AUXACOLOR 2 56513 20 testů KOLORIMETRICKÝ TEST ASIMILACE CUKRŮ K IDENTIFIKACI HLANÍCH LÉKAŘSKY ÝZNAMNÝCH KASINEK. 1
1 KLINICKÝ ÝZNAM průběhu posledních dvaceti let se výrazně zvýšila incidence mykotických infekcí, zejména infekcí způsobených kvasinkami, a podstatně se změnil i profil jejich výskytu v souvislosti s rostoucím výskytem oportunních infekcí. Detekce kvasinek v patologických vzorcích odebraných z povrchových i hlubokých tkání organismu má zásadní význam, vzhledem k variabilitě míst postižených infekcí a různorodosti druhů. Navíc vzhledem k opakovanému výskytu těchto infekcí a širšímu použití antimykotických léků se objevují rezistentní patogenní kmeny, proto je v současnosti nezbytné přesně identifikovat druh kvasinek, zodpovědný za infekci. AUXACOLOR 2 splňuje tento účel, jelikož umožňuje identifikovat druhy, které se nejčastěji vyskytují v klinické praxi. Test je snadno použitelný a interpretovatelný a může být snadno zaveden do všech laboratoří. 2 PRINCIP Test AUXACOLOR 2 je identifikační systém založený na principu asimilace cukrů. Růst kvasinek je vizualizován barevnou změnou ph indikátoru. Souprava dále obsahuje 3 enzymatické testy, včetně testu k detekci fenoloxidázové aktivity Cryptococcus neoformans. 3 DRUHY TESTŮ K POUŽITÍ Souprava obsahuje: negativní kontrolu usnadňující interpretaci výsledků asimilace cukrů (modrá jamka). 13 výsledků asimilace cukrů, které odpovídají následujícím cukrům: glukóza (GLU.) : pozitivní kontrola maltóza (MAL.) celobióza (CEL.) sacharóza (SAC.) trehalóza (TRE.) galaktóza (GAL.) adonitol (ADO.) laktóza (LAC.) melezitóza (MEL.) rafinóza (RAF.) xylóza (XYL.) inositol (INO.) arabinóza (ARA.) 2
Každý cukr je dehydrován v přítomnosti základního roztoku a ph indikátoru bromkresolové červeně. Růst kvasinek je indikován změnou barvy indikátoru z modré na žlutou a zákalem v jamce. Enzymatický test k detekci Nacetylgalaktosaminidázové aktivity (hexosaminidáza: HEX.). Pozitivní reakce se projevuje žlutým zbarvením jamky, zatímco u negativního testu zůstává obsah jamky bezbarvý. Fenoloxidázový test (POX) k detekci aktivity fenoloxidázy Cryptococcus neoformans spojený s testem k detekci prolinarylamidázové aktivity (PRO): hnědé zbarvení jamky indikuje positivní výsledek fenoloxidázové (POX) aktivity žluté zbarvení indikuje pozitivní výsledek prolinarylamidázové (PRO) aktivity absence zbarvení nebo šedé zbarvení indikuje negativní reakci pro oba testy. Koexistence POX a PRO testů v té samé jamce může být odůvodněna tím, že tyto dva testy nejsou nikdy zároveň oba pozitivní. Jediné možné profily jsou POX negativní/pro negativní, POX pozitivní/pro negativní, POX negativní/pro pozitivní, přičemž kolorimetrická interpretace je popsána výše. SCHÉMA USPOŘÁDÁNÍ MIKROTITRAČNÍ DESTIČKY AUXACOLOR 2 3
4 SLOŽENÍ SOUPRAY Krabice s 20 testy, kód 56513, obsahující: 20 x R1 jednotlivě balené 16jamkové mikrotitrační destičky 20 přilnavých fólií 20 x R2 suspenzní médium hotové k použití 1 složku s výsledkovými archy 1 příbalový leták 5 UPOZORNĚNÍ A BEZPEČNOSTNÍ PŘEDPISY Nepoužívejte soupravu po datu exspirace. Zacházejte se všemi vzorky jako s potenciálně infekčním materiálem a při kultivaci dodržujte aseptické laboratorní techniky. Kontaminovaný materiál odkládejte do nádoby přizpůsobené pro likvidaci laboratorního odpadu. 6 UCHOÁÁNÍ REAGENCIÍ Reagencie musí být uchovávány při teplotě 2 až 8 C ve vlastních obalech. Za těchto podmínek jsou reagencie stabilní až do data exspirace uvedeného na obalu. Po otevření obalu mikrotitrační destičky je možné destičku uchovávat při laboratorní teplotě po dobu 10 hodin, aniž by došlo ke změně účinnosti testu. 7 PRACONÍ POSTUP Dodávaný materiál iz složení soupravy. Nezbytný materiál, který není součástí dodávky Opacity control kit, kód 56499. Bakteriologická klička. Pipety pro měření a dávkování 100 µl. Nádoba na dezinfekční roztok nebo autoklávovatelná nádoba pro likvidaci kontaminovaného materiálu. Případně denzitometr. 4
