Měřicí zařízení na testování přítomnosti nikotinu (kotininu) v moči COT - Návod k použití Zařízení pro rozlišení, zda testovaná osoba kouřila, či nikoliv.
Obsah ÚVOD...3 ÚČEL POUŽITÍ...3 PRINCIP MĚŘENÍ...4 ČINIDLA...4 BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ...4 SKLADOVÁNÍ A PŘECHOVÁVÁNÍ...4 OBSTARÁVÁNÍ A PŘÍPRAVA VZORKŮ...5 NÁSTROJE PRO TESTOVÁNÍ...5 POSTUP MĚŘENÍ...5 VYSVĚTLIVKY K VÝSLEDKŮM MĚŘENÍ...6 KONTROLA JAKOSTI...6 OMEZENÍ FUNKČNOSTI PŘÍSTROJE...6 TECHNICKÉ PARAMETRY...7 KŘÍŽOVÁ REAKTIVITA...8 2
Úvod Děkujeme vám za koupi tohoto výrobku. Pro plné a správné pochopení všech jeho funkcí a vlastností, si prosím před prvním použitím pečlivě přečtěte tento návod k použití. Účel použití Velmi rychlé, v jednom kroku provedené testování na přítomnost nikotinu (kotininu) v moči člověka. Zařízení COT - testování moči na nikotin v jednom kroku - je odnoží chromatografického imunologického testování pro detekci nikotinu v moči člověka přesahující hranici 200 ng/ml. Jelikož toto testovací zařízení dokáže detekovat i další složky přítomné v moči, používejte pro správné vyhodnocení testů tabulky uvedené v části Analýza výsledků testování, v další části tohoto Návodu k použití. Analýza provedená tímto zařízením poskytuje pouze předběžné analytické výsledky. Pro více specifické výsledky musí být použity sofistikovanější chemické metody, které poskytují certifikované výsledky. Mezi takové metody lze zařadit plynovou chromatografii a hmotnostní spektrometrii (GC/MS). Pro lékařské rozhodnutí a rozhodnutí soudu je možné používat přístroj v případě zneužití jakéhokoliv léku, obzvláště, pokud je třeba dopřed stanovit, zda jde o pozitivní výsledek. Shrnutí Kotinin je primární metabolit nikotinu. Je to toxický alkaloid, který u člověka způsobuje stimulaci autonomních uzlin a centrálního nervového systému. Nikotin je droga, které je vystaven každý člen společnosti, v níž se kouří a on inhaluje vzduch vydechovaný kuřáky. Vedle tabáku je nikotin stejně komerčně dostupný jako aktivní složka terapií na skončení s kouřením jako např. žvýkačky, kožní náplasti a nosní spreje. Během 24 hodin je do moči z přibližně 5 % dávky nikotinu vyloučeno 10 % jako kotinin a 35 % jako hydroxycotinin. Koncentrace ostatních metabolitů představuje podíl menší než 5 %. Přestože se do nedávné doby vědci domnívali, že kotinin je neaktivní metabolit, bylo zjištěno, že jeho eliminační vlastnosti jsou více stabilní nebo u nikotinu, který je více závislý na ph moči. V konečném výsledku je tedy kotinin lepším biologickým ukazatelem pro přítomnost nikotinu. Poločas rozpadu plazmy s nikotinem je přibližně 60 minut po inhalaci této látky, nebo jejím přímém přijetí (kouření). Nikotin i kotinin jsou velmi rychle vylučovány ledvinami, přesto je možné detekovat kotinin v moči na hranici 200 ng/ml až po 2-3 dnech po požití nikotinu. Měřicí zařízení COT je schopné velmi rychle provést test na vzorku moči bez nutnosti použít dalších nástrojů. Při testování je využíváno monoklonální antilátky pro výběrovou detekci zvýšených úrovní kotininu v moči. Měřicí zařízení COT udává jako pozitivní výsledek, pokud naměřená hodnota přesahuje 200 ng/ml. 3
Princip měření Měřicí zařízení COT využívá imunologický test založený na principu konkurenčních vazeb. Léky a narkotika, která mohou být ve vzorku moči přítomná, konkurují látkám, které jsou spojeny vaznými místy s protilátkami. V průběhu testu se vzorek moči pohybuje vzlínáním měřicím přístrojem. Kotinin, pokud je ve vzorku moči přítomný v objemu nižším než 200 ng/ml, neprosakuje vaznou stranou protilátek, kterými jsou pokryty jednotlivé části měřicího zařízení. Protilátky, přítomné na jednotlivých částech měřicího zařízení pak zachyceny nepohyblivým spojeným Kotininem a viditelné