LABORATORNÍ PŘÍRUČKA Transfuzní oddělení Laboratoř systému a PCR diagnostiky Účinnost od 15. 9. 2015 Verze č. 4 Tímto předpisem se ruší Verze č. 3, platnost od 1. 4. 2014 Odborný garant Jméno a příjmení, funkce Datum Podpis RNDr. Gabriela Červená, Ph.D. PharmDr. Jana Podzimková 11. 9. 2015 Zpracoval MUDr. Hana Jiroušová 9. 9. 2015 Přezkoumal MUDr. Vít Řeháček Hana Krejčí 10. 9. 2015 Schválil MUDr. Vít Řeháček 14. 9. 2015 Rozdělovník Jméno Funkce Počet MUDr. Hana Jiroušová Vedoucí jištění kvality 1 (originál) Trans P: 1 Intranet FN HK (Vnitřní předpisy) 1 Internet FN HK (www.fnhk.cz/ Dodavatelé a partneři/ Laboratorní příručky 1 Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 1 z 17
Obsah 1. Úvod...3 2. Základní informace o laboratoři...3 2.1. Identifikace laboratoře, důležité údaje a kontakty...3 2.2. Zaměření laboratoře...4 2.3. Organizace laboratoře a její vnitřní členění...4 2.4. Systém kontroly kvality (úroveň a stav akreditace pracoviště)...6 3. Pojmy a zkratky...6 4. Přehled prováděných vyšetření...7 5. Procesy před laboratorním vyšetřením...8 5.1. Manuál pro odběr biologického materiálu a doporučený odběrový systém...8 5.2. Požadavkové listy (žádanky)... 10 5.3. Ústní požadavky na vyšetření (dodatečná a opakovaná vyšetření)... 10 5.3.1. Požadavky na STATIM vyšetření... 11 5.4. Transport primárního vzorku... 11 5.5. Skladování vzorků... 11 6. Kritéria pro odmítnutí vadných (kolizních) primárních vzorků... 11 7. Uvolňování výsledků... 12 7.1. Výdej výsledků... 12 7.1.1. Typizace I. a II. třídy PCR SSP metodikou... 12 7.1.2. Typizace RHD variant a slabých D typů PCR SSP metodikou... 12 7.1.3. Telefonické vydávání výsledků... 13 7.2. Změny výsledků po jejich vydání (po uzavření výsledkového protokolu)... 13 7.2.1. Oprava identifikační části a oprava výsledkové části... 13 7.2.2. Zrušení žádanky... 14 7.3. Hlášení výsledků ve varovných (kritických) intervalech... 14 8. Způsoby řešení reklamací a stížností... 14 8.1. Reklamace... 14 8.2. Stížnosti... 14 8.3. Konzultační činnost laboratoře... 14 9. Přílohy... 14 10. Revize a změnové řízení... 16 Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 2 z 17
1. Úvod Cílem tohoto dokumentu je podání informace zdravotnickým pracovištím o laboratorních metodách, které zajišťuje laboratoř systému a PCR diagnostiky na Transfuzním oddělení Fakultní nemocnice v Hradci králové. Informace jsou zaměřeny jen na metody týkající se molekulárně genetického vyšetření laboratoře v oblasti identifikace erytrocytového RhD antigenu, tzn. kvalitativní (variantní antigen) a kvantitativní odchylky (slabý antigen) a typizace antigenního systému I. a II. třídy pro program orgánových transplantací. Laboratorní příručka je součástí řízené dokumentace a je pravidelně aktualizována. Laboratorní příručka pro laboratoř systému a PCR diagnostiky (č. 17) je v celém rozsahu dostupná žadatelům našich služeb na webových stránkách Fakultní nemocnice Hradec Králové: www.fnhk.cz - dodavatelé a partneři laboratorní příručky Laboratorní příručka laboratoře systému a PCR diagnostiky Intranet informace vnitřní předpisy laboratorní příručka 7.64 Laboratorní příručka laboratoře systému a PCR diagnostiky Transfuzní disk (P) Příručky TO 2. Základní informace o laboratoři 2.1. Identifikace laboratoře, důležité údaje a kontakty Laboratoř systému a PCR diagnostiky, nákladové středisko 6474 Vedoucí lékař MUDr. Řeháček Vít tel. 495 833445 laboratoře Zástupce vedoucího