UREA/BUN. Kinetické UV stanovení pro močovinu/dusík močoviny Informace pro objednání. Analyzátor(y), na kterých lze soupravu použít

Transkript

1 Informace pro objednání REF CONTENT Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (Kinetické UV stanovení pro močovinu/dusík ([1] 6 x 66 ml, [2] 6 x 43 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 186 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([2] 6 x 118 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 470 ml) Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen (4 x 293 ml) Analyzátor(y), na kterých lze soupravu použít Roche/Hitachi MODULAR P Roche/Hitachi MODULAR P, MODULAR D Roche/Hitachi MODULAR D Kinetic UV assay for urea/urea nitrogen ([1] 6 x 40 ml, [2] 3 x 49 ml) Roche/Hitachi Calibrator f.a.s. (12 3 ml) Kód Precinorm U (20 5 ml) Kód Precinorm U plus (10 x 3 ml) Kód Precipath U (20 5 ml) Kód Precipath U plus (10 x 3 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (20 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 1 (4 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (20 x 5 ml) Kód PreciControl ClinChem Multi 2 (4 x 5 ml) Kód Chimneys Některé analyzátory a soupravy nejsou dostupné ve všech zemích. Pro další systémové aplikace kontaktujte místní zastoupení Roche Diagnostics. Česky Systémové informace Pro analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D: Urea ACN 418, ACN 419; BUN ACN 421, ACN 427. Použití Enzymatické in vitro stanovení pro kvantitativní stanovení močoviny/dusíku močoviny v lidském séru, plazmě a moči na automatizovaných analyzátorech klinické chemie Roche. Souhrn 1,2,3,4,5,6,7,8,9 Stanovení močoviny je nejpoužívanějším testem při hodnocení funkcí ledvin. Tento test je nejčastěji používán spolu se stanovením kreatininu při diferenciální diagnostice prerenálních urémií (dekompenzace srdce, deplece vody, zvýšený katabolismus proteinů), renálních urémií (glomerulonefritida, chronická nefritida, polycystické ledviny, nefroskleróza, tubulární nekróza) a postrenálních hyperurémií (obstrukce močového traktu). ovina je konečným produktem metabolismu bílkovin a aminolyselin. Při katabolismu jsou bílkoviny, štěpeny na jednotlivé aminokyseliny a deaminovány. Z amoniaku, vznikajícího v tomto procesu, je v játrech syntetizována močovina. Jedná se o nejdůležitější metabolickou cestu pro odstraňování nadbytku dusíku z lidského těla. V 1913 Marshall představil metodu, využívající enzym ureázu, pro stanovení močoviny v krvi. Amoniak, uvolňovaný z močoviny ureázou, byl měřen titrací. Od té doby byl vyzkoušen bezpočet dalších technik pro měření vytvářeného amoniaku. Mezi ně patří Berthelotova indofenolová metoda a reakce amoniaku s Nesslerovou reagencií. Následně byly publikovány modifikace od Fawcetta a Scotta a od Chaneye s Marbachem. V roce 1965 Talke a Schubert představili plně enzymatický postup stanovení močoviny spojeným systémem enzymů ureáza/glutamát dehydrogenáza (GLDH). Stanovení Roche je založeno na postupu Talkeho a Schuberta a bylo optimalizováno pro analyzátory, umožňující kinetické (pevný čas) měření. Toto uspořádání poskytuje velký rozsah linearity a značnou stabilitu reagencií. Princip testu Kinetická UV metoda Vzorek a přidání R1 Přidání R2 a zahájení reakce: ovina je hydrolyzována ureázou za vzniku amoniaku a CO 2-3. ureáza močovina + H 2 O 2 NH CO 3 2- Vznikající amoniak reaguje s α ketoglutarátem a NADH v přítomnosti GLDH a vytváří glutamát a NAD +. α ketoglutarát + NH NADH GLDH L glutamát + NAD + + H 2 O Pokles absorbance v důsledku spotřebovávání NADH je měřen kineticky. Reagencie - pracovní roztoky R1 R2 CAPSO a) pufr: 5 mmol/l, ph 9.65; NADH (kvasinky) 0.23 mmol/l; konzervans BICIN b) buffer: 1000 mmol/l, ph 7.6; ureáza (fazole) 120 µkat/l; GLDH (hovězí játra) 15.0 µkat/l; α ketoglutarát 8.3 mmol/l; konzervans a) CAPSO = 3 [cyclohexylamino] 2 hydroxy 1 propansulfonová kyselina b) BICIN = N,N bis(2 hydroxyethyl) glycin Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Zacházení s reagenciemi R1: Připraveno k použití R2: Připraveno k použití Tato souprava vyžaduje použití barevně odlišených komínků, které redukují příjem atmosférického NH3 reagenciemi. Komínky mají být umístěny přímo do odpovídající reagencie: bílý = R1. Komínky mohou být opět použity pro nádobky stejné soupravy. Kvůli zamezení kontaminace reagencie detergentem nebo naředění reagencie vodou není před opětovným použitím povoleno promývat komínky. Komínky se používají ve všech systémech. Uskladnění a stabilita Součásti neotevřené soupravy: Do data exspirace při 2 8 C R1: 4 týdny otevřená a v chlazeném prostoru analyzátoru R2: 4 týdny otevřená a v chlazeném prostoru analyzátoru 1 / 5

