14. Fluorescenční mikroskopie
|
|
- Simona Pavlíková
- před 8 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 14. Fluorescenční mikroskopie
2 Fluorescenční mikroskop
3 Rozlišení
4 Abbého podmínka vysoká NA nebo kratší λ nízká NA nebo delší λ
5 Proč mají olejové imerzní objektivy větší rozlišení? Slabý, NA~ 0.25 D~ 8 µm Silný, suchý, NA~0.5 D~ 2 µm Olejová imerze, NA~ 1.3 D~0.4 µm
6 Epifluorescenční mikroskop
7 Vícebarevná mikroskopie Vyžaduje sérii dichroických zrcadel a více nezávislých detektorů vyšší cena Lacoste T D et al. PNAS 2000;97: Optical setup of the multicolor sample-scanning confocal microscope. (a) Excitation arm. Laser excitation guided through a single-mode fiber is reflected by a dichroic mirror (DC1) and focused through an infinity-corrected objective lens (OL) onto the sample (S), which is mounted on a 3D piezo-scanner (PS). A real image of the fluorescence response of this focal spot is formed in the plane of an adjustable pinhole (PH, 630 µm in diameter) used for background rejection. (b) Detection arm of the Axioskop (dual-color). Fluorescence light originating from PH is split by a dichroic mirror (DC2), filtered by a bandpass (BP) or a longpass (LP1), also rejecting the excitation wavelength. A lens (L1) in a 2f-2f configuration is used to focus the light onto two independently adjustable APDs. Their small sensitive areas (200 µm in diameter) function as confocal pinholes. (c) Detection arm of the Axiovert (multicolor). The fluorescence light originating from the pinhole plane is collimated by a lens (L2), long-pass filtered (LP2), dispersed by a prism, and imaged through another lens (L3) onto an ICCD camera. A full emission spectrum is acquired for each scanned pixel by The National Academy of Sciences
8 Vícebarevná mikroskopie Lidský chromozóm 8 je žlutozelený (FITC), všechny ostatní chromozómy jsou obarveny červeně (propidium iodide)
9 Vícebarevná mikroskopie Fluorescenční mikroskopie endoteliálních buněk za použití tří fluoroforů. Červeně jsou označeny mitochondrie, zeleně F-aktin cytoskeletu a modře jádro.
10 Konfokální mikroskop Vzorek proměřujeme bod po bodu, celkový obraz je poté vytvořen v počítači. Výhody - lepší poměr signál/šum - signál je snímán z menšího a lépe definovaného objemu (především v ose z) - snazší možnost dělat řezy - rozlišení v rovině xy je dáno velikostí otvorů vymezující detekovaný objem, a teoreticky může být i větší než v klasickém mikroskopu, ale v praxi je potřeba tyto otvory otevřít poněkud více, abychom detekovali dostatečné množství fotonů, takže výsledné rozlišení bývá zhruba stejné jako v klasickém mikroskopu.
11 Funkční fluorescenční mikroskopie využívá sledování parametrů nezávislých na koncentraci fluoroforu - excitační a emisní spektra - poměrové měření - kinetika dohasínání fluorescence Fura-2 detection of Ca 2+ in HeLa cells
12 FRET Využití poměrového měření k detekci kolokalizace proteinů Kardash et al., Nature Protocols 6, (2011)
13 Fluorescenční videomikroskopie Šíření mezibuněčné vlny Ca2+ z astrocytu do endoteliálních buněk. Intercelulární vlna Ca2+ je vyvolána mechanickou stimulací (šipka) gliové buňky, která se šíří gliovou buňkou a poté do sousedních endoteliálních buněk. Bílá linie označuje rozhraní mezi gliovými a endoteliálními buňkami. Figure 1; Leybaert et al., (1998), Glia, 24, Čas mezi snímky = 0,3 s.
14 FLIM (Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy) Měření dříve prováděné z časových důvodů převážně ve fázové doméně, dnes už běžně i v časové doméně. Problémem je nízký počet detekovaných fotonů z jednoho pixelu (~1000) a často je problém rozlišit 1- a 2-exponenciální dohasínání. Náročné je i vyhodnocování dat.
