LABORATORNÍ METODY A TESTY V GASTROENTEROLOGII. MUDr.Petr Kocna CSc.

LABORATORNÍ METODY A TESTY V GASTROENTEROLOGII MUDr.Petr Kocna CSc. http://www.lf1.cuni.cz/~kocna/pkweb1.htm FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK VŠCT seminář -Praha, říjen 2017 2 VÝCOZÍ STAV STIMULACE DIAGNOSTICKÝ PROCES MORFOLOGIE 3 METODY LABORATORNÍ REÁLNÝ STAV FUNKČNÍ ODEZVA ZOBRAZOVACÍ METODY 4 80 70 60 50 FUNKČNÍ ODEZVA 40 30 20 10 0 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 ČASOVĚ ZÁVISLÁ ODPOVĚĎ FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK MALABSORBCE 5 6 LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA MALABSORBCE

MALABSORPCE, MALDIGESCE, MALASIMILACE MALABSORPCE STAV, KDY JEDNA, NEBO VÍCE ZÁKLADNÍC ŽIVIN NENÍ TRÁVENA A VSTŘEBÁVÁNA, NEBO NEDOSTATEČNĚ ŽALUDEČNÍ, DUODENÁLNÍ, STŘEVNÍ SONDA MALABSORPČNÍ SYNDROM (MS) ZARNUJE: PORUCU INTRALUMINÁLNÍO TRÁVENÍ, DIGESCE PORUCU VSTŘEBÁVÁNÍ ŽIVIN, ABSORPCE ABNORMÁLNÍ SEKRECE TRÁVICÍC ŠŤAV ZÁVAŽNÉ NARUŠENÍ MOTILITY TRÁVICÍ TRUBICE NEDOSTATEČNÝ PŘÍJEM POTRAVY PRIMÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROM PORUCA NA ÚROVNI ENTEROCYTU CÉLIAKIE, TROPICKÁ SPRUE, WIPPLOVA C... ŽALUDEČNÍ SONDA TYP LEVIN CROSBY KAPSLE SEKUNDÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROM ONEMOCNĚNÍ PANKREATU, ŽLUČNÍKU, JATER OBSTRUKČNÍ COROBY STŘEVA, INFEKCE... 7 8 RTG KONTROLA ZAVEDENÍ SONDY TENKÉ STŘEVO - FUNKCE ENTEROCYTU DUODENUM - JEJUNUM - ILEUM, DÉLKA 3-4 METRY POVRC 5 x ZVĚTŠUJÍ KLKY (0,5-1 mm, 20-40 klků / mm 2 ) MIKROKLKY - KARTÁČOVÝ LEM - ZVĚTŠUJE POVRC 30x 100 m 2 KLKY ENTEROCYTY MIKROKLKY 9 10 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK VYŠETŘENÍ STOLICE ANALÝZA STOLICE UMOŽŇUJE DIAGNOSTICKÝ PROCES ONEMOCNĚNÍ ZAŽÍVACÍO ÚSTROJÍ, JATER A PANKREATU. UJASNĚNÍ PŘÍČÍN VEDOUCÍC K SYMPTOMŮM OVLIVŇUJÍCÍ ZAŽÍVACÍ TRAKT VČETNĚ PRŮJMU, NAUSEY, ZVRACENÍ, EDÉMU, BOLESTÍ, KŘEČÍ, OREČKY, ZTRÁTY CUTI APOD. DETEKCE NĚKTERÝC ENZYMŮ VE STOLICI K URČENÍ MÍRY PANKREATICKÉ FUNKCE. DETEKCE OKULTNÍO KRVÁCENÍ PRO SCREENING KOLOREKTÁLNÍC TUMORŮ DETEKCE PŘÍTOMNOSTI PARASITŮ, NAPŘ. LAMBLIE DETEKCE A IDENTIFIKACE NĚKTERÝC TYPŮ BAKTERIÍ DETEKCE NENATRÁVENÝC ZBYTKŮ POTRAVY PŘI MALABSORPČNÍM SYNDROMU 11 12

MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE BIOCEMICKÁ VYŠETŘENÍ VZORKU STOLICE SVALOVÁ VLÁKNA ŠKROBOVÁ ZRNKA TUKOVÉ KAPÉNKY NATIVNÍ PREPARÁT ZBYTKY POTRAVY VLÁKNA CELULÓZY BARVENÍ FRIEDIGER S REAGENS - SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ - TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ - ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE Gastroenterologie für die Praxis München, 1975 14 Anti ttg IgA Anti Gliadin sciga β-defensin 2 Zonulin α 1 -antitrypsin EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin Calprotectin Lactoferin emoglobin aptoglobin Transferin elicobacter pylori Ag Amyláza Lipáza Chymotrypsin Elastáza - 1 Lysozyme Albumin Myeloperoxidáza PMN Elastáza PCR / DNA VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU CALPROTECIN VE STOLICI - RAPID TESTY CalDetect CalPro CalFast CerTest - CALPROTECTIN + LACTOFERRIN 15 16 KOMBINOVANÉ RAPID-TESTY NA STOLICI ODBĚROVÝ SYSTÉM PRO NĚKOLIK TESTŮ emoglobin Calprotectin Lactoferin E-coli toxin Transferin IDK Extract Single Tube Analytics Analyt Calprotectin Lactoferrin Pancreatic elastase emoglobin aptoglobin anti-gliadin anti-transglutaminase s-iga α 1-antitrypsin Albumin Lysozyme β-defensin 2 EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin Stabilita 2-8 C 9 9 7 5 7 7 3 7 9 9 5 7 5 17 18

AUTOMATICKÉ ANALYZÁTORY NA STOLICI Kroma it Linear KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICI SBĚR STOLICE - 72 hod. REFERENČNÍ METODA EXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU FAT 72 hod. S-CCK TEST NS-Prime Alfresa Pharma 19 NS-Plus Alfresa Pharma 20 VODÍKOVÉ DECOVÉ TESTY - 2 MICRO - ANALYZÁTOR 2 /C 4 BAKTERIÁLNÍ PRODUKCE PARAMETRY JEDNODUCÁ OBSLUA BATERIOVÝ TYP REAL-TIME KINETICKÝ SW ROZSA MĚŘENÍ 0-500 ppm CITLIVOST 1 ppm ANAEROBNÍ YDROLÝZA A PRODUKCE VODÍKU A METANU STŘEVNÍ MIKROFLÓROU APLIKACE 21 Kód VZP: 15140 249 bodů klinický kód, GE, odb. 105 MALABSORPCE LAKTÓZY MALABSORPCE SACARÓZY MALABSORPCE FRUKTÓZY BAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ MOTILITA GIT, TRANSIT TIME 22 Pimentel M.,Gunsalus RP.,Rao SSC.,Zhang.: Methanogens in uman ealth and Disease. Am J Gastroenterol Suppl (2012) 1:28 33 2 /C 4 /CO 2 - LACTOTEST 202 2 /C 4 /CO 2 - GLUKÓZOVÝ TEST - SIBO KOMBINACE STANOVENÍ VODÍKU a METANU ELIMINACE FAL.NEGATIVITY MODULÁRNÍ KONCEPCE SENZORY: 2 /C 4 /CO 2 - VLIV ANTIBIOTIK - NÍZKÁ PRODUKCE VODÍKU KONCENTRACE 2 KONCENTRACE 2 + 2x C 4 M. Di Stefano, G.R. Corazza Role of hydrogen and methane breath testing in gastrointestinal diseases Digestive and Liver Disease Supplements 2009/3, 40 43 23 Satish S.C. Rao - Ability of the Normal uman Small Intestine to Absorb Fructose: Evaluation by Breath Testing Clinical Gastroenterology and epatology 2007/5, 959-963 24 75 g GLUKÓZY