lékaře, vedoucí auditor, správce dokumentace Vedoucí laborantka, správce měřidel, přístrojový technik Odborný garant e-mail: rehacekv@lfhk.cuni.cz, vit.rehacek@fnhk.cz MUDr. Jiroušová Hana tel. 495 833992 e-mail: hana.jirousova@fnhk.cz Krejčí Hana tel. 495 832 301 e-mail: hana.krejci@fnhk.cz RNDr. Červená Gabriela, Ph.D. PharmDr. Jana Podzimková tel. 495 833 562 495 832 289 fax. 495 832 025 e-mail:gabriela.jamborova@fnhk.cz e-mail: podzimkovaj@lfhk.cuni.cz JOP VŠ Mgr. Synková Kamila tel. 495 833 562 fax. 495 832 025 e-mail: kamila.synkova@fnhk.cz Úseková laborantka Nováková Romana tel. 495 833 562 e-mail:romana.novakova2@fnhk.cz Zástupce Dagmar Nixová tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz Drešerová Zita tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz Kostková Václava tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz Zdravotní Radová Monika tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz laborantky Ivana Vaňková tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz Vavrušková Andrea tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz Bc. Tereza Chudobová tel. 495 833 562 e-mail: transhla@fnhk.cz Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 3 z 17
Adresa Vedoucí lékař TO Vedoucí jištění kvality TO (manažer kvality) Vedoucí lékař laboratorního úseku Vedoucí laborantka TO Transfuzní oddělení, Fakultní nemocnice, Sokolská 581, 500 05 Hradec Králové Nový Hradec Králové, IČO: 00179906 tel. 495 833 445 e-mail: rehacekv@lfhk.cuni.cz, MUDr. Řeháček Vít fax. 495 833 020 vit.rehacek@fnhk.cz MUDr. Jiroušová Hana MUDr. Řeháček Vít Krejčí Hana tel. 495 833 992 fax. 495 833 020 tel. 495 833 445 fax. 495 833 020 tel. 495 832 301 fax. 495 833 020 e-mail: hana.jirousova@fnhk.cz e-mail: rehacekv@lfhk.cuni.cz, vit.rehacek@fnhk.cz e-mail: hana.krejci@fnhk.cz 2.2. Zaměření laboratoře Laboratoř systému a PCR diagnostiky provádí stanovení typu vyšetřovaného jedince neboli typizaci, a to pomocí dvou metod - sérologicky a molekulárně geneticky. Sérologické vyšetření definuje antigeny, tj. molekuly exprimované na buněčných membránách a molekulárně genetické vyšetření určuje alely, tj. sekvence oligonukleotidů kódující antigeny. Principem sérologického vyšetření je mikrolymfocytotoxický test za použití panelu protilátek (soubor diagnostických sér pokrývajících spektrum známých specifit). Sérologicky se stanovují antigeny I. třídy (-A, -B, -C) a antigen -B27. Molekulárně genetické vyšetření systému se stanovuje pomocí polymerázové řetězové reakce za použití sekvenčně specifických primerů (PCR-SSP). Výsledek vyšetření je interpretován na úrovni nízkého rozlišení (low resolution). PCR SSP metodika slouží ke zjištění sekvence oligonukleotidů v DNA u konkrétní oblasti (lokus -A*, -B*, -DRB1*, DQB1*). Detekce a následné vyhodnocení PCR produktů se provádí elektroforeticky. Dále provádí vyšetření RHD genotypizace (D-Weak, D-Partial) metodou PCR SSP. 2.3. Organizace laboratoře a její vnitřní členění Laboratoř systému a PCR diagnostiky je součástí Transfuzního oddělení (budovy č. 19 a budova č.13) v areálu. Laboratoř se nachází v přízemní budově č.13 a má 2 místnosti. Provozní doba laboratoře č. 17: pondělí pátek: 7.00 15.30 Transplantační služba na telefon pondělí neděle: 15.30 7.00 Laboratoř slouží denně transplantační pohotovost na telefonu: 602 872 676 Po výzvě koordinátora pro orgánové transplantace (FN HK nebo KST Praha) si sloužící laborantka přichází pro odebrané vzorky osobně na určené místo. Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 4 z 17