15 FLIM-FRET Donor - lipid/calciumdependent protein kinase C značená GFP Intenzita Akceptor - IgG specifický pro fosforylovanou formu PKC značený Cy3 Doba života
16 Praktické problémy Vybělování (photobleaching) - molekula fluoresceinu vyzáří fotonů a poté dojde k její fotodegradaci (QY bleach ~ ) - při nižších intenzitách osvětlení k vybělování také dochází, ale pomaleji - vybělování je často fotodynamický proces - vyžaduje světlo a kyslík
17 Jak dosáhnout maximální citlivosti - používáme objektiv s velkou NA a nejmenší zvětšení I fl ~ I il NA obj 4 / M tot 2 - je dobré koupit nejnovější objektiv a vybrat ten s největší transmitancí - používáme filtry s maximální propustností - používáme co nejméně optických elementů - je potřeba naladit zvětšení podle maximálního rozlišení kamery M Max = 3*Velikost pixelu na detektoru/optické rozlišení např.: 3*7 µm/[0.6 *520nm/1.4] = 91X - minimalizujeme vybělování - používáme kameru s maximální kvantovou účinností detektoru Živé buňky - používáním závěrek minimalizujeme poškození světlem - používáme tepelné filtry
18
19 Nanoskopie (STED) y x z S.W. Hell & J. Wichmann (1994), Opt. Lett. 19, 780. x 200 nm Detector y PhaseMod ps 50 ps Depletion (STED) Excitation The stronger the STED beam the narrower the fluorescent spot! S 1 Absorption Fluorescence τ 1 ns fl Stimulated Emission Fluorescence S 0 τ vib p 1 ps I STED [GW/cm 2 ]
20 1.0 Focal spot... probed with 1 molecule 0.5 I Isat 20 I I sat 20 λ STED = 770 nm Fluorescence I STED STED 48 nm 200nm Confocal 254 nm x [nm] V. Westphal & S.W. Hell (2005), Phys. Rev. Lett. 94,
21 Imaging 40 nm fluorescence beads: Confocal STED... just physics! 10 counts/0,3ms counts/0,3ms 89 1µm X Y
22 Imaging protein distribution on cell membrane: SNAP 25...just physics! Confocal: STED:
23 Heavy subunit of neurofilaments in neuroblastoma Confocal STED G. Donnert, et al. (2006), PNAS 103,
24 Max Planck Society STED Microscopy: (a) Confocal Sometimes only resolution STED (b) Pores in a porous membrane marked with a fluorescent dye x y 200nm (c) (d) Fluorescence dye marked nanostructures produced by electron beam lithography in a polymer y x 1µm makes subdiffraction images! V. Westphal, S.W. Hell (2005), Phys. Rev. Lett. 94, V. Westphal, J. Seeger, T. Salditt, S. W. Hell (2005), J. Phys. B 38, S695.
25 STED microscopy - Resolution is not limited by the wavelength of light! - Resolution just depends on the level of fluorescence depletion. - Resolution at the molecular scale is possible with visible light and regular lenses! - Resolution follows a new law; a modification of Abbe s law: x 2n sin λ α 1+ I I sat 1.0 Fluorescence S.W. Hell (2003), Nature Biotech. 21, I>>I Isat sat S.W. Hell (2004), Phys. Lett. A 326, 140. V. Westphal & S.W. Hell (2005), Phys. Rev. Lett. 94,
26 Sharpest focal spot Max Planck Society Validation of square-root resolution law. V. Westphal, S.W. Hell (2005), Phys. Rev. Lett. 94,
27 Shrnutí Fluorescenční mikroskopie - klasická, konfokální Rozlišení je limitováno difrakcí - Abbého podmínka, Rayleighovo kritérium Využití monochromatických zdrojů světla (lasery) a filtrů (kostky) Vícebarevná mikroskopie Selektivní zobrazování Funkční zobrazování - poměrové měření, měření dob života (FLIM) Praktické problémy - autofluorescence, vybělování, degradace biomolekul Nanoskopie - STED (stimulated emission depletion), možnost měření s rozlišením větším, než dovoluje Abbého podmínka
Barevné hry se světlem - co nám mohou říci o biomolekulách?
Barevné hry se světlem - co nám mohou říci o biomolekulách? Martin Kubala Univerzita Palackého v Olomouci Přírodovědecká fakulta, katedra biofyziky Tato prezentace je spolufinancována Evropským sociálním
VíceMetoda Live/Dead aneb využití fluorescenční mikroskopie v bioaugmentační praxi. Juraj Grígel Inovativní sanační technologie ve výzkumu a praxi
Metoda Live/Dead aneb využití fluorescenční mikroskopie v bioaugmentační praxi Juraj Grígel Inovativní sanační technologie ve výzkumu a praxi Co je to vlastně ta fluorescence? Některé látky (fluorofory)
VíceOptická konfokální mikroskopie a mikrospektroskopie. Pavel Matějka
Optická konfokální mikroskopie a Pavel Matějka 1. Konfokální mikroskopie 1. Princip metody - konfokalita 2. Instrumentace metody zobrazování 3. Analýza obrazu 2. Konfokální 1. Luminiscenční 2. Ramanova
VíceFluorescenční mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1 VYUŽITÍ FLUORESCENCE, PŘÍMÁ FLUORESCENCE, PŘÍMÁ A NEPŘÍMA IMUNOFLUORESCENCE, BIOTIN-AVIDINOVÁ METODA IMUNOFLUORESCENCE
VíceBarevné hry se světlem - co nám mohou říci o biomolekulách?
