Rapid-VIDITEST Influenza A Card

Transkript

1 Rapid-VIDITEST Influenza A Card Jednokrokový kazetový test pro detekci antigenu viru chřipky typu A z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů.. Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II č.365, Vestec, Jesenice u Prahy, ČR, tel: , POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST Influenza A Card je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenu viru chřipky typu A. Je určen pro humánní diagnostiku infekce chřipky z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů. ÚVOD: Virus chřipky atakuje zejména horní cesty dýchací sliznici nosu, hrtan a průdušky, někdy také plíce. Infekce většinou odezní do jednoho týdne. Hlavními symptomy infekce jsou vysoké horečky, bolesti svalů, bolesti hlavy, nevolnost, dráždivý kašel, bolest v krku a rýma. Většina lidí se uzdraví za jeden až dva týdny bez podávání léků. U velmi malých dětí, osob ve vysokém věku a osob se závažným onemocněním jako je onemocnění plic, diabetes, nádorové onemocnění nebo onemocnění srdce a ledvin je infekce virem chřipky velmi riziková. U těchto lidí může infekce vést k různým komplikacím výše popsaných chorob, pneumonii a dokonce i k úmrtí. Běžně cirkulující typy viru chřipky, které způsobují onemocnění u lidí, lze rozdělit do dvou skupin: A a B. Dva subtypy Influenzy A infikující lidi - A(H3N2) a A(H1N1) jsou spojovány i s případy úmrtí. Virus chřipky je definován dvěma rozdílnými povrchovými proteinovými komponenty, antigeny, které se nazývají hemaglutinin (H) a neuramidáza (N). Byly také zaznamenány propuknutí infekce i sporadické infekce lidí prasečí chřipkou nebo ptačí chřipkou. PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST Influenza A Card je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenu viru chřipky typu A. V testovacích zónách kazety je navázána myší monoklonální protilátka proti virovému antigenu. V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem (anti-typ A myší monoklonální protilátky červené mikročástice), imobilizoavným na membráně testu. Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými protilátkami, což se ve výsledkové zóně projeví jako barevná linka. Vzlínání pokračuje až k imobilizovaným kontrolním protilátkám v kontrolní zóně, kde se vždy na konci testu objeví zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1

2 1) že se použil dostatečný objem vzorku, 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku, 3) interní kontrolu reagencií. OBSAH SOUPRAVY: - Testovací kazety (obsahují jednorázové plastové pipety) - Sterilní odběrové tampóny - Roztok B (ředicí roztok pro vzorky) - Testovací zkumavky - Návod k použití - Certifikát kontroly balení POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU: - Sterilní nádoba pro odběr vzorků - jednorázové rukavice - stopky SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Vzorky nosních výtěrů: - Ohněte tyčinku odběrového tamponu tak, aby jste kopírovali křivku nosohltanu - Vnořte vatový tampón skrze nosní dírku do oblasti zadního nosohltanu. - Rotačním pohybem tampónu setřete infikované buňky. - Pro získání optimálního vzorku, opakujte postup i u druhé nosní dírky. Vzorky nosních výplachů a aspirátů (odsávací zařízení, sterilní odsávací cévka): - Nakapejte do každé nosní dírky několik kapek solného roztoku. - Zaveďte cévku skrze nosní dírku do oblasti zadního nosohltanu. - Jemně nasajte. Rotačním pohybem pomalu vyjměte cévku. - Pro získání optimálního vzorku, opakujte postup i u druhé nosní dírky. Odešlete ihned po odběru do laboratoře (citlivost s časem klesá). Vzorky z nosohltanu během skladování a transportu udržujte chlazené na 2º-4ºC. PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte testovací kazetu, vzorky a roztok B vytemperovat na laboratorní teplotu (15 až 30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. Postup pro vzorky nosních výplachů nebo aspirátů: Pro každý vzorek použijte novou testovací zkumavku a dávkovací pipetu. 1. Do testovací zkumavky přidejte vzorek výplachu nebo aspirátu z nosohltanu (6 kapek nebo 300 µl) (1). 2. Přidejte roztok B (3 kapky nebo 150 µl) a zamíchejte (2). Vyjměte testovací kazetu z obalu a ihned po otevření ji použijte. Pro každý vzorek použijte novou testovací kazetu. 3. Aplikujte 100 µl do oválného okénka, které je označeno písmenem S (3). Začněte měřit čas. Po 10 minutách odečtěte výsledek (objeví se barevné linky). 2