ORGANIZAČNÍ SCHÉMA laboratoře systému a PCR diagnostiky Vedoucí laboratoře MUDr. Vít Řeháček Zástupce vedoucího laboratoře MUDr. Hana Jiroušová Oddělení zdravotnické techniky Metrolog FN HK Odborný garant RNDr. G. Červená, Ph.D. PharmDr. J. Podzimková Vedoucí jištění kvality MUDr. H. Jiroušová Vedoucí laborantka (správce měřidel, přístrojový technik) Hana Krejčí JOP VŠ Mgr. K. Synková (předatestační příprava) Vedoucí jištění kvality, manažer kvality, správce dokumentace, vedoucí auditor MUDr. H. Jiroušová Úseková laborantka R. Nováková Auditor Zástupce úsekové laborantky D. Nixová Zdravotní laborantky Bc. Chudobová, Radová, Drešerová, Kostková, Vaňková, Vavrušková Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 5 z 17
2.4. Systém kontroly kvality (úroveň a stav akreditace pracoviště) Pracoviště je součástí FNHK, která získala v roce 2008 Certifikát o Akreditaci od SAK ČR Od roku 2002 je Transfuzní oddělení držitelem Certifikátu v systému řízení kvality ČSN EN ISO 9001 : 2000, od roku 2009 pak ČSN EN ISO 9001:2008 Laboratoř získala Osvědčení o úspěšném splnění podmínek AUDIT I. NASKL ČSL JEP (2009, 2011) a AUDIT II. NASKL (2013). Laboratoř systému a PCR diagnostiky získala akreditaci ČIA pro laboratorní metody PCR (17. 5. 2013). 3. Pojmy a zkratky CET ČR ČSN DNA EHK EN ISO IČZ IKK ISTO JOP VŠ MZ PC PCR SM SJ SOP SSP SÚKL VŠ TBSDR TO Continuing Education and Training, testování kontroly kvality Česká republika Česká soustava norem Deoxyribonukleová kyselina Externí hodnocení kvality Mezinárodní organizace pro standardizaci Human Leukocyte Antigen (Hlavní histokompatibilní systém člověka) Identifikační číslo zařízení Interní kontrola kvality Informační systém transfuzního oddělení Jiný odborný vysokoškolský pracovník Ministerstvo zdravotnictví Personál computer (osobní počítač) Polymerase Chain Reaction (polymerázová řetězová reakce) směrnice Směrnice jakosti Standardní operační postup Sequence Specific Primers (sekvenčně specifické primery) Státní ústav pro kontrolu léčiv Vysokoškolský pracovník Trombocyty směsné, deleukotizované z buffy-coatu, v resuspenzním roztoku SSP+ Transfuzní oddělení Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 6 z 17
4. Přehled prováděných vyšetření IMUNOLOGIE pro orgánové transplantace: SOP II.3.8.21. Typizace genů systému metodou PCR SSP Princip metody: PCR SSP metodika slouží ke zjištění sekvence oligonukleotidů v DNA pacienta na konkrétní oblasti (-A*, -B*, -DRB1* či DQB1*). Prvním krokem je cílená amplifikace (PCR reakce) vyšetřovaného vzorku DNA pomocí DNA polymerázy za použití směsi sekvenčně specifických primerů, které jsou součástí firemního kitu. Druhým krokem je separace získaných amplikonů DNA (o různé velikosti) v elektrickém poli pomocí elektroforézy a barviva ethidium bromidu. Posledním krokem je identifikace velikosti amplikonů po UV ozáření gelu a interpretace výsledku pomocí odečítacího diagramu či aktuální verze PC softwaru. Indikační oblast: transplantační program (transplantace ledvin a kostní dřeně), příbuzenské transplantace kostní dřeně, IKK a EHK. IMUNOHEMATOLOGIE pro genotypizaci RHD (kvalitativní a kvantitativní odchylky): SOP II. 3.8.22. Typizace RHD variant (Partial D-TYPE) a slabých D typů (WEAK D- TYPE) PCR SSP. Princip metody: prvním krokem je cílená amplifikace (PCR reakce) vyšetřovaného vzorku DNA