nedílnou součástí osvědčení o akreditaci č.: 146/2017 ze dne:

KOMPLEMENTOVÝ SYSTÉM

Výskyt a význam infekce Borna disease virem u pacientů léčených

IMUNITA PROTI INFEKCÍM. Ústav imunologie 2.LF UK Praha 5- Motol

Rutinní imunologická vyšetření neplodných párů

Obsah. Seznam zkratek Předmluva k 5. vydání... 21

SEZNAM LABORATORNÍCH VYŠETŘENÍ

Verifikace metod návrh STL

Komplementový systém a nespecifická imunita. Jana Novotná Ústav lékařské chemie a biochemie 2 LF UK

Příloha č.4 Seznam imunologických vyšetření

tky proti annexinu V Protilátky u trombofilních stavů u opakovaných těhotenských ztrát 2003 By Default! Slide 1

Imunitní systém. Přesnější definice: Tkáně a buňky lidského těla schopné protektivně reagovat na vlivy působící proti udržení homeostázy.

VZTAH DÁRCE A PŘÍJEMCE

Interpretace sérologických nálezů v diagnostice herpetických virů. K.Roubalová

Jak analyzovat monoklonální gamapatie

Biochemie imunitního systému. Jana Novotná

Varovné meze a jejich hlášení. Nahrazuje dokument I-ÚLBLD-1 Varovné meze a jejich hlášení vyd.5, zm.1 ze dne

IMUNITNÍ SYSTÉM OBRATLOVCŮ - MATKA PLOD / MLÁDĚ VÝVOJ IMUNITNÍHO SYSTÉMU OBRATLOVCŮ CHARAKTERISTUIKA IMUNITNÍHO SYSTÉMU OBRATLOVCU

MUDr.Kissová Jarmila Oddělení klinické hematologie FN Brno

Abnormality bílých krvinek. MUDr.Kissová Jarmila Oddělení klinické hematologie FN Brno

Helena Langhansová. 30. listopadu 2011

IMUNOLOGIE: VELKÝ OBOR OD MOLEKUL K PACIENTŮM CCA 20 NOBELOVÝCH CEN

Princip testu. Kdy se PAT provádí (1) Kdy se PAT provádí (2) PAT kvalitativní a kvantitativní stanovení na ID-gelových kartách

VK obecně o akreditaci, důležité kapitoly normy ISO MV obecně o validaci a verifikaci Marcela Vlková ÚKIA, FN u sv.

jako markeru oxidativního

vyrobený z lidské krevní plazmy

Objednací číslo Určení Třída IgG Substrát Formát EI G Parainfluenza viry typu 1. Ag-potažené mikrotitrační jamky

Nemocnice s poliklinikou Karviná-Ráj, příspěvková organizace Laboratoře HTO (Hematologicko-transfuzní oddělení) Vydmuchov 399/5, Karviná-Ráj

Novinky VIDIA v di agnost ce Lymeské borreliózy

PŘÍPRAVA PACIENTA : Speciální příprava pacienta ani dieta není nutná, pro obvyklé vyšetřování je vhodný odběr ráno, nalačno.

IMUNOFLUORESCENCE. Mgr. Petr Bejdák Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny a Lékařská fakulta MU

Transkript:

Setkáváte te se ve Vaší laboratoři i s podobnými záhadami? Doris Vokurková 1, Pavlína Králíčkov ková 1, Eva Malá 1, Jakub Novosad 1, Pavel Rozsíval 2, Eva Pařízkov zková 2 vokurkovad@lfhk lfhk.cuni.czcz 1 Ústav klinické imunologie a alergologie, FN Hradec Králov lové a LF UK Hradec Králov lové 2 Dětská klinika, FN Hradec Králov lové a LF UK Hradec Králov lové

Stanovení T, B, NK tetrachrom, 2lasery, Cytomics FC500, Beckman Coulter 1.zkumavka CD45-FITC, CD4-PE, CD8-ECD, CD3-PC5 2.zkumavka CD45-FITC, CD56+16-PE, CD19-ECD, CD3-PC5

MODIFIKACE

pac.a pac.b pac.b+serum pac.a pac.a 2x proprano

PŘÍČINA??? Vliv léků l (kortikoidy, cytostatika) Hypergamaglobulinémie mie Vysoké CRP Krevní skupina???? podle přítomnosti p antigenu na membráně erytrocytu jsou rozlišeny 4 krevní skupiny A, B, AB a 0. V plazmě se pak vyskytují protilátky tky proti těmto t krevním m skupinám m a to vždy v protilátka tka proti té t krevní skupině,, která není přítomná na membráně erytrocytu. - krevní skupina A - na membráně erytrocytu antigen A a v plazmě přítomnu protilátku tku anti B, krevní skupina B - na povrchu erytrocytu antigen B a v plazmě protilátku tku anti A, krevní skupinu AB, jež má na membráně erytrocytu přítomnp tomné oba antigeny a v plazmě žádnou z protilátek tek

březen 2012 květen 2012 HIV pacient, muž, 38let září 2012 prosinec 2012 prosinec 2012 březen 2013