3 Postup pro vzorky nosních výtěrů: Pro každý vzorek (stěr) použijte novou testovací zkumavku a dávkovací pipetu.. 1. Do testovací zkumavky aplikujte 15 kapek nebo 500uL roztoku B (1). 2. Vložte do ní odběrový tampon. Krouživým pohybem tamponu důkladně roztok promíchejte. Třete tampon o stěnu zkumavky, vytlačte z něj co nejvíce tekutiny (2). Vyjměte testovací kazetu z obalu a ihned po otevření ji použijte. Pro každý vzorek použijte novou testovací kazetu. 3. Aplikujte 100 µl do oválného okénka, které je označeno písmenem S (3). Začněte měřit čas. Po 10 minutách odečtěte výsledek. 3

4 INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: ZELENÁ ČERVENÁ ČERVENÁ Negativní Pozitivní Neplatný Neplatný POZITIVNÍ: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví také červená linka ve výsledkové zóně T. NEGATIVNÍ: V kontrolní zóně C se objeví jedna zelená linka. Výsledková zóna T zůstane prázdná. NEPLATNÝ: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně C neobjeví zelená linka bez ohledu na přítomnost červené linky ve výsledkové zóně T. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečný objem vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. POZNÁMKA K INTERPRETACI VÝSLEDKU: Intenzita červené linky v místě označeném T se může měnit v závislosti na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně tímto kvalitativním testem nelze posuzovat množství antigenu ani odhadovat nárůst nebo pokles. PLATNOST TESTU: V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně je vnitřní kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. OČEKÁVANÝ PŘÍNOS: Virus chřipky typu A způsobuje epidemie téměř každou zimu. Ve Spojených státech nákaza chřipkou v zimě způsobuje onemocnění u 10-20% obyvatel a je zodpovědná za přibližně úmrtní a více než hospitalizací za rok. 4

5 OMEZENÍ TESTU: 1. Test musí proběhnout do 2 hodin od otevření zataveného obalu. 2. Tento test slouží pouze k pravděpodobné diagnóze chřipkové infekce. Potvrzení infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a laboratorní nálezy. 3. Použitím nedostatečného množství vzorku, nebo vzorku s příliš nízkou koncentrací antigenu může dojít k falešné negativitě výsledku. Proto se doporučuje, aby všechny negativní výsledky získané Rapid-VIDITEST Influenza A Card testem byly otestovány jinou metodou a/nebo na buněčných kulturách. VLASTNOSTI TESTU: Citlivost a specifita Různá ředění virového extraktu byla testována přímo v ředicím roztoku nebo v negativním vzorku nosního výtěru. Detekce byla provedena podle návodu. Rapid-VIDITEST Influenza A Card test vykazoval >99% citlivost a >99% specifitu ve srovnání s jiným komerčně dostupným rychlotestem. Křížové reakce S testem Rapid-VIDITEST Influenza A Card byla provedena studie křížové reaktivity. Nebyla nalezena žádná křížová reaktivita s běžnými respiračními patogeny a dalšími organizmy a látkami, které se příležitostně mohou nacházet ve vzorcích z nosohltanu, např. RSV (Respiračně syncytiální virus), Adenovirus. SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním obalu v chladničce nebo při pokojové teplotě (2 až 30 C). Test je stabilní do data expirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte. BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Pouze pro in vitro diagnostiku. - Nepoužívejte po uplynutí expirační doby. - Testy až do použití uchovávejte zatavené v neporušených obalech. - Pokud je hliníkový obal porušený test nepoužívejte. - Dodržujte zásady Správné laboratorní praxe, používejte ochranný oděv a ochranné rukavice, při práci nejezte, nepijte a nekuřte. - Se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem. - Testovací kazetu likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. - Test provádějte nejpozději do 2 hodin od otevření hliníkového obalu. 5

6 REFERENCE: 1. Daniel E. Noyola, et al. Comparison of a New Neuraminidase Detection Assay with an Enzyme Immunoassay, Immunofluorescence, and Culture for Rapid Detection of Influenza A and B Viruses in Nasal Wash Specimens. Journal of Clinical Microbiology, Mar. 2000, p Vol. 38, No Newman A.P. et al. Human Case of Swine Influenza A (H1N1) Triple Reassortant Virus Infection, Wisconsin. Emerging Infectious Diseases, Sept 2008, Vol 14, No. 9, pp Andreea C. Cazacu, Gail J. Demmler et al. Comparison of a New Lateral-Flow Chromatographic Membrane Immunoassay to Viral Culture for Rapid Detection and Differentiation of Influenza A and B Viruses in Respiratory Specimens. Journal of Clinical Microbiology, Aug. 2004, p Vol. 42, No Kenneth E. Irmen and James J. Kelleher. Use of Monoclonal Antibodies for Rapid Diagnosis of Respiratory Viruses in a Community Hospital. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, May 2000, p Vol. 7, No. 3. POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Datum expirace Číslo šarže Výrobce Datum poslední revize: Leden