Kroky pracovního postupu Před použitím nechte reagencie ustálit na laboratorní teplotu. 1. Inokulace mikrotitrační destičky Připravte si inokulum z kultury pěstované 24 až 48 h na Sabouraudově médiu (/ antibiotika) nebo v chromogenním médiu (CandiSelect 4, kód 63746). Za sterilních podmínek vyočkujte do suspensního média (R2) dostatečné množství (1 až 5 identických kolonií) čistých kolonií daného kmene (bez baktérií a jiných kvasinek) tak, abyste získali zákal ekvivalentní zákalové kontrole dodávané pod kódovým označením soupravy 56499 (zákal odpovídající zákalovému standardu 1,5 McFarlanda). Důsledné dodržení zákalu inokula je nezbytné pro získání kvalitních výsledků. Homogenizujte suspenzi na třepačce. Pomocí pipety odeberte a rozplňte 100 µl inokula do každé jamky mikrotitrační destičky (R1). Přelepte mikrotitrační destičku (R1) přilnavou fólií, přitom dbejte na co nejvíc stejnoměrném přilnutí fólie k destičce. Inkubujte 48 hodin (v případě nutnosti 72 hod.) při 30 C (± 2 C). 2. yhodnocení výsledků Definitivní vyhodnocení by se mělo provést po 48 hodinách. Ačkoliv předběžné vyhodnocení po 24 hodinách může přinést správné skóre a identifikaci jistých kvasinek, doporučujeme, aby se definitivní vyhodnocení provedlo až po 48 hodinách. 5
Pokud existuje podezření na kryptokokovou infekci, mělo by se definitivní vyhodnocení provést až po 72 hodinách vzhledem k pomalému růstu těchto mikroorganismů. yhodnocení lze usnadnit kontrolou spodní strany mikrotitrační destičky či sejmutím adhezívní fólie, přitom je však nutné dodržovat obvyklá pravidla sterility pro případ, že bude nutné v inkubaci pokračovat. takovém případě opatrně vyměňte adhezívní fólii, vyhodnoťte výsledky podle tabulky na straně 9 a zaznamenejte je do příslušného výsledkového archu. 3. Interpretace výsledků a) Jak interpretovat barevné reakce Jamka Test Barva/Interepretace Negativní kontrola Neg. k. Negativní kontrola Modrá Negativní Pozitivní Testy asimilace cukrů Enzymové testy GLU MAL SAC GAL LAC RAF INO CEL TRE ADO MEL XYL ARA HEX POX/PRO Glukóza (pozitivní kontrola) Maltóza Sacharóza Galaktóza Laktóza Rafinóza Inositol Celobióza Trehalóza Adonitol Melezitóza Xylóza Arabinóza Detekce aktivity Nacetylgalaktósaminidázy (hexosaminidáza) Detekce aktivity fenoloxidázy Cryptococcus neoformans (POX) Detekce activity prolinarylamidázy (PRO) Modrá (a) nebo zelená Bezbarvá Bezbarvá nebo šedá (c) Žlutá (b) nebo bezbarvá Žlutá Hnědá Žlutá (b) 6
(a) Modrošedá a modrozelená jsou považovány za negativní (b) Světle žlutá a žlutozelená jsou považovány za pozitivní (c) Některé kmeny Geotrichum capitatum, Geotrichum candidum, Trichosporon spp a Cryptococcus laurentii mohou způsobit šedohnědé zbarvení jamky. tomto případě je reakce negativní a této jamce se musí při vyhodnocení přiřadit hodnota nula. b) Metoda vyhodnocení K identifikaci se používá 16 biochemických charakteristik rozdělených do 15 jamek (testy POX. a PRO. jsou kombinovány ve stejné jamce). Pětimístný numerický profil se získá kombinací hodnot získaných z 15 testů do následujících trojmístných skupin: 1. číslice Glukóza Maltóza Sacharóza 2. číslice Galaktóza Laktóza Rafinóza 