Barevné hry se světlem - co nám mohou říci o biomolekulách? Martin Kubala Univerzita Palackého v Olomouci Přírodovědecká fakulta, katedra biofyziky mkubala@prfnw.upol.cz Vzdělávání středoškolských pedagogů
Více7. Měření fluorescence při excitaci kontinuálním světlem ( steady-state )
7. Měření fluorescence při excitaci kontinuálním světlem ( steady-state ) Steady-state měření Excitujeme kontinuálním světlem, měříme intenzitu emise (počet emitovaných fotonů) Obvykle nedetekujeme všechny
VíceBioimaging rostlinných buněk, CV.2
Bioimaging rostlinných buněk, CV.2 Konstrukce mikroskopu (optika, fyzikální principy...) Rozlišení - kontrast Live cell microscopy Modulace kontrastu (Phase contrast, DIC) Videomikroskopia Nízký kontrast
VíceFluorescenční mikroskopie
Luminiscence jev, kdy látka vysílá do prostoru světlo chemická reakce chemiluminiscence (např. světluška) světlo fotoluminiscence fluorescence (emisní záření jen krátkou dobu po skončení exitačního záření)
VíceODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY
ODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY s názvem KONFOKÁLNÍ MIKROSKOPIE - CEITEC MU II. ČÁST 2 vyhotovené podle 156 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách, v platném znění (dále jen Zákon o VZ) 1. ODŮVODNĚNÍ
VícePrincipy a instrumentace
Průtoková cytometrie Principy a instrumentace Ing. Antonín Hlaváček Úvod Průtoková cytometrie je moderní laboratorní metoda měření a analýza fyzikálních -chemických vlastností buňky během průchodu laserovým
VíceFörsterův rezonanční přenos energie (FRET)
13. FRET Försterův rezonanční přenos energie (FRET) http://www.olympusfluoview.com/applications/fretintro.html Pokud se v blízkosti fluoroforu (donoru) nachází molekula (akceptor), jejíž absorpční spektrum
VíceF l u o r e s c e n c e
F l u o r e s c e n c e Fluorescenční mikroskopie Luminiscence jev, kdy látka vysílá do prostoru světlo chemická reakce chemiluminiscence světlo fotoluminiscence Vyvolávající záření exitační fluorescence
VíceEM, aneb TEM nebo SEM?
EM, aneb TEM nebo SEM? Jiří Šperka Přírodovědecká fakulta, Masarykova univerzita, Brno 2. únor 2011 / Prezentace pro studentský seminář Jiří Šperka (Masarykova univerzita) SEM a TEM 2. únor 2011 1 / 21
VícePokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii
Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1/1 Proč biofyzikální metody? Biofyzikální metody využívají fyzikální principy ke studiu biologických systémů Poskytují kvantitativní
VíceLuminiscence. Luminiscence. Fluorescence. emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) chemicky (chemiluminiscence)
Luminiscence Luminiscence emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence chemicky (chemiluminiscence) teplem (termoluminiscence) zvukem (sonoluminiscence)
VíceLuminiscence. emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence. chemicky (chemiluminiscence)
Luminiscence Luminiscence emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence chemicky (chemiluminiscence) teplem (termoluminiscence) zvukem (sonoluminiscence)
VíceFluorescenční mikroskopie. -fluorescenční mikroskopie -konfokální mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie -fluorescenční mikroskopie -konfokální mikroskopie Fluorescence a fluorofory Schéma konvenčního fluorescenčního mikroskopu -Na fluorescenčně značený vzorek dopadá pouze světlo
VíceKonfokální mikroskop vybavený FLIM modulem pro detekci interakce molekul u živých buněk
Písemná zpráva zadavatele zpracovaná podle ust. 85 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách, ve znění pozdějších předpisů Veřejná zakázka na dodávky, ev. č. 527942 zadávaná podle 21 odst. 1 písm.
VíceOtázky k předmětu Optické spektroskopie 1
Otázky k předmětu Optické spektroskopie 1 Testy jsou zaměřeny především na ověření porozumění probrané látky. Otázky v testech mohou být oproti těm níže uvedeným mírně modifikovány nebo zkráceny. U početních
VíceZAHRADA FLUORESCENČNÍ KORELAČNÍ SPEKTROSKOPIE. LENKA BERANOVÁ, JANA HUMPOLÍČKOVÁ a MARTIN HOF. Obsah
Chem. Listy 3, 5 9 (9) ZAHRAA FLUORESCENČNÍ KORELAČNÍ SPEKTROSKOPIE LENKA BERANOVÁ, JANA HUMPOLÍČKOVÁ a MARTIN HOF Ústav fyzikální chemie J. Heyrovského AV ČR, v. v. i., olejškova 55/3, 8 3 Praha 8 lenka.beranova@jh-inst.cas.cz