2 /C 4 /CO 2 - TEST LAKTÓZOVÉ INTOLERANCE 2 /C 4 /CO 2 - TEST LAKTÓZOVÉ INTOLERANCE KONCENTRACE 2 KONCENTRACE 2 20 g LAKTÓZY 20 g LAKTÓZY 25 26 2 /C 4 /CO 2 - SIBO TEST PROČ JE TŘEBA DALŠÍ, TŘETÍ ANALYT? Pokud je alveolární vzorek vzduchu kontaminovaný se vzduchem v místnosti, koncentrace CO 2 ve vzorku se sníží, stejně jako další měřené plyny ve vzorku - 2 ac 4 KONCENTRACE 2 + 2x C 4 Korekční faktor = alveolární koncentrace CO 2 / koncentrace CO 2 ve vzorku 75 g GLUKÓZY Korekční faktor nastavený podle koncentarce CO 2 minimalizuje chyby způsobené nesprávným odběrem vzorku 27 28 ALVEOLÁRNÍ KONCENTRACE CO 2 ANALYZÁTORY DECOVÝC TESTŮ C/ 12 C CO 2 je fyziologickým regulátorem dýchání, a alveolární tlak pco 2 je konstantní - 40 mm g (torr). Proto je CO 2 nejspolehlivějším "normalizátorem" měřených plynů ve vzorku. IR force 600, Richen BreathID, Exalenz Zahraniční studie prokazují, že použití alveolární koncentrace 5,5%, je vhodné pro výpočet korekčního faktoru 29 Alveolární pco 2 je konstantní - 40 mm g. Procento CO 2 v alveolárním vzduchu je ovlivněno barometrickým tlakem. Alveolární vzduch s pco 2 40 mm g, na úrovni hladiny moře, bude mít koncentraci CO 2 asi 5,5% zatímco alveolární vzduch např. v Denveru bude mít CO 2 6,8% (1610 m.n.m., barometrický tlak je 625 torru) 30 FLIP, umedics elifan, Fischer - FAN

NABÍDKA SUBSTRÁTŮ PRO DECOVÉ TESTY C DECOVÉ TESTY, INDIKACE, SPOLELIVOST C - acetát C - methacetin C - oktanoát C - galaktóza C - urea C - aminopyrin C - bikarbonát C - kofein C - glukóza C - fenylalanin C - mixed triglycerid C - laktóza C - triolein C - xylóza C - škrob C - glykocholát C - palmitát Dechový test C-Glykocholát C-Xylóza C-Laktóza C-Urea C-Aminopyrin C-Metacetin C-Fenylalanin C-Mixed-triglycerid C-Oktanoát Indikace SIBO SIBO Malabsorpce p infekce Jaterní testy Jaterní testy Jaterní testy Pankreat.insuficience Vyprazdňování žaludku Senzitivita 76% 89% 84% 96% 86% 93% 98% 89% 67% Specificita 35% 30% 96% 93% 68% 94% 60% 81% 80% 31 32 Siddiqui I, Ahmed S, Abid S. Update on diagnostic value of breath test in gastrointestinal and liver diseases. World J Gastrointest Pathophysiol. 2016 Aug 15;7(3):256-265 C DECOVÉ TESTY - PDB STANDARD C DECOVÉ TESTY - PDB STANDARD Standardem PDB je primární referenční materiál pro měření přirozených změn obsahu izotopu uhlíku C, stanoveného v uhličitanu vápenatém ze schránek křídových belemnitů rodu Belemnitella americana z geologické formace Pee Dee v Jižní Karolíně (USA) PDB - Pee Dee Belemnitella americana PDB Pee Dee Belemnitae Mezinárodní standard C = 1.11237 % 33 34 VÝSKYT IZOTOPU C V PŘÍRODĚ PRINCIP C- MTG DECOVÉO TESTU % C δ C PDB 1,120 + 10 Uhličitany 1,110 PeeDee Belemnite 0 1,100 C4 rostliny Atmosférický CO 2-10 perorální podání C-substrát stanovení poměru C/ 12 C produkce CO 2 1,090 1,080 1,070 1,060 1,050 C3 rostliny Fosilní zdroje US - Dech CO 2-20 Jap. - Dech CO 2 EU - Dech CO 2-30 -40-50 enzymatická hydrolytická funkce GIT C C CO 2 eliminace kumulativní výdej CO 2 35 C abundances of nutrients and the effect of variations in C isotopic abundances of test meals formulated for CO2 breath tests. Schoeller DA. et al.: Am J Clin Nutr. 1980; 33(11): 2375-2385 36 absorpce cpdr

