AIA-PACK TgAb. Rev. 04/09 POTŘEBNÉ MATERIÁLY, KTERÉ NEJSOU SOUČÁSTÍ DODÁVKY ÚČEL POUŽITÍ SOUHRN A VYSVĚTLENÍ PRINCIP STANOVENÍ DODÁVANÝ MATERIÁL

Transkript

1 Rev. 04/09 Upozornění: Tento návod k použití je v souladu se směrnicí IVD 98/79/ES a je určen pro zákazníky z členských států Evropské unie. ÚČEL POUŽITÍ AIA-PACK TgAb AIA-PACK TgAb je určen pouze pro diagnostické použití in vitro ke kvantitativnímu měření antithyreoglobulinových protilátek (TgAb) v lidském séru nebo heparinizované plazmě na analyzátorech systému Tosoh AIA. SOUHRN A VYSVĚTLENÍ Protilátky štítné žlázy, zejména antimikrosomální a antithyreoglobulinové protilátky (TgAb), jsou ukazatelem souvisejícím s autoimunitními onemocněními štítné žlázy, jako například Gravesova a Hashimotova choroba (1). Avšak testy na TgAb jsou někdy pozitivní u jiných autoimunitních onemocnění než těch, které postihují štítnou žlázu, a tak specificita TgAb pro dané onemocnění není jasná (2,3). Thyreoglobulin (Tg) je protein, který má molekulární hmotnost okolo 660 kda. Je produkován buňkami štítné žlázy a je základní součástí koloidu obsaženého ve folikulárních buňkách štítné žlázy. Tg má důležitou úlohu v produkci a ochraně hormonů štítné žlázy. Přestože byly TgAb konvenčně analyzovány semikvantitativními metodami nepřímé aglutinace, byly vyvinuty vysoce senzitivní kvantitativní metody, jako například metody RIA a EIA (4 9). AIA-PACK TgAb je činidlo enzymové imunoanalýzy k měření koncentrací TgAb v lidském séru nebo heparinizované plazmě pomocí zrn potažených Tg antigenem a myší monoklonální protilátkou proti lidské IgG označenou alkalickou fosfatázou. PRINCIP STANOVENÍ ST AIA-PACK TgAb je dvoumístná imunoenzymometrická analýza, která je celá prováděná v testovacích kelímcích AIA-PACK TgAb. TgAb přítomný v testovaném vzorku se váže na Tg antigen imobilizovaný na magnetických zrnech v AIA PACK TgAb. Magnetická zrna jsou promývána, aby se odstranily nenavázané materiály a poté jsou inkubována s enzymem značenou myší monoklonální protilátkou proti lidské IgG protilátce. Magnetická zrna jsou promytím zbavena nenavázaných, enzymem značených monoklonálních protilátek a jsou pak inkubována s fluorogenním substrátem, 4-methylumbeliferylfosfátem (4MUP). Množství enzymem značených monoklonálních protilátek, které se vážou na zrna, je přímo úměrné koncentraci TgAb v testovaném vzorku. Je vynesena standardní křivka a neznámé koncentrace vzorků jsou vypočítány pomocí této křivky. DODÁVANÝ MATERIÁL Katalogové č zásobníků x 20 testovacích kelímků AIA-PACK TgAb CUP 5 lahviček x 5 ml AIA-PACK TgAb CONJUGATE Plastové testovací kelímky obsahují dvanáct lyofylizovaných magnetických zrn potažených Tg antigenem (AIA-PACK TgAb CUP) a lahvičky obsahující tekutou myší monoklonální protilátku proti lidské IgG konjugovanou hovězí alkalickou fosfatázou s azidem sodným jako konzervační látkou (AIA-PACK TgAb CONJUGATE). POTŘEBNÉ MATERIÁLY, KTERÉ NEJSOU SOUČÁSTÍ DODÁVKY Následující materiály jsou vyžadovány k provedení TgAb analýzy pomocí AIA-PACK TgAb (Kat. č ) na analyzátorech systému Tosoh AIA. Následující materiály společnost Tosoh dodává samostatně. Materiály Kat. č. AIA-1200 XL AIA AIA Nex IA nebo AIA AIA Nex IA nebo AIA-21 LA AIA-1800 ST AIA-1800 LA AIA-2000 ST AIA-2000 LA AIA-600 II AIA-600 