Praktikum z histologie. Modul B

Transkript

1 Praktikum z histologie Modul B Pracovní protokol 2011

2 Buňka Odběr tkání a buněk: Ze živého organismu (BIOPSIE) Z mrtvoly (NEKROPSIE) Fyzikální metody: Teplo (mikrovlnná trouba) Zmražení (tekutý dusík 170 o C) Chemické metody: Aldehydy: Formaldehyd, glutaraldehyd Alkoholy: metanol, etanol Kyseliny: kyselina octová, trichloroctová, pikrová Soli těžkých kovů: chlorid rtuťnatý, oxid osmičelý, dvojchroman draselný Elektronová mikroskopie: Metoda ultratenkých řezů: Fixace (glutaraldehyd, paraformaldehyd a oxid osmičelý) Zalévání (epoxidové, polyesterové a akrylátové pryskyřice), Polymerace Krájení - síla řezu 50-60nm Kontrastování (osmium, uran, wolfram) Prohlížení, hodnocení Metoda negativního barvení: Obklopení částice elektrodensním materiálem kyselina fosfowolframová nebo octan uranylu = temné pozadí, objekty světlé. Užití virologie Metoda mrazového lámání Tkáň se zmrazí. Vysuší ve vakuu. Pokoví a prohlíží v TEM Jsou vidět membrány povrchy jako v SEM Kontrolní otázky: Jak se připravují preparáty pro TEM? Co je to polotenký řez? Jak se dají znázornit viry? Jaká je rozlišovací schopnost SEM a TEM

3 Barvení Hematoxylineosin Barvivo Hematoxylin Eosin Jádro modré až černé Kolag en růžový Elastik a Svaly růžové Poznámka Weigert van Gieson Weigertův hematoxylin Saturnová červeň Trinitrofenol hnědé červen ý žluté místo Saturnové červeni se používá také kyselý fuchsin, žluté -vše kromě kolagenu AZAN Modrý Massonův trichrom Žlutý Massonův trichrom Azokarmín Anilínová modř Oranž G Hematoxylin Kyselý fuchsin Anilínová modř Hematoxylin Erytrosin Šafrán červené modré až černé modré až černé modrý modrý žlutý oranžově červené červené červené červené - erytrocyty modrý - mucin červené - erytrocyty modrý - mucin červené erytrocyty možno použít i kyselý fuchsin a Tuchecht gelb Zelený Massonův trichrom Hematoxylin Kyselý fuchsin Světlá zeleň modré až černé zelená červené červené - erytrocyty Weigertův resorcin-fuchsin Resorcin Fuchsin fialová Impregnace Ag AgNO 3 hnědý šedo-černé retikulární vlákna - černá Heidenhainův železitý hematoxylin HŽH Heidenhainův železitý hematoxylin hnědé až černé šedo-černé