3. číslice Inositol Celobióza Trehalóza 4. číslice Adonitol Melezitóza Xylóza 5. číslice Arabinóza Hexosaminidáza Fenoloxidáza Každé negativní reakci se přiřazuje skóre nula a každé pozitivní reakci se přiřazuje skóre podle pozice v dané trojici takto: 1 bod pro pozici 1 2 body pro pozici 2 4 body pro pozici 3 v dané trojici Seskupením tří bodových hodnocení se získá číslo, které odpovídá pětičíselném numerickém profilu: Např. : Glukóza Maltóza Sacharóza 1 2 4 = první číslice je 7 Prolinarylamidázová aktivita (jamka PRO: POX./PRO.) se hodnotí jako nebo jako podle pozorovaného zbarvení. žlutá jamka (světle žluté a žlutozelené zbarvení je považované za pozitivní): pozitivní test PRO. bezbarvá nebo šedá jamka (šedohnědé zbarvení je považované za negativní): negativní test PRO. 7
Aby hodnocení bylo kompletní, je nutno vypočíst další dvě dodatečné číslice pomocí výše zmíněné metody. Ty představují následné charakteristiky: Pigmentace (PI.) Artrospóry (AR.) Pouzdro (CA.) Mycelium/pseudomycelium (MY. PSMY.) Chlamydospóry (CHL.) Růst při 37 C Konečná identifikace je založena na kombinaci biochemických testů a doplňujících kritérií (morfologických a metabolických) za obvyklých podmínek. Příklady: KMEN GLU. MAL. SAC. GAL. LAC. RAF. INO. CEL. TRE. ADO. MEL. XYL. ARA. HEX. POX./ PRO. PI. AR. CA. MY./PSMY. CHL. 37 C KMEN Č. 1 KMEN Č. 2 KMEN Č. 3 ýpočet odpovídajících numerických profilů a identifikace: Numerický profil Kmen Biochemické Další Identifikace Test PRO testy charakteristika Kmen č. 1 71442 07 C. albicans Kmen č. 2 10400 04 C. glabrata Kmen č. 3 75134 44 C. neoformans Poté, co byl stanoven numerický profil, je vyhledán v seznamu na straně 15 (originální příbalový leták). Pokud není získaný numerický profil uveden v seznamu (vzácný profil), použijte interpretační tabulku (strana 9). 8
9 37 C () () CHL. () () MY. PSMY. () () () CA. AR. PI. () () () () () () POX. /PRO. () () HEX. () () () () () () ARA. () () XYL. () () () () () () () MEL. () () () () () ADO. () () () () () () TRE. () () () () () () () CEL. () () () INO. () RAF. () () () LAC. () () () GAL. () () () () () () () SAC. () () MAL. () GLU. INTERPRETAČNÍ TABULKA DRUHY C. ALBICANS 1 C. ALBICANS 2 (1) C. CIFERRII C. DUBLINIENSIS C. FAMATA C. GLABRATA C. GUILLIERMONDII C. INCONSPICUA C. KEFYR C. KRUSEI C. LIPOLYTICA C. LUSITANIAE C. NOREGENSIS C. PARAPSILOSIS C. RUGOSA C. SAKE C. TROPICALIS C. ZEYLANOIDES C. ALBIDUS C. LAURENTII C. NEOFORMANS C. UNIGUTTULATUS G. CANDIDUM G. CAPITATUM K. APICULATA R. GLUTINIS R. MUCILAGINOSA (RUBRA) S. CEREISIAE T. ASAHII T. INKIN T. MUCOIDES T. SPP P. WICKERHAMII (2)
POPISEK (1) C. albicans 2: odpovídá kmenům dříve klasifikovaným pod druhem C. stellatoidea, nachází se vzácně. (2) P. wickerhamii: jedná se o patogenní jednobuněčnou řasu, která roste snadno na médiích pro izolaci kvasinek a má stejný makroskopický vzhled jako kvasinky. Mikroskopické vyšetření odhalí kulaté buňky rozdělené vnitřními přepážkami. : Test pozitivní minimálně pro 99 % kmenů : Test negativní minimálně pro 99 % kmenů : ariabilní test () : Test pozitivní minimálně pro 95 % kmenů nebo test s opožděnou expresí (48 hod. nebo 72 hod.) () : Test negativní minimálně pro 95 % kmenů PI. : Pigmentace AR. : Artrospory CA. : Pouzdro MY. : Mycelium (P.C.B. médium) PSMY. : Pseudomycelium (P.C.B. médium) CHL. : Chlamydospory 37 C : Růst při 37 C 10
