HE4. Lidský epididymální protein 4. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 ms_ v Česky Upozornění Naměřené hodnoty ve vzorcích pacientů se mohou lišit v závislosti na použitém postupu stanovení. Na laboratorním nálezu musí být proto vždy uveden údaj, kterým testem byl stanoven. Hodnoty, stanovené ve vzorku pacienta rozdílnými testy, nemohou být přímo mezi sebou porovnávány a mohly by způsobit chybnou zdravotní interpretaci. Jestliže dojde ke změně v metodě stanovení, používané k monitorování léčby, musí být hodnoty získané po změně na novou metodu potvrzeny paralelním měřením oběma metodami. Použití Imunologický test pro kvantitativní stanovení v lidském séru a plazmě. Stanovení se používá jako pomůcka při monitorování rekurence nebo progresivního onemocnění pacientů s epiteliálním karcinomem. Sériové měření hodnot pacientek by mělo být použito ve spojení s dalšími klinickými nálezy používanými pro monitorování karcinomu. Dále slouží k použití ve spojení se stanovením Elecsys CA 25 II jako pomůcka pro odhad rizika epiteliálního karcinomu u žen před a po menopauze s tumorem v malé pánvi. Výsledky musí být interpretovány ve spojení s dalšími metodami v souladu s platnými klinickými doporučeními. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn (, také známý jako WFDC2) patří do rodiny proteinů označovaných jako "whey acidic four-disulfide core (WFDC)" s vlastnostmi podobnými inhibitoru trypsinu.,2 Odpovídající gen kóduje 3 kd protein. Ve své rozvinuté glykosylované podobě má protein molekulovou hmotnost přibl kd a skládá se z jednoho peptidového řetězce obsahujícího 2 WFDC domény. 3 byl poprvé zjištěn v epitelu distálního nadvarlete. 4 Vykazuje nízkou expresi v epitelu respiračních a reprodukčních tkání včetně, ale vysokou expresi ve tkáni karcinomu. 5 Vysoce sekretované hladiny lze nalézt rovněž v séru pacientů s karcinomem. U se také předpokládá, že pomáhá při zjišťování rizika epiteliálního karcinomu. Karcinom je celosvětově 4. nejčastější příčinou úmrtí na rakovinu u žen. Jde o formu gynekologického karcinomu s nejvyšší úmrtností, s možností vyléčení, je-li diagnostikován včas 7,8 a léčen chirurgy, kteří jsou obeznámeni se způsobem léčby karcinomu. 9, Symptomy karcinomu jsou nicméně spojovány s přítomností tumoru adnex a jsou často nejasné a nespecifické karcinomu je tak zjištěno až v pozdním stádiu. Podle International Agency for Research on Cancer je míra přežití 5 let u pacientů s karcinomem 4. Pokud bude ovšem nemoc diagnostikována včas, naroste míra přežití až na 94. Jako jediný marker tumoru má nejvyšší senzitivitu na detekci karcinomu, zejména v. stádiu onemocnění, v raném asymptomatickém stádiu. Kombinace CA 25 a poskytuje nejvyšší senzitivitu s 7.4 při specifičnosti 95. je v rané fázi endometriálního karcinomu senzitivnější než CA 25. Zvýšené sérové hladiny s normálním CA 25 ukazuje přítomnost buď karcinomu nebo jiného druhu karcinomu, např. karcinomu endometria.,2 V kombinaci s jinými markery jako je CA 25 může přispět ke zjištění, zda je tumor v malé pánvi benigní nebo maligní u žen před a po menopauze. Duální kombinace markeru CA 25 a je přesnějším prediktorem zhoubnosti než když jsou použity samostatně. Huhtinen a kol. zaznamenal 78. senzitivitu při 95 specifičnosti u karcinomu vs. endometriotické cysty. 3 Hladiny korelují s klinickou odezvou na léčbu nebo rekurencí u žen s diagnostikovaným karcinomem Elecsys 2 MODULAR ANALYTICS E7 cobas e 4 cobas e cobas e 2 stanoveným CT-skenom. by tak mohl být důležitým časným indikátorem pro rekurenci onemocnění. 