PŘIROZENÉ SUBSTRÁTY C PRO DECOVÉ TESTY C-škrob eliview - IRMS ANALYZÁTOR DECOVÝC TESTŮ NA BÁZI ULÍKU C kukuřice C4 rostliny C-laktóza krystalizace laktózy mléko C-enriched lactose, derived from milk of cows fed with silo corn (d= -10.885) for 5 weeks. Because it is known that it takes 14 days for cows milk to be in equilibrium with a diet, milk of seven cows was collected during the last 3 weeks of this 5-week period and pooled. Lactose was obtained by crystallization techniques. 37 38 Kód VZP: 81701 501 bodů analytika, odb. 801, IRMS ANALYZÁTOR CO 2 - IRMS DETEKCE ANALYZÁTOR CO 2 - IRMS DETEKCE SEPARACE VODY INJEKTOR e e VÝSTUP Z GC MAGNETICKÉ POLE NAFION VACUTAINER REF.INJEKTOR VENTIL MS IONIZACE PLYNU SEPARACE PODLE MOTNOSTI AUTOSAMPLER SEPARACE GC REFERENČNÍ CO 2 IRMS ISOTOPE - RATIO MASS SPECTROMETRY TRIPLE FARADAY COLLECTOR DETEKCE 44-12 C 16 O 2 45 - C 16 O 2 46-12 C 16 O 18 O 39 40 ANALYZÁTOR CO 2 - NDIRS DETEKCE ANALYZÁTOR CO 2 - NDIRS DETEKCE 12 C 16 O 2 2299.642 cm -1 C 16 O 2 2299.795 cm -1 ZDROJ IR λ = 2-8 μm REF.PLYN VZOREK CO 2 C 16 O 18 O 12 CO 2 41 ABSORBČNÍ MAXIMA ISOTOPŮ: 4348,5 nm - 4348,2 nm 42 NonDispersive Isotope-selective InfraRed Spectroscopy

ANALYZÁTOR CO 2 - NDIRS DETEKCE ANALÝZA VYDECOVANÉO VZDUCU OptoAkustický detektor Lehrer & Luft typ Lehrer E and Luft K F 1938 German Patent No 730478 NÁDEC CO 2 = 0,04 % VÝDEC CO 2 2,5-3,5 % 43 - absorpce IR -změna tlaku - deformace membrány - akustický signál An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detector Daniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: 281-286 44 CO 2 = 5,20 % NÁDEC - VÝDEC (BEZ ZADRŽENÍ DECU) NÍZKÁ KONC.CO 2 NÁDEC - ZADRŽENÍ DECU - KRÁTKÝ VÝDEC NÍZKÁ KONC.CO 2 NÁDEC - ZADRŽENÍ DECU NA 10 sec - DLOUÝ VÝDEC KONC.CO 2 JE OK FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK PRŮKAZ INFEKCE ELICOBACTER PYLORI PRŮKAZEM BAKTERIE/ANTIGENU p NIKOLIV DETEKCE PROTILÁTEK K p 45 46 DECOVÝ TEST s C - MOČOVINOU (UREOU) CLO TEST (RUT) s MOČOVINOU (UREOU) SUBSTRÁT: C-MOČOVINA DÁVKA: 50-100 mg DOBA TESTU: 30 minut p - UREÁZA DECOVÝ TEST globální test - žaludku N 2 - CO-N 2 + 2 O = 2 N 3 + CO 2 47 RYCLÝ UREÁZOVÝ TEST lokální test - biopsie 48 Rychlý ureázový test změna p = změna zbarvení výsledek během hodiny

