NÁLEZ DVOJITĚ POZITIVNÍCH T LYMFOCYTŮ - CO TO MŮŽE ZNAMENAT? Ondřej Souček Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice Hradec Králové
LEUKÉMIE x LYMFOM Nádorová onemocnění buněk krvetvorné tkáně LEUKÉMIE postihují kostní dřeň a infiltrují i periferní krev a de facto celý organismus Může tvořit tumorózní léze mimo KD LYMFOMY vychází z lymfocytů a postihují lymfatické uzliny a tkáně Mohou se leukemizovat
JAK NA BLASTIČNOST LYMFOCYTŮ? Diagnosis and treatment in leukaemia, Pasweg J.R. 2011 https://www.slideshare.net/esoslides/jakob-r-passweg
B LYMFOCYTY Classification of lymphoid neoplasms: the microscope as a tool for disease discovery, Blood 2008 112:4384-4399
T LYMFOCYTY Classification of lymphoid neoplasms: the microscope as a tool for disease discovery, Blood 2008 112:4384-4399
FENOTYPOVÉ ABNORMALITY T LYMFOCYTŮ Identifikace klonálních T lymfocytů je nepřímá a obtížná vzhledem k absenci molekuly, která by poukazovala na nádorový původ buněk Standardní fenotyp nevylučuje maligní původ buněk, naopak určité fenotypové abnormality nemusí svědčit pro klonalitu buněk
FENOTYPOVÉ ABNORMALITY T LYMFOCYTŮ Slabá exprese či abscence pan T-lymfoidních molekul (CD2, CD3, CD5, CD7) Abnormální exprese či poměr znaků CD4 / CD8 Ztráta či aberantní exprese TCR řetězců Slabá exprese či negativita znaku CD45 Výlučná exprese určité izoformy znaku CD45 Abnormální parametry SSC / FSC Koexprese molekul typických pro myeloidní řadu či B lymfocyty nebo NK buňky
Pan Ondřej L. *1990 V 1/2017 přijat pro susp. na ALL SP:
MORFOLOGICKÝ NÁLEZ KD PK
NÁLEZ fyziologické T lymfocyty nádorová populace T lymfocytů cca 87% buněk T-lymfoidního původu nejasného stáří CD34-, ccd3+, scd3-/+, CD4+, CD8+
FENOTYP CD2+ CD4+ CD5+ CD7+ CD8+ CD27+/- CD38+ CD43+ CD45-RO+
STÁŘÍ BUNĚK? fyziologické T lymfocyty nádorová populace T lymfocytů ALL? CD34-, CD45 v silné densitě, exprese CD45-RO (typická izoforma pro aktivované a paměťové T lymfocyty) NHL? chybí silná povrchová exprese znaku CD3, absence TCR (αβ i γδ)
CD45 CD45 Characterization and Isoforms, Bio-Rad https://www.bio-rad-antibodies.com/cd45-characterization-isoforms-structure-function-antibodies-minireview.html
STÁŘÍ BUNĚK? Zásadní pro určení stáří nakonec exprese molekuly CD1a Výsledný imunofenotyp odpovídá dg. kortikální T-ALL CD1a patří do rodiny molekul CD1 Molekula patřící mezi MHC typu I. Exprese na kortikálních thymocytech, nikoliv na zralých T buňkách
IMUNOFENOTYPICKÁ KLASIFIKACE ALL DLE EGIL Akutní lymfoblastická leukémie dospělých, Postgraduální medicína 03/2011, 278-285
ZÁVĚR Vyšetření KD prokázalo přítomnost abnormálních buněk T-lymfoidního původu (cca 87%) Exprese molekul CD45+, CD1a+, souběžná exprese molekul CD4 a CD8, absence TCR a silně vyjádřené povrchové molekuly CD3 svědčí pro dg. kortikální T-ALL
Pan Jiří V. *1954 Od r. 2012 perzistující lymfocytóza s nálezem fenotypově abnormálních T lymfocytů PK:
MORFOLOGICKÝ NÁLEZ PK PK
NÁLEZ 79% fenotypově abnormální T lymfocyty Exprese pan T-lymfoidních markerů zachována: CD3+, CD2+, CD5+, CD7+ Výlučná exprese izoformy enzymu CD45 RA
CD45 CD45 Characterization and Isoforms, Bio-Rad https://www.bio-rad-antibodies.com/cd45-characterization-isoforms-structure-function-antibodies-minireview.html
NÁLEZ cytotoxické T lymfocyty nádorová populace T lymfocytů Susp. buňky dvojitě pozitivní CD4+/CD8+ CD1a-
NÁLEZ Koexprese znaků NK buněk CD11b, CD56 a CD57 (CD16-)
ZÁVĚR V PK cca 79% susp. T lymfocytů s abnormálním fenotypem: CD4+/CD8+ a koexpresí znaků NK buněk DP fenotyp u T-NHL je málo častý, může svědčit nejčastěji pro T-PLL či v kontextu exprese NK znaků pro vzácný případ DP T-LGL, event. ATLL
T-NHL CD3- fyziologické T lymfocyty nádorová populace T lymfocytů
POUČENÍ Povrchová exprese CD3 může být přítomna na ALL buňkách, naopak může chybět na buňkách lymfomu Exprimovaná izoforma znaku CD45 nemusí jednoznačně definovat stáří buněk Mohou pomoci určité znaky: CD1a, CD90, CD99, CD30 či současná exprese myeloidních či B / NK lymfoidních znaků Důležitá konzultace s lékařem, korelace s hematologickým a patologickým nálezem
DĚKUJI ZA POZORNOST!