II BCR AIA-PACK SUBSTRATE SET (pouze pro řady AIA-1200 nebo AIA-600) AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT / AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT AIA-PACK SUBSTRATE SET II (pro analyzátory systému TOSOH AIA s výjimkou řad AIA-1200 a AIA-600) AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II / AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II AIA-PACK TgAb CONJUGATE AIA-PACK TgAb CALIBRATOR SET CALIBRATOR (1) 0 IU/ml CALIBRATOR (2) 2 IU/ml (přibližně) CALIBRATOR (3) 4 IU/ml (přibližně) CALIBRATOR (4) 10 IU/ml (přibližně) CALIBRATOR (5) 20 IU/ml (přibližně) CALIBRATOR (6) 43 IU/ml (přibližně) AIA-PACK TgAb CONTROL SET CONTROL LEVEL 1 4 IU/ml (přibližně) CONTROL LEVEL 2 20 IU/ml (přibližně) AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP Další požadavky pouze pro řady AIA-1200: AIA-1200 ŠPIČKY PIPET AIA-PACK AIA-1200 DETECTOR STANDARDIZATION SOLUTION Další požadavky pouze pro AIA-600: KELÍMKY NA VZORKY Další požadavky pro AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800 a AIA-2000: KELÍMKY NA VZORKY AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Další požadavky pouze pro AIA Nex IA/AIA-21: PIPETOVACÍ ŠPIČKY PŘEDEM VLOŽENÉ ŠPIČKY PRO PIPETU

2 Další požadavky pro AIA-600 II, AIA-1800 a AIA-2000: PIPETOVACÍ ŠPIČKY STOJAN NA PIPETY PŘEDEM VLOŽENÉ ŠPIČKY PRO PIPETU Používejte pouze materiály dodané společností Tosoh. Nepoužívejte náhradní materiály získané z jiných zdrojů, protože výkonnost testu je charakterizována přísně na základě materiálů společnosti Tosoh. VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ 1. AIA-PACK TgAb je určen pouze pro diagnostické použití in vitro. 2. V rámci jednoho zásobníku nemíchejte testovací kelímky různých šarží nebo různých testů. 3. Různé šarže AIA-PACK TgAb CONJUGATE nesmí být smíchány. Test AIA-PACK TgAb musí být prováděn s použitím konjugátu a testových kelímků stejné šarže a ne s testovými kelímky jiné šarže. 4. AIA-PACK TgAb obsahuje azid sodný, který může reagovat s olověným nebo měděným potrubím za vzniku potenciálně výbušných azidů kovu. Při likvidaci těchto činidel do kanalizace je vždy spláchněte velkým množstvím vody, aby nedocházelo k hromadění azidu. 5. Lidský biologický materiál užívaný při přípravě tohoto produktu byl testován metodami schválenými FDA s negativními výsledky pro přítomnost HBsAg a protilátek proti HIV-1 a HCV. Protože žádná testovací metoda neposkytuje absolutní jistotu, že produkty z lidské krve nemohou přenášet infekční agens, je doporučeno zacházet s tímto produktem se stejnými bezpečnostními opatřeními jako se vzorky pacientů. 6. AIA-PACK TgAb CONJUGATE se skládá z myší monoklonální protilátky proti lidské IgG označené alkalickou fosfatázou, která způsobuje nižší aktivitu protilátky při kontaktu s lidským sérem nebo plazmou. 