Elecsys HE4. MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 ms_ v Česky Systémové informace Pro analyzátor cobas e 4: číslo testu Pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2: Číslo kódu aplikace 28 Upozornění Naměřené hodnoty HE4 ve vzorcích pacientů se mohou lišit v závislosti na použitém postupu stanovení. Na laboratorním nálezu musí být proto vždy uveden údaj, kterým testem byl HE4 stanoven. Hodnoty HE4, stanovené ve vzorku pacienta rozdílnými testy, nemohou být přímo mezi sebou porovnávány a mohly by způsobit chybnou zdravotní interpretaci. Jestliže dojde ke změně v metodě stanovení HE4, používané k monitorování léčby, musí být hodnoty HE4 získané po změně na novou metodu potvrzeny paralelním měřením oběma metodami. Použití Imunologický test pro kvantitativní stanovení HE4 v lidském séru a plazmě. Stanovení se používá jako pomůcka při monitorování rekurence nebo progresivního onemocnění pacientů s epiteliálním karcinomem. Sériové měření hodnot HE4 pacientek by mělo být použito ve spojení s dalšími klinickými nálezy používanými pro monitorování karcinomu. Dále slouží k použití ve spojení se stanovením Elecsys CA 25 II jako pomůcka pro odhad rizika epiteliálního karcinomu u žen před a po menopauze s tumorem v malé pánvi. Výsledky musí být interpretovány ve spojení s dalšími metodami v souladu s platnými klinickými doporučeními. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn Lidský epididymální protein 4 (HE4, také známý jako WFDC2) patří do rodiny proteinů označovaných jako "whey acidic four-disulfide core (WFDC)" s vlastnostmi podobnými inhibitoru trypsinu.,2 Ve zralé glykosylované formě má protein molekulovou hmotnost přibl kd a skládá se z jednoho peptidového řetězce obsahujícího 2 WFDC domény. 3,4 Původně bylo popisováno, že exprese HE4 je specifická pro nadvarle. 4,5 Podle nejnovějších zjištění je HE4 v nízkých koncentracích exprimovaný v respiračním epitelu a epitelu pohlavních orgánů, a ve vysokých koncentracích ve tkáních ovariálních karcinomů. Ve vysokých koncentracích se nachází rovněž v séru pacientek s ovariálním karcinomem. 7 Karcinom je ze všech maligních nádorů u žen celosvětově sedmou nejčastější příčinou úmrtí. 8 Jde o formu gynekologického karcinomu s nejvyšší úmrtností, je ale potenciálně vyléčitelný, je-li diagnostikován včas 9 a operován chirurgy, kteří mají zkušenosti s operacemi karcinomu. 9, Symptomy karcinomu jsou nicméně často nejasné a nespecifické. Z tohoto důvodu je většinou karcinom diagnostikován v pozdním stádiu, což snižuje šanci na 5leté přežívání pacientek z 9 ve stádiu I pod 2 ve stádiu IV. Jako jediný marker tumoru má HE4 nejvyšší citlivost na detekci karcinomu, zejména ve stádiu I onemocnění, v raném asymptomatickém stádiu. Kombinace CA 25 a HE4 má nejvyšší citlivost 7.4 při specifičnosti 95. 2,3 Kombinace CA 25 a HE4 umožňuje posoudit, zda je ložisko v malé pánvi u žen před a po menopauze benigní nebo maligní. Duální kombinace markerů CA 25 a HE4 je přesnějším prediktorem malignity než když jsou použity samostatně. 2 Huhtinen a kol. popsal 78. citlivost při 95 specifičnosti při rozlišování ovariálního karcinomu od endometriotické cysty. 4 Moore a kol. popsal při použití kombinace CA 25 a HE4 28-, V 8. Česky / MODULAR ANALYTICS E7 cobas e 4 cobas e cobas e 2 v algoritmu (Risk of Ovarian Malignancy Algorithm) 94 správnost při rozlišování maligních a benigních nádorů v malé pánvi. 5 Hladiny HE4 dále korelují s klinickou odpovědí na léčbu nebo rekurenci u žen s diagnostikovaným karcinomem stanoveným CT-skenom. HE4 by tak mohl být důležitým časným indikátorem rekurence onemocnění. Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 8 minut.. inkubace: µl vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka specifická pro HE4 a monoklonální protilátka specifická pro HE4, značená rutheniovým komplexem a) reagují za tvorby sendvičového komplexu. 2. inkubace: Po přidání mikročástic potažených streptavidinem se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky se stanovují pomocí kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj 2bodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie nebo elektronického čárového kódu. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako HE4. M R R2 Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), nádobka,.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice,.72 mg/ml; konzervans. Anti-HE4-Ab~biotin (šedé víčko), nádobka, ml: Biotinylovaná monoklonální protilátka proti HE4 (myší).75 mg/l; fosfátový pufr mmol/l, ph.5; konzervans. Anti-HE4-Ab~Ru(bpy) (černé víčko), nádobka, ml: Monoklonální protilátka proti HE4 (myší) značená rutheniovým komplexem.5 mg/l; fosfátový pufr mmol/l, ph 7.4; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím.