barevné linie ukazují oblast jeho výskytu v testovacím pásmu. Barevné linie se v testovacím pásmu neformují, pokud úroveň Kotininu přesahuje hranici 200 ng/ml, neboť při takové koncentraci jsou vsáknuty všechny vazebné strany kotininových protilátek. Vzorek s pozitivním testem na přítomnost narkotik nevytváří barevné linie, neboť jednotlivá narkotika mezi sebou soupeří, zatímco při negativním vzorku, nebo vzorku s přítomností narkotik pod úrovní 200 ng/ml jsou právě barevné linie v testovacím pásmu vytvářeny. Aby posloužily k procedurálnímu řízení, objevují se barevné linie v řídící části testovacího pásma, aby indikovaly, že měřicí zařízení obdrželo dostatečný objem vzorku a proběhlo nasáknutí vzorku membránou. Činidla Měřicí zařízení obsahuje myší monoklonální anti-kotininovou protilátku a spárované kotininové proteiny. V systému řízení testu je použito "kozí" protilátky. Bezpečnostní opatření Nepoužívejte po uplynutí doby použitelnosti. Měřicí zařízení musí zůstat v zapečetěném obalu do té doby, než je používáno. Všechny vzorky určené pro testování by měly být považovány za potenciálně nebezpečné a mělo by s nimi být nakládáno jako s infekčními látkami. Použité a vyřazené měřicí zařízení musí být řádně zlikvidováno podle místní vyhlášky. Skladování a přechovávání Skladujte zabalené v utěsněném obale buď v místnosti o teplotě 2-30 C. Měřicí zařízení je spolehlivě funkční pouze po dobu jeho použitelnosti, uvedené na jeho obale. Měřicí zařízení musí být uskladněno v utěsněném obalu, dokud není používáno. Nevystavujte je mrazu!!! Nepoužívejte zařízení po uplynutí jeho doby použitelnosti. 4
Obstarávání a příprava vzorků 1) Vzorek moči Vzorek moči musí být odebrán do čisté a suché nádoby. Lze použít vzorek moči odebraný v kteroukoliv denní dobu. Vzorky moči vykazující viditelné usazeniny by měly být odstředěny, přefiltrovány, nebo musí být vyčkáno, až se usadí, aby byl získán čirý vzorek pro testování. 2) Skladování vzorku Vzorek moči může být skladován v prostorách o teplotě 2-8 C do 48 hodin po jeho odebrání. Pro prodloužení doby uchování může být vzorek zmrazen, nebo uchován v prostorách o teplotě -20 C. Po rozmražený je nutné vzorek před použitím řádně promíchat. Nástroje pro testování 1) Dodané součásti: měřicí zařízení kapátko obsah balení. 2) Součásti vyžadované, ale nedodané: nádoba na odběr vzorků časovač. Postup měření Před samotným měřením nechte nějakou dobu měřicí zařízení i vzorek v pokojové teplotě (15-30 C). 1. Před otevřením utěsněného obalu měřicího zařízení jej přineste do místnosti s pokojovou teplotou. Vyndejte měřicí zařízení z obalu a použijte jej co nejdříve po jeho vyndání. 2. Měřicí zařízení umístěte na čistou rovnou plochu. Vertikálně uchopte kapátko a nakapejte 3 velké kapky moči (přibližně 10 ml) to žlábku pro vzorek (S) a zapněte časovač. Zamezte vniknutí vzduchových bublin do žlábku pro vzorek (S). Proveďte podle obrázku níže. 3. Vyčkejte, až se objeví viditelné barevné linie. Výsledek měření je čitelný cca po 5 minutách. Je důležité, aby bylo čisté pozadí, aby mohl být výsledek čitelný. Nevyhodnocujte výsledky testu po době delší než 10 minut. 5
Vysvětlivky k výsledkům měření (pro vyhodnocení použijte obrázku výše) NEGATIVNÍ: Jsou viditelné 2 linie. Jedna barevná linie by měla být viditelná v řídící oblasti testovacího pásma (C) a druhá zjevná linie by měla být viditelná v testovacím pásmu (T). Tento negativní výsledek měření signalizuje, že koncentrace Kotininu ve vzorku je pod detekovatelnou úrovní 200 ng/ml. Poznámka: Barevný stín v testovacím pásmu (T) se může měnit, avšak měření musí být prohlášeno za negativní vždy, když se objeví i pouze mdlá linie. POZITIVNÍ: Jediná barevná linie je viditelná v řídící oblasti testovacího pásma (C). Žádná další linie není viditelná v testovacím pásmu (T). Tento pozitivní výsledek měření signalizuje, že úroveň Kotininu ve vzorku přesáhla detekovatelnou úroveň 200 ng/ml. NEPLATNÉ: Nejsou viditelné žádné barevné linie. Nezpůsobilý vzorek, nebo nesprávně provedené postup měření jsou nejčastějšími příčinami nezobrazení žádné barevné linie. Opakujte proto znovu celý proces měření za použití nového testovacího zařízení. Pokud bude problém přetrvávat, zastavte používání a kontaktujte vašeho prodejce (viz poslední strana Návodu). Kontrola jakosti Procedurální kontrola řízení je součástí testu. Barevné linie objevující se v řídící oblasti testovacího pásma je považována za vnitřní procedurální kontrolu řízení. Slouží k potvrzení dostatečného objemu vzorku, dostačujícího pro nasáknutí membránou a správné provedení měřicích procesů. Omezení funkčnosti přístroje 1) COT měřicí zařízení poskytuje pouze kvalitativní předběžné analytické výsledky. Pro získání certifikovaných výsledků testování je nutné použít sekundární analytické metody, jako například plynovou chromatografickou spektrometrii (GC/MS). 2) Je možné, že se při měření objeví technické, nebo procedurální chyby, stejně tak mohou chybné výsledky způsobit jiné látky, které proniknou do vzoru moči. 6
3) Příměsi, jako například bělidla, nebo kamenec, ve vzorku moči mohou způsobit chybné výsledky měření, a to bez ohledu na použitou metodu měření. Pokud máte podezření na takovéto znehodnocení měření, opakujte měření s jiným vzorkem moči. 4) Pozitivní výsledek měření indikuje pouze, že přítomnost Kotininu je vyšší než hraniční úroveň koncentrace. Neindikuje ani v žádném případě neměří úroveň spotřeby. Technické parametry Přesnost Při porovnání výrobku s druhým konkurenčním bylo provedeno srovnání COT měřicího zařízení a komerčního produktu dostupného na trhu. Testování bylo provedeno na 300 klinických vzorcích odebraných od kuřáků i nekuřáků. Následující tabulka uvádí zjištěné výsledky srovnání: Metoda Další testované přístroje Celkové Výsledky Pozitivní Negativní výsledky COT měřicí Pozitivní 103 12 115 zařízení Negativní 0 185 185 Celkové výsledky 103 197 300 % shoda >99 % 94 % 96 % Analytická citlivost Vzorek moči neobsahující narkotika ani léky byl upraven pomocí Kotininu na následující koncentrace této látky: 0 ng/ml, 100 ng/ml, 150 ng/ml, 200 ng/ml, 250 ng/ml, 300 ng/ml a 400 ng/ml. Výsledky ukazují, na více než 99 % přesnost u 100 % vzorků koncentrací nad hraniční úrovní a 50 % vzorků pod hraniční úrovní. Zjištěné výsledky ukazuje následující tabulka: Koncentrace % hraniční Viditelné výsledky Počet Kotininu (ng/ml) úrovně Negativní Pozitivní 0 0 90 90 0 100-50 % 90 90 0 150-25 % 90 90 0 200 Hraniční úr. 90 63 27 250 +25 % 90 46 50 300 +50 % 90 16 74 400 +100 % 90 0 90 Analytické specifikace Následující tabulka uvádí seznam komponentů, které byly pozitivně detekovány v moči pomocí COT měřicího zařízení po 5 minutách: Komponent Koncentrace (ng/ml) (-) Kotinin 200 (-) Nikotin 6,250 7
Preciznost Studie preciznosti byla vedena dvěma zkušenými testery za použití 2 odlišných měřicích přístrojů pro demonstrování jejich schopností. Byla použita identická sada vzorků neobsahující Kotinin, obsahující 50 % hraniční úrovně Kotininu a vzorek obsahující 200 % úroveň hraniční hodnoty 200 ng/ml. Následující tabulka ukazuje výsledky testování: Koncentrace Kotininu (ng/ml) Přístroj A Přístroj B Počet/ přístroj Pozitivní Negativní Pozitivní Negativní 0 30 30 0 30 0 100 30 30 0 30 0 400 30 0 30 0 30 Vliv relativní hustoty moči Patnáct vzorků moči o běžné, vysoké a nízké relativní hustotě bylo upraveno přidáním 100 ng/ml a 400 ng/ml Kotininu. Měřicí přístroj COT byl testován dvojitě použitím patnácti čistých a upravených vzorků moči. Výsledky