7. Nepoužívejte po uplynutí data exspirace. SKLADOVÁNÍ A STABILITA Veškeré neotevřené materiály jsou stabilní do data exspirace uvedeného na štítku, jsou-li uchovávány při specifikované teplotě. Materiály Kat. č. 2 8 C: AIA-PACK TgAb (CUP a CONJUGATE) AIA-PACK TgAb CONJUGATE AIA-PACK TgAb CALIBRATOR SET AIA-PACK TgAb CONTROL SET AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION AIA-PACK SUBSTRATE SET AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE C: AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Testovací kelímky ST AIA-PACK TgAb mohou být skladovány až 1 den při teplotě C. - AIA-PACK TgAb CONJUGATE zůstává po otevření stabilní po dobu 7 dnů při teplotě 2 8 C. - Kalibrační roztoky musí být uchovávány pevně uzavřené a zchlazené při teplotě 2 8 C. Kalibrační materiály musí být použity do 1 dne od otevření nebo rekonstituování za předpokladu, že jsou uchovávány těsně uzavřené a zchlazené na teplotu 2 8 C Po otevření bude SAMPLE DILUTING SOLUTION stabilní po dobu až 30 dnů, pokud je zchlazený na teplotu 2 8 C. - Je-li AIA-PACK TgAb CONTROL SET uchováván neotevřený v chladničce při teplotě 2 8 C, je stabilní do data exspirace uvedeného na štítku. Materiály kontrolních roztoků by měly být spotřebovány do 7 dnů od otevření, za předpokladu, že jsou lahvičky těsně uzavřeny a uloženy v chladu při teplotě 2 8 C. - Rekonstituovaný roztok substrátu je stabilní 3 dny při C nebo 7 dnů při teplotě 2 8 C. - Pracovní ředicí roztok a promývací roztoky jsou stabilní po dobu 30 dnů při C. Jestliže se činidla zakalí nebo změní barvu, nepoužívejte je. ODBĚR VZORKŮ A MANIPULACE S NIMI 1. Pro analýzu je nutno použít sérum nebo heparinizovanou plazmu. NESMÍ BÝT POUŽITA EDTA nebo citrátová plazma. 2. Používá-li se sérum, vzorek žilní krve se odebírá asepticky bez konzervačních látek. Uchovávejte při teplotě C než se vytvoří sraženina (obvykle minut), pak odstředěním získejte vzorek séra pro test. 3. Používá-li se heparinizovaná plazma, vzorek žilní krve se odebírá asepticky s určeným aditivem. Co nejdříve odstřeďte a oddělte plazmu od sedimentovaných buněk. 4. Během sériového sledování jednotlivého pacienta nestřídejte druhy vzorků. U určitých pacientů se mohou koncentrace naměřené v různých druzích vzorků poněkud lišit. 5. Před provedením analýzy mohou být vzorky uloženy při teplotě 2 8 C po dobu maximálně 24 hodin. Nelze-li analýzu provést do 24 hodin, musí být vzorek uchováván zmražený při teplotě -20 C nebo nižší po dobu maximálně 60 dnů. 6. Zabraňte opakovanému zmrazování a rozmrazování vzorků. Zakalené vzorky séra nebo vzorky, které obsahují částice hmoty, musí být před analýzou odstředěny. Před analýzou pomalu ponechte vzorky dosáhnout teploty C a jemně je promíchejte. 7. Všechny vzorky pacientů před analýzou vyžadují ředění. Vzorky jsou ředěné 51-krát AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION. AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800 a AIA-2000 provedou automaticky ředění a vypočítají výsledky. Ředění vzorku se provádí manuálně před analýzou u AIA-1200 XL a AIA-600. Další informace týkající se provozu zařízení získáte v uživatelském manuálu systému TOSOH AIA. Materiály AIA-PACK TgAb CALIBRATOR a CONTROL nevyžadují před analýzou ředění. 8. Naředěný vzorek musí být spotřebován do 24 hodin a nesmí být skladován. 9. Objem naředěného vzorku potřebný pro analýzu je 50 µl. POSTUP Podrobné pokyny pro AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-2000 a AIA-360 naleznete v uživatelském manuálu. I. Příprava činidla A. Substrátový roztok Před přípravou pracovního činidla ponechte všechna činidla, aby dosáhla teploty C. U AIA-1200 XL a AIA-600 přidejte celý obsah AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT (100 ml) do lyofilizovaného AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT a důkladně promíchejte, aby se pevný materiál rozpustil. U AIA Nex IA/AIA-21, AIA600II, AIA-1800 nebo AIA-2000 přidejte celý obsah AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II (100 ml) k AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II (lyofilizovanému), důkladně promíchejte, aby se pevný materiál rozpustil. 4-11