VíceFLUORESCENČNÍ MIKROSKOP
FLUORESCENČNÍ MIKROSKOP na gymnáziu Pierra de Coubertina v Táboře Pavla Trčková, kabinet Biologie, GPdC Tábor Co je fluorescence Fluorescence je jev spočívající v tom, že některé látky (fluorofory) po
VíceOptická mikroskopie a spektroskopie nanoobjektů. Nanoindentace. Pavel Matějka
Optická mikroskopie a spektroskopie nanoobjektů Nanoindentace Pavel Matějka Optická mikroskopie a spektroskopie nanoobjektů 1. Optická mikroskopie blízkého pole 1. Princip metody 2. Instrumentace 2. Optická
VíceZoologická mikrotechnika - FLUORESCENČNÍ MIKROSKOPIE
Fluorescence Fluorescence je jev, kdy látka absorbuje ultrafialové záření nebo viditelné světlo s krátkou vlnovou délkou a emituje viditelné světlo s delší vlnovou délkou než má světlo absorbované Emitace
VíceTechnické parametry příloha č. 2 k veřejné zakázce s názvem: Mikroskopy pro Centrum modelových organismů
Technické parametry příloha č. 2 k veřejné zakázce s názvem: Mikroskopy pro Centrum modelových organismů Část 1 veřejné zakázky: Super-rezoluční mikroskop s možností zobrazování živých dějů - invertovaný
VíceVícebarevná průtoková cytometrie v klinice
Vícebarevná průtoková cytometrie v klinice EXBIO seminář 21.5.2014 Miroslav Benko EXBIO Praha a.s. Nad Safinou II Vestec Vícebarevná průtoková cytometrie v klinice EXBIO seminář 21.5.2014 Miroslav Benko
VíceMOLEKULÁRNÍ METODY V EKOLOGII MIKROORGANIZMŮ
MOLEKULÁRNÍ METODY V EKOLOGII MIKROORGANIZMŮ (EKO/MMEM) FLUORESCENČNÍ MIKROSKOPIE A ANALÝZA OBRAZU Použití fluorescenční mikroskopie je založeno na detekci objektů pomocí fluorochromů látek, jež se specificky
Více10/21/2013. K. Záruba. Chování a vlastnosti nanočástic ovlivňuje. velikost a tvar (distribuce) povrchové atomy, funkční skupiny porozita stabilita
Chování a vlastnosti nanočástic ovlivňuje velikost a tvar (distribuce) povrchové atomy, funkční skupiny porozita stabilita K. Záruba Optická mikroskopie Elektronová mikroskopie (SEM, TEM) Fotoelektronová
Více-fluorescenční mikroskopie. -konfokální mikroskopie -multifotonová konfokální mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie -fluorescenční mikroskopie -konfokální mikroskopie -multifotonová konfokální mikroskopie Fluorescence a fluorofory Schéma konvenčního fluorescenčního mikroskopu -Na fluorescenčně
VíceTechnická specifikace předmětu veřejné zakázky
předmětu veřejné zakázky Příloha č. 1c Zadavatel požaduje, aby předmět veřejné zakázky, resp. přístroje odpovídající jednotlivým částem veřejné zakázky splňovaly minimálně níže uvedené parametry. Část
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceViková, M. : MIKROSKOPIE V Mikroskopie V M. Viková
Mikroskopie V M. Viková LCAM DTM FT TU Liberec, martina.vikova@tul.cz Hloubka ostrosti problém m velkých zvětšen ení tloušťka T vrstvy vzorku kolmé k optické ose, kterou vidíme ostře zobrazenou Objektiv
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceZobrazovací soustava pro spektrograf s vícekanálovým Šolcovým filtrem. Daniel Jareš, Vít Lédl, Zdeněk Rail. 2. Varianty zobrazovacích soustav
Zobrazovací soustava pro spektrograf s vícekanálovým Šolcovým filtrem Daniel Jareš, Vít Lédl, Zdeněk Rail Při řešení slunečního spektrografu s vícekanálovým filtrem Šolcova typu byl proveden rozbor možných
VíceLeica-microsystems nově v Pragolab
Leica-microsystems nově v Pragolab Mikroskopy Leica Martin Kopecký Obsah Leica Microsystems a historie Popis klasických mikroskopů Kontrastní metody a základní principy Aplikace pro mikroskopy Konfokální
VícePotlačování šumu v mikroskopických snímcích pomocí adaptivního non-local means filtru
Potlačování šumu v mikroskopických snímcích pomocí adaptivního non-local means filtru Jarní škola 2013 Krušné hory, Mariánská 28. května 2013 Motivace Časosběrná fluorescenční mikroskopie detekce částic
VíceZákladní pojmy. Je násobkem zvětšení objektivu a okuláru
Vznik obrazu v mikroskopu Mikroskop se skládá z mechanické části (podstavec, stojan a stolek s křížovým posunem), osvětlovací části (zdroj světla, kondenzor, clona) a optické části (objektivy a okuláry).