c) Poznámky 1 Identifikace kvasinek je založena jak na jejich biochemických charakteristikách určených na mikrotitrační destičce AUXACOLOR 2, tak na jejich morfologických charakteristikách, které se přednostně stanovují na médiu PCB, nebo případně na médiu RAT. Je nutné získat všechny tyto údaje. Pro identifikaci je nutno zároveň vzít v úvahu původ vzorků, klinické souvislosti, a případně i výsledky doplňujících testů. 2 Při interpretaci výsledků je nutno brát v potaz původ vzorků a klinický kontext. 3 Druhy Rhodotorula glutinis a Rhodotorula mucilaginosa jsou sice uvedeny v interpretační tabulce, avšak jejich numerické profily nejsou specifikovány, protože mnohé jejich znaky jsou variabilní. Tyto 2 druhy jsou charakterizovány lososově růžovou pigmentací kolonií, která se často objevuje po 48 hodinách kultivace. 4 Kvasinky rodu Cryptococcus tvoří pouzdro, které může být výrazně nespojité. 5 Morfologie kvasinek Kloeckera apiculata je charakteristická, která umožňuje jejich rozlišení od druhů se stejnými numerickými profily: velmi malé kvasinky protáhlého tvaru s bipolárními pupeny ( podobné citrónu). 6 Pro potvrzení identifikace některých druhů kvasinek nebo pro rozlišení druhů se stejnými numerickými profily může být vhodné provedení doplňujících testů: test asimilace dusičnanu draselného je možné použít k odlišení kvasinek jako jsou Cryptococcus albidus (pozitivní test) a Cryptococcus laurentii (negativní test) nebo Rhodotorula mucilaginosa (negativní test) a Rhodotorula glutinis (pozitivní test). stanovení ureázy na ureaindolovém médium slouží k potvrzení identifikace rodu Cryptococcus. Tento test je pozitivní do 4 hodin u Cryptococcus neoformans a do 24 hodin u ostatních druhů. redukce tetrazolia odlišuje Candida tropicalis (pozitivní reakce) od Candida lusitaniae (negativní reakce). 11
8 ÚČINNOST TESTU Souprava AUXACOLOR 2 umožňuje identifikovat 31 druhů kvasinek a jeden druh jednobuněčných řas Prototheca wickerhamii. porovnání se soupravou AUXACOLOR umožňuje tato souprava identifikovat 7 nových druhů kvasinek: Candida ciferrii, Candida dubliniensis, Candida sake, Kloeckera apiculata, Trichosporon asahii, Trichosporon inkin a Trichosporon mucoides. Prospektivní klinická studie a v retrospektivní studie 120 kmenů, které tvořily reprezentativní vzorek druhů identifikovaných soupravou AUXACOLOR 2, ukázaly že: 92,5 % testovaných kmenů bylo identifikováno do 48 hod. (59,2 % do 24 h), a to vzhledem k použití nových testů v soupravě (hexosaminidázový test a prolinarylamidázový test), rovněž však díky komplementaci seznamu numerických profilů pro druhy uvedené v návodu k použití. Souprava AUXACOLOR 2 je schopna rozlišit všechny kmeny Candida dubliniensis (5 testovaných kmenů) a Candida albicans (15 kmenů). Kombinace prolinarylamidázového testu a fenoloxidázového testu je dalším testem na mikrotitrační destičce, který je vhodný k identifikaci kmenů Candida glabrata (9 kmenů, které jsou odlišeny od Candida zeylanoides) nebo k odlišení Candida krusei (6 kmenů) a Candida lipolytica (4 kmeny). POX test umožnil detekci fenoloxidázové aktivity Cryptococcus neoformans u 4 testovaných kmenů. 9 OMEZENÍ TESTU 1 Souprava AUXACOLOR 2 umožňuje identifikovat pouze druhy kvasinek uvedené v interpretační tabulce. 2 U uvedených druhů uvádí databáze pouze nejčastější numerické profily. Numerický profil, který není uveden v seznamu, může odpovídat vzácnému profilu uvedeného druhu nebo profilu druhu, který není uveden. Doplňující údaje k informacím v databázi jsou uvedeny v interpretační tabulce. 12