3 B. Promývací roztok Přidejte celý obsah AIA-PACK WASH CONCENTRATE (100 ml) k přibližně 2,0 l vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo typu I NCCLS, dobře promíchejte a upravte konečný objem na 2,5 l. C. Ředicí roztok Přidejte celý obsah AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE (100 ml) k přibližně 4,0 l vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo typu I NCCLS, dobře promíchejte a upravte konečný objem na 5,0 l. D. TgAb konjugát AIA-PACK TgAb CONJUGATE je dodávaný připravený k použití. E. Roztok pro ředění vzorků AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION je dodáván připravený k použití. II. Postup kalibrace A. Kalibrační křivka Kalibrační roztoky používané s AIA-PACK TgAb jsou uvedeny v normě NIBSC (kód 65/093). Kalibrační křivka pro AIA-PACK TgAb bude stabilní až 90 dnů. Stabilita kalibrace je sledována prováděním kontroly kvality a závisí na správné manipulaci s činidlem a na řádné údržbě systému Tosoh AIA podle pokynů výrobce. Opětovná kalibrace může být nutná častěji, když jsou kontroly mimo nastavené rozmezí pro tento test nebo když jsou prováděny určité servisní postupy (např. nastavení teploty, změny mechanismu odběru vzorků, údržba promývací sondy nebo nastavení či výměna žárovky detektoru). Kalibrační křivka vzorku z AIA-1800 sleduje a znázorňuje algoritmus použitý při výpočtu výsledků. Rozsah koncentrací kalibrační křivky je zobrazen v 1/51 rozsahu testu ve vzorcích pacientů. Koncentrace vzorků pacienta jsou vypočítány násobením koncentrací získaných na kalibrační křivce faktorem ředění. AIA Nex IA /AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800 a AIA-2000 automaticky vypočítají koncentrace vzorků pacienta pomocí faktoru ředění a nahlásí výsledky. B. Postup kalibrace 1. Pokyny postupu viz příslušný uživatelský manuál systému Tosoh AIA Ověřte, že jsou obě šarže AIA-PACK TgAb CUP a AIA-PACK TgAb CONJUGATE stejné. 3. Ověřte, že kalibrační šarže a čísla koncentrací byly správně zadány do softwaru. 4. CALIBRATOR (1) pro AIA-PACK TgAb je dodávaný připravený k použití. Společnost TOSOH doporučuje, aby všechny kalibrační roztoky byly spuštěny trojmo. 5. CALIBRATOR (2)-(6) pro ST AIA-PACK TgAb jsou lyofilizované. Všechny hodnoty by měly být rekonstituovány 1,0 ml vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo typu I NCCLS. Společnost TOSOH doporučuje, aby všechny kalibrační roztoky byly spuštěny trojmo. C. Kritéria přijatelnosti kalibrace 1. Průměrná rychlost pro CALIBRATOR (1) má být < 2,0 nmol/(l s). 2. Vzhledem k tomu, že existuje přímý vztah mezi koncentrací a rychlostí, musí rychlost vzrůstat s narůstající koncentrací. 3. Opakující se hodnoty musí být v rozmezí 10 %. D. Kontrola kalibrace a schválení 1. Pečlivě zkontrolujte křivku kalibrace a použijte výše uvedená kritéria. 