pomocí DNA polymerázy za použití směsi sekvenčně specifických primerů, které jsou součástí firemního kitu. Druhým krokem je separace získaných amplikonů DNA (o různé velikosti) v elektrickém poli pomocí elektroforézy a barviva etidium bromidu. Posledním krokem je identifikace velikosti amplikonů po UV ozáření gelu a interpretace výsledku pomocí odečítacího diagramu či aktuální verze PC softwaru. Indikační oblast -vyšetření se provádí u dárců krve a krevních složek, novorozenců, těhotných žena a pacientů v případě diskrepantního výsledku vyšetření získaného sérologickou metodikou. IMUNOLOGIE pro genotypizaci systémů asociovaných s chorobami metodou PCR SSP: SOP II 3.8.23 Typizace genů systému asociovaných s chorobami metodou PCR SSP. Princip metody: PCR SSP metodika slouží ke zjištění sekvence oligonukleotidů v DNA pacienta na konkrétní oblasti (-A*, -B*, -DRB1* či DQB1*). Prvním krokem je cílená amplifikace (PCR reakce) vyšetřovaného vzorku DNA pomocí DNA polymerázy za použití směsi sekvenčně specifických primerů, které jsou součástí firemního kitu. Druhým krokem je separace získaných amplikonů DNA (o různé velikosti) v elektrickém poli pomocí elektroforézy a barviva ethidium bromidu. Posledním krokem je identifikace velikosti amplikonů po UV ozáření gelu a interpretace výsledku pomocí odečítacího diagramu či aktuální verze PC softwaru. Indikační oblast: Vyšetření predispozičních alel pro autoimunitní onemocnění. Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 7 z 17
5. Procesy před laboratorním vyšetřením 5.1. Manuál pro odběr biologického materiálu a doporučený odběrový systém Vyšetření systému sérologickou a/nebo PCR metodou Typ laboratorní metody (vyšetření) Laboratoř Primární vzorek Poznámka Protilátky antileukocytové, antitrombocytové 5 ml srážlivé žilní krve nebo 2 ml séra zkumavka bez protisrážlivého činidla dle firemního typu včetně gelové systém I.třídy lokus A, B, C sérologicky B27 antigen sérologicky (sérologická laboratoř) 5 ml nesrážlivé žilní krve, nebo lymfocytární suspenze ze sleziny či uzliny 5 ml nesrážlivé žilní krve heparinum natrium dle firemního typu zkumavky heparinum natrium dle firemního typu zkumavky CM test (cross-match) 5 ml nesrážlivé žilní krve 5 ml srážlivé žilní krve heparinum natrium dle firemního typu zkumavky systém I. a II. třídy PCR metodou 5 ml nesrážlivé žilní krve EDTA, dle firemního typu zkumavky Typizace RHD weak/varianty (PCR laboratoř) 5 ml nesrážlivé žilní krve EDTA, dle firemního typu zkumavky Celiakie (typizace DQ2, DQ8) 5 ml nesrážlivé žilní krve EDTA, dle firemního typu zkumavky Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 8 z 17
Časová odezva Typ laboratorní metody (vyšetření) Laboratoř Časová odezva Vyšetření mimo pracovní dobu Vyšetření STATIM Protilátky antileukocytové antitrombocytové systém I. třídy lokus - A, B, C (sérologicky) -B27 (sérologicky) CM test (cross-match) systém I. a II. třídy oblast - A*, B*, DRB1* DQB1* metodou PCR systém I. a II. třídy oblast - A*, B*, DRB1*, DQB1* metodou PCR Typizace RHD variant a slabých D typů metodou PCR Celiakie, typizace DQ2, DQ8 metodou PCR (sérologická laboratoř) (sérologická laboratoř) (sérologická laboratoř) (sérologická laboratoř) (PCR laboratoř) (PCR laboratoř) (PCR laboratoř) (PCR laboratoř) 2 týdny ne ne 5 hod. pro transplantační program ne 5 hod. ne ne 4 hod. 6 hod. transplantační program transplantační program transplantační program (aktuální cross match) ano transplantační program kadaverozní dárce 6 hod. ne ne 6 hod. ne ano 4 hod. ne ne Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 9 z 17