3 Některé vzácné druhy, které nejsou uvedeny v návodu k použití, mohou mít ve výjimečných případech stejný numerický profil jako druh uvedený v tabulce. 4 Mikrotitrační destička AUXACOLOR 2 musí být použita pouze s čistými kmeny. Kombinace kvasinek jsou detekovány u 16 % vzorků. izualizace kombinací kvasinek je umožněna paralelně kultivací na CandiSelect 4 nebo médiu PCB a testem AUXACOLOR 2. 5 některých případech může použité izolační médium ovlivnit barevnou změnu určitých testů za 24 hod. (xylóza, hexosaminidáza), avšak neinterferuje s identifikací kvasinek po 48 hodinách. 6 Fenoloxidázový / prolinarylamidázový test: některé výjimečné kmeny Cryptococcus neoformans nemusí projevovat fenoloxidázový znak. některé kmeny Geotrichum capitatum, Geotrichum candidum, Trichosporon spp a Cryptococcus laurentii mohou indukovat kaštanově šedé zbarvení jamky. tomto případě je reakce negativní a při vyhodnocení musí být této jamce přiřazena hodnota nula. některé kmeny Prototheca wickerhamii mohou vyjadřovat charakteristiku prolin arylamidázy 7 Neměl by být brán zřetel na případy změny pozitivního výsledku na výsledek negativní, tj. změnu barvy původně interpretovanou jako pozitivní na negativní. Např. jamka, která je žlutá po 24 nebo 48 hodinách a pak zezelená nebo zmodrá po 48 nebo 72 hodinách, je považována za pozitivní. 8 Na druhou stranu jakákoliv změna z negativního výsledku na výsledek pozitivní během prvních 72 hodin musí být brána v potaz: jamka by měla byt považována za pozitivní. Např. jamka, která je modrošedá a modrozelená po 24 nebo 48 hodinách a pak zežloutne po 48 nebo 72 hodinách, je považována za pozitivní 10 KONTROLA KALITY Mikrotitrační destičky AUXACOLOR 2 (R1) jsou podrobeny kontrole kvality pomocí panelu čistých kmenů s dobře definovanými biochemickými charakteristikami. 13
Aktivitu soupravy je možné rovněž zkontrolovat v laboratoři pomocí následujících referenčních kmenů: KMENY C. NEOFORMANS ATCC 32045 T. MUCOIDES BCCM/IHEM 14146 C. LIPOLYTICA IP 817.63 NEG. GLU. MAL. SAC. GAL. LAC. RAF. INO. CEL. TRE. ADO. MEL. XYL. ARA. HEX. POX/PRO Znaky pozorované po 48 hod. inkubace u kmenů kultivovaných na Sabouraudově agaru. ATCC: American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, USA. BCCM / IHEM: Belgian Coordinated Collections of Microorganisms / IHEM Culture Collection, Scientific Institute of Public Health Louis Pasteur, Mycology Section, Rue J. Wytsmanstraat 14, B1050 Brussels IP: Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris cedex 15, France 11 KONTROLA KALITY ÝROBCE šechny vyrobené reagencie jsou připraveny v souladu s naším systémem kvality, od převzetí surovin až po výslednou komercializaci výrobku. Každá skupina výrobků je podrobena hodnocení kontroly kvality a je uvedena na trh, pouze pokud splňuje předem specifikovaná akceptační kritéria. Záznamy týkající se produkce a kontroly každé skupiny výrobků jsou uchovány v BioRadu. 12 LITERATURA iz francouzská verze. 14
BioRad 3, boulevard Raymond Poincaré 92430 MarneslaCoquette France Tel. : 33 (0) 1 47 95 60 00 Fax : 33 (0) 1 47 41 91 33 10/2005 code: 880050 15
Code 10000 () 05 Candida krusei 10000 25 Geotrichum capitatum 10000 () 01 Candida zeylanoides 10000 () 05 Candida lipolytica 10000 05 Candida norvegensis 10000 v 04 Candida inconspicua 10010 () 01 Candida zeylanoides 10010 () 05 Candida lipolytica 10040 () 21 Geotrichum candidum 10200 00 Kloeckera apiculata 10200 05 Candida norvegensis 10200 () 05 Candida lipolytica 10240 05 Candida norvegensis 10400 04 Candida glabrata 10400 () 01 Candida zeylanoides 10402 () 01 Candida zeylanoides 10410 () 01 Candida zeylanoides 10600 () 01 Candida zeylanoides 10610 () 01 Candida zeylanoides 11000 25 Geotrichum capitatum 11000 () 05 Candida lipolytica 