4 Seznam preparátů Modul B Preparáty vracejte na původní místo!! Je zakázáno měnit pořadí!! It is not allowed to change the order of slides in boxes!! Epitely Epithelial tissue B1 Arterie svalová / muscle artery HE B2 Ledvina / kidney HE B3 Štítná žláza / thyroid gland HE B4 Tlusté střevo/colon HE B5 Vejcovod / oviduct ampulla WvGieson B6 Bronchus HE B7 Močový měchýř/urinary bladder HE B8 Kůže břicha /skin HE B9 Jícen/Esophagus HE B10 Vagina PAS B11 Plíce/Lung HE B12 Tenké střevo/small intestine Toluid.modř B13 Pancreas HE B14 Parotis HE B15 Gl. submandibularis HE B16 Mamma lactans HE B17 Mamma nonlactans HE B18 Nadledvina/Suprarenal gland HE Pojiva- Connective tissue B19 Mesenchym Toluidin blue B20 Pupečník/Umbilical cord AZAN B21 Aorta RF B22 Hnědý tuk / brow n fat HE B23 Šlacha / tendon HE B24 Kloubní chrupavka / cartilage HE B25 Epiglottis HE B26 Epiglottis RF B27 Intramembranosní ossifikace HE B28 Enchondral ossification Toluidin blue B29 Lamelosní kost/lamelar bone HE Em bryologie/pohlavní systém y B30 Ovarium HE B31 Děloha HE B32 Testes HE Lym fatická tkáň B33 Lymfatická uzlina/lymphatic node HE B34 Slezina/Spleen Ag B35 Slezina/Spleen Perls B36 Thymus HE B37 Tonsila HE Svaly-Muscle tissue B38 Sval hladký/smooth muscle HE B39 Sval hladký/smooth muscle van Gieson B40 Srdeční sval/cardiac muscle HE B41 Srdeční sval/cardiac muscle HIH B42 Kosterní sval/skeletal muscle HE B43 Kosterní sval/skeletal muscle HIH Nervová tkáň B44 Mozek / cerebrum HE B45 Mozek / cerebrum Myelin B46 Mozeček / cerebellum HE B47 Mozeček / cerebellum Kresylviolet B48 Mícha / spinal cord HE B49 Autonomní ganglion HE B50 Periferní nerv / peripheral nerve HE

5 Tkáň epitelová 1. Jednovrstevný plochý epitel Preparát: Arterie svalová (B1) HE a) Jednovrstevný plochý epitel - endotel b) oválná jádra epitelových buněk c) membrana elastica externa d) lumen 2. Jednovrstevný plochý epitel Preparát: Ledvina (B2) HE a) parietální list Bowmannova pouzdra b) plochá jádra epitelových buněk c) glomerulus

6 3. Jednovrstevný kubický epitel Preparát: Ledvina (B2) H+E a)jednovrstevný kubický epitel-sběrací kanálek b) kulaté jádro epitelové buňky c) bazální membrána d) lumen kanálku 4.Jednovrstevný kubický epitel Preparát: Štítná žláza (B3) a) Jednovrstevný kubický epitel b) kulaté jádro epitelové buňky c) bazální membrána d) lumen folikulu

7 5. Jednovrstevný cylindický epitel Tlusté střevo (B4) a) Jednovrstevný cylindrický epitel b) kulaté jádro epitelové buňky c) bazální membrána 6. Jednovrstevný cylindický epitel s řasinkami Preparát: vejcovod (B5) a) Jednovrstevný cylindrický epitel b) epitelové buňky c) řasinky s bazálními tělísky d) bazální membrána

8 7. Víceřadý cylindrický epitel s řasinkami Preparát: Bronchus (B6) a) Víceřadý cylindrický epitel b) jádra cylindrických buněk c) řasinky s bazálními tělísky d) pohárkové buňky e) bazální membrána 8. Přechodní epitel - urothel Preparát: močový měchýř (B7) a) bazální buňky b) povrchové - hruškovité buňky c) jádra buněk d) bazální membrána 9. Vrstevnatý dlaždicový epitel rohovějící

9 Preparát: Kůže břicha (B8) Barvení : a) Vrstevnatý dlaždicový epitel b) stratum basale c) stratum spinosum d) stratum granulosum e) stratum corneum f) bazální membrána 10. Vrstevnatý dlaždicový epitel nerohovějící Preparát: Jícen (B9) a) Vrstevnatý dlaždicový epitel b) bazální vrstva cylindrických buněk c) vrstvy polyedrických buněk d) povrchové ploché buňky e) bazální membrána

10 11. Vrstevnatý dlaždicový epitel nerohovějící: Preparát: Vagina (B10) a)vrstevnatý dlaždicový epitel b) stratum basale c) stratum parabasale d) stratum intermedium e) stratum superficiale f) glykogen