VíceLuminiscence. Luminiscence. Fluorescence. emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) chemicky (chemiluminiscence)
Luminiscence Luminiscence emise světla látkou, která je způsobená: světlem (fotoluminiscence) fluorescence, fosforescence chemicky (chemiluminiscence) teplem (termoluminiscence) zvukem (sonoluminiscence)
VíceVerze: 1.2 Datum poslední revize: 24.9.2014. Nastavení real-time PCR cykleru. Light Cycler 480 Instrument. (Roche) generi biotech
Verze: 1.2 Datum poslední revize: 24.9.2014 Nastavení real-time PCR cykleru Light Cycler 480 Instrument (Roche) generi biotech OBSAH 1. Nastavení teplotního profilu...3 1.1. Nastavení nového teplotního
VíceVýběr fluoroforu. http://www.chem.duke.edu/~wwarren/tissueimaging.php
10. Fluorofory Výběr fluoroforu Citlivost k měřenému parametru - velikost změny fluorescenčního parametru - rozsah použitelnosti (např. při měření ph je dán pk A, při měření vazby K D,...) - selektivita
VíceViková, M. : MIKROSKOPIE II Mikroskopie II M. Viková
II Mikroskopie II M. Viková LCAM DTM FT TU Liberec, martina.vikova@tul.cz Osvětlovac tlovací soustava I Výsledkem Köhlerova nastavení je rovnoměrné a maximální osvětlení průhledného preparátu, ležícího
VíceModerní nástroje pro zobrazování biologicky významných molekul pro zajištění zdraví. René Kizek
Moderní nástroje pro zobrazování biologicky významných molekul pro zajištění zdraví René Kizek 12.04.2013 Fluorescence je fyzikálně chemický děj, který je typem luminiscence. Luminiscence se dále dělí
VíceBi4170 Bi417 Optické kon Optic trastn ké kon trastn a zobrazova a zob razova metody metody
Bi4170 Optické kontrastní a zobrazovací metody Fluorescence a Konfokální mikroskopie Šárka Mašová 1 Podzim 2014 Fluorescenční mikroskopie Excitace a pozorovní fluorescenčních molekul Velmi často používaná:
VíceVyužití a princip fluorescenční mikroskopie
Využití a princip fluorescenční mikroskopie fyzikálně chemický děj Fluorescence typem luminiscence (elektroluminiscence, fotoluminiscence, radioluminiscence a chemiluminiscenci) patří mezi fotoluminiscenční
VíceFluorescenční rezonanční přenos energie
Fluorescenční rezonanční přenos energie Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 1 Přenos excitační energie Přenos elektronové energie se uskutečňuje mechanismy zářivými nebo
VíceOptické spektroskopie 1 LS 2014/15
Optické spektroskopie 1 LS 2014/15 Martin Kubala 585634179 mkubala@prfnw.upol.cz 1.Úvod Velikosti objektů v přírodě Dítě ~ 1 m (10 0 m) Prst ~ 2 cm (10-2 m) Vlas ~ 0.1 mm (10-4 m) Buňka ~ 20 m (10-5 m)
VíceMikroskopie pro biomedicínu (výběr podskupiny bio ) Vladislav Krzyžánek
Mikroskopie pro biomedicínu (výběr podskupiny bio ) 2016 Vladislav Krzyžánek Mikroskopie pro biomedicínu Podskupina katodoluminiscence Petr Schauer Ondřej Lalinský (doktorand) Podskupina bio Vladislav
VícePřístrojové vybavení pro detekci absorpce a fluorescence
Přístrojové vybavení pro detekci absorpce a fluorescence Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 4.10.2007 1 Opakování barevných principů fluorescence http://probes.invitrogen.com/resources/educ
VíceInterakce fluoroforu se solventem
18. Vliv solventu Interakce fluoroforu se solventem Fluorescenční charakteristiky fluoroforu se mohou měnit podle toho, jaké je jeho okolí změna kvantového výtěžku posun excitačního či emisního spektra
VíceBioscience Imaging Centre
Bioscience Imaging Centre (Středisko mikroskopie) zajišťujeme moderní mikroskopické zařízení a softwary pro analýzu obrazu poradíme s plánováním experimentů (histologie, detekce proteinů a mrna) pomůžeme
VíceModerní metody rozpoznávání a zpracování obrazových informací 15
Moderní metody rozpoznávání a zpracování obrazových informací 15 Hodnocení transparentních materiálů pomocí vizualizační techniky Vlastimil Hotař, Ondřej Matúšek Katedra sklářských strojů a robotiky Fakulta
VíceBarevné principy absorpce a fluorescence
Barevné principy absorpce a fluorescence Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 27.9.2007 2 1 Světlo je elektromagnetické vlnění Skládá se z elektrické složky a magnetické
VíceFluorescenční mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie Mgr. Jan Černý PhD. Oddělení vývojové biologie, Katedra fyziologie živočichů, Přírodovědecká fakulta UK v Praze janmartincerny@seznam.cz Klasická světelná mikroskopie sloužila
Více12. Zhášení fluorescence
12. Zhášení fluorescence Dynamické zhášení fluorescence (collisional quenching) Jeli molekula fluoroforu v excitovaném stavu, srážka s jinou molekulou (např. I, O 2, akrylamid) může způsobit nezářivý přechod
VíceNěco o laserech. Ústav fyzikální elektroniky Přírodovědecká fakulta Masarykovy univerzity 13. května 2010
Něco o laserech Ústav fyzikální elektroniky Přírodovědecká fakulta Masarykovy univerzity 13. května 2010 Pár neuspořádaných faktů LASER = Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation Zdroj dobře
