Jana Bednářová Oddělení klinické mikrobiologie FN Brno

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Jana Bednářová Oddělení klinické mikrobiologie FN Brno"

Lucie Havlíčková
před 8 lety
Počet zobrazení:

1 Jana Bednářová Oddělení klinické mikrobiologie FN Brno

2 Jistá LNB: Splněna následující tři kritéria: (i) neurologické příznaky odpovídající LNB (ii) pleocytóza v CSF (iii) intratekální syntéza Bb-specifických protilátek Pravděpodobná LNB: Splněna dvě z uvedených tří kritérií. European Journal of Neurology 2010, 17: 8 16

syntéza Bb-specifických protilátek Pravděpodobná LNB: Splněna dvě

4 Linkův index, Tourtellotova formule - lineární závislost mezi poruchou HLB a stupněm intratekální syntézy - riziko falešně pozitivních nálezů při středním a vyšším stupni poruchy HLB Reiberův diagram - hyperbolická závislost mezi poruchou HLB a stupněm intratekální syntézy odlišující patologickou, intratekálně syntetizovanou frakci specifických protilátek v likvoru od specifických protilátek sérového původu přestupujících přes porušenou HLB Link H, Tibbling G: Scand.J.Clin.Lab.Invest. 1977, 37: Tourtellotte WW: J.Neurol.Sci. 1970, 10:

odlišující patologickou, intratekálně syntetizovanou frakci specifických protilátek v likvoru od specifických protilátek sérového původu

5 * 1940 Stuttgart Univerzita Tübingen, obor biochemie Max-Planck Institute, Göttingen (proteinolipidové interakce v myelinu) Neurochemická laboratoř, Neurologická klinika, Univerzita Göttingen (diagnostika CSF) od roku 1991 pořadatel a odborný poradce pro CSF diagnostiku, INSTAND (Quality Assessment in Germany and several European countries) publikační aktivita:

Univerzita Göttingen (diagnostika CSF) od roku 1991 pořadatel a odborný poradce pro CSF

6 vznik filtrací přes endotel kapilár v plexus chorioideus postranních komor průtok z komorového systému přes bazální cisterny do subarachnoidálního prostoru (kortikální, spinální) resorpce do venózního systému přes arachnoidální klky Reiber H: Multiple Sclerosis. 1998, 4:

subarachnoidálního prostoru (kortikální, spinální) resorpce do

7 krevní proteiny vstupují do CSF v průběhu jeho toku mezi komorami a lumbálním subarachnoidálním prostorem 2,5 násobný vzestup koncentrace celkového proteinu mezi komorovým a lumbálním CSF přestup proteinů z krve do CSF probíhá na základě zákonů difúze v závislosti na velikosti molekul větší CSF/sérum kvocient pro menší molekuly: Qalb>QIgG>QIgA>QIgM absolutní koncentrace krevních proteinů v CSF závisí na individuální koncentraci v séru, věku, místě LP, odebraném objemu a stupni likvorového průtoku

v závislosti na velikosti molekul větší CSF/sérum kvocient pro menší molekuly: Qalb>QIgG>QIgA>QIgM absolutní koncentrace

8 HLB je tvořená chorioidálním plexem a endotelem kapilár albuminový kvocient Qalb je obecně přijímaným indikátorem funkce hematolikvorové bariéry zvýšená koncentrace albuminu v likvoru je vždy důsledkem dysfunkce hematolikvorové bariéry, protože albumin pochází výlučně z krve patologické zvýšení koncentrace proteinu, např. IgG, v likvoru je způsobeno dysfunkcí hematolikvorové bariéry a/nebo intratekální syntézou IgG rozlišení porovnáním QIgG versus Qalb

bariéry, protože albumin pochází výlučně z krve patologické zvýšení koncentrace proteinu, např.