4 Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 8 minut.. inkubace: µl vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka proti a monoklonální protilátka proti, značená rutheniovým komplexem a) reagují a vytváří sendvičový komplex. 2. inkubace: Po přidání mikročástic potažených streptavidinem se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako. M R R2 Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), nádobka,.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice,.72 mg/ml; konzervans. Anti--Ab~biotin (šedé víčko), nádobka, ml: Biotinylovaná monoklonální protilátka proti (myší).75 mg/l; fosfátový pufr mmol/l, ph.5; konzervans. Anti--Ab~Ru(bpy) (černé víčko), nádobka, ml: Monoklonální protilátka proti (myší) značená rutheniovým komplexem.5 mg/l; fosfátový pufr mmol/l, ph 7.4; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C do uvedeného data exspirace 2-7, V 7. Česky /

2 ms_ v7. Stabilita: po otevření při 2 8 C v analyzátorech 2 týdnů 28 dní Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Li heparin, K 2 a K 3 EDTA plazma, jakož i zkumavky s Li heparinem, obsahující separační gel. Kritérium: Sklon úsek na ose ±, korelační koeficient.95. Stabilní 48 hodin při 2 8 C, 5 hodin při 5 25 C, 2 týdnů při 2 C. Vzorky mohou být zmrazeny 2x. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 2 25 C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , CalSet, pro 4 x ml , PreciControl, pro 2 x ml každý z PreciControl a , Diluent MultiAssay, 2 x ml diluentu vzorku Celkové vybavení laboratoře Elecsys 2, MODULAR ANALYTICS E7 nebo analyzátor cobas e Pro odhad rizika epiteliálního karcinomu s (Risk of Ovarian Malignancy Algorithm): , CA 25 II, testů , CA 25 II CalSet, 4 x ml , PreciControl Tumor Marker, pro 2 x 3 ml každý PreciControl Tumor Marker a , Diluent Universal, 2 x ml diluentu vzorku nebo , Diluent Universal, 2 x 3 ml diluentu vzorku Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2 a analyzátory cobas e 4: , ProCell, x 38 ml systémový pufr 29722, CleanCell, x 38 ml čistící roztok pro měřící celu , Elecsys SysWash, x 5 ml promývací přísada 93359, Adapter for SysClean 782, Elecsys 2 AssayCup, x reakčních nádobek 7799, Elecsys 2 AssayTip, 3 x 2 pipetovacích špiček Příslušenství pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu 3234, PC/CC Cups, 2 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím 35729, ProbeWash M, 2 x 7 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , PreClean M, 5 x ml systémový čistící roztok 2237, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky 3235, WasteLiner, odpadní vaky 3275, SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: 29853, Elecsys SysClean, 5 x ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 5místnou sekvenci čísel. Analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 2 C a umístěte je do reagenčního kotouče (2 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována dle metody EIA od Fujirebio Diagnostics, Inc. Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: po 2 týdnech při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek v. Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikteritou (bilirubin < 3 µmol/l nebo < mg/dl), hemolýzou (Hb <.2 mmol/l nebo <. g/dl), lipémií (Intralipid < 2 mg/dl) a biotinem (< 25 nmol/l nebo < 5 ng/ml). Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ± počáteční hodnoty. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference zaznamenána do koncentrace 5 IU/mL. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro do koncentrace 4. 2 / 2-7, V 7. Česky