Odběrové systémy pro vyšetření a množství vzorku Laboratoř /PCR Vyšetření Zkumavka VACUTAINER Množství žilní krve I. třída ZELENÁ / Heparin 5 ml -B27 ZELENÁ / Heparin 5 ml sérologicky Antileukocytové protilátky Antitrombocytové protilátky ČERVENÁ / bez protisrážlivého činidla ČERVENÁ / bez protisrážlivého činidla 5 ml 5 ml PCR CM test cross match I. třída A,B II. třída DR, DQ Typizace RHD variant a slabých D typů Typizace DQ2, DQ8 ZELENÁ / Heparin (od dárce) ČERVENÁ / bez protisrážlivého činidla (od příjemce) RŮŽOVÁ / K 2 EDTA FIALOVÁ / K 3 EDTA RŮŽOVÁ / K 2 EDTA FIALOVÁ / K 3 EDTA RŮŽOVÁ / K 2 EDTA FIALOVÁ / K 3 EDTA RŮŽOVÁ / K 2 EDTA FIALOVÁ / K 3 EDTA 2x 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5 ml 5.2. Požadavkové listy (žádanky) - název, adresu a IČZ zdravotnického zařízení žadatele - jméno a příjmení pacienta - rodné číslo pacienta - zdravotní pojišťovnu pacienta - diagnózu nemoci - žádost o vyšetření - datum odběru vzorku - odebraný materiál (typ vzorku) - podpis odesílajícího lékaře 5.3. Ústní požadavky na vyšetření (dodatečná a opakovaná vyšetření) Ústní nebo telefonické požadavky na dodatečná vyšetření jsou akceptovány pouze po konzultaci mezi odesílajícím lékařem a pracovníkem laboratoře s vysokoškolským vzděláním v oboru Hematologie a transfuzní lékařství. Podmínkou dodatečného vyšetření je správně odebraný, ještě stabilní vzorek v dostatečném množství. Přijatý dodatečný požadavek je zaevidován a proveden. Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 10 z 17
5.3.1. Požadavky na STATIM vyšetření Požadavky na STATIM (urgentní vyšetření) jsou určeny pouze pro genotypizaci RHD odchylku: - dárců krve a krevních složek (při výrobě TBSDR) - u rodiček těsně po porodu RhD pozitivního plodu (aplikace profylaxe do 72 hodin po porodu) 5.4. Transport primárního vzorku Vzorky pro PCR diagnostiku je třeba dodat v pracovní době do 9.00 hodin do přízemí budovy č. 19 (laboratoř expedice transfuzních přípravků s nepřetržitým provozem 24 hodin), kde je vzorek vložen do označeného stojanu pro laboratoř č. 17, na žádance je zaznamenán čas + datum doručení vzorku. Po telefonické výzvě si osobně přichází odpovědná osoba laboratoře č. 17 pro materiál, který přijímá ke zpracování. 5.5. Skladování vzorků a) primární vzorky se skladují v chladnici při teplotě +2 C až +8 C po odběru se musí dopravit nejlépe do 9.00 hodin do laboratoře, pokud nelze jinak a odebraný vzorek bude doručen do laboratoře až následující den, je třeba uchovávat vzorek v chladnici při teplotě +2 C až +8 C, při které je stabilita primárního vzorku 7 dní b) izolovaná DNA v označené PCR mikrozkumavce se skladuje v mrazícím boxu při teplotě < - 20 C + 5 C. 6. Kritéria pro odmítnutí vadných (kolizních) primárních vzorků Identifikační označení primárního vzorku - Správně zvolená zkumavka pro požadované vyšetření - Zkumavka uzavřená uzávěrem (dle typu firemní zkumavky) - Zkumavka nepotřísněná biologickým materiálem (krví) - Číselný kód vyšetření na TO nesmí překrývat štítek na zkumavce z oddělení SPRÁVNĚ OZNAČENÝ VZOREK Na štítku uveďte tyto údaje jednoznačně identifikující vyšetřovaného v souladu s údaji na žádance: 1. dárce : číselný kód dárce s číslem odběru (pro dárce krve) 2. pacient: jméno pacienta datum (den, měsíc, rok) narození datum odběru vzorku