11000 v 05 Candida rugosa 11001 v 05 Candida rugosa 11010 () 05 Candida lipolytica 11010 v 05 Candida rugosa 11040 v 05 Candida rugosa 11040 () 21 Geotrichum candidum 11041 v 05 Candida rugosa 11050 v 05 Candida rugosa 11050 () 21 Geotrichum candidum 11400 04 Prototheca wickerhamii 11400 () 01 Candida zeylanoides 11410 () 01 Candida zeylanoides 11600 () 01 Candida zeylanoides 11610 () 01 Candida zeylanoides 12400 04 Candida glabrata 13400 04 Prototheca wickerhamii 31002 07 Candida albicans 2 31042 07 Candida albicans 2 Code 31052 07 Candida albicans 2 31402 07 Candida albicans 2 31442 07 Candida albicans 2 31452 07 Candida albicans 2 31472 07 Candida albicans 2 33242 25 Trichosporon asahii 33243 25 Trichosporon asahii 33262 25 Trichosporon asahii 33263 25 Trichosporon asahii 33342 25 Trichosporon asahii 33343 25 Trichosporon asahii 33362 25 Trichosporon asahii 33363 25 Trichosporon asahii 33642 25 Trichosporon asahii 33643 25 Trichosporon asahii 33662 25 Trichosporon asahii 33663 25 Trichosporon asahii 33742 25 Trichosporon asahii 33743 25 Trichosporon asahii 33762 25 Trichosporon asahii 55000 05 Candida kefyr 55001 05 Candida kefyr 55040 05 Candida kefyr 55041 05 Candida kefyr 57000 05 Candida kefyr 57001 05 Candida kefyr 57010 05 Candida kefyr 57011 05 Candida kefyr 57040 05 Candida kefyr 57041 05 Candida kefyr 57050 05 Candida kefyr 57051 05 Candida kefyr 57200 05 Candida kefyr 57201 05 Candida kefyr 57240 05 Candida kefyr 57241 05 Candida kefyr 57400 05 Candida kefyr 57401 05 Candida kefyr 57440 05 Candida kefyr 57441 05 Candida kefyr 15
Code 57600 05 Candida kefyr 57601 05 Candida kefyr 57640 05 Candida kefyr 57641 05 Candida kefyr 70160 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70161 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70170 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70171 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70400 04 Saccharomyces cerevisiae 70462 v 01 Candida sake 70560 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70561 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70570 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70571 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 70620 v 05 Candida lusitaniae 70660 v 40 Cryptococcus albidus 70661 v 40 Cryptococcus albidus 70662 v 01 Candida sake 70670 v 05 Candida lusitaniae 70760 v 40 Cryptococcus albidus 70761 v 40 Cryptococcus albidus 71002 07 Candida dubliniensis 71010 07 Candida dubliniensis 71012 07 Candida dubliniensis 71021 v 05 Candida parapsilosis 71031 v 05 Candida parapsilosis 71042 07 Candida albicans1 71052 07 Candida albicans 1 71061 v 05 Candida parapsilosis 71071 v 05 Candida parapsilosis 71124 44 Cryptococcus neoformans 71125 44 Cryptococcus neoformans 71134 44 Cryptococcus neoformans 71135 44 Cryptococcus neoformans 71164 44 Cryptococcus neoformans 71165 44 Cryptococcus neoformans 71174 44 Cryptococcus neoformans 71175 44 Cryptococcus neoformans 71324 44 Cryptococcus neoformans Code 71325 44 Cryptococcus neoformans 71334 44 Cryptococcus neoformans 71335 44 Cryptococcus neoformans 71400 04 Saccharomyces cerevisiae 71402 07 Candida dubliniensis 71410 07 Candida dubliniensis 71411 v 05 Candida parapsilosis 71412 07 Candida dubliniensis 71420 04 Saccharomyces cerevisiae 71421 v 05 Candida parapsilosis 71422 v 01 Candida sake 71430 07 Candida dubliniensis 71431 v 05 Candida parapsilosis 71432 v 01 Candida sake 71432 07 Candida dubliniensis 71440 07 Candida albicans 1 71441 07 Candida albicans 1 71442 07 Candida albicans 1 71443 07 