2 Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Plazma: Li heparin, Na heparin nebo K EDTA plazma. Nepoužívejte heparin amonný. Stabilita: 10 7 dní při C 7 dní při 2 8 C 1 rok při (-15) (-25) C : odebírejte bez použití konzervans. Stabilita: 10 2 dny při C 7 dní při 2 8 C 4 týdny při (-15) (-25) C Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR: Vzorky moče jsou automaticky ředěny v analyzátoru 0.9% roztokem NaCl nebo destilovanou/deionizovanou vodou. Odpovídající faktor ředění je zahrnut do výpočtu výsledku. Roche/Hitachi analyzátory bez automatického ředění vzorku: Vzorky moče ručně nařeďte 0.9% roztokem NaCl nebo destilovanou/deionizovanou vodou (např ). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem ředění (např. 11). Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" 0.9% NaCl Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro analyzátory. Instrukce, specifické pro jednotlivé analyzátory, vyhledejte v uživatelské příručce. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle SRM c) 909b. /moč S1: 0.9% NaCl S2: C.f.a.s. (Calibrator for automated systems) Frekvence kalibrace 2bodová kalibrace je doporučena každých 42 dní po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality. c) SRM = Standard Reference Material Kontrola kvality /moč Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a limity by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek. Převodní faktory: mg/dl močoviny x = mmol/l močoviny mmol/l močoviny = mg/dl močoviny mg/dl dusík močoviny x = mmol/l močoviny mg/dl močoviny x = mg/dl dusíku močoviny Při použití 24hod. sběru moče jako vzorku, vynásobte výsledek množstvím za 24 hodin a získáte hodnotu v g nebo mmol/24 hodin. Omezení - interference Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty. /plazma Ikterus: 11 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro konjugovaný a nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 1026 µmol/l nebo 60 mg/dl). Hemolýza: 11 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 1000 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 621 µmol/l nebo 1000 mg/dl). Lipémie (Intralipid): 11 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglyceridů je slabá korelace. Amoniak, vznikající v kyvetě při stanovení GLDH interferuje, se stanovením močoviny/bun. Reagencie močovina/bun nesmí být instalovány na analyzátor společně s reagenciemi stanovení GLDH. V moči endogenní ionty amoniaku interferují se stanovením močovina/bun. Zvýšené koncentrace se mohou vyskytovat při zvýšené kyselosti (acidóza). Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference. 12,13 Velká péče musí být věnována předcházení kontaminaci amoniakem vzorků a kalibrátorů, používaným pro metodu močovina/dusík močoviny. Ve velmi vzácných případech gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), může způsobit nespolehlivé výsledky. 14 Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference. 13 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na analyzátorech Roche/Hitachi cobas c je použití speciálních mycích cyklů povinné. Pro další pokyny čtěte nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu (carry over) a příručku pro obsluhu. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry over). Limity a rozmezí Rozsah měření /plazma mmol/l (5 400 mg/dl močoviny nebo mg/dl dusíku Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P/MODULAR D: Vzorky s vyššími koncentracemi změřte použitím funkce rerun. Vzorky nařeďte 1:1.5 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 1.5. Na přístrojích bez automatického opakování (rerunu) vzorek ručně nařeďte 0.9% roztokem NaCl nebo destilovanou/deionizovanou vodou (např ). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem ředění (např. 2). Analyzátor Roche/Hitachi mmol/l ( mg/dl močoviny nebo mg/dl dusíku 2 / 5