2 ms_ v8. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 2 týdnů 28 dní Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Li heparinizovaná, K 2 a K 3 EDTA plazma, jakož i zkumavky s Li heparinem, obsahující separační gel. Kritérium: Sklon úsek na ose ±, korelační koeficient.95. Stabilní 48 hodin při 2 8 C, 5 hodin při 5 25 C, 2 týdnů při 2 C (± 5 C). Vzorky lze zmrazit 2krát. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 2 25 C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , HE4 CalSet, pro 4 x ml , PreciControl HE4, pro 4 x ml , Diluent MultiAssay, 2 x ml diluentu vzorku Celkové vybavení laboratoře MODULAR ANALYTICS E7 nebo analyzátor cobas e Pro posouzení rizika epitelového karcinomu s algoritmem (Risk of Ovarian Malignancy Algorithm): , Elecsys CA 25 II, testů , CA 25 II CalSet, 4 x ml , PreciControl Tumor Marker, pro 4 x 3 ml , Diluent Universal, 2 x ml diluentu vzorku nebo , Diluent Universal, 2 x 3 ml diluentu vzorku Příslušenství pro analyzátor cobas e 4: , ProCell, x 38 ml systémový pufr 29722, CleanCell, x 38 ml čistící roztok pro měřící celu , Elecsys SysWash, x 5 ml promývací přísada 93359, Adapter for SysClean 782, Assay Cup, x reakčních nádobek 7799, AssayTip, 3 x 2 pipetovacích špiček 857, Clean Liner Příslušenství pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu 3234, PC/CC Cups, 2 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím 35729, ProbeWash M, 2 x 7 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , PreClean M, 5 x ml systémový čistící roztok 2237, AssayTip/AssayCup, 48 kazet x 84 reakčních nádobek nebo pipetovacích špiček, odpadní vaky 3235, WasteLiner, odpadní vaky 3275, SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: 29853, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy nelze načíst čárový kód, zadejte 5místní sekvenci čísel (kromě analyzátoru cobas e 2). Analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 2 C a umístěte je do reagenčního kotouče (2 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována dle metody HE4 EIA od Fujirebio Diagnostics, Inc. Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace se musí provádět jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Obnovení kalibrace se doporučuje: po 2 týdnech při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl HE4. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Je-li to nutné, zopakujte měření příslušného vzorku. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek v. Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikteritou (bilirubin < 3 µmol/l nebo < mg/dl), hemolýzou (Hb <.2 mmol/l nebo <. g/dl), lipémií (Intralipid < 2 mg/dl) a biotinem (< 25 nmol/l nebo < 5 ng/ml). Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ± počáteční hodnoty. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference zaznamenána do koncentrace 5 IU/mL. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro HE4 do koncentrace 4. 2 / 28-, V 8. Česky