9 vztah mezi Qalb a QIgG/IgA/IgM není lineární, ale hyperbolický vertikální linie = hodnota Qalb horní hyperbolická křivka (Qlim) = diskriminační linie mezi Ig pocházejícími ze séra a syntetizovanými intratekálně 5 referenčních rozmezí: 1 normální 2 porucha HLB 3 intratekální Ig syntéza s poruchou HLB 4 intratekální Ig syntéza bez poruchy HLB 5 oblast metodologické chyby

syntetizovanými intratekálně 5 referenčních rozmezí: 1 normální 2 porucha HLB 3 intratekální Ig

11 sérum a CSF odebrané současně vyšetření ihned nebo zamrazit na -20 C stanovení specifických anti-borreliových protilátek ve třídě IgG, IgM metodou EIA dle návodu výrobce současné vyšetření ředěného standardního séra výsledek: absorbance (OD) Tumani H, Nölker G, Reiber H: Neurology. 1995, 45:

metodou EIA dle návodu výrobce současné vyšetření ředěného standardního

12 standardní křivka odvozená z ředěného standardního séra absorbance ředěného standardního séra v rozmezí 0,05 2,0; nejvyšší hodnota absorbance je definována jako 100 AU další ředění odpovídají 50 AU, 25 AU, 12,5 AU atd. logaritmický graf dle Reibera výsledek: hodnoty AU

absorbance je definována jako 100 AU další ředění odpovídají 50 AU,

14 Borrelia burgdorferi: standardní křivka absorbance (log) 10 1 S CSF 0, jednotky AU (log)

15 ze stejných vzorků séra a CSF nefelometricky pozor na jednotky: sérum g/l; CSF mg/l Qalb poměr koncentrace albuminu v CSF a séru Qalb je referenčním markerem pro stav hematolikvorové bariéry

16 protilátkový index (antibody index, AI) AI = Q spec /Q IgG Q spec poměr specifických IgG protilátek v likvoru a séru (zohlednit odpovídající faktor ředění!) Q IgG poměr celkových IgG protilátek v likvoru a séru Q IgG je matematicky vyjádřen hyperbolickou závislostí s limitní hodnotou Q lim(igg) Q lim(igg) = 0,93xSQRT(Qalb 2 + 6x10-6 ))-1,7x10-3 pokud Q IgG >Q lim(igg), platí: AI = Q spec /Q lim(igg)

) Q IgG poměr celkových IgG protilátek v likvoru a séru Q IgG je matematicky vyjádřen hyperbolickou

17 AI = Q spec /Q IgM Q spec poměr specifických IgM protilátek v likvoru a séru (zohlednit odpovídající faktor ředění!) Q IgM poměr celkových IgM protilátek v likvoru a séru Q IgM je matematicky vyjádřen hyperbolickou závislostí s limitní hodnotou Q lim(igm) Q lim(igm) = 0,67xSQRT(Qalb x10-6 ))-7,1x10-3 pokud Q IgM >Q lim(igm), platí: AI = Q spec /Q lim(igm)

) Q IgM poměr celkových IgM protilátek v likvoru a séru Q IgM je matematicky vyjádřen

18 vyjadřuje patologickou, intratekálně syntetizovanou frakci specifických protilátek v likvoru teoreticky normální hodnota AI = 1,0 vzhledem k metodickým nepřesnostem stanoveno referenční rozmezí AI = 0,7 1,3 intratekální syntéza je přítomná, je-li AI > 1,4

AI = 1,0 vzhledem k metodickým nepřesnostem stanoveno

22 specifický protilátkový index (AI): patologické hodnoty > 1,4 (IgG, IgM) dg senzitivita AI 80% u časné LNB, 100% u pozdní LNB pro odlišení akutního, chronického nebo dříve prodělaného onemocnění musí být AI posuzován v kontextu s anamnézou, klinickými příznaky a dalšími laboratorními parametry v likvoru Mygland Å et al: EFNS guidelines on the diagnosis and management of European Lyme neuroborreliosis. European Journal of Neurology 2010, 17: 8 16

23 akutní zánětlivé onemocnění (neuroborrelióza, neurosyfilis) přetrvávající intratekální syntéza po proběhlém onemocnění (stav po HSV encefalitidě či neuroborrelióze) chronický zánětlivý autoimunitní proces v CNS (sclerosis multiplex, )

Podobné dokumenty

WWW.DYNEX.CZ DEN LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY

WWW.DYNEX.CZ DEN LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY DEN LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY LYMESKÉ BORRELIÓZY Brno, seminář f. Dynex 1.4.2009 Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě Centrum klinických laboratoří Hana Bílková Fránková á Oddělení parazitologie a lékařské