11 Bariery: 12. Plíce - vzduch -krev (plicní alveoly) Preparát (B11) Jednovrstevný plochý epitel -pneumonocyty Bazální membrána Endotel 13. Ledvina - krev - primární moč (glomerulus) Preparát (B2) Jednovrstevný pochý epitel - podocyty Bazální membrána Endotel 14. Tenké střevo - resorpční epitel Preparát (B12) Enterocyt Bazální membrána Endotel

12 Mezibuněčné spoje Seromucinosní žláza

13 Žlázy:

14 15. Serozní žláza s endokrinní žlázou Preparát : Pankreas s Langerhansovými ostrůvky (B13) a) Exokrinní žláza b) serózní buňky c) vývody d) Endokrinní žláza 16. Seromucinosní žláza Preparát: glandula sublingualis (B15) a) serózní buňky b) mucinosní buňky c) vývody

15 17. Apokrinní žláza Preparát Mléčná žláza (B16, B17) Mamma lactans a) vývody b) sekreční alveoly 18. Kůže - kožní žlázy Preparát Kůže břicha (B8) a) ekrinní žláza b) holokrinní žláza

16 Pojivová tkáň Vazivo 1. Mesenchym Preparát: Končetinové pupeny (B19) Toluidinová modř a) Mesenchymové buňky 2. Makrofágy Preparát: Slezina (B35) Perlsova reakce a) Makrofágy b) retikulární vazivo

17 3. Rosolovité vazivo - Whartonův rosol Preparát: Pupečník (B20) AZAN a) jádra fibroblastů b) mezibuněčná hmota 4. Řídké kolagenní vazivo Preparát: Tlusté střevo (B4) a) tenké svazky kolagenních vláken b) jádra fibroblastů c) céva

18 5. Husté kolagenní vazivo neuspořádané Preparát : Kůže břicha (B8) a) silné svazky kolagenních vláken b) jádra fibroblastů 6. Husté kolagenní vazivo uspořádané Preparát: Šlacha (B23) a) silné svazky kolagenních vláken b) jádra fibroblastů

19 7. Elastické vazivo Preparát: Aorta (B21) Resorcin - fuchsin a) Elastické vazivo (tunica media) b) elastické membrány c) hladké svalové buňky a fibroblasty d) kolagenní vlákna 8. Retikulární vazivo Preparát : Slezina (B34) Impregnace Ag, Perlsova reakce a) retikulární vlákna b) retikulární buňky c) lymfocyty

20 9. Bílé tukové vazivo Preparát: Kůže břicha (B8) H+E a) tuková buňka b) tuková vakuola c) cévy d) řídké kolagenní vazivo 10. Hnědé tukové vazivo Preparát: Hnědý tuk (B22) a) tuková buňka b) tuková vakuola c) jádra tukových buněk

21 Chrupavka 1. Hyalinní chrupavka Preparát: Trachea (B6) a) Isogenetická skupina b) chondrocyt c) lacuna cartilaginea d) matrix e) perichondrium 2. Hyalinní chrupavka Kloubní chrupavka (B24) a) Chondrocyty b) kloubní povrch chrupavky c) matrix

22 3. Elastická chrupavka Preparát: Epiglottis (B25,B26) H+E, Resorcin fuchsin a) Elastická vlákna b) chondrocyty c) lacunae

23 Kost a osifikace 1. Desmogenní (intramembranosní) osifikace Preparát: Calva (B27) H+E a) Kost b) osteocyty c) osteoblasty d) osteoklasty e) řídké vazivo 2. Enchondrální osifikace Preparát: Končetina (B28) Toluidinová modř a) zona normální chrupavky b) zona rostoucí chrupavky c) zona hypertrofické chrupavky d) linie eroze e) nezvápenatělá kost f) kost g) periostální kostěná manžeta h) směrové trámce

24 3. Lamelosní kost Preparát: lamelosní kost - kompakta (B29) H+E a) Osteon b) Haversův kanál c) canaliculi ossium d) lamella ossea e) osteocyty