3 ms_ v8. In vitro testy byly prováděny na 8 běžně užívaných lécích. Nebyla zjištěna žádná interference. Speciální léky na rakovinu byly testovány v koncentracích uvedených v tabulce níže. Nebyla zjištěna žádná interference. Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ± počáteční hodnoty. Droga Koncentrace (µg/ml) Carboplatin Cisplatin 8 Cyklofosfamid 5 Dexamethason 2 Doxorubicin 2 Leucovorin 75 Melphalan 5 Methotrexat disodium 5 Paclitaxel 25 Fluorouracil 9 Bevacizumab (Avastin) 75 Erlotinib (Tarceva) 5 Rituximab (MabThera) 75 Trastuzumab (Herceptin) Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Měřící rozsah 5. 5 (definováno mezí detekce a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí detekce se vykazují jako < 5.. Hodnoty nad měřícím rozsahem se vykazují jako > 5 (nebo až 3 při 2násobném ředění vzorku). Dolní meze měření Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti Mez blanku = 5. Mez detekce = 5. Mez stanovitelnosti = 2. s celkovou přípustnou chybou 3 Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP7 A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 ). Mez stanovitelnosti je definovaná jako nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze přesně kvantifikovat s celkovou přípustnou chybou 3. Byla provedena studie použitím 5 vzorků koňského séra a naředěných lidských sér, každý na mez blanku, resp. na mez detekce. Vzorky byly testovány v sériích po dobu 3 dnů na 2 analyzátorech, které poskytly n = hodnot. Mez blanku a mez detekce byly vypočítané jako.358, resp... Pro mez stanovitelnosti byly 3 vzorky lidského séra naředěné a změřené v sériích po dobu 3 dnů na 2 analyzátorech. Při celkové přípustné chybě 3 byla mez stanovitelnosti Linearita Stanovení je lineární v celém rozsahu měření od Vzorky byly připraveny dle CLSI EP A, naředěním 3 vzorků sér a 3 plazem, každý s Diluent MultiAssay ve více krocích v rozmezí od > 5 až do meze blanku. Ředění Vzorky s koncentrací HE4 nad měřícím rozsahem lze ředit s Diluent MultiAssay. Doporučený poměr ředění je :2 (buď automaticky na analyzátorech nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 75. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem počítá software automaticky s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Studie v klinickém centru v Německu se stanovením na sérech 358 zdánlivě zdravých žen poskytlo následující výsledky: HE4 () Věk (roky) N Medián 95. percentil < Distribuce v procentech () stanovení hodnot HE4 naměřených ve 2 klinických centrech ve Španělsku a Německu stanovením u 89 ženských vzorků je shrnuta v tabulce níže: Zdraví jedinci Před menopauzou 9 7 Hodnoty () > 5 (84.4 ) Po menopauze 3 Benigní nemoci (59.4 ) Před menopauzou 77 (9.4 ) Po menopauze 2 2 (.8 ) Těhotenství 5 5 Negynekologické onemocnění ( ) 35 (45.7 ) CHF b) 23 9 Rakovina Rakovina Před menopauzou Rakovina Po menopauze Rakovina endometria (39. ) 39 2 (3.8 ) 97 (.3 ) 49 8 (3.7 ) Rakovina prsu Gastrointestinální malignity (4.8 ) 4 9 (4.3 ) Rakovina plic 23 5 Rakovina moč. měchýře (2.7 ) 2 3 (25. ) N (procentuální rozdělení) 3 (4.4 ) 4 (37.7 ) (9. ) 3 (3.4 ) (7. ) (47.8 ) 7 (7.9 ) 9 (9. ) 2 (4.8 ) 9 (4.4 ) 2 (43.5 ) 7 (3.4 ) 4 (33.3 ) (. ) 3 (2.8 ) (. ) 9 (8.8 ) (7. ) 3 (3. ) 3 (33.3 ) 34 (35. ) 9 (8.4 ) 5 (. ) (3. ) (43.5 ) 4 (33.3 ) 7 (2. ) 5 (2.8 ) 28 (28.9 ) (2. ) (2. ) (2.2 ) (4.3 ) (8.3 ) 2 (5. ) (.2 ) (2. ) 28-, V 8. Česky 3 /

4 ms_ v8. b) CHF = kongestivní selhání srdce V této studii mělo 84 zdravých žen před menopauzou hodnotu stanovení při nebo pod 7 a 97 zdravých žen po menopauze mělo hodnotu stanovení při nebo pod 4. V této studii byl 95. percentil pro zdravé ženy před a po menopauze (všech věkových skupin) 92., resp. 2. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Monitorování stavu onemocnění u pacientek s diagnostikovaným karcinomem Účinnost stanovení jako pomůcky při monitorování stavu onemocnění u pacientek s karcinomem byla měřena změnou hladin HE4 v sériových vzorcích sér pacientek ve srovnání se změnami ve stavu nemoci. Studie zahrnující celkem 375 párů pozorování byla provedena s 3 odběry krve na pacientku. Pozitivní změna HE4 byla definovaná jako nárůst hodnoty o nejméně 2 ve srovnání s předchozí hodnotou testu. 