VíceFluorescenční mikroskopie
Fluorescenční mikroskopie Luminiscence Emise záření spontánně nastávajícího při přechodu molekuly z excitovaného stavu do základního - Chemiluminiscence excitace je vyvolána chemickou reakcí - Fotoluminiscence
VíceKonstrukční varianty systému pro nekoherentní korelační zobrazení
Konstrukční varianty systému pro nekoherentní korelační zobrazení Technický seminář Centra digitální optiky Vedoucí balíčku (PB4): prof. RNDr. Radim Chmelík, Ph.D. Zpracoval: Petr Bouchal Řešitelské organizace:
VíceBarevné principy absorpce a fluorescence
Barevné principy absorpce a fluorescence Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr Světlo je elektromagnetické vlnění Skládá se z elektrické složky a magnetické složky, které
Více6. Metody molekulové spektroskopie spektrofotometrie, luminiscenční metody
Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti 6. Metody molekulové spektroskopie spektrofotometrie, luminiscenční metody Pavel Matějka pavel.matejka@vscht.cz pavel.matejka@gmail.com
VíceTypy světelných mikroskopů
Typy světelných mikroskopů Johann a Zacharias Jansenové (16. stol.) Systém dvou čoček délka 1,2 m 17. stol. Typy světelných mikroskopů Jednočočkový mikroskop 17. stol. Typy světelných mikroskopů Italský
VíceFluorescence (luminiscence)
Fluorescence (luminiscence) Patří mezi luminiscenční metody fotoluminiscence. Luminiscence efekt, kdy excitované molekuly či atomy vyzařují světlo při přechodu z excitovaného do základního stavu. Podle
VíceVEŘEJNÁ ZAKÁZKA S NÁZVEM: Mikroskopy
ODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY ve smyslu ust. 156 zákona č. 137/2006 Sb., ve znění pozdějších předpisů (dále jen zákon ) a v souladu s ust. 2 až 8 vyhlášky č. č. 232/2012 Sb. (dále jen vyhláška) VEŘEJNÁ ZAKÁZKA
VíceZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ
ZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ (c) -2008, ACH/IM BLOKOVÉ SCHÉMA: (a) emisní metody (b) absorpční metody (c) luminiscenční metody U (b) monochromátor často umístěn před kyvetou se vzorkem. Části
VíceOptoelektronické senzory. Optron Optický senzor Detektor spektrální koherence Senzory se CCD prvky Foveon systém
Optoelektronické senzory Optron Optický senzor Detektor spektrální koherence Senzory se CCD prvky Foveon systém Optron obsahuje generátor světla (LED) a detektor optické prostředí změna prostředí změna
VíceMTP-7-optické materiály. Optické vlastnosti materiálů
MTP-7-optické materiály Optické vlastnosti materiálů Barva, teplota světla Draper point 525 C Žárovka a výbojka - spektra Světlo pod vodou LASER (light amplification by stimulated emission of radiation)
VíceSTUDIUM DOBY ŽIVOTA A SPEKTRÁLNÍCH ZMĚN FLUORESCENCE NANOČÁSTIC V BUNĚČNÉ BIOLOGII
VYSOKÉ UČENÍ TECHNICKÉ V BRNĚ BRNO UNIVERSITY OF TECHNOLOGY FAKULTA ELEKTROTECHNIKY A KOMUNIKAČNÍCH TECHNOLOGIÍ ÚSTAV BIOMEDICÍNSKÉHO INŽENÝRSTVÍ FACULTY OF ELECTRICAL ENGINEERING AND COMMUNICATION DEPARTMENT
VíceVývoj a současnost světelné mikroskopie. úvod do kurzu Bi1301 Botanická mikrotechnika
Vývoj a současnost světelné mikroskopie úvod do kurzu Bi1301 Botanická mikrotechnika Nejlepší způsob jak předpovědět budoucnost je začít v minulosti (McCrone 1988) Začátky světelné mikroskopie - asi před
VíceFluorescenční sondy. Fluorescenční sondy. Indikátory pro anorganické ionty. Fluorescenční sondy pro využití v analytické chemii, medicíně a biologii
Fluorescenční sondy Fluorescenční sondy vnější fluorofory, které se ke sledovaným molekulám, iontům, atd. váží nekovalentní vazbou změna fluorescenční vlastností (intenzita emise, posun emisního maxima,
VícePrůtoková cytometrie
Průtoková cytometrie Princip průtokové cytometrie Použití více fluorescenčních barev - teorie kompenzace Možnosti analýzy dat Některé aplikace průtokové cytometrie Imunologické laboratorní metody 20.4.2009
Vícepříloha C zadávací dokumentace pro veřejnou zakázku malého rozsahu Mikroskopy pro LF MU TECHNICKÉ PODMÍNKY (technická specifikace)
příloha C zadávací dokumentace pro veřejnou zakázku malého rozsahu Mikroskopy pro LF MU TECHNICKÉ PODMÍNKY (technická specifikace) Část 1 Stereomikroskop s digitální kamerou : - Konstrukce optiky CMO (Common
VíceFluorescenční a konfokální mikroskopie
Fluorescenční a konfokální mikroskopie Hana Sehadová, Biologické centrum AVČR, České Budějovice, 2011 Co je to fluorescence? některé látky (fluorofory) po ozáření (excitaci) světlem jsou schopny absorbovat
VíceSpolečná laboratoř optiky. Skupina nelineární a kvantové optiky. Představení vypisovaných témat. bakalářských prací. prosinec 2011
Společná laboratoř optiky Skupina nelineární a kvantové optiky Představení vypisovaných témat bakalářských prací prosinec 2011 O naší skupině... Zařazení: UP PřF Společná laboratoř optiky skupina nelin.