3 ms_ v7. In vitro testy byly prováděny na 8 běžně užívaných lécích. Nebyla zjištěna žádná interference. Speciální léky na rakovinu byly testovány v koncentracích uvedených v tabulce níže. Nebyla zjištěna žádná interference. Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ± počáteční hodnoty. Droga Koncentrace (µg/ml) Carboplatin Cisplatin 8 Cyklofosfamid 5 Dexamethason 2 Doxorubicin 2 Leucovorin 75 Melphalan 5 Methotrexat disodium 5 Paclitaxel 25 Fluorouracil 9 Bevacizumab (Avastin) 75 Erlotinib (Tarceva) 5 Rituximab (MabThera) 75 Trastuzumab (Herceptin) Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Rozsah měření 5. 5 (definováno Detekčním Limitem a maximem master křivky). Hodnoty pod Detekčním Limitem jsou vykazovány jako < 5.. Hodnoty nad rozsahem měření jsou vykazovány jako > 5 (nebo až 3 při 2násobném ředění vzorku). Spodní limity měření Limit blanku (LoB), Detekční limit (LoD) a Kvantitativní limit (LoQ) Limit Blanku = 5. Detekční Limit = 5. Kvantitativní Limit = 2. s celkovou přípustnou chybou 3 Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP7 A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 ). Kvantitativní Limit je definován jako nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze přesně kvantifikovat s celkovou přípustnou chybou 3. Studie byla provedena použitím 5 vzorků koňských sér a naředěných vzorků lidských sér, každé na LoB a LoD. Vzorky byly testovány v sériích po dobu 3 dnů na 2 analyzátorech s hodnotami n =. LoB a LoD byly vypočítány jako.358, resp... Pro LoQ byly 3 vzorky lidských sér naředěny a měřeny v sériích po dobu 3 dnů na 2 analyzátorech. Při celkové přípustné chybě 3 bylo LoQ Linearita Stanovení Elecsys je lineární v celém rozsahu měření od Vzorky byly připraveny dle CLSI EP A, naředěním 3 vzorků sér a 3 plazem, každý s Diluent MultiAssay ve více krocích v rozmezí od > 5 až do LoB. Ředění Vzorky s koncentrací nad rozsahem měření lze ředit s Diluent MultiAssay. Doporučený poměr ředění je :2 (buď automaticky na analyzátorech MODULAR ANALYTICS E7, Elecsys 2 nebo cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 75. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E7, Elecsys 2 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Studie v klinickém centru v Německu se stanovením Elecsys na sérech 358 zdánlivě zdravých žen poskytlo následující výsledky: () Věk (roky) N Medián 95. percentil < Distribuce v procentech () stanovení hodnot naměřených ve 2 klinických centrech ve Španělsku a Německu stanovením Elecsys u 89 ženských vzorků je shrnuta v tabulce níže: Zdraví jedinci Před menopauzou 9 7 Hodnoty Elecsys () > 5 (84.4 ) Po menopauze 3 Benigní nemoci (59.4 ) Před menopauzou 77 (9.4 ) Po menopauze 2 2 (.8 ) Těhotenství 5 5 Negynekologické onemocnění ( ) 35 (45.7 ) CHF b) 23 9 Rakovina Rakovina Před menopauzou Rakovina Po menopauze Rakovina endometria (39. ) 39 2 (3.8 ) 97 (.3 ) 49 8 (3.7 ) Rakovina prsu Gastrointestinální malignity (4.8 ) 4 9 (4.3 ) Rakovina plic 23 5 (2.7 ) N (procentuální rozdělení) 3 (4.4 ) 4 (37.7 ) (9. ) 3 (3.4 ) (7. ) (47.8 ) 7 (7.9 ) 9 (9. ) 2 (4.8 ) 9 (4.4 ) 2 (43.5 ) 7 (3.4 ) (. ) 3 (2.8 ) (. ) 9 (8.8 ) (7. ) 3 (3. ) 3 (33.3 ) 34 (35. ) 9 (8.4 ) 5 (. ) (3. ) (43.5 ) 7 (2. ) 5 (2.8 ) 28 (28.9 ) (2. ) (2. ) (2.2 ) (4.3 ) 2 (5. ) (.2 ) (2. ) Rakovina moč měchýře (25. ) (33.3 ) (33.3 ) (8.3 ) 2-7, V 7. Česky 3 /