DECOVÝ TEST s C - MOČOVINOU (UREOU) ENDOSKOPICKÝ DECOVÝ TEST - C EUBT Kód VZP: 15143 1661 bodů klinická část, GE, odb. 105 Pylobactell a Infai UBT - p soupravy jsou registrovány v ČR - SUKL 25 mg C-urea aplikace spray sondou 5 minutový test 49 50 Five minute endoscopic urea breath test with 25 mg of ()C-urea in the management of elicobacter pylori infection. Isomoto et al.: Eur J Gastroenterol epatol. 2002 Oct;14(10):1093-1100 ELICOBACTER PYLORI - DAKO TEST pstar ODBĚROVÁ NÁDOBKA Kód VZP: 91483 odb. 8, 761 bodů POROVNÁNÍ p RAPID TESTŮ mab - TEST MEMBRÁNA FILTR PRŮKAZ ELICOBACTER PYLORI pstar TEST - DAKO RAPID TEST MONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKA helicocare negativní p StAR negativní helicocare pozitivní p StAR negativní helicocare pozitivní p StAR pozitivní 51 INKUBAČNÍ NÁDOBKA 52 Jeřábek, J.: Stanovení antigenu elicobacter pylori ve stolici rapid testem. Diplomová práce 1.LF UK Praha 2007 ELICOBACTER PYLORI INFEKCE.Pylori + hostitel PODEZŘENÍ NA GASTRITÍDU, P INFEKCI, CA ŽALUDKU detekce p PGI/PGII, G-17b Cl Cl negativní p, normální PGI/PGII normální G-17b pozitivní p, normální PGI/PGII normální G-17b p +/-, nízké PGI/PGII zvýšené G-17b pozitivní p, nízké PGI/PGII nízké G-17b p gastritída Atrofická gastritída DUODENÁLNÍ VŘED GASTRIN BEZ ONEMOCNĚNÍ GASTRIN ATROFIE KARCINOM Normální žaludeční sliznice Rizko žaludečního nebo duodenálního vředu Rizko karcinomu žaludku 53 KMENY BAKTERIE - GENETICKÁ DISPOZICE - VNĚJŠÍ PROSTŘEDÍ - DIETA 54 Eradikace p infekce + gastroskopie

FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE TVORBA ŽLUČE CCK-PZ ENZYMY 0.7 l/den SEKRETIN PANKREATICKÁ ŠŤÁVA CO 3-, VODA 2.0 l/den 55 56 SPECIFICKÁ STIMULACE ORMONY SEKRETIN COLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN CRONICKÁ PANKREATITÍDA ZOBRAZOVACÍ METODY ERCP ŠŇŮRA PEREL ANALÝZA BIKARBONÁTŮ ANALÝZA AMYLÁZY DUODENÁLNÍ ŠŤÁVA AUTOMATICKÉ ANALYZÁTORY ENDOSKOPICKÝ SEKRETINOVÝ TEST 57 ERCP KLASIFIKACE PANKREATITID ERCP PAPILA MINOR D.WIRSUNGI D.SANTORINI 58 Erchinger F, Engjom T, Gudbrandsen OA et al.: Automated spectrophotometric bicarbonate analysis in duodenal juice compared to the back titration method. Pancreatology. 2016; 16(2): 231-237 ŽÁDNÁ STIMULACE ELASTÁZA VE STOLICI SEKREČNÍ KAPACITA GRADING CP 59 TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU NEPŘÍMÁ STIMULACE PANKREATICKÁ LIPÁZA DIGESTIVNÍ FUNKCE TRÁVENÍ (TUKŮ) STIMULAČNÍ POKRM SUBSTRÁT KUKUŘIČNÝ CLÉB 20g RAMA PERORÁLNÍ PODÁNÍ ANALÝZA C-MARKERU 250mg C-MTG SUBSTITUČNÍ TERAPIE SUBSTITUČNÍ LIPÁZA C - DECOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU VOLBA SUBSTRÁTU C - TRIOLEIN C - IOLEIN C - MIXED TRIGLYCERIDE C - COLESTERYL OCTANOATE C - TRIPALMITIN C - TRIOCTANOIN C - STARC C-BzTyrAla 60 STEATOREA > 11-14 g/den INTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZA SPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE VÝDEJ LIPÁZY < 90 ku/hod PANKREAT. COLESTEROL ESTERÁZA STEATOREA > 11 g/den MALABSORPCE TUKŮ TKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30% SEKRECE AMYLÁZY < 10% KORELACE s PABA testem

METABOLICKÉ PROCESY C-MTG CO 2 V DECU PANKREATICKÁ LIPÁZA 1,3 DI - STEAROYL O C 2 -O-C-(C 2 ) 16 -C 3 O 2 - ( C) - OCTANOYL FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK C - O - C-(C 2 ) 6 -C 3 O C 2 -O -C -(C 2 ) 16 -C 3 JATERNÍ β -OXIDACE 61 62 CO JE CÉLIAKIE? podle: Mowat AT, Lancet 2003, 361: 1290 CELOŽIVOTNÍ ONEMOCNĚNÍ, PERMANENTNÍ STŘEVNÍ INTOLERANCE LEPKU OBILOVIN GENETICKÝM FAKTOREM JE LA-B8, LA-DR3 a LADQ2 MESENCYMÁLNÍ BUŇKY TKÁŇOVÁ TRANSGLUTAMINÁZA M.BUNĚK ttg DEAMIDACE GLIADIN 33-mer PEPTID ŽALUDEČNÍ, PANKREATICKÉ PEPTIDÁZY, PROLYL-ENDOPEPTIDÁZY PŠENICE SPOUŠTĚCÍM FAKTOREM JSOU GLIADINOVÉ PEPTIDY IMUNOLOGICKÁ ODPOVĚĎ, AUTOIMUNITNÍ CARAKTER ONEMOCNĚNÍ 19-mer PEPTID Zonulin CÉLIAKIE ATROFIE KLKŮ POŠKOZENÍ SLIZNICE TENKÉO STŘEVA CD4+ T-BUŇKA PROJEVY MALABSORPČNÍO SYNDROMU T2-BUŇKA T1-BUŇKA ZÁNĚTLIVÁ ODPOVĚĎ 63 ODPOVĚĎ NA BEZLEPKOVOU DIETU 64 B-BUŇKA PROTILÁTKY IL 4,5,10 IL2, γifn, TNF CÉLIAKIE YPERPLASIE KRYPT ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI PODEZŘENÍ NA CS ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI ZVÝŠENÉM GENETICKÉM RIZIKU negativní protilátky normální IgA 65 Nízká pravděpodobnost celiakie LA typizace, opakovat biopsii vysoké klinické podezření negativní histologie IgA attg / IgA EmA a celkové IgA pozitivní protilátky Biopsie TS, histologie Bezlepková dieta histologický obraz celiakie Předběžná diagnóza celiakie deficit IgA klinická a histologická normalizace Definitivní diagnóza celiakie C. Briani et al. / Autoimmunity Reviews 2008; 7, 644 650 IgG attg, IgG EmA nebo IgG AGA pozitivní protilátky Vysoká pravděpodobnost celiakie 66 negativní LA Není riziko CS Marsh 0 or 1 Normální dieta Falešně pozitivní test Potenciální CS LA DQ2 and/or DQ8 negativní protilátky Vyloučit IgA deficienci Nízký příjem glutenu Střevní biopsie anti TG2 > 3x normy Marsh 2 or 3 Definitivní diagnóza celiakie pozitivní LA IgA attg2 & total IgA EmA pozitivní anti TG2 < 3x normy IgA EmA European Society for Pediatric Gastroenterology, epatology, and Nutrition Guidelines for the Diagnosis of Coeliac Disease. usby S. at al. JPGN 2012; 54: 6 160 EmA negativní Tranzientně falešná pozit. anti TG2 Normální dieta Další serologické testy

BIOPSIE TENKÉO STŘEVA - KLASIFIKACE SOUČASNÝ PROTOKOL STANOVENÍ PROTILÁTEK (EVIDENCE - BASED) PERSPEKTIVNÍ PROTOKOL STANOVENÍ PROTILÁTEK (PRACOVNÍ YPOTÉZA) IgA attg +IgA IgA attg +IgA EmA ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA attg +IgG attg DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU +IgAAGA DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET +IgGDGP ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA attg DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET Marsh 0 Marsh 1 Marsh 2 Marsh 3a Marsh 3b Marsh 3c 67 Clinical practice - Coeliac disease. Kneepkens C. M., von Blomberg B. M. Eur J Pediatr. 2012; 171(7) : 1011-1021 68 Old and new serological tests for celiac disease screening. Volta U., Fabbri A., Parisi C. et al. Expert Rev. Gastroenterol. epatol. 2010, 4(1) ANTIENDOMYSIÁLNÍ PROTILÁTKY - EmA SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY EmA IF - opičí jícen AGA-16, AGG-1, attg-1.5 pacient D.K. 10/2004 RYCLÉ, RAPID TESTY Z PLNÉ KRVE POCT ANALÝZA anti-ttg (IgA & IgG) EmA IF - opičí jícen pozitivní kontrola anti-dgp (IgA &IgG) + celkové IgA 69 EmA IF - opičí jícen AGA-238, AGG-220, attg-233 CSF, pacient M.P. 02/2002 70 anti-ttg (IgA) + celkové IgA anti-ttg (IgA, IgG, IgM) SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY Fingertip rapid point-of-care test in adult case-finding in coeliac disease. Popp A., Jinga M., Jurcut C., Balaban V., Bardas C., Laurila K., Vasilescu F., Ene A., Anca I., Mäki M. BMC Gastroenterology 20, :115 Diagnostic accuracy of a new point-of-care screening assay for celiac disease, Benkebil F., Combescure C., Anghel SI., Duvanel CB., Schäppi MG. World J Gastroenterol 20; 19(31): 5111-5117 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK Evaluation of a DGP point-of-care test for celiac disease in a pediatric population. Marti CO., Fellay B., Bürgin-Wolff A., Magnin JL., Baehler P. International Journal of Celiac Disease, 2015, 3/1 71 72

STŘEVNÍ DISACARIDÁZA - LAKTÁZA DISACARID - LAKTÓZA JE YDROLYZOVÁN STŘEVNÍ DISACARIDÁZOU DIAGNOSTIKA LAKTÁZOVÉ INTOLERANCE ISTOCEMICKÝ PRŮKAZ AKTIVITY LAKTÁZY V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTU IMUNOISTOCEMICKÁ DETEKCE LAKTÁZA 73 AKTIVITA ENZYMU V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTU C 2 O C 2 O O O O O O 1 4 O O O O β-d-galactose α-d-glucose 74 MODERNÍ RAPID TEST DETEKCE AKTIVITY LAKTÁZY CROMOGENNÍ METODOU 75 FUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECOVÉ TESTY ELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEK 76 80 70 60 50 40 30 20 10 0 INCIDENCE A MORTALITA KOLOREKTÁLNÍO KARCINOMU V ČR na 100.000 1960 1970 1980 1990 2000 2010 INCIDENCE MORTALITA Epidemiologie nádorů České republiky http://www.svod.cz/ normální adenom progresivní lokalizovaný KRCA lymfatické KRCA jaterní sliznice adenom KRCA metastázy metastázy 10-15 let 2005 TESTY OKULNÍO KRVÁCENÍ VE STOLICI - FOBT/TOKS J Med Screen. 2002;9(3):99-103. Basic variables at different positivity thresholds of a quantitative immunochemical test for faecal occult blood. Castiglione G, Grazzini G, Miccinesi G, Rubeca T, Sani C, Turco P, Zappa M. qi-fobt - 3.generace 5 leté přežití (%) 1990 i-fobt - 2.generace 77 KRCA stádium: Dukes I-II Dukes III Dukes IV Proteomics of colorectal cancer: overview of discovery studies and identification of commonly identified cancer-associated proteins and candidate CRC serum markers. Jimenez CR, Knol JC, Meijer GA, Fijneman RJ. - J Proteomics. 2010;73:1873-1895 1975 78 g-fobt - 1.generace Schweiz Med Wochenschr. 1976 Feb 28;106(9):297 The hemoccult test in the screening for colonic carcinoma Deyhle P, Nüesch J, Kobler E, Jenny S, Säuberli.