Vícesekundy Femtosekundová spektroskopie, aneb
Femtosekundová spektroskopie, aneb co všechno se může stát za biliontinu sekundy Tomáš Polívka Laboratoř optické spektroskopie Časový vývoj Časové rozlišení ( ) = interval mezi dvěma následujícími obrázky
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceMeasurement of fiber diameter by laser diffraction Měření průměru vláken pomocí laserové difrakce
Progres in textile science and technology TUL Liberec 24 Pokroky v textilních vědách a technologiích TUL v Liberci 24 Sec. 9 Sek. 9 Measurement of fiber diameter by laser diffraction Měření průměru vláken
VícePřístrojové vybavení pro detekci absorpce a fluorescence
Přístrojové vybavení pro detekci absorpce a fluorescence Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 4.10.2007 1 Opakování barevných principů fluorescence http://probes.invitrogen.com/resources/educ
VíceFluorescenční vyšetření rostlinných surovin. 10. cvičení
Fluorescenční vyšetření rostlinných surovin 10. cvičení Cíl cvičení práce s fluorescenčním mikroskopem detekce vybraných rostlinných surovin Princip nepřímé dvojstupňové IHC s použitím fluorochromu Fluorescenční
VíceVýzkumné centrum genomiky a proteomiky. Ústav experimentální medicíny AV ČR, v.v.i.
Výzkumné centrum genomiky a proteomiky Ústav experimentální medicíny AV ČR, v.v.i. Systém pro sekvenování Systém pro čipovou analýzu Systém pro proteinovou analýzu Automatický sběrač buněk Systém pro sekvenování
VíceKUPNÍ SMLOUVA. Fyziologický ústav AV ČR, v.v.i. jako kupující
KUPNÍ SMLOUVA kterou níže uvedeného dne, měsíce a roku v souladu s ustanovením 409 zákona č. 513/1991 Sb., Obchodního zákoníku v platném znění uzavřeli jako prodávající a Fyziologický ústav AV ČR, v.v.i.
VíceČasově rozlišená fluorescence
Časově rozlišená fluorescence Pokročilé biofyzikální metody v experimentální biologii Ctirad Hofr 18.10.2007 5 1 Ustálená a časově rozlišená fluorescence Ustálená fluorescence (Steady State) se měří při
VíceSpektroskopické metody. převážně ve viditelné, ultrafialové a blízké infračervené oblasti
Spektroskopické metody převážně ve viditelné, ultrafialové a blízké infračervené oblasti Elektromagnetické záření Elektromagnetické záření je postupné vlnění elektromagnetického pole složeného z kombinace
VíceStruktura bílkovin očima elektronové mikroskopie
Struktura bílkovin očima elektronové mikroskopie Roman Kouřil Katedra Biofyziky (http://biofyzika.upol.cz) Centrum regionu Haná pro biotechnologický a zemědělský výzkum Přírodovědecká fakulta, Univerzita
VíceMikroskopie a zobrazovací technika. Studentská 1402/ Liberec 1 tel.: cxi.tul.cz
Mikroskopie a zobrazovací technika Oddělení vozidel a motorů Vizualizační technika Sledování dějů ve spalovacím motoru Systém pro přímé sledování dějů ve spalovacím motoru AVL VISIOSCOPE, součástí zařízení
VíceNová zařízení pro měření, kalibraci popř. řízení měření Zařízení konstruovaná pro fluorescenční detektory (FD) projektu PAO Fungující na principu detekce optického žáření Cloud camera (us University of
VíceDODATEČNÉ INFORMACE dle 49 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách
DODATEČNÉ INFORMACE dle 49 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách Zadavatel tímto poskytuje dodavatelům v souladu s 49 odst. 4 zákona o veřejných zakázkách dodatečné informace k veřejné zakázce
Více- Rayleighův rozptyl turbidimetrie, nefelometrie - Ramanův rozptyl. - fluorescence - fosforescence
ROZPTYLOVÉ a EMISNÍ metody - Rayleighův rozptyl turbidimetrie, nefelometrie - Ramanův rozptyl - fluorescence - fosforescence Ramanova spektroskopie Každá čára Ramanova spektra je svými vlastnostmi závislá
VíceÚvod. OLYMPUS Stream Rychlý návod k obsluze
Upozornění * Podívejte se prosím na on-line nápovědu v návodu (help) softwaru, nastavení softwaru, kalibraci systému a podrobná nastavení.. *Tento návod k obsluze obsahuje základní funkce verze SW Start