Vzorek krve nesmí být hemolytický! Vyšetřují se jen správně označené vzorky! Chybně označený vzorek a vzorky nesplňující požadavky na standardní značení a odběr nelze vyšetřit (rozbití zkumavky, potřísněný biologickým materiálem, nedostatečné množství materiálu, neoprávněný požadavek, znehodnocený vzorek), vzorky se zlikvidují na TO dle platných vnitřních předpisů směrnice FN SM_05 Nakládání s odpady a nutně musí být vyžádán odběr nového vzorku dle požadavků standardního značení. Zacházení s tzv. vzácnými (jedinečnými) vzorky viz Metodický pokyn č. 04/09 Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 11 z 17
Požadavek na zaslání nového vzorku k vyšetření vyřizuje v pracovní době laborantka přijímající materiál k vyšetření telefonickou domluvou s žadatelem o vyšetření. - provede záznam na zaslanou žádanku jméno kontaktní osoby na oddělení, které byl požadavek předán, a čas telefonického oznámení požadavku - provede záznam do deníku Neakceptovatelné vzorky. Odmítnout lze tyto případy: žádanku o vyšetření, kde chybí nebo jsou nečitelné základní údaje, které nelze telefonicky doplnit a ověřit žádanku o vyšetření nebo zkumavku potřísněnou biologickým materiálem nedostatečné množství materiálu způsobené chybným odběrem, rozlitím, rozbitím odběrové nádoby chybně nebo nedostatečně označený primární vzorek chybně odebraný primární vzorek (jiná, než doporučená odběrová nádoba, jiný protisrážlivý roztok, sražený, hemolytický primární vzorek) 7. Uvolňování výsledků 7.1. Výdej výsledků Výsledek vyšetření v rámci denního programu je vydán do 6 hodin po zahájení vyšetření. 7.1.1. Typizace I. a II. třídy PCR SSP metodikou Kniha pracovních záznamů (PCR laboratoř - izolace DNA). Datum a číselný kód vzorku, jméno, příjmení, rodné číslo, zdravotní pojišťovna pacienta, lékař požadující vyšetření, podpis pracovníka provádějícího vyšetření. PCR protokol (příprava Master Mixu, amplifikace DNA). Číselný kód vzorku, datum, podpis pracovníka provádějícího vyšetření, komentář, jméno, příjmení, RČ, ZP pacienta, komentář, podpis, Lot polymerázy a délkového standardu Pracovní protokol (Worksheet). Jméno, příjmení, RČ, číselný kód vzorku, diagnóza, datum, podpis pracovníka provádějícího vyšetření a podpis zodpovědného VŠ pracovníka, výsledek vyšetření, fotografie gelu. Konkrétní tabulka pro interpretaci výsledků popř. aktuální verze PC softwaru Specifikační tabulka Databáze fotografií v PC (Dokumenty Foto elfo). Dokumentace výsledků, zápis do databáze ISTO v PC; odeslání výsledků v písemné formě poštou. Pravidla pro sdělování výsledků viz. SJ 5.8./15189 7.1.2. Typizace RHD variant a slabých D typů PCR SSP metodikou Kniha pracovních záznamů (PCR laboratoř - izolace DNA). Datum a číselný kód vzorku, jméno, příjmení, RČ, ZP pacienta, lékař požadující vyšetření, podpis pracovníka provádějícího vyšetření. Pracovní protokol (Worksheet) včetně vyhodnocovacího diagramu. Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 12 z 17