Candida albicans 1 71450 07 Candida albicans 1 71451 07 Candida albicans 1 71451 v 05 Candida parapsilosis 71452 07 Candida albicans 1 71453 07 Candida albicans 1 71460 () 05 Candida tropicalis 71461 v 05 Candida parapsilosis 71462 v 01 Candida sake 71462 07 Candida albicans 1 71470 () 05 Candida tropicalis 71471 v 05 Candida parapsilosis 71472 v 01 Candida sake 71472 07 Candida albicans 1 71473 07 Candida albicans 1 71524 44 Cryptococcus neoformans 71525 44 Cryptococcus neoformans 71534 44 Cryptococcus neoformans 71535 44 Cryptococcus neoformans 71553 05 Candida ciferrii 71560 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 71561 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 71564 44 Cryptococcus neoformans 16
Code 71565 44 Cryptococcus neoformans 71570 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 71571 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 71574 44 Cryptococcus neoformans 71575 44 Cryptococcus neoformans 71620 v 05 Candida lusitaniae 71620 v 40 Cryptococcus albidus 71630 v 05 Candida lusitaniae 71660 () 05 Candida tropicalis 71660 v 05 Candida lusitaniae 71661 v 05 Candida lusitaniae 71662 v 01 Candida sake 71670 () 05 Candida tropicalis 71670 v 05 Candida lusitaniae 71670 v 40 Cryptococcus albidus 71671 05 Candida guilliermondii 71671 v 05 Candida lusitaniae 71672 v 01 Candida sake 71724 44 Cryptococcus neoformans 71725 44 Cryptococcus neoformans 71734 44 Cryptococcus neoformans 71735 44 Cryptococcus neoformans 71764 44 Cryptococcus neoformans 71765 44 Cryptococcus neoformans 71774 44 Cryptococcus neoformans 71775 44 Cryptococcus neoformans 72762 25 Trichosporon inkin 72763 25 Trichosporon inkin 73242 25 Trichosporon asahii 73243 25 Trichosporon asahii 73262 25 Trichosporon asahii 73263 25 Trichosporon asahii 73342 25 Trichosporon asahii 73343 25 Trichosporon asahii 73362 25 Trichosporon asahii 73363 25 Trichosporon asahii 73641 () 21 Trichosporon spp 73642 () 25 Trichosporon spp 73643 25 Trichosporon asahii 73651 () 21 Trichosporon spp Code 73653 () 21 Trichosporon spp 73661 () 21 Trichosporon spp 73662 () 25 Trichosporon spp 73663 25 Trichosporon asahii 73670 v 05 Candida lusitaniae 73671 () 21 Trichosporon spp 73673 () 21 Trichosporon spp 73741 () 21 Trichosporon spp 73742 25 Trichosporon asahii 73743 25 Trichosporon asahii 73751 () 21 Trichosporon spp 73753 () 21 Trichosporon spp 73761 () 21 Trichosporon spp 73762 () 25 Trichosporon spp 73763 () 25 Trichosporon spp 73771 () 21 Trichosporon spp 73773 () 21 Trichosporon spp 74000 04 Saccharomyces cerevisiae 74020 04 Saccharomyces cerevisiae 74361 v 40 Cryptococcus albidus 74371 v 40 Cryptococcus albidus 74400 04 Saccharomyces cerevisiae 74420 04 Saccharomyces cerevisiae 74560 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 74561 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 74570 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 74571 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 74660 v 40 Cryptococcus albidus 74661 v 40 Cryptococcus albidus 74760 v 40 Cryptococcus albidus 74761 v 40 Cryptococcus albidus 74771 v 40 Cryptococcus albidus 75000 04 Saccharomyces cerevisiae 75020 04 Saccharomyces cerevisiae 75124 44 Cryptococcus neoformans 75125 44 Cryptococcus neoformans 75134 44 Cryptococcus neoformans 75135 44 Cryptococcus neoformans 75164 44 Cryptococcus neoformans 75165 44 Cryptococcus neoformans 17