VíceIntegrita povrchu a její význam v praktickém využití
Integrita povrchu a její význam v praktickém využití Michal Rogl Obsah: 7. Válečkování články O. Zemčík 9. Integrita povrchu norma ANSI B211.1 1986 11. Laserová konfokální mikroskopie Válečkování způsob
VíceObsah přednášky Metody používané v cytologii Metody založené na barvení buněk
Obsah přednášky Metody používané v cytologii Metody založené na barvení buněk Nejčastěji používané mikroskopické techniky Imunofluorescenční značení Příklady a využití Konfokální mikroskopie Princip metody
VíceIZOLACE, SEPARACE A DETEKCE PROTEINŮ I. Vlasta Němcová, Michael Jelínek, Jan Šrámek
IZOLACE, SEPARACE A DETEKCE PROTEINŮ I Vlasta Němcová, Michael Jelínek, Jan Šrámek Studium aktinu, mikrofilamentární složky cytoskeletu pomocí dvou metod: detekce přímo v buňkách - fluorescenční barvení
VíceTechniky mikroskopie povrchů
Techniky mikroskopie povrchů Elektronové mikroskopie Urychlené elektrony - šíření ve vakuu, ovlivnění dráhy elektrostatickým nebo elektromagnetickým polem Nepřímé pozorování elektronového paprsku TEM transmisní
VíceZobrazování s využitím prostorového modulátoru světla
Zobrazování s využitím prostorového modulátoru světla Technický seminář Centra digitální optiky vedoucí balíčku (PB4): prof. RNDr. Radim Chmelík, Ph.D. Řešitelské organizace: Pracovní balíček Zobrazování
VíceLRR/BUBCV CVIČENÍ Z BUNĚČNÉ BIOLOGIE 3. TESTY ŽIVOTASCHOPNOSTI A POČÍTÁNÍ BUNĚK
LRR/BUBCV CVIČEÍ Z BUĚČÉ BILGIE 3. TESTY ŽIVTASCHPSTI A PČÍTÁÍ BUĚK TERETICKÝ ÚVD: Při práci s buňkami je jedním ze základních sledovaných parametrů stanovení jejich životaschopnosti (viability). Tímto
Více1. Teorie mikroskopových metod
1. Teorie mikroskopových metod A) Mezi první mikroskopové metody patřilo barvení biologických preparátů vhodnými barvivy, což způsobilo ovlivnění amplitudy světla prošlého preparátem, který pak byl snadno
VíceSOFTWAROVÉ ŘEŠENÍ SYSTÉMU FLIM S VYUŽITÍM PULSNÍHO LADITELNÉHO LASERU V KONFOKÁLNÍ MIKROSKOPII
VYSOKÉ UČENÍ TECHNICKÉ V BRNĚ BRNO UNIVERSITY OF TECHNOLOGY FAKULTA ELEKTROTECHNIKY A KOMUNIKAČNÍCH TECHNOLOGIÍ ÚSTAV BIOMEDICÍNSKÉHO INŽENÝRSTVÍ FACULTY OF ELECTRICAL ENGINEERING AND COMMUNICATION DEPARTMENT
VíceIMUNOFLUORESCENCE. Mgr. Petr Bejdák Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny a Lékařská fakulta MU
Mgr. Petr Bejdák Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny a Lékařská fakulta MU Luminiscence jev, při kterém látka emituje záření po absorpci excitačního záření (fotoluminiscence)
VícePříloha C. zadávací dokumentace pro podlimitní veřejnou zakázku Mikroskopy pro LF MU 2013. TECHNICKÉ PODMÍNKY (technická specifikace)
Příloha C zadávací dokumentace pro podlimitní veřejnou zakázku Mikroskopy pro LF MU 2013 TECHNICKÉ PODMÍNKY (technická specifikace) 1. část VZ: Laboratorní mikroskop s digitální kamerou a PC Položka č.1
VíceM I K R O S K O P I E
Inovace předmětu KBB/MIK SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066
VíceElektronová mikroanalýza trocha historie
Elektronová mikroanalýza trocha historie 1949 - Castaing postavil první mikrosondu s vlnově disperzním spektrometrem a vypracoval teorii 1956 počátek výroby komerčních mikrosond (Cameca) 1965 - počátek
VíceVYSOKÉ UČENÍ TECHNICKÉ V BRNĚ. Diplomová práce. magisterský navazující studijní obor Biomedicínské a ekologické inženýrství
VYSOKÉ UČENÍ TECHNICKÉ V BRNĚ Fakulta elektrotechniky a komunikačních technologií Ústav biomedicínského inženýrství Diplomová práce magisterský navazující studijní obor Biomedicínské a ekologické inženýrství
VíceTéma: Testy životaschopnosti a Počítání buněk
LRR/BUBV vičení z buněčné biologie Úloha č. 3 Téma: Testy životaschopnosti a Počítání Úvod: Při práci s buňkami je jedním ze základních sledovaných parametrů stanovení jejich životaschopnosti (viability).
Více