Jméno, příjmení, RČ, číselný kód vzorku, diagnóza, datum, podpis pracovníka provádějícího vyšetření a podpis zodpovědného VŠ pracovníka, výsledek vyšetření, fotografie gelu (viz příloha). Konkrétní tabulka pro interpretaci výsledků součástí pracovního protokolu Databáze fotografií v PC (Dokumenty Výsledky SSP FOTO D Weak a D Varianta). Dokumentace výsledků, zápis do databáze ISTO v PC; odeslání výsledků v písemné formě poštou. Pravidla pro sdělování výsledků viz.sj 5.8./15 189 7.1.3. Telefonické vydávání výsledků Viz. Metodický pokyn ke SJ 5.8./15189 SDĚLOVÁNÍ systému a PCR diagnostiky VÝSLEDKŮ laboratoř Výsledky vyšetření se telefonicky pacientům nesdělují. Telefonické sdělování výsledků vyšetření je pouze v rámci FNHK: Porodnická a gynekologická klinika Koordinátorka transplantačního centra IV. Interní hematologické kliniky FNHK (Karolína Doskočilová) Koordinátorka transplantačního centra urologické kliniky FNHK (Malgorzata Grofová) KST Praha (Koordinační středisko transplantací Praha) Výsledky vyšetření z laboratoře systému a PCR diagnostiky z transplantační služby se odesílají pomocí elektronického komunikačního systému TRINIS. V případě selhání systému lze sdělit výsledky vyšetření faxem, vytištěné potvrzení o odeslání zprávy faxem obsahuje datum, čas, příjemce výsledků, odesílatele výsledků, počet stran výsledků. Zakládá se k dokumentaci dárce. Sdělované výsledky genotypizace: systém I. a II. třídy (A *, B *, DRB1*, DQB1*) genotypizace RHD odchylek (D weak/varianta) Pravidla pro sdělování výsledků: nabídka pro volajícího - odeslat OPIS výsledku vyšetření odeslat e-mailem: transexp@fnhk.cz, transhla@fnhk.cz Zodpovědnost za sdělování výsledků vyšetření : JOP VŠ laboratoře systému a PCR diagnostiky: Mgr. K. Synková, RNDr. G. Červená, Ph.D. Pověřená osoba konající transplantační službu: úseková laborantka R. Nováková, Ivana Vaňková, M. Radová, Z. Drešerová, A. Vavrušková, D. Nixová, V. Kostková, Bc. T. Chudobová Kvalifikovaná osoba TO: MUDr. V. Řeháček, MUDr. H. Jiroušová, MUDr. J. Černohorská 7.2. Změny výsledků po jejich vydání (po uzavření výsledkového protokolu) 7.2.1. Oprava identifikační části a oprava výsledkové části Opravy v identifikační a výsledkové části jsou evidovány v protokolu Změna zprávy: a) odpovědná osoba provede opravu v textu v databázi PC b) vytiskne opravený (správný) výsledek vyšetření Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 13 z 17
Kód pojišťovna odbornost Transfuzní oddělení c) provede kontrolu správnosti spolu s druhou osobou (viz výše) d) zaznamená opravu výsledku do protokolu Změna zprávy : datum, čas, číslo vyšetření, jmenovka + podpis, poznámka e) původní zprávu označí: datum, OPRAVA výsledku, jmenovka + podpis f) v textu podtrhne slovo, větu, číslo..., které bylo opraveno. Výsledky, které byly propuštěny mimo TO, musí být označeny jako neshoda závažná, a musí být zaznamenány do karty neshod, případně nahlášeny jako nežádoucí událost. O neshodě musí být neprodleně informován žadatel, kterému je ihned po opravě odeslán nový výsledkový list se správnými údaji. 7.2.2. Zrušení žádanky Zrušení žádanky žadatelem po telefonické domluvě Zrušení žádanky z důvodu velký neshod v základních údajích telefonická žádost o vydání nové žádanky, provedeme záznam do listu chybová hlášení 7.3. Hlášení výsledků ve varovných (kritických) intervalech Platí pro ostatní laboratoře TO, pro laboratoř (č. 17) systému a PCR diagnostiky je pouze povinnost STATIM vyšetření genotypizace RHD od rodiček po porodu, kdy je rozhodující interval pro podání profylaktického anti-d gamaglobulinu do 72 hodin po porodu RhD pozitivního plodu RhD negativní matce. Platí zde pouze povinné hlášení výsledku vyšetření (v nutném případě i telefonicky). 8. Způsoby řešení reklamací a stížností 8.1. Reklamace Reklamace jsou řešeny individuálně telefonicky nebo e-mailem. 