Code 75174 44 Cryptococcus neoformans 75175 44 Cryptococcus neoformans 75324 44 Cryptococcus neoformans 75325 44 Cryptococcus neoformans 75334 44 Cryptococcus neoformans 75335 44 Cryptococcus neoformans 75361 v 40 Cryptococcus albidus 75371 v 40 Cryptococcus albidus 75400 04 Saccharomyces cerevisiae 75420 04 Saccharomyces cerevisiae 75524 44 Cryptococcus neoformans 75525 44 Cryptococcus neoformans 75534 44 Cryptococcus neoformans 75535 44 Cryptococcus neoformans 75551 05 Candida ciferrii 75553 05 Candida ciferrii 75560 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 75561 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 75564 44 Cryptococcus neoformans 75565 44 Cryptococcus neoformans 75570 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 75571 v 40 Cryptococcus uniguttulatus 75574 44 Cryptococcus neoformans 75575 44 Cryptococcus neoformans 75630 v 00 Candida famata 75631 05 Candida guilliermondii 75631 v 00 Candida famata 75651 v 00 Candida famata 75670 v 00 Candida famata 75671 05 Candida guilliermondii 75671 v 00 Candida famata 75724 44 Cryptococcus neoformans 75725 44 Cryptococcus neoformans 75734 44 Cryptococcus neoformans 75735 44 Cryptococcus neoformans 75751 05 Candida ciferrii 75753 05 Candida ciferrii 75761 v 40 Cryptococcus albidus 75764 44 Cryptococcus neoformans 75765 44 Cryptococcus neoformans 75771 v 40 Cryptococcus albidus Code 75774 44 Cryptococcus neoformans 75775 44 Cryptococcus neoformans 76361 v 40 Cryptococcus albidus 76371 v 40 Cryptococcus albidus 76761 v 40 Cryptococcus albidus 76771 v 40 Cryptococcus albidus 77361 v 40 Cryptococcus albidus 77371 v 40 Cryptococcus albidus 77610 v 00 Candida famata 77611 v 00 Candida famata 77630 v 00 Candida famata 77631 v 00 Candida famata 77641 () 21 Trichosporon spp 77643 () 21 Trichosporon spp 77651 () 21 Trichosporon spp 77651 v 00 Candida famata 77653 () 21 Trichosporon spp 77661 () 21 Trichosporon spp 77663 () 21 Trichosporon spp 77670 v 00 Candida famata 77671 () 21 Trichosporon spp 77671 v 00 Candida famata 77673 () 21 Trichosporon spp 77741 () 21 Trichosporon spp 77742 () 21 Trichosporon spp 77743 () 21 Trichosporon spp 77751 () 21 Trichosporon spp 77753 () 21 Trichosporon spp 77761 () 21 Trichosporon spp 77761 v 40 Cryptococcus albidus 77763 25 Trichosporon mucoides 77771 25 Trichosporon mucoides 77771 40 Cryptococcus laurentii 77771 v 40 Cryptococcus albidus 77772 () 21 Trichosporon spp 77773 25 Trichosporon mucoides 18
12 BIBLIOGRAPHY 1. C.P. KURTZMAN, J.W. FELL The Yeasts. A taxonomic study, Fourth Revised and Enlarged Edition. Editions Elsevier 1998. 2. BH COOPER, M. SILAHUNTER Yeasts of medical importance. Manual of clinical microbiology. Fourth edition. 1985, p 526541. 3. H. KOENIG Guide de mycologie médicale. Editions Ellipses 1995, p 3196. 4. H. FRICKERHIDALGO, B. LEBEAU, P. KERROEDAN, O. FAURE, P. AMBROISETHOMAS, R. GRILLOT AUXACOLOR TM, a new commercial system for yeast identification: evaluation of 182 strains comparatively with ID 32C. Ann. Biol. Clin. (Paris). 1995; 53(4): 2215. 5. H. FRICKER, D. MONGET, B. LEBEAU, M. BABOLAT, P. AMBROISE THOMAS, R. GRILLOT Rapid identification of Candida albicans: evaluation of Rapidec albicans". Study of 444 yeast strains. Ann. Biol. Clin. (Paris). 1992; 50(2): 1036. 6. D. SULLIAN, D. COLEMAN Candida dubliniensis : characteristics and identification. J. Clin. Microbiol. 1998 ; 36(2) : 329334. 7. H.S.WANG, R.T. ZEIMIS, G.D. ROBERTS Evaluation of a caffeic acidferric citrate test for rapid identification of Cryptococcus neoformans. J. Clin. Microbiol. 1977; 6(5): 4459.
BioRad 3, boulevard Raymond Poincaré 92430 MarneslaCoquette France Tel. : 33 (0) 1 47 95 60 00 10/2005 Fax.: 33 (0) 1 47 41 91 33 code: 880050