FIT - KVALITATIVNÍ, RAPID TESTY ng b/ml 1600 ifobt - OC Micro - Eiken cut-off 75 ng/ml 697-1477 ng/ml mean 1087 ng/ml 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 25-45 ng/ml mean 35 ng/ml 140-263 ng/ml mean 202 ng/ml 315-654 ng/ml mean 485 ng/ml NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER 79 ŠIROKÁ NABÍDKA ifobt RAPID TESTŮ V ČESKÉ REPUBLICE 80 Levi Z.,Rozen P.,azazi R.,Vilkin A.,Waked A.,Maoz E.,Birkenfeld S.,Leshno M.,Niv Y. Ann Intern Med. 2007;146:244-255 A Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Test for Colorectal Neoplasia ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ LINÍKOVÝ UZÁVĚR PRO PERFORACI NÁSTŘIKOVOU JELOU VLOŽENÍ VZORKU STOLICE PERFORACE LINÍKOVÉ FÓLIE NÁSTŘIK 25 μl PRO ANALÝZU FILTRAČNÍ VLOŽKA SEPTUM DEFINUJÍCÍ MNOŽSTVÍ STOLICE KARTÁČEK PRO ODBĚR STOLICE IDENTIFIKAČNÍ ČÁROVÝ KÓD VZORKU 81 82 ELIMINACE NADBYTKU STOLICE TRANSFER 10 mg TRANSFER EXTRAKTU PŘES FILTR DO VZORKOVACÍ JAMKY i-fobt LABORATORNÍ & POCT ANALYZÁTORY FALEŠNÁ NEGATIVITA FIT TESTU OC-DIANA Eiken QuikRead Orion M-Jack Kyowa 4/24 4/14 18.1% 28.5% SmartPlus Eurolyser Senti FIT Sentinel SENTi-FIT Sentinel 83 i-chroma Boditech Kroma it Linear NS-Plus Alfresa Pharma 84 3/24 12.5% Falešná negativita FIT pod 15 μg/g cut-off hodnota doporučená komisí MZČR je ve VFN - 18,5% 21 karcinomů ze 1 (dg. do 1 roku po FIT) Při jednom testu je procento nezachycených karcinomů - 23.5% (20 μg/g) a 17.6% (15 μg/g) 10/53 18.8% Kelley L, Swan N, ughes DJ. - Colorectal Dis. 20 Sep; 15(9): e512-21 An analysis of the duplicate testing strategy of an Irish immunochemical FOBT colorectal cancer screening programme

http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm http://gelab.zde.cz ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm http://gelab.zde.cz http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ginet/index.htm http://gweb.zde.cz http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ge_atlas/ge_frames.htm http://geatlas.zde.cz http://www1.lf1.cuni.cz/ukb/lectures.htm 85 Medline on-line nejnovější publikace Přímý link na MZČR Národní číselník 86