Elecsys Anti-Tg. MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 Anti-Tg MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 Česky Systémové informace Pro analyzátor cobas e 411: číslo testu 710 Pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: Číslo kódu aplikace 133 Upozornění Naměřené hodnoty anti Tg ve vzorcích pacientů se mohou lišit v závislosti na použitém testovacím postupu. Na laboratorním nálezu musí být proto vždy uveden údaj, kterým testem bylo anti Tg stanoveno. Hodnoty anti Tg stanovené ve vzorku pacientů různými testovacími postupy nelze porovnávat přímo mezi sebou, mohly by totiž způsobit chybnou lékařskou interpretaci. Dojde-li během monitorování léčby ke změně metody stanovení anti Tg, měly by být hodnoty anti Tg získané po této změně potvrzeny paralelním měřením použitím obou metod. Použití Imunochemické kvantitativní in vitro stanovení protilátek proti tyreoglobulinu v lidském séru a plazmě. anti Tg slouží jako pomůcka při detekci autoimunitních onemocnění štítné žlázy. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení a cobas e. Souhrn Tyreoglobulin (Tg) je vytvářen v štítné žláze a je hlavní složkou lumen folikul štítné žlázy. Společně s enzymem, specifickým pro štítnici, peroxidázou (TPO), má Tg nezastupitelnou funkci při jodaci L tyrosinu a vytváření hormonů štítné žlázy T4 a T3. 1 Tg i TPO jsou potenciálně autoantigenní. 2,3 Se zvýšenou sérovou koncentrací protilátek proti Tg (autoprotilátek proti Tg) se setkáváme u osob s autoimunitní tyreoiditidou. 2,3 Vysoké koncentrace anti Tg spolu s anti TPO jsou známkou chronické lymfocytické infiltrativní tyreoiditidy (Hashimotova choroba). 3 Protilátky proti tyreoglobulinu se vyskytují u cca pacientů s autoimunitní tyreoiditidou, včetně Hashimotové choroby, a u cca osob s Gravesovou chorobou. 3,4,5,6 anti Tg může rovněž poskytnout užitečné informace pro monitorování pacientů s Hashimotovou tyreoiditidou a při diferenciální diagnostice. 3,7 Toto zahrnuje případy suspektní autoimunitní tyreoitidy neznámého původu s negativnímy výsledky anti TPO testu, 8,9 a na rozlíšení Hashimotovy tyreoiditidy od netoxické uzlovité strumy nebo jiných forem tyreoiditidy. 4 se uvádí rovněž jako náhradní diagnostický marker pro diferencovaný karcinom štítné žlázy v případech, kdy je sérový Tg negativní 10 a pro vyloučení interference autoprotilátek proti Tg při měření sérového Tg použitím Tg testu. 11,12 Ačkoliv se citlivost metody může zvýšit paralelním stanovením dalších tyreoidálních protilátek (anti TPO, anti TSHR), negativní výsledek nevylučuje zcela přítomnost autoimunitního onemocnění. Titr protilátek nekoreluje s klinickou aktivitou onemocnění. Od počátku zvýšené titry se mohou stát negativními, trvá-li onemocnění po delší dobu nebo je v remisi. Jestliže se po remisi znovu objeví protilátky, dochází pravděpodobně k relapsu. používá lidský antigen a monoklonální lidské protilátky proti Tg. 13 Princip testu Princip kompetice. Celková doba stanovení: 18 minut. 1. inkubace: 10 µl vzorku je inkubováno s biotinylovaným Tg a protilátky ve vzorku se vážou na antigen. 2. inkubace: Po přidání anti Tg protilátek značených rutheniovým komplexem a) a streptavidinem potažených mikročástic se vytvořený imunokomplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky se stanovují pomocí kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj 2bodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie nebo elektronického čárového kódu. a) Tris(2,2 -bipyridyl)ruthenium(ii)-komplex (Ru(bpy) ) Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako A TG. M R1 R2 Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 12 ml: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/ml; konzervans. Tg~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 10 ml: Biotinylované Tg (lidské) mg/l; TRIS pufr 100 mmol/l ph 7.0; konzervans. -Ab~Ru(bpy) (černé víčko), 1 nádobka, 10 ml: Monoklonální protilátka proti Tg (lidská), značená rutheniovým komplexem mg/l; TRIS pufr 100 mmol/l, ph 7.0; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Pro USA: Varování: Federální zákon omezuje prodej tohoto přístroje pouze lékařem nebo na jeho pokyn. Všechny biologické materiály je nutné považovat za potenciálně infekční. Všechny produkty odvozené z lidské krve jsou připravené výhradně z krve individuálně testovaných dárců a nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. U počátečního extraktu tkáně ze štítné žlázy obsahující lidský tyreoglobulin nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. Testovací metody použily stanovení schválené FDA nebo povolené v souladu s evropskou směrnicí 98/79/ES, Příloha II, Seznam A. Žádné testovací metody však nemohou zcela vyloučit příp. riziko infekce, a proto je nutné s materiálem zacházet opatrně, stejným způsobem, jako se vzorky pacientů. V případě vystavení se riziku, dodržujte nařízení příslušných zdravotnických úřadů. 14,15 U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. 1 / 5

2 Anti-Tg Nemrazit. Reagenční soupravu skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 6 týdnů 6 týdnů Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Na-heparinizovaná, K 2 a K 3 EDTA plazma. Kritérium: Výtěžnost v rozmezí hodnot séra nebo sklon úsek na ose v rozmezí < ± 2 x analytické citlivosti (LDL) + korelační koeficient > Nepoužívejte Li heparinizovanou plazmu ani plazmu s citrátem sodným. Stabilní 3 dny při 2 8 C, 1 měsíc při -20 C. Zmrazit jen jednou. 16 Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , CalSet, pro 4 x 1.5 ml , PreciControl ThyroAB, pro 4 x 2.0 ml Celkové vybavení laboratoře MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátor cobas e 411: , ProCell, 6 x 380 ml systémový pufr , CleanCell, 6 x 380 ml čistící roztok pro měřící celu , SysWash, 1 x 500 ml promývací přísada , Adapter for SysClean , Assay Cup, 60 x 60 reakčních nádobek , AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček , Clean Liner Příslušenství pro MODULAR ANALYTICS E170, analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu , PC/CC Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím , ProbeWash M, 12 x 70 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , AssayTip/AssayCup, 48 kazet x 84 reakčních nádobek nebo pipetovacích špiček, odpadní vaky , WasteLiner, odpadní vaky , SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: , ISE Cleaning Solution/ SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok , ISE Cleaning Solution/ SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok (pro USA) Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy nelze načíst čárový kód, zadejte 15místní sekvenci čísel (kromě analyzátoru cobas e 602). Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle NIBSC (Národní institut pro biologické standardy a kontrolu) standardu 65/93. Každá reagenční souprava je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace se musí provádět jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Kalibrační interval lze po přijatelné verifikaci kalibrace laboratoří prodloužit. Obnovení kalibrace se doporučuje: po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl ThyroAB. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Je-li to nutné, zopakujte měření příslušného vzorku. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek (buď v nebo kiu/l). Omezení - interference není ovlivněno ikterem (bilirubin < 1129 µmol/l nebo < 66 mg/dl), hemolýzou (Hb < 1.05 mmol/l nebo < 1.69 g/dl), lipémií (Intralipid < 2000 mg/dl) a biotinem (< 246 nmol/l nebo < 60 ng/ml). Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 15 počáteční hodnoty. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorovaná do koncentrace 300. In vitro testy se prováděly na 24 běžně užívaných léčivech. Nebyla zjištěná žádná interference. Koncentrace Tg > 2000 ng/ml mohou vést k falešně zvýšeným koncentracím anti Tg. V takovém případě by proto pro vzorky pacientů neměly být vykazovány hodnoty anti Tg. 2 / 5

3 Anti-Tg Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Meze a rozmezí Měřící rozsah (definováno mezí detekce a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí detekce se vykazují jako < Hodnoty nad měřícím rozsahem se vykazují jako > Dolní meze měření Mez detekce testu Mez detekce: < 10.0 Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 2 standardní odchylky nad nejnižším standardem (master kalibrátor, standard 1 + 2, studie opakovatelnosti, n = 21). Ředění Ředění vzorků není možné. Autoprotilátky jsou heterogenní, a proto je ředění provázeno fenoménem nelinearity. Přibližně 5 patologických vzorků může mít koncentraci > Očekávané hodnoty Studie, prováděné se soupravou v 5 klinických centrech, zahrnovaly 392 vzorků zdravých jedinců (MCE, stav: říjen 2001) potvrdily dosud používanou mezní hodnotu 115 ; tato hodnota odpovídá 94. percentilu. Více informací o referenčních intervalech pro děti, mladistvé a těhotné ženy je uvedeno v brožuře Reference Intervals for Children and Adults, anglicky: , německy: Tato brožura také obsahuje výsledky studie, zaměřené na faktory ovlivňující parametry štítné žlázy v definovaných referenčních skupinách dospělých. Použita byla různá kritéria pro zařazení či vyřazení osob (např. výsledky sonografie (objem a denzita štítnice) stejně jako kritéria směrnice National Academy of Clinical Biochemistry - NACB). Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla měřena použitím reagencií a poolovaného lidského séra podle upraveného protokolu (EP5 A) CLSI (Institut pro klinické a laboratorní standardy): 5 nebo 6krát denně po 10 dní (n = 59 nebo 60); opakovatelnost v analyzátoru MODULAR ANALYTICS E170, n = 21. Získané byly následující výsledky: Analyzátor cobas e 411 Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Preciznost byla stanovena použitím reagencií a kontrol podle protokolu (EP5 A2) CLSI (Institut pro klinické a laboratorní standardy): 2 série denně v duplikátech, každý po 21 dní (n = 84). Získané byly následující výsledky: Analyzátor cobas e 411 PC b) THYRO PC THYRO b) PC = PreciControl PC THYRO PC THYRO Porovnání metod Následuje porovnání hodnot ležících nad a pod mezí (115 ). Tyto hodnoty byly naměřeny metodou Enzymun Test (115 ) a 2 komerčními testy (60 a 40 ). Koncentrace naměřené stanovením byly v rozmezí < 10 a až do > a) Rutinní klinické vzorky Porovnání výsledků získaných stanovením a metodou Enzymun Test u klinických rutinních vzorků: Metoda Enzymun Test < 115 > 115 Celkem > < Celkem Shoda procent = 87 (95 rozmezí spolehlivosti ) Porovnání výsledků získaných stanovením a komerčním testem u klinických rutinních vzorků: Srovnávací test 1 < 60 > 60 Celkem > < Celkem Shoda procent = 93 (95 rozmezí spolehlivosti ) 3 / 5

4 Anti-Tg Porovnání výsledků získaných stanovením a druhým komerčním testem u klinických rutinních vzorků: Srovnávací test 2 < 40 > 40 Celkem > < Celkem Shoda procent = 89 (95 rozmezí spolehlivosti ) b) Vzorky pacientů Porovnání výsledků získaných stanovením a metodou Enzymun Test, u vzorků pacientů s Gravesovou chorobou (n = 39) a Hashimotovou tyreoiditidou (n = 43): Metoda Enzymun Test < 115 > 115 Celkem > < Celkem Shoda procent = 88 (95 rozmezí spolehlivosti ) Porovnání výsledků získaných stanovením a komerčním testem, u vzorků pacientů s Gravesovou chorobou (n = 39) a Hashimotovou tyreoiditidou (n = 43): Srovnávací test 1 < 60 > 60 Celkem > < Celkem Shoda procent = 91 (95 rozmezí spolehlivosti ) Porovnání výsledků získaných stanovením a druhým komerčním testem, u vzorků pacientů s Gravesovou chorobou (n = 27) a Hashimotovou tyreoiditidou (n = 24): Srovnávací test 2 < 40 > 40 Celkem > < Celkem Shoda procent = 78 (95 rozmezí spolehlivosti ) Analytická specifičnost U vzorků obsahujících až cca 1400 anti TPO (měřeno stanovením Anti TPO) byla zjištěna maximální hodnota anti Tg 51. Odkazy 1 Mansourian AR. Metabolic pathways of tetraidothyronine and triidothyronine production by thyroid gland: a review of articles. Pak J Biol Sci 2011;14(1): Ruf J, Ferrand M, Durand-Gorde JM, et al. Significance of thyroglobulin antibodies cross-reactive with thyroperoxidase (TGPO antibodies) in individual patients and immunized mice. Clin Exp Immunol 1993;92(1): Thomas L. Thyroid function. Thyroglobulin antibodies. In: Thomas L (ed.). Deutsch: Labor und Diagnose. TH-Books, Frankfurt. 5th edition 1998:1043. English: Clinical Laboratory Diagnosis. 1st edition 1998: Slatosky J, Shipton B, Wahba H. Thyroiditis: differential diagnosis and management. Am Fam Physician 2000;61(4): Garber JR, Cobin RH, Gharib H, et al. Clinical practice guidelines for hypothyroidism in adults: cosponsored by the American Association of Clinical Endocrinologists and The American Thyroid Association. Thyroid 2012;22(12): Iddah MA, Macharia BN. Autoimmune thyroid disorders. ISRN Endocrinol 2013: Schmeltz LR, Blevins TC, Aronoff SL, et al. Anatabine supplementation decreases thyroglobulin antibodies in patients with chronic lymphocytic autoimmune (Hashimoto s) thyroiditis: A randomized controlled clinical trial. J Clin Endocrinol Metab 2014;99:E137-E Feldt-Rasmussen U. Analytical and clinical performance goals for testing autoantibodies to thyroperoxidase, thyroglobulin, and thyrotropin receptor. Clin Chem 1996;42(1): Lazarus J, Brown RS, Daumerie C, et al European Thyroid Association guidelines for the management of subclinical hypothyroidism in pregnancy and in children. Eur Thyroid J 2014;3: Nam HY, Paeng JC, Chung JK, et al. Monitoring differentiated thyroid cancer patients with negative serum thyroglobulin. Diagnostic implication of TSH-stimulated antithyroglobulin antibody. Nuklearmedizin 2014;53(2): Spencer CA, Takeuchi M, Kazarosyan M, et al. Serum Thyroglobulin Antibodies: Prevalence, Influence on Serum Thyroglobulin Measurement, and Prognostic Significance in Patients with Differentiated Thyroid Carcinoma. J Clin Endocrin Metabol 1998;83(4): Spencer C. International Thyroid Testing Guidelines. National Academy of Clinical Biochemistry, August 2001;Section 3E, Prentice L, Kiso Y, Fukuma N, et al. Monoclonal Thyroglobulin Autoantibodies: Variable Region Analysis and Epitope Recognition. J Clin Endocrin Metabol 1995;80: Occupational Safety and Health Standards: Bloodborne pathogens. (29 CFR Part ). Fed. Register. 15 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 16 Greiling H, Gressner AM. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie. 3rd edition, Stuttgart; New York: Schattauer 1995:1012. Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky (pro USA: pro definici použitých symbolů navštivte stránku GTIN Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2017, Roche Diagnostics 4 / 5

5 Anti-Tg Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v / 5