58. (29/5) vzorků pacientek s pozitivní změnou korelovalo s progresí onemocnění, zatímco 84. (273/325) sériových vzorků pacientek bez významné změny hodnot HE4 nekorelovalo s žádnou progresí. Celková konkordance byla 8.5 (32/375). Následující tabulka představuje údaje ve formátu 2 x 2. Změna stavu onemocnění na sekvenční pár Nárůst koncentrace HE4 Progrese Bez progrese Celkem > Celkem Odhad rizika u pacientek s tumorem v malé pánvi Účinnost stanovení v kombinaci se stanovením Elecsys CA 25 II pro odhad rizika epiteliálního karcinomu u pacientek s tumorem v malé pánvi byla měřena v mezinárodním klinickém pokusu mnoha center použitím depotních vzorků. Pro odhad rizika epiteliálního karcinomu byl vytvořen algoritmus ( = Risk of Ovarian Malignancy Algorithm). Algoritmus bere v potaz hodnoty HE4 a CA 25, jakož i stav menopauzy pacientky. Algoritmus vypočítá prediktivní pravděpodobnost nálezu epiteliálního karcinomu při operaci. Výpočet Prediktivního Indexu (PI) 7 Prediktivní index se počítá zvlášť pro pacientky před a po menopauze použitím rovnic () a (2) níže. Pro výpočet PI jsou hodnoty získané stanovením a Elecsys CA 25 II vloženy do rovnic níže, podle stavu menopauzy žen. () Před menopauzou: PI = *LN[HE4] +.2*LN[CA25] (2) Po menopauze: PI = *LN[HE4] +.732*LN[CA25] kde LN = Přirozený Logaritmus. Nepoužívejte LOG = Log. Výpočet hodnoty 7 Pro výpočet hodnoty (tj. prediktivní pravděpodobnosti), vložte do rovnice (3) vypočítanou hodnotu pro PI: (3) hodnota () = exp(pi) / [ + exp(pi)] *, kde, exp(pi) = e PI UPOZORNĚNÍ: Tyto rovnice byly použity pro výpočet hodnot stanovením od a stanovením Elecsys CA 25 II od.42 5 U/mL. Příklady níže by měly být použity pro validaci výpočtů PI a před uvolněním výsledků pacientky: Stav menopauzy Před menopauzou HE4 () Hodnoty Elecsys CA 25 II (U/mL) (2.38*3.24) Výpočet PI PI + (.2*4.3) (2.38*5.957) + (.2*3.82) Stav menopauzy Po menopauze HE4 () Hodnoty Elecsys CA 25 II (U/mL) (.4*4.2) Výpočet PI PI + (.732*2.425) (.4*5.948) + (.732*3.22) Stratifikace do skupin s malým a velkým rizikem Do studie bylo zahrnuto celkem 384 depotních vzorků pacientek a byla měřena prediktivní pravděpodobnost karcinomu, jakož i schopnost rozdělení do skupin s malým a velkým rizikem založených na hodnotách. Algoritmus byl použit k stratifikaci žen do rizikových skupin pro zjištění epiteliálního karcinomu. Pro specifičnost 75 pro kombinaci stanovení a Elecsys CA 25 II byly použity následující cutpointy: Ženy před menopauzou Hodnota.4 = vysoké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Hodnota <.4 = nízké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Ženy po menopauze Hodnota 29.9 = vysoké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Hodnota < 29.9 = nízké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Stratifikace rizika všech 384 pacientek (94 před a 9 po menopauze) s tumorem v malé pánvi použitím hodnot pro kombinaci stanovení a Elecsys CA 25 II je zobrazena v následující tabulce: Skupiny pacientek s tumorem v malé pánvi N Pacientky před menopauzou <.4 Stádium I-II EOC c) (37.5 ) Stádium I-IIIC 2 7 EOC d) (33.3 ) Stádium I-IV EOC Stádium III-IV EOC 25 7 (28. ) 9 (. ) EOC bez stádia 2 2 (.7 ) Benigní 57 8 (75.2 ) c) EOC = epiteliální