Zajímavé kazuistiky z laboratoře Mgr.Kamila Kutějová a kol. Spadia Lab Setkání uživatelů Průtokové cytometrie Beckman Coulter květen 2017, Bořetice
Plazmocytární leukémie Je vzácné krevní nádorové onemocnění vycházející z plazmatických buněk, incidence je 2 4% ze všech mnohočetných myelomů Jsou rozlišovány 2 formy primární de novo PCL s akutní a rychle progredující leukemickou fází (60% ze všech PCL) sekundární, která se vyvíjí leukemickou transformací z MM a zpravidla jde o fatální konečnou fázi u pacientů s refrakterním MM Diagnostickým kritériem je absolutní ( více než 2x 10x9/l) nebo relativní (více než 20%) počet maligních plazmocytů v periferní krvi Jejich morfologie je různá od zralých forem plazmocytů až po formy blastické Odpověď na léčbu je obecně u primární PCL lepší než u sekundární PCL, kde většinou pacienti nereagují na léčbu a medián přežití je nižší než 2 měsíce Není známá informace, že by fenotyp plazmablastů či plazmocytů souvisel s dobou přežití pacientů Flowcytometrie slouží k rychlému stanovení počtu maligních plazmocytů v periferní krvi a umožňuje stanovení diagnózy plazmocytární leukémie
Plazmocytární leukémie Pacientka 68 let, léčena pro mnohočetný myelom od 2014, laboratoř 13.7.2016 klinika hematoonkologie FNO kde byla přeložena z Nemocnice Orlová (od 11.7.2016 hospitalizována pro febrilie suspektní uroinfekt, léčba Cefotaximem) Při přijetí do FNO byla stabilní, afebrilní, hyperkalcémie nebo hyperproteinémie lab.neprokázána, pokračováno v nasazené ATB terapii 13.7.2016 ráno rapidní zhoršení stavu, vysoké horečky, počínající pneumonie, přeložení na JIP Při podezření na možnou progresi myelomu (vyšší KM a LDH) doplněna 13.7.2016 sternální punkce cytologicky 38,4% plazmocytů, progrese sérových volných řetězců FLC escape tedy progrese myelomu, v diff rozpočtu periferní krve 17% plazmocytů, flow PK až 21% plazmocytů
Plazmocytární leukémie Závěr: jde o leukemizaci a fulminantní progresi onemocnění, která se pravděpodobně podílí i na poruše vědomí (infiltrace CNS) a na plícním postižení. Tuto fulminantní progresi onemocnění nelze terapeuticky ovlivnit, proto dále jen symptomatický a přísně paliativní postup. Stav pacientky rychle progredoval do kómatu a exitus letalis nastal 15.7.2016 ve 22.55 hod srdeční zástava Bezprostřední příčina smrti srdeční selhání při susp.ak.infarktu myokardu Základní příčina smrti fulminantní progrese mnohočetného myelomu
Plazmocytární leukémie Symptomatický mnohočetný myelom, IgG lambda, dg 7/2014 CRAB: anémie, RTG skeletu bez známek osteolýzy, MIg vstupně 50g/l, cytol.36% Cytogenetika: dva odvozené klony s komplexními chromozomovými aberacemi, dominuje delece 13q14 a trizomie/tetrazomie lokusu 1q21 spojená s nebalancovanými translokacemi chromozomů 2 a 21, dále přítomny numerické a strukturní aberace chromozomů X, 1, 2, 7, 8 (terazomie CMYC genu), 12, 14 a 21. 1.progrese 9/2015, dle MIg 2. progrese 20.3.2016 dle MIg 1.vysokodávkovaná chemoterapie s autologní transplantací krvetvorby 22.3.2016 3. fulminantní progrese 13.7.2016 charakteru plazmocytární leukémie
Plazmocytární leukémie Zkumavka MM: clambdafitc /ckappape /CD138 PC5.5 /CD27 PC7 /CD56 APC / CD19 APC AF750 /CD38 PB /CD45 KromeOrange + zkumavka LST: kappa+cd8 FITC/lambda+CD56 PE/CD5 PC5.5/CD38 PC7/CD3 APC/CD19 APC F750/CD20+CD4 PB/ CD45 KromeOrange PerFix nc (Beckman Coulter)
Plazmocytární leukémie kostní dřeň Naměřeno 1 000 000 leukocytů 41,5 % PC (CD38+CD138+)
Plazmocytární leukémie N PC (CD19+CD56 ), A PC (CD19 CD56+/CD19 CD56 /CD19+CD56+) Klonalita cyt Ig Lambda PC (a PC) cytoplazmatická exprese kappa/lambda <0,3
Plazmocytární leukémie CD27 negativní
Plazmocytární leukémie Nižší intenzita exprese CD38 na PC mladší formy plazmocytů
Plazmocytární leukémie Nižší intenzita exprese CD38 na PC mladší formy plazmocytů
Plazmocytární leukémie periferní krev Naměřeno 1 000 000 leukocytů 20,5 % PC (CD38+CD138+)
Plazmocytární leukémie N PC (CD19+CD56 ), A PC (CD19 CD56+/CD19 CD56 /CD19+CD56+) Klonalita cyt Ig Lambda PC (a PC) cytoplazmatická exprese kappa/lambda <0,3 CD27 negativní
Plazmocytární leukémie periferní krev
Plazmocytární leukémie Kostní dřeň 67letá pacientka, leden 2016
Plazmocytární leukémie Kostní dřeň 67letá pacientka, leden 2016
Plazmocytární leukémie Periferní krev 67letá pacientka, leden 2016
Plazmocytární leukémie Periferní krev 67letá pacientka, leden 2016
Plazmocytární leukémie Kostní dřeň 59letá pacientka, říjen 2015
Plazmocytární leukémie Periferní krev 59letá pacientka, říjen 2015
Plazmocytární leukémie Periferní krev 59letá pacientka, říjen 2015
Plazmocytární leukémie Exprese CD56 na PC nižší v PK oproti KD
Plazmocytární leukémie Exprese CD56 na PC nižší v PK oproti KD
Plazmocytární leukémie Exprese CD56 na PC nižší v PK oproti KD
Plazmocytární leukémie CD27 ztráta genu nalézána u progrese MM
Sézaryho syndrom 48 letá pacientka, kožní změny zhruba od r.2010, zpočátku hodnoceno jako atopická dermatitida, léčena kortikoidy a poté i Sandimmunem Říjen 2015 zhoršení nálezu, dalším přešetřením stanovena diagnoza Sezaryho syndromu PET/CT leden 2016 s nálezem mírné axilární a tříselné lymfadenopatie, po zahájení léčby Introan + Targretin (systémový retinoid bexaroten) zlepšení kožního nálezu, poslední měsíce stabilní, v chladu se cítí dobře, zhoršení vždy po expozici sluncem zarudnutí a bolestivá kůže Probíhá terapie cílená na kůži, systémová chemoterapie zatím neindikována, nadále péče dermatologické ambulance
Mycosis fungoides/ Sézaryho syndrom Mycosis fungoides je lymfom ze zralých T buněk s lokalizací v kůži charakterizovaný infiltrací epidermis a dermis malými až středně velkými T lymfocyty s cerebriformním jádrem, postižení kostní dřeně a periferní krve je i v pokročilých případech vzácné Sézaryho syndrom je generalizovaný lymfom ze zralých T buněk s postižením kůže, lymfatických uzlin a periferní krve, považuje se za agresivní leukemickou variantu mycosis fungoides Nemocné trápí urputné svědění a také mají špatnou regulaci teploty těla způsobenou erytrodermií Neoplastické buňky v PK pocházejí většinou z kožní lokalizace
Mycosis fungoides/ Sézaryho syndrom Pro stanovení diagnozy je nutná histologie kůže a dále průkaz více než 5 10% patologických lymfocytů v periferním krevním obrazu Léčebné postupy jsou identické jako u MF, prognóza pacientů je však mnohem nepříznivější a léčebné efekty menší a krátkodobější (procento pětiletého přežití se uvádí u MF 88%, u SS 24%) Léčba první linie : Extrakorporální fotoforéza, INF alfa, Denileukin diftitox, Chlorambucil a prednison Léčba druhé linie: Bexaroten, Chemoterapie, Alemtuzumab (anti CD52), Metotrexát
Mycosis fungoides/ Sézaryho syndrom Buňky MF/SS nemají plně specifický imunofenotyp, který by umožňoval jejich snadnou detekci v PK čikd Neoplastické buňky vycházejí z linie paměťových helperů, takže základními znaky, které exprimují, jsou CD4 a CD45RO (CD8+ formy jsou vzácné) Příslušnost k T linii je demonstrována expresí dalších znaků CD2, CD3, CD5 a TCR alfa/beta NegativníbývajíznakyCD7(ažu2/3případů), CD26, CD62L a CD25 (u poloviny případů), jehožexpreseseněkdy spojuje s horší prognózou
Sézaryho syndrom T/NK lymfoproliferace panel 1.zkumavka: CD45 RO FITC /CD26 PE /CD2 PC7 /CD3 APC /CD7 APC AF700 / CD45 RA APC AF750 /CD4 PB /CD45 KromeOrange 2.zkumavka: TCRgd FITC /TCRab PE /CD25 PC5.5 /CD3 APC / CD16 APC AF750 / CD57 PB /CD45 KromeOrange + LST zkumavka
Sézaryho syndrom LST zkumavka CD3+ (nižší exprese)
Sézaryho syndrom LST zkumavka CD5+
Sézaryho syndrom LST zkumavka CD4+
Sézaryho syndrom T/NK screen 1.zkumavka CD26+
Sézaryho syndrom T/NK screen 1.zkumavka CD45RO+
Sézaryho syndrom T/NK screen 1.zkumavka CD7 CD2+
Sézaryho syndrom T/NK screen 1.zkumavka
Sézaryho syndrom T/NK screen 2.zkumavka TCR alfa/beta+
Sézaryho syndrom T/NK screen 2.zkumavka CD16 CD57
Sézaryho syndrom T/NK screen 2.zkumavka CD25+ slabě
Sézaryho syndrom T/NK screen 2.zkumavka
Sézaryho syndrom Kontrolní vyšetření 9.5.2017 nepatrné zvýšení patologické populace T lymfocytů v periferní krvi
Děkuji za pozornost