PBS Sorensenův fosfátový pufr Roztok A: KH 2 PO 4... 91g ad 1000ml H 2 O pro inj Roztok B: Na 2 HPO 4 x12 H 2 O.. 240g ad 1000ml H2O pro inj 20% DIHYDROGENFOSFOREČNAN DRASELNÝ Reklamace 10% roztok je zakalený, zastaven prodej šarže

46,9% Závada v laseru 77.9%

METABOLICKÉ VZPLANUTÍ Měření respiračního vzplanutí granulocytů po jejich stimulaci inakt.bakteriemi E.coli aktivace NADPH-oxid oxidázy Vznikající reaktivní meziprodukty uvnitř fagocytů oxidují DHR123 na fluorescenční produkt rhodamin123 detekován n průtokovým cytometrem (modrý laser 488nm)

METABOLICKÉ VZPLANUTÍ Chybějící nebo snížen ená tvorba oxidativních produktů fagocytujících ch buněk - vážné onemocnění chronické granulomatózy Mutace genu kódujk dujícího enzym fagocytárn rní NADPH- oxidazu na chromozomu X ( enzym má m sníženou nebo nulovou aktivitu) Aktivovaná NADPH-oxidaza katalyzuje reakci - vzniká singletový kyslík, peroxid vodíku ku, hydroxylový radikál, chlornan. Tyto reaktivní oxidační meziprodukty jsou zodpovědn dné za ničen ení patogenů uvnitř fagocytů po jejich ingesci

METABOLICKÉ VZPLANUTÍ muž 51let, obézn zní-150kg, 185cm recidivující infekce HCD, hraniční IgM imunoprofylaxe, Avamys u nás n s od r.1995 burstest v r. březen b 2012

cympo ZK PACIENT

granulocyty granulocyty granulocyty ZK PACIENT

eo - pacient leuko - ZK leuko - pacient

METABOLICKÉ VZPLANUTÍ Příčinou snížen eného respiračního vzplanutí může e být i nepřítomnost enzymu myeloperoxidázy (MPO) Monocyty ve srovnání s neutrofily obsahují jen velmi malé množstv ství tohoto enzymu. Eosinofily disponují příbuzensky poměrn rně blízkou peroxidázou zou,, která se vyznačuje ve srovnání s neutrofilní myeloperoxidázou 69.8 % homologií v sekvenční úrovni aminokyselin. V eozinofilech eozinofilní MPO, tvoří normáln lní DHR signál

Aktivace NK buněk vyšet etření vlivu buněč ěčné složky imunity na neplodnost u žen a mužů - součást stí imunologické reaktivity je také buněč ěčná imunita, představovp edstavována NK buňkami test doplňuje komplexnejší vyšet etření buněč ěčné imunity vůčv ůči antigenům m spermií a trofoblastu metodou inhibice migrace detekce buňkami zprostředkovan edkované imunologické reaktivity, která je namířena proti spermiím či i buňkám m trofoblastu ženy s diagnózou opakovaného potrácen cení po neúsp spěšných IVF zákrocz krocíchch jiný neobjasněný ný důvod d neplodnosti U těchto t žen - vyšší podíl l aktivovaných NK buněk k in vivo i po kultivaci s antigeny spermií či i trofoblastu V případě mužů může e zvýšen ená aktivace NK buněk k po kultivaci s antigeny spermií vypovídat o zvýšen ené cytotoxické reaktivitě vůči spermiáln lním antigenům

Žena trofoblast spermie NK ko NKT NEGATIVNÍ

Žena trofoblast spermie ko NK NKT POZITIVNÍ na antigeny spermií i trofoblastu

trofoblast spermie ko NK NKT Pacientka 35let, kdysi vrcholově gymnastika, nyní posilovna, anabolika neguje, zřejmě kouří marihuanu

BAZOTEST detekce bazofilů z plné krve pomocí průtokov tokové cytometrie využívá značen ení CD203c a aktivačního znaku CD63 lidské bazofily aktivované in vitro prostřednictv ednictvím m jejich vysokoafinitního receptoru pro IgE,, nově exprimují znak CD63 také na své membráně tato exprese velmi dobře e koreluje s jejich degranulací neg.ko poz.ko

BAZOTEST Muž 34let Obtížně léčitelné astma, polyvalentní alergie Recidivující infekce HCD neg.ko poz.ko

Promytá periferní krev pacienta + nativní sérum zdravé kontroly Promytá periferní krev pacienta + inaktivované sérum zdravé kontroly periferní krev zdravého dárce + nativní sérum pacienta periferní krev zdravého dárce + inaktivované sérum pacienta

BAZOTEST Z důvodu d vyšší odpovědi di v negativní kontrole hůřh ůře hodnotitelné U pacienta byl dále d proveden bazotest s autologním sérem vzhledem k podezřen ení na autoprotilátky tky proti IgE nebo receptoru IgE na bazofilech Při i testování vlivu pacientova séra s na kontrolní bazofily zdravého jedince nebyla prokázána jeho schopnost aktivovat bazofily Navíc c bylo zjištěno, že bazofily pacienta jsou aktivovány v bazotestu i po promytí Výskyt autoprotilátek tek proto nebyl ani prokázán, ale ani vyloučen Mohlo by se jednat o autoprotilátky tky vázané na povrch pacientových bazofilů???

Děkuji za pozornost Setkáváte se ve Vaší laboratoři s podobnými záhadami???