4 ms_ v7. b) CHF = kongestivní selhání srdce V této studii mělo 84 zdravých žen před menopauzou hodnotu stanovení Elecsys při nebo pod 7 a 97 zdravých žen po menopauze mělo hodnotu stanovení Elecsys při nebo pod 4. V této studii byl 95. percentil pro zdravé ženy před a po menopauze (všech věkových skupin) 92., resp. 2. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Monitorování stavu onemocnění u pacientek s diagnostikovaným karcinomem Účinnost stanovení Elecsys jako pomůcky při monitorování stavu onemocnění u pacientek s karcinomem byla měřena změnou hladin v sériových vzorcích sér pacientek ve srovnání se změnami ve stavu nemoci. Studie zahrnující celkem 375 párů pozorování byla provedena s 3 odběry krve na pacientku. Pozitivní změna byla definovaná jako nárůst hodnoty o nejméně 2 ve srovnání s předchozí hodnotou testu. 58. (29/5) vzorků pacientek s pozitivní změnou korelovalo s progresí onemocnění, zatímco 84. (273/325) sériových vzorků pacientek bez významné změny hodnot nekorelovalo s žádnou progresí. Celková konkordance byla 8.5 (32/375). Následující tabulka představuje údaje ve formátu 2 x 2. Změna stavu onemocnění na sekvenční pár Nárůst koncentrace Progrese Bez progrese Celkem > Celkem Odhad rizika u pacientek s tumorem v malé pánvi Účinnost stanovení Elecsys v kombinaci se stanovením Elecsys CA 25 II pro odhad rizika epiteliálního karcinomu u pacientek s tumorem v malé pánvi byla měřena v mezinárodním klinickém pokusu mnoha center použitím depotních vzorků. Pro odhad rizika epiteliálního karcinomu byl vytvořen algoritmus ( = Risk of Ovarian Malignancy Algorithm). Algoritmus bere v potaz hodnoty a CA 25, jakož i stav menopauzy pacientky. Algoritmus vypočítá prediktivní pravděpodobnost nálezu epiteliálního karcinomu při operaci. Výpočet Prediktivního Indexu (PI) 5 Prediktivní index se počítá zvlášť pro pacientky před a po menopauze použitím rovnic () a (2) níže. Pro výpočet PI jsou hodnoty získané stanovením Elecsys a Elecsys CA 25 II vloženy do rovnic níže, podle stavu menopauzy žen. () Před menopauzou: PI = *LN[] +.2*LN[CA25] (2) Po menopauze: PI = *LN[] +.732*LN[CA25] kde LN = Přirozený Logaritmus. Nepoužívejte LOG = Log. Výpočet hodnoty 5 Pro výpočet hodnoty (tj. prediktivní pravděpodobnosti), vložte do rovnice (3) vypočítanou hodnotu pro PI: (3) hodnota () = exp(pi) / [ + exp(pi)] *, kde, exp(pi) = e PI UPOZORNĚNÍ: Tyto rovnice byly použity pro výpočet hodnot stanovením Elecsys od a stanovením Elecsys CA 25 II od.42 5 U/mL. Příklady níže by měly být použity pro validaci výpočtů PI a před uvolněním výsledků pacientky: Stav menopauzy Před menopauzou () Hodnoty Elecsys CA 25 II (U/mL) (2.38*3.24) Výpočet PI PI + (.2*4.3) (2.38*5.957) + (.2*3.82) Stav menopauzy Po menopauze () Hodnoty Elecsys CA 25 II (U/mL) (.4*4.2) Výpočet PI PI + (.732*2.425) (.4*5.948) + (.732*3.22) Stratifikace do skupin s malým a velkým rizikem Do studie bylo zahrnuto celkem 384 depotních vzorků pacientek a byla měřena prediktivní pravděpodobnost karcinomu, jakož i schopnost rozdělení do skupin s malým a velkým rizikem založených na hodnotách. Algoritmus byl použit k stratifikaci žen do rizikových skupin pro zjištění epiteliálního karcinomu. Pro specifičnost 75 pro kombinaci stanovení Elecsys a Elecsys CA 25 II byly použity následující cutpointy: Ženy před menopauzou Hodnota.4 = vysoké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Hodnota <.4 = nízké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Ženy po menopauze Hodnota 29.9 = vysoké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Hodnota < 29.9 = nízké riziko nálezu epiteliálního