3 Na přístrojích bez automatického opakování (rerunu) vzorek ručně nařeďte 0.9% roztokem NaCl nebo destilovanou/deionizovanou vodou (např ). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem ředění (např. 3). Vzorky s koncentracemi nižšími než technický limit 66.6 mmol/l (400 mg/dl močoviny nebo 186 mg/dl dusíku měřte neředěné. Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P: mmol/l ( mg/dl močoviny nebo mg/dl dusíku Vzorky s vyššími koncentracemi změřte použitím funkce rerun. Vzorky ředíme 1:1.5 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků naředěných funkcí rerun jsou automaticky vynásobeny faktorem 1.5. Vzorky s koncentracemi nižšími než technický limit 66.6 mmol/l (400 mg/dl močoviny nebo 186 mg/dl dusíku stanovte pomocí funkce rerun. Vzorky jsou měřeny neředěné. Spodní limity měření Spodní detekční limit testu /plazma Detekční limit: 0.83 mmol/l (5 mg/dl močoviny nebo 2 mg/dl dusíku Detekční limit: 1.0 mmol/l (6 mg/dl močoviny nebo 2.8 mg/dl dusíku. Spodní detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítána jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard SD, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty (močovina) /plazma mmol/l ( mg/dl) 24-h. moč mmol/24 h ( g/24 h), odpovídá mmol/l ( g/dl) Založeno na průměrné diuréze L/24 h Očekávané hodnoty (dusík /plazma Dospělí (18 60 let): mmol/l (6 20 mg/dl) Dospělí (60 90 let): mmol/l (8 23 mg/dl) Děti (< 1 rok): mmol/l (4 19 mg/dl) Kojenec/dítě: mmol/l (5 18 mg/dl) 24h. moč: mmol/24 h (12 20 g/24 h) dusíku močoviny, odpovídající mmol/l ( mg/dl) d) d) Založeno na průměrné diuréze L/24 h Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost ovina Lidské sérum Precinorm U Precipath U Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum N-močoviny Lidské sérum Precitrol N Precitrol A protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (2 alikvoty na sérii, 1 série denně, 10 dní). Byly získány následující výsledky: Lidská moč Kontrola moč Kontrola moč Porovnání metod ovina Porovnání nové kombinace vlnových délek 700/340 nm (y) a staré 405/340 nm (x) použitím kapalných reagencií Roche pro močovinu na analyzátoru Roche/Hitachi 717 poskytlo následující korelaci (mg/dl : y = 1.01x y = 1.02x τ = r = 1.00 Počet naměřených vzorků: 85 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 4.84 až 57.3 mmol/l (29 až 343 mg/dl) močoviny. Porovnání nové kombinace vlnových délek 700/340 nm (y) a staré 376/340 nm (x) použitím kapalných reagencií Roche pro močovinu na analyzátoru Roche/Hitachi 911 poskytlo následující korelaci (mg/dl : y = 0.99x y = 1.00x / 5

4 τ = r = Počet naměřených vzorků: 53 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 15.4 až 271 mmol/l (92 až 1625 mg/dl) močoviny. N močovina Porovnání měření N močoviny použitím reagencií Roche Diagnostics Germany urea liquid a Roche Diagnostics Corporation urea N reagent na analyzátoru Roche/Hitachi 917 poskytlo následující korelaci (mg/dl N : y = 0.992x y = 0.982x τ = r = 1.00 Počet naměřených vzorků: 51 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 3.21 až 51.4 mmol/l (9 až 144 mg/dl) N močoviny. Porovnání měření N močoviny použitím reagencií Roche Diagnostics Germany urea liquid a Roche Diagnostics Corporation urea N reagent na analyzátoru Roche/Hitachi 917 poskytlo následující korelaci (mg/dl N : y = 0.975x y = 0.958x τ = r = Počