Návod k laboratornímu cvičení. Bílkoviny

Transkript

1 Úkol č. 1: Důkazy bílkovin ve vaječném bílku a) natvrdo uvařené vejce s kyselinou dusičnou Pomůcky: Petriho miska, pipeta, nůž. Návod k laboratornímu cvičení Bílkoviny Chemikálie: koncentrovaná kyselina dusičná HNO 3 (O,C), natvrdo uvařené vejce. 1. Natvrdo uvařené vejce rozkrojíme, žloutek můžeme odstranit. 2. Pomocí pipety pokapeme natvrdo uvařený bílek koncentrovanou kyselinou dusičnou. b) xantoproteinová reakce Pomůcky: zkumavky, odměrný válec, síťka, stojan na zkumavky, kahan, skleněná tyčinka Chemikálie: 0,75% roztok NaCl, vaječný bílek, 10% roztok amoniaku NH 3 (C,N,X i ), 45% roztok kyselina dusičné HNO 3 (O,C) 1. Připravíme roztok vaječného bílku- syrový bílek z 1 slepičího vejce protřepeme s 10-ti násobným objemem 0,75% roztoku NaCl a směs filtrujeme přes 2x přeloženou gázu. 2. Ve zkumavce zahřívejte 2 cm 3 roztoku vaječného bílku s 1cm 3 45% roztoku kyseliny dusičné. 3. Reakční směs nechte vychladnout a opatrně přidejte asi 2 cm 3 roztoku amoniaku (výsledná reakce musí být alkalická=zásaditá). 1

2 c) biuretová reakce Pomůcky: zkumavky, odměrný válec, držák na zkumavky, kahan Chemikálie: roztok vaječného bílku(viz.předcházející úloha), 10% roztok hydroxidu sodného NaOH (C,X i ),1% roztok síranu měďnatého CuSO 4 (X n ) 1. Do zkumavky nalijeme 1 cm 3 roztoku vaječného bílku, přidáme 0,2 cm 3 1% roztoku síranu měďnatého a 1 cm 3 10% roztoku hydroxidu sodného. 2. Směs ve zkumavce protřepeme a pozorujeme. Princip úkolu a závěry: 2

3 Úkol č. 2: Důkaz dusíku a síry vázaných v bílkovině Pomůcky: zkumavky, odměrný válec, fenolftaleinový papírek, váha, plynový kahan. Chemikálie: roztok vaječného bílku, 40% roztok hydroxidu sodného NaOH (C,X i ), 5% roztok dusičnanu olovnatého Pb(NO 3 ) 2 (T,N,O). 1. K roztoku vaječného bílku ve zkumavce přilijeme stejný objem 40% roztoku NaOH a směs rozdělíme do dvou zkumavek. 2. Směs v první zkumavce opatrně zahříváme k varu. Do ústí zkumavky opatrně vložíme navlhčený fenolftaleinový papírek. Pozorujeme barevnou změnu. 3. Do druhé zkumavky přidáme 5% roztok dusičnanu olovnatého (2 cm 3 ) a směs opatrně zahříváme. Pozorujeme barevnou změnu. Princip úkolu a závěr: 3

4 Úkol č. 3: Vlastnosti bílkovin Pomůcky: zkumavky, pipeta, kádinka, váha, kahan Chemikálie: koncentrovaná kyselina dusičná HNO 3 (O,C), 40% roztok hydroxidu sodného NaOH (C,X i ), nasycený roztok dusičnanu olovnatého Pb(NO 3 ) 2 (T,N,O). 1. Do 4 zkumavek nalijeme stejné množství roztoku vaječného bílku. 2. Roztok v první zkumavce zahřejeme k varu. Do druhé přidáme koncentrovanou kyselinu dusičnou. Do třetí 40% roztok hydroxidu sodného a do čtvrté roztok dusičnanu olovnatého. Princip úkolu a závěr: 4

5 Úkol č. 4: Sestavení modelů molekul dipeptidu Ala-Gly, tripeptidu Val-Leu-Thr Pomůcky: molekulární stavebnice 1. Sestavte model molekuly: a) alaninu, glycinu, dipeptidu Ala-Gly b) valinu, leucinu,treoninu, tripeptidu Val-Leu-Thr 2. Napište racionální chemické vzorce dipeptidu a tripeptidu a označte peptidickou vazbu. Princip úkolu a závěr: 5

6 Otázky a úkoly(teorie): Dokažte výpočtem: 1. Kolik g chloridu sodného NaCl a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 g 0,75% roztoku? (0,225 g, 29,775 cm 3 ) 2. Kolik cm 3 koncentrovaného amoniaku NH 3 a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 cm 3 jeho 10% roztoku? 3. Kolik cm 3 koncentrované kyseliny dusičné HNO 3 (ρ=1,5127 g.cm -3 ) a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 cm 3 jejího 45% roztoku(ρ=1, g.cm -3 )? 4. Kolik g hydroxidu sodného NaOH a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 g 10% roztoku? (3 g, 27 cm 3 ) 5. Kolik g síranu měďnatého CuSO 4 a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 g 1% roztoku? (0,3 g, 29,7 cm 3 ) 6. Kolik g hydroxidu sodného NaOH a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 g 40% roztoku? (12 g, 18 cm 3 ) 7. Kolik g dusičnanu olovnatého Pb(NO 3 ) 2 a kolik cm 3 vody potřebujete k přípravě 30 g 5% roztoku? (1,5 g, 28,5 cm 3 ) 8. Co jsou bílkoviny z hlediska chemického? Jakou mají funkci pro organismus? 9. Popiš strukturu bílkovin. Vysvětlete, co znamená pojem denaturace bílkoviny? 6

7 7