karcinom.4 (2.5 ) 4 (.7 ) 8 (72. ) 8 (88.9 ) (83.3 ) 39 (24.8 ) Pacientky po menopauze N < 29.9 (37.5 ) 34 9 (2.5 ) 53 (8.9 ) 37 4 (.8 ) 44 2 (4.5 ) 93 7 (7.3 ) 29.9 (2.5 ) 25 (73.5 ) 43 (8. ) 33 (89.2 ) 42 (95.5 ) 22 (23.7 ) d) Stádium I-IIIB a Stádium I-IIIC (omentum negativní, lymfatické uzliny pozitivní) EOC Senzitivita pro zařazení pacientek se stádiem I IV epiteliálního karcinomu do skupiny s velkým rizikem byla 84.3 při specifičnosti 75, a tak bylo 75. žen s benigním tumorem v malé pánvi zařazeno do skupiny s malým rizikem. Pozitivní a negativní prediktivní hodnoty byly 4.9 resp. 9. AUC (95 CI): Ženy před menopauzou =.858 ( ) Ženy po menopauze =.923 ( ) 4 / 28-, V 8. Česky

5 ms_ v8. Je třeba brát v úvahu následující fakta Hladinu HE4 nelze použít jako absolutní důkaz přítomnosti nebo absence zhoubného onemocnění a stanovení by nemělo být použito jako test pro screening rakoviny. Výsledky by měly být použity ve spojení s dalšími klinickými údaji, např. symptomy, anamnestickými údaji, atd. Jsou-li výsledky v rozporu s klinickými nálezy, doporučujeme pro potvrzení výsledku další testování. Výsledky by neměly být použity navzájem s metodami jiných výrobců pro měření HE4. Výsledky Elecsys CA 25 II by neměly být použity navzájem s metodami jiných výrobců pro měření CA 25 při výpočtu. Pacientky s potvrzeným karcinomem mohou mít hodnoty stanovení ve stejném rozmezí jako zdravé ženy. Některé histologické typy karcinomu (např. mucinózní nebo germinativní tumory) zřídka produkují HE4, z toho důvodu se stanovení nedoporučuje pro monitorování pacientek s prokázaným mucinózním nebo ovariálním germinatívním tumorem. A opačně, zvýšené hladiny HE4 antigenu mohou být přítomné u jedinců s renálním, jaterním a nemaligním onemocněním. nebyl validován pro následující skupiny pacientek: pacientky dříve léčené na zhoubná onemocnění, pacientky s právě probíhající léčbou chemoterapií a pacientky mladší než 8 let. Jak je uvedeno, selháním stanovení a/nebo Elecsys CA 25 II nebo chybou při výpočtu výsledků může dojít k nepřesnému odhadu rizika a nesprávnému sledování pacientky. Zejména falešně nízké výsledky stanovení mohou vést k závěru, že pacientka má nízké riziko epiteliálního karcinomu, což může mít za následek přeřazení pacientky na méně specializovanou úroveň péče. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, vzorků a kontrol podle protokolu (EP5 A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech, každý po 2 dní (n = 84). Získané byly následující výsledky: Vzorek Analyzátor cobas e 4 Prům. Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum PreciControl HE PreciControl HE Analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2 Vzorek Prům. Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2 Vzorek Prům. Opakovatelnost Mezilehlá preciznost PreciControl HE PreciControl HE Porovnání metod Porovnání stanovení (y) s manuální metodou HE4 (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace: Počet naměřených vzorků: 52 Passing/Bablok 8 Lineární regrese y =.8x y =.x +.4 τ =.88 r =.978 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 22 až 5. Porovnání stanovení (y) s automatizovanou metodou HE4 (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace: Počet naměřených vzorků: 73 Passing/Bablok 8 Lineární regrese y =.9x +.4 y =.875x +. τ =.83 r =.985 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 2 až 4. Analytická specifičnost Zjištěna byla následující křížová reaktivita, testováno s koncentrací HE4 5 až 55 : Proteins (skupina WFDC) Testované koncentrace Křížová reaktivita Elafin e) /SKALP f) SLPI g) e) Elafin = elastase-specific inhibitor f) SKALP = skin-derived antileukoproteinase g) SLPI = secretory leucocyte protease inhibitor Odkazy Israeli O, Goldring-Aviram A, Rienstein S, et al. In silico chromosomal clustering of genes displaying altered expression patterns in ovarian cancer. Cancer Genet Cytogenet 25;: Bouchard D, Morisset D, Bourbonnais Y, et al. Proteins with wheyacidic-protein motifs and cancer. Lancet Oncol 2;7: Bingle L, Singleton V, Bingle CD. The putative ovarian tumour marker gene HE4 (WFDC2), is expressed in normal tissues and undergoes complex alternative splicing to yield multiple protein isoforms. Oncogene 22;2: Kirchhoff C. Molecular characterization of epididymal proteins. Rev Reprod 998;3: Kirchhoff C, Habben I, Ivell R, et al. A major human epididymis-specific cdna encodes a protein with sequence homology to extracellular proteinase inhibitors. Biol Reprod 99;45: Drapkin R, von Horsten HH, Lin Y, et al. Human epididymis protein 4 (HE4) is a secreted glycoprotein that is overexpressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas. Cancer Res 25;5: Hellström I, Raycraft J, Hayden-Ledbetter M, et al. The HE4 (WFDC2) protein is a biomarker for ovarian carcinoma. Cancer Res 23;3: Ferlay J, Soerjomataram I, Ervik M, et al. GLOBOCAN 22 v., Cancer Incidence and Mortality Worldwide: IARC CancerBase No. [Internet] Lyon, France: International Agency for Research on Cancer; 23.Available from: accessed on day/month/year. 28-, V 8. Česky 5 /

6 ms_ v8. 9 Earle CC, Schrag D, Neville BA, et al. Effect of surgeon specialty on processes of care and outcomes for ovarian cancer patients. J Natl Cancer Inst 2;98:72-8. Engelen MJ, Kos HE, Willemse PH, et al. Surgery by consultant gynecologic oncologists improves survival in patients with ovarian carcinoma. Cancer 2;: Clarke-Pearson, DL. Clinical practice. Screening for ovarian cancer. NEJM 29;3(2): Moore RG, Brown AK, Miller MC, et al. The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass. Gynecol Oncol 28;8: Moore RG, Brown AK, Miller MC, et al. Utility of a novel serum tumor biomarker HE4 in patients with endometrioid adenocarcinoma of the uterus. Gynecol Oncol 28;: Huhtinen K, Suvitie P, Hiissa J, et al. Serum HE4 concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts. Br J Cancer 29;: Moore RG, Miller MC, Disilvestro P, et al. Evaluation of the Diagnostic Accuracy of the Risk of Ovarian Malignancy Algorithm in Women With a Pelvic Mass. Obstet Gynecol 2;8(2,Part): Anastasi E, Marchei GG, Viggiani V, et al. HE4: a new potential early biomarker for the recurrence of ovarian cancer. Tumor Biol 2;3: Moore RG, McMeekin DS, Brown AK, et al. A novel multiple marker bioassay utilizing HE4 and CA25 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass. Gynecol Oncol 29;: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 988 Nov;2(): Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. je ochrannou známkou Fujirebio Diagnostics, Inc. Antigeny HE4 a protilátky použité v produktech Roche HE4 mají licenci Fujirebio Diagnostics, Inc. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO 5223 následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku GTIN Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 27, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse, D-835 Mannheim / 28-, V 8. Česky