testování ukázaly, že proměnlivá relativní hustota moči nemá žádný vliv na výsledky měření úrovně Kotininu (nikotinu) ve vzorku moči. Vliv kyselosti (ph) moči Kyselost (ph) moči označené jako negativní byla nastavena v rozpětí od 5 do 9 ph jednotek a následně byla upravena přidáním Kotininu v množství 100 ng/ml a 400 ng/ml. Upravená moč s nastavenou kyselostí byla dvojitě testována COT měřicím přístrojem. Výsledky testování ukázaly, že proměnlivá kyselost moči nemá vliv na provádění testu. Křížová reaktivita Studie byla provedena pro určení křížové reaktivity měření a látek obsažených jak v negativním, tak i pozitivním vzorku moči. Následující látky představují složky, které nevykazují reaktivní činnost při testování pomocí COT měřicího zařízení při jejich koncentraci nižší než 100 mikrogr/ml. Nereaktivní složky: 4-Acetaminonfen Aceton Acetofenitidin Acetylosalicylová kyseliny Bělidlo Aminopyrin Amobarbital Amoxapine Amoxicillin I-Amfetamin Ampicillin Apomorfin Aspartam Atropin Benzilová kyselina Kyselina benzoová Benzoylecgonin Benzfetamin Bilirubin Brompheniramin Buspiron Kofein Canabidiol Cannabinol Chloralhydrát Chloramfenikol Chlordiazepoxid Chlorochinin (+)-Chlorfeniramin (+-)Chlorfeniramin 8
Chlorpromazin Chlorprothixen Cholesterol Cimetidine Clomipramin Klonidin Kokain Kodein Kortizon Kreatin Cyklobarbital Cyklobenzaprine Deoxykortikosteron (-) Deoxyefedrin R(-) Deprenyl Dextromethorphan Diazepam Diclofenac Digoxin 4-Dimethylaminoantipyrin Diphenhydramin 5,5 - Difenylhydamoin Disopyramid Doxylamin Ekgonin Ekgonin Metylester EDDP Efavirenz (Sustiva) EMDP Efedrin (1r,2s)-(-) Efedrin (-)-Efedrin (+/-) Adrenalin Erytromycin B-Estradiol Estron 3-sulfátový Ethanol Ethyl-p-aminobenzoát Etodolac Famprofazon Fenfluramin Fenoprofen Fentanyl Fluoxetin Furosemid Kyselina gentisová d (+) Glukoza Guajakol glyceryléter Hemoglobin Hydralazin Hydrochlorothiazid Hydrocodone Hydrokortizon Hydromorfon p-hydroxyamfetamin o-hydroxyhippuridová kyselina p-hydroxymethamfetamin p-hydroxynoefedrin Hydroxyzin 3-Hydroxytyramin Ibuprofen Imipramin Iproniazid (-) Isoproterenol Isoxsuprin Kanamycin Ketamin Ketoprofen Labetalol l-kyselina askorbová l-efedrin l-epinefrin Levorphanol Lidokain Lindan Uhličitan lithný Loperamid Maprotiline Meperidin Mephentemin Meprobamat Metadon MDA MDMA Metylfenidát Methyprylon Metoprolol Sulfát morfinu Mofrin 3-S-d-glukoron Kyselina nalidixová Nalorfin Naloxon Nalterxon Nimesulit Norcodein Kyselina a-naftalenactetic Norethindrone Normorpfin d-norepropoxyfen Noscapin d,l-oktopamin Orfenadrin Kyselina šťavelová Oxazepam Oxokyselina Oxycodon Oxymetazolin Oxymorphon Papaverin Pemolin Penicilin-G Pentazocin Pentobarbital Perphenacin Fenocyklidin Fenelzin Feniramin Fenobarbital Fenothiazin Fentersmin Trans2- Fenylcykloprofylamin l-fenylphrin B-Fenylthylamin d,l Norefedrin (+/-) Fenylpropanolamin Prednisolon Prokain Promazin Promethazin d,l-propanolol d-propoxyfen d-pseudeefedrin Atebrin Chinidin Chinin Ranitidin 9
Riboflavin Kyselina salicylová Secobarbital Enteramin Chlorid sodný Sulfametazin Sulindac Temazepam Tetracyklin Tetrahydrokortizon 3-acetát Tetrahydrozolin Thebain Theofylin Thiamin Thioridazine l-thyroxin Tolbutamin Cis-Tramadol Tradozon Trimteren Trifluoperazin Trimethobenzamid Trimetroprim Trimipramin Trypramin d,l-tryptofan Tyramin d,l-tyrozin Kyselina močová Verapmil Zomepirac Přístroj byl schválen pro použití v zemích EU a je proto opatřen značkou CE. Veškeré potřebná dokumentace je k dispozici u dovozce. Změny technických parametrů, vlastností, tiskové chyby vyhrazeny. Záruční a pozáruční opravy zabezpečuje dovozce: Compex spol. s r.o., Palackého 105, 612 00 Brno ve svém centrálním servisním středisku na výše uvedené adrese. 549 245 575; 602 766 759 10