karcinomu Stratifikace rizika všech 384 pacientek (94 před a 9 po menopauze) s tumorem v malé pánvi použitím hodnot pro kombinaci stanovení Elecsys a Elecsys CA 25 II je zobrazena v následující tabulce: Skupiny pacientek s tumorem v malé pánvi N Pacientky před menopauzou <.4 Stádium I-II EOC c) (37.5 ) Stádium I-IIIC 2 7 EOC d) (33.3 ) Stádium I-IV EOC Stádium III-IV EOC 25 7 (28. ) 9 (. ) EOC bez stádia 2 2 (.7 ) Benigní 57 8 (75.2 ) c) EOC = epiteliální karcinom.4 (2.5 ) 4 (.7 ) 8 (72. ) 8 (88.9 ) (83.3 ) 39 (24.8 ) Pacientky po menopauze N < 29.9 (37.5 ) 34 9 (2.5 ) 53 (8.9 ) 37 4 (.8 ) 44 2 (4.5 ) 93 7 (7.3 ) 29.9 (2.5 ) 25 (73.5 ) 43 (8. ) 33 (89.2 ) 42 (95.5 ) 22 (23.7 ) d) Stádium I-IIIB a Stádium I-IIIC (omentum negativní, lymfatické uzliny pozitivní) EOC Senzitivita pro zařazení pacientek se stádiem I IV epiteliálního karcinomu do skupiny s velkým rizikem byla 84.3 při specifičnosti 75, a tak bylo 75. žen s benigním tumorem v malé pánvi zařazeno do skupiny s malým rizikem. Pozitivní a negativní prediktivní hodnoty byly 4.9 resp. 9. AUC (95 CI): Ženy před menopauzou =.858 ( ) Ženy po menopauze =.923 ( ) 4 / 2-7, V 7. Česky

5 ms_ v7. Je třeba brát v úvahu následující fakta Hladinu nelze použít jako absolutní důkaz přítomnosti nebo absence zhoubného onemocnění a stanovení Elecsys by nemělo být použito jako test pro screening rakoviny. Výsledky Elecsys by měly být použity ve spojení s dalšími klinickými údaji, např. symptomy, anamnestickými údaji, atd. Jsou-li výsledky Elecsys v rozporu s klinickými nálezy, doporučujeme pro potvrzení výsledku další testování. Výsledky Elecsys by neměly být použity navzájem s metodami jiných výrobců pro měření. Výsledky Elecsys CA 25 II by neměly být použity navzájem s metodami jiných výrobců pro měření CA 25 při výpočtu. Pacientky s potvrzeným karcinomem mohou mít hodnoty stanovení Elecsys ve stejném rozmezí jako zdravé ženy. Některé histologické typy karcinomu (např. mucinózní nebo germinativní tumory) zřídka produkují, z toho důvodu se stanovení Elecsys nedoporučuje pro monitorování pacientek s prokázaným mucinózním nebo ovariálním germinatívním tumorem. 5 A opačně, zvýšené hladiny antigenu mohou být přítomné u jedinců s renálním, jaterním a nemaligním onemocněním. nebyl validován pro následující skupiny pacientek: pacientky dříve léčené na zhoubná onemocnění, pacientky s právě probíhající léčbou chemoterapií a pacientky mladší než 8 let. Jak je uvedeno, selháním stanovení Elecsys a/nebo Elecsys CA 25 II nebo chybou při výpočtu výsledků může dojít k nepřesnému odhadu rizika a nesprávnému sledování pacientky. Zejména falešně nízké výsledky stanovení mohou vést k závěru, že pacientka má nízké riziko epiteliálního karcinomu, což může mít za následek přeřazení pacientky na méně specializovanou úroveň péče. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, vzorků a kontrol podle protokolu (EP5 A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech každý pro 2 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: Vzorek Analyzátory Elecsys 2 a cobas e 4 Průměr Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum PreciControl PreciControl Analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2 Vzorek Průměr Opakovatelnost Mezilehlá preciznost Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Analyzátory MODULAR ANALYTICS E7, cobas e a cobas e 2 Vzorek Průměr Opakovatelnost Mezilehlá preciznost PreciControl PreciControl Porovnání metod Porovnání stanovení Elecsys (y) s manuální metodou (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace: Počet naměřených vzorků: 52 Passing/Bablok Lineární regrese y =.8x y =.x +.4 τ =.88 r =.978 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 22 až 5. Porovnání stanovení Elecsys (y) s automatizovanou metodou (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace: Počet naměřených vzorků: 73 Passing/Bablok Lineární regrese y =.9x +.4 y =.875x +. τ =.83 r =.985 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 2 až 4. Analytická specifičnost Zjištěna byla následující křížová reaktivita, testováno s koncentrací 5 až 55 : Proteins (skupina WFDC) Testované koncentrace Křížová reaktivita Elafin e) /SKALP f) SLPI g) e) Elafin = elastase-specific inhibitor f) SKALP = skin-derived antileukoproteinase g) SLPI = secretory leucocyte protease inhibitor Odkazy Israeli O, Goldring-Aviram A, Rienstein S, et al. In silico chromosomal clustering of genes displaying altered expression patterns in ovarian cancer. Cancer Genet Cytogenet 25;: Bouchard D, Morisset D, Bourbonnais Y, et al. Proteins with wheyacidic-protein motifs and cancer. Lancet Oncol 2;7: Bingle L, Singleton V, Bingle CD. The putative ovarian tumour marker gene (WFDC2), is expressed in normal tissues and undergoes complex alternative splicing to yield multiple protein isoforms. Oncogene 22;2: Kirchhoff C. Molecular characterization of epididymal proteins. Rev Reprod 998;3: Drapkin R, von Horsten HH, Lin Y, et al. Human epididymis protein 4 () is a secreted glycoprotein that is overexpressed by serous and endometrioid ovarian carcinomas. Cancer Res 25;5: Hellström I, Raycraft J, Hayden-Ledbetter M, et al. The (WFDC2) protein is a biomarker for ovarian carcinoma. Cancer Res 23;3: Pickle LW, Hao Y, Jemal A, et al. A new method of estimating United States and state-level cancer incidence counts for the current calendar year. CA Cancer J Clin 27;57: Cancer Mondial Statistical Information System: 9 Earle CC, Schrag D, Neville BA, et al. Effect of surgeon specialty on processes of care and outcomes for ovarian cancer patients. J Natl Cancer Inst 2;98: , V 7. Česky 5 /

6 ms_ v7. Engelen MJ, Kos HE, Willemse PH, et al. Surgery by consultant gynecologic oncologists improves survival in patients with ovarian carcinoma. Cancer 2;: Moore RG, Brown AK, Miller MC, et al. The use of multiple novel tumor biomarkers for the detection of ovarian carcinoma in patients with a pelvic mass. Gynecol Oncol 28;8: Moore RG, Brown AK, Miller MC, et al. Utility of a novel serum tumor biomarker in patients with endometrioid adenocarcinoma of the uterus. Gynecol Oncol 28;: Huhtinen K, Suvitie P, Hiissa J, et al. Serum concentration differentiates malignant ovarian tumours from ovarian endometriotic cysts. Br J Cancer 29;: Anastasi E, Marchei GG, Viggiani V, et al. : a new potential early biomarker for the recurrence of ovarian cancer. Tumor Biol 2;3: Moore RG, McMeekin DS, Brown AK, et al. A novel multiple marker bioassay utilizing and CA25 for the prediction of ovarian cancer in patients with a pelvic mass. Gynecol Oncol 29;:4-4. Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 988 Nov;2(): Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. je ochrannou známkou Fujirebio Diagnostics, Inc. Antigeny a protilátky použité v produktech Roche mají licenci Fujirebio Diagnostics, Inc. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo smíchání Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 23, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse, D-835 Mannheim / 2-7, V 7. Česky