2. Je-li to nutné, editujte kalibraci a potom kalibraci akceptujte. Další informace o kalibraci naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. III. Postup kontroly kvality A. Komerčně dostupné kontroly Komerčně dostupné kontroly by měly být spuštěny nejméně jednou denně. Doporučuje se, aby byly použity nejméně dva stupně kontrol, normální a abnormální. Metoda laboratoře pro tento určitý test specifikuje následující: Kontrolní materiál: Frekvenci: Číslo šarže kontrolního materiálu, přijatelné limity a nápravná opatření v případě, že kontroly nesplní laboratorní kritéria, můžete nalézt ve zvláštním dokumentu o kontrole kvality, který je v laboratoři. B. Postup kontroly kvality 1. Kontrolní vzorky mají být užívány ke kontrole kvality. Další informace o pokynech při postupu kontroly kvality viz příslušný uživatelský manuál systému Tosoh AIA. 2. Materiál kontroly kvality, který má projít tímto testem, je specifikovaný individuální metodou laboratoře. IV. Zpracování vzorků A. Příprava Všechny vzorky pacientů vyžadují před analýzou ředění a jsou naředěny 51-krát pomocí AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION. Naředění či nenaředěné vzorky pacientů jsou umístěny na příslušné pozice v analyzátorech systému Tosoh AIA. Další informace týkající se přípravy vzorku a provozu přístroje naleznete v kapitole ODBĚR VZORKŮ A MANIPULACE S NIMI a specifickém uživatelském manuálu systému TOSOH AIA. Primární zkumavky a také kelímky na vzorky jsou kódovány čárovým kódem a mohou být použité v AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-2000 a AIA B. Postup analýzy 1. Poskytněte dostatečné množství testovacích kelímků AIA-PACK TgAb pro počet vzorků, které mají být analyzovány. 2. Vložte vzorky pacienta podle pokynů v uživatelském manuálu a pokračujte v analýze. 6-11

4 Poznámka: AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP bude v případě použití vestavěných ředění vyžadován systémem AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800 a AIA POZNÁMKY K POSTUPU 1) Lyofilizovaný substrát musí být zcela rozpuštěn. 2) Ligandové analýzy prováděné analyzátory systému Tosoh AIA vyžadují, aby laboratoř používala vodu označenou Společností amerických patologů třídou I nebo podle NCCLS typem I. Voda musí být testována nejméně jednou měsíčně a neměla by osahovat částicovou hmotu včetně bakterií. ph vody by mělo být také pravidelně testováno. Další informace naleznete v dokumentu NCCLS Příprava a testování reagenční vody v klinické laboratoři, dokument NCCLS C3-A3, svazek 11, č. 13, původně odsouhlaseném jako směrnice NCCLS v říjnu ) Vyskytne-li se vzorek obsahující koncentraci TgAb vyšší, než je horní hranice rozsahu testu, tedy IU/ml, musíte tento vzorek naředit AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION a provést analýzu znovu podle postupu analýzy. Doporučené ředění pro vzorky obsahující koncentraci větší než IU/ml je 1:10. Je žádoucí takové ředění, aby byl odečet naředěného vzorku mezi 6,0 a IU/ml. Pokud nepoužíváte funkci automatického ředění, musíte provést 51násobné ředění. Další informace o ředění vzorků naleznete ve specifickém uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. 