8.2. Stížnosti Ve Fakultní nemocnici v Hradci Králové přijímá stížnosti, podněty a oznámení, eviduje a zajišťuje jejich interpretaci a včasné vyřízení odbor řízení kvality a kontroly podle směrnice SM _46 FN HK Postup pro vyřizování stížností. 8.3. Konzultační činnost laboratoře V problematice imunologie transplantací a imunohematologie pro genotypizaci RHD antigenu v souvislosti s výsledky vyšetření podává MUDr. Vít Řeháček nebo jeho zástupce. Otázky ohledně organizace laboratoře, laboratorních metod a organizace odběru vzorků mohou podávat vysokoškolsky vzdělaní pracovníci laboratoře. Laboratorní výkony a účtované kódy pro pojišťovny: 1 Izolace a uchování lidské DNA (RNA) 94119 222/818 2 Fotografie gelu 94191 222/818 3 Elektroforéza nukleových kyselin 94193 222/818 4 Amplifikace metodou PCR 94199 222/818 9. Přílohy Příloha č. 1 Žádanka o vyšetření Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 14 z 17
Příloha č. 1 Žádanka o vyšetření Laboratoř systému a PCR diagnostiky Zdravotnická laboratoř č.8267 akreditovaná ČIA dle ČSN EN ISO 15189:2007 Fakultní nemocnice, Sokolská 581, 500 05 Hradec Králové - Nový Hradec Králové Vedoucí laboratoře: MUDr. Vít Řeháček, tel.:495833445, e-mail: vit.rehacek@fnhk.cz Kontakt : RNDr. G. Jamborová, Ph.D., Mgr. K. Synková, tel.: +420 495833562, fax: +420 495 832 025, e-mail: transhla@fnhk.cz Jméno a příjmení pacienta: Rodné číslo: Kód pojišťovny: Diagnóza: ŽÁDANKA O VYŠETŘENÍ Datum a čas odběru vzorku: Ordinující lékař (jméno, adresa, razítko a podpis): IČP: Odbornost: tel./fax/e-mail: Požadavky na vyšetření (zaškrtněte prosím požadované vyšetření) název vyšetření metoda požadavek na vzorek B27 (sérologická typizace) 5 ml/ heparin A,-B,-Cw (sérologická typizace antigenů I. třídy) 5 ml/ heparin DQ2, DQ8 (PCR-SSP genotypizace - celiakie) 5 ml/ K 3 EDTA (MCT) 2-3 ml séra (srážlivá krev) (Capture-P) 2-3 ml séra (srážlivá krev) -match test (MCT) 5 ml/ heparin (dárce) 2-3 ml séra (příjemce) A*, B*, DRB1* (PCR-SSP genotypizace genů I. a II. třídy) 5 ml/ K 3 EDTA DRB1* (PCR-SSP genotypizace genů II. třídy) 5 ml/ K 3 EDTA Weak, Partial D-Type (PCR-SSP RHD genotypizace) 5 ml/ K 3 EDTA akreditovaná metoda ČIA Vyšetření příbuzných pacienta indikovaného k transplantaci: Jméno a příjmení : Rodné číslo: Vztah k pacientovi: Poznámka: Odběr primárního vzorku (izolace DNA) byl proveden s informovaným souhlasem pacienta a dle pokynů laboratorní příručky (www.fnhk.cz) Zkratky: Capture-P ČIA MCT PCR-SSP RHD Weak D-Type Partial D-Type Vyplňuje laboratoř: detekce protilátek proti trombocytům metodou pevné fáze český institut pro akreditaci mikrolymfocytotoxický test polymerázová řetězová reakce se sekvenčně specifickými primery gen RH systému slabý D antigen variantní D antigen Číslo vyšetření:.datum a čas přijetí vzorku:.. Převzal a přezkoumal: Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 15 z 17
10. Revize a změnové řízení Aktualizace dokumentu dle potřeby, revize se řídí SJ 4.2.3/ 01 Řízení dokumentů na TO FN HK. 1. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: 2. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: 3. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: 4. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 16 z 17
5. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: 6. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: 7. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: 8. Revize dne: Záznam o změně: Provedl: Schválil: Laboratorní příručka_ verze č. 4 _ platnost od 15. 9. 2015 Strana 17 z 17