4) V analyzátorech systému Tosoh AIA (s výjimkou AIA 600) mohou být současně uloženy dvě různé kalibrační křivky pro každý analyt. Proto mohou být v rámci téhož cyklu použity dvě různé šarže testovacích kelímků a konjugátu. AIA-600 může pro každý analyt použít pouze jednu kalibrační křivku, protože do AIA-600 lze vložit pouze jednu šarži konjugátu. 5) Nejsou-li pro tento test specifikace analýzy připraveny v softwaru systému, musí být specifikace zadány pod kódem testu 048. VÝPOČET VÝSLEDKŮ Analyzátory systémů Tosoh AIA provádějí všechny operace manipulace se vzorky a činidly automaticky. Analyzátory systému Tosoh AIA odečítají míru fluorescence generovanou reakcí a automaticky ji převádějí na míru koncentrace antithyreoglobulinové protilátky IU/ml. U vzorků vyžadujících ředění provedou systémy AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800 a AIA-2000 automaticky ředění a vypočtou výsledky, pokud byly faktory ředění zadány do softwaru. Faktory ředění lze zadat při programování vzorků v monitoru analýzy. Pro AIA-1200 XL a AIA-600 je požadováno ruční ředění vzorků. Podrobné informace o programování ředění naleznete v příslušném uživatelském manuálu. VYHODNOCENÍ VÝSLEDKŮ Kontrola kvality Za účelem sledování a vyhodnocení přesnosti analytické výkonnosti se doporučuje v souladu s místními nařízeními analyzovat komerčně dostupné kontrolní vzorky. Minimální doporučená frekvence zpracování interního kontrolního materiálu je: Po kalibraci je spuštěna třístupňová analýza interních kontrolních vzorků, aby byla akceptována kalibrační křivka. Tři stupně kontrol jsou opakovány, když jsou provedeny určité servisní postupy (např. nastavení teploty, změna mechanismu pro odběr vzorků, údržba promývací sondy nebo nastavení či výměna žárovky detektoru). K ověření celkového výkonu analyzátorů systému Tosoh AIA by měly být po denní údržbě provedený nejméně dva stupně kontroly. Je-li jedna nebo více hodnot kontrolního vzorku(ů) mimo přípustné rozmezí, bude před ohlášením výsledků pacientů nutné prošetřit validitu kalibrační křivky Je nutno dodržovat standardní laboratorní postupy podle přísného zákonného orgánu, který na provoz laboratoře dohlíží. OMEZENÍ 1. Pro diagnostické účely je nutné využívat výsledky tohoto testu společně s dalšími údaji (např. symptomy, výsledky dalších testů, klinickými dojmy, léčbou atd.). 2. Při použití AIA-PACK TgAb je nejvyšší koncentrace TgAb měřitelná 51-násobným ředěním AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION 40 IU/ml, což odpovídá IU/ml a nejnižší měřitelná koncentrace je 0,12 IU/ml, což odpovídá 6,0 IU/ml (senzitivita testu). 3. Přestože přibližná hodnota nejvyššího kalibračního roztoku je 43 IU/ml, přesná hodnota se může poněkud lišit. Specifikaci testu ASSAY RANGE HIGH (VYSOKÝ ROZSAH TESTU) je nutno definovat jako horní hranici rozsahu testu, a to 40 IU/ml, která odpovídá přibližně IU/ml v původních vzorcích. 4. Přestože hemolýza nemá významný vliv na test, mohou hemolyzované vzorky poukazovat na špatné zacházení se vzorkem před analýzou a výsledky je nutno interpretovat opatrně. 5. Lipémie má na test nevýznamný vliv, kromě případu silné lipémie, kdy může dojít k prostorové interferenci. 6. Vzorky pacientů, kteří užívají léky a/nebo u kterých probíhá léčba, mohou vykazovat chybné výsledky. 7. Vzorky pacienta mohou obsahovat lidské protilátky proti myším (HAMA) buď v důsledku přirozené tvorby protilátek, a nebo tvorby protilátek jako odpovědi na léčebné režimy. HAMA mohou způsobovat falešně pozitivní výsledky testů užívajících myší monoklonální protilátky. Jiné heterofilní protilátky jsou také známé svou interferencí s testy tohoto typu. AIA-PACK TgAb byl vytvořen k minimalizaci účinků HAMA a heterofilních protilátek, ale interference způsobená vysokými titry protilátek nemůže být vyloučena. 8. Pro úplnější pochopení omezeních tohoto postupu, si laskavě přečtěte oddíly ODBĚR A MANIPULACE SE VZORKY, VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ, SKLADOVÁNÍ A STABILITA a POZNÁMKY K POSTUPU této příbalové informace. PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY Každá laboratoř by měla stanovit referenční interval, který odpovídá charakteristikám testované populace. Podobně jako u všech diagnostických postupů, musí být klinické výsledky interpretovány s ohledem na současně podávané léky. Referenční rozmezí Ve skupině sérových vzorků od 199 relativně zdravých Asiatů bylo 97,5 % hodnot menších než 13,6 IU/ml. VÝKONNOSTNÍ CHARAKTERISTIKY PŘESNOST a. Výtěžnost: Tři vzorky byly označeny třemi rozdílnými hladinami TgAb a testovány před a po označení. Vzorek Původní TgAb Předpokládaná Naměřená Procento hodnota přidaný hodnota hodnota výtěžnosti (IU/ml) (IU/ml) (IU/ml) (IU/ml) (%) Vzorek A1 11,34 4,38 15,72 15,77 100,3 11,34 8,75 20,09 20,07 99,9 11,34 17,50 28,84 25,96 90,0 8-11

5 Vzorek B1 10,27 4,39 14,66 15,05 102,7 10,27 8,78 19,05 20,84 109,4 10,27 17,55 27,82 28,07 100,9 Vzorek C1 11,09 4,15 15,24 15,19 99,7 11,09 8,30 19,39 19,69 101,5 11,09 16,60 27,69 27,42 99,0 b. Ředění: Tři vzorky naředěné 51 x byly sériově naředěny pomocí AIA-PACK TPOAb/TgAb SAMPLE DILUTING SOLUTION a analyzovány. Vzorek Faktor Předpokládaná Naměřená Procento ředění hodnota hodnota výtěžnosti (IU/ml) (IU/ml) (%) Vzorek A2 žádný 21,11 21,11 100,0 7,5/10 15,83 16,34 103,2 5,0/10 10,55 11,45 108,5 2,5/10 5,28 6,01 113,8 1,0/10 2,11 2,32 110,0 Vzorek B2 žádný 11,85 11,85 100,0 7,5/10 8,88 8,86 99,8 5,0/10 5,92 5,91 99,8 2,5/10 2,96 3,05 103,0 1,0/10 1,18 1,12 94,9 Vzorek C2 žádný 20,91 20,91 100,0 7,5/10 15,68 16,49 105,2 5,0/10 10,45 12,17 116,5 2,5/10 5,23 6,13 117,2 1,0/10 2,09 2,59 123,9 PŘESNOST a. Variační koeficient metody byl hodnocen ve třech vzorcích 10 opakovanými měřeními. Vzorek Počet Průměr Standardní Koeficient opakování odchylka variace (IU/ml) (IU/ml) (%) Vzorek L 10 2,91 0,134 4,6 Vzorek M 10 11,92 0,489 4,1 Vzorek H 10 22,59 0,700 3,1 b. Variační koeficient metody byl hodnocen ve dvou odlišných koncentracích analýzou vzorků ve 20 oddělených cyklech. Vzorek Počet Průměr Standardní Koeficient opakování odchylka variace (IU/ml) (IU/ml) (%) Vzorek L 20 2,96 0,084 2,8 Vzorek H 20 23,54 0,592 2,5 KORELACE Korelace mezi sérem (x) a heparinizovanou plazmou (y) v ST AIA-PACK TgAb byla provedena s použitím 102 pacientských vzorků. Směrnice 1,010 Průsečík s osou y -2,324 Korelační koeficient 0,998 Rozmezí vzorků 6, ,83 Počet vzorků 102 SENZITIVITA Minimální detekovatelné koncentrace (MDC) lidského TgAb je odhadnuta na 0,12 IU/ml, což odpovídá 6 IU/ml v původním séru (faktor ředění 51). Minimální detekovatelná koncentrace (MDC) je definována jako taková koncentrace lidské TgAb, která odpovídá míře fluorescence, jež je dvě směrodatné odchylky od průměrné míry fluorescence dvaceti opakovaných stanovení pomocí CALIBRATOR (1). INTERFERENCE Interference je pro účely této studie definovaná jako výtěžnost přesahující 10 % známé průměrné hodnoty koncentrace vzorku po přidání následujících látek k vzorkům pacienta. Hemoglobin (až do 410 mg/dl), volný bilirubin (do 13 mg/dl) a konjugovaný bilirubin (do 18 mg/dl) neinterferují s testem. Lipémie indikovaná koncentrací triglyceridů (do 290 mg/dl) neinterferuje s testem. Protein indikovaný koncentrace albuminu (do 5,0 g/dl) neinterferuje se stanovením. Kyselina askorbová (do 20 mg/dl) neinterferuje s testem. Heparin (do 100 U/ml) neinterferuje s testem. Výsledky jsou získané přidáním těchto interferujících látek do naředěných vzorků. REFERENCE 1. Wang L. and Zheng W.: Measurement and clinical significance of thyroid microsomal and thyroglobulin antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay. Chin. Med. J. 102, (1989). 2. Ericsson U. B., Christensen S. B. and Thorell J. I.: A High Prevalence of Thyroglobulin Autoantibodies in Adults with and without Thyroid Diseases as Measured with a Sensitive Solid-Phase Immunosorbent Radioassay. Clin. Immunol. Immunopathol. 37, (1985). 3. Kaino Y., Kida K., Goto Y., Ito T., Matsuda H., Kohno T. and Ishikawa E.: Thyroglobulin antibodies in Type 1 diabetic patients and their relatives - measurement with highly sensitive assay. Diabetes Res. Clin. Pract. 22, (1994). 4. Beever K., Bradbury J., Phillips D., McLachlan S. M., Pegg C., Goral A. Overbeck W., Feifel G. and Rees Smith B.: Highly Sensitive Assays of Autoantibodies to Thyroglobulin and to Thyroid peroxidase. Clin. Chem. 35, (1989). 5. Tamaki H., Amino N., Iwatani Y., Matsuzuka F., Kuma K. and Miyai K.: Detection of Thyroid Microsomal and Thyroglobulin Antibodies by New Sensitive Radioimmunoassay in Hashimoto s disease; Comparison with Conventional Hemagglutination Assay. Endocrinol Jpn. 38, (1991). 6. Tamaki H., Katsumaru H., Nakamoto H., Ishikawa E. and Miyai K.: Usefulness of thyroglobulin antibody detected by ultrasensitive enzyme immunoassay: a good parameter for immune surveillance in healthy subjects and for prediction of post -partum thyroid dysfunction. Clin. Endocrinol. 37, (1992)

6 7. Harchali A. A., Montagne P., Cuilliere L. M., Bouanani M., Pau B. and Duheille J.: Detection of Antithyroglobulin Autoantibodies with Defined Epitopic Specificity by a Microparticle-Enhanced Nephelometric Immunoassay. Clin. Chem. 38, (1992). 8. Kuppers R. C., Outschoorn I. M., Hamilton R. G., Burek C. L. and Rose N. R.: Quantitative Measurement of Human Thyroglobulin-Specific Antibodies by Use of a Sensitive Enzyme-Linked Immunoassay. Clin. Immunol. Immunopathol. 67, (1993). 9. Caturegli P., Kuppers R. C., Mariotti S., Lynne Burek C., Pinchera A., Ladenson P. W. and Rose N. R.: IgG subclass distribution of thyroglobulin antibodies in patients with thyroid disease. Clin. Exp. Immunol. 98, (1994). TOSOH CORPORATION 3-8-2, Shiba, Minato-ku TOKYO (JAPONSKO) Tel.: +81 (0) Fax: +81 (0) TOSOH EUROPE N.V. Transportstraat 4 B-3980 TESSENDERLO (BELGIE) Tel.: +32 (0) Fax: +32 (0) TOSOH BIOSCIENCE, INC Shoreline Court, Suite 101 South San Francisco, CA 94080, USA Telefon: Objem netto (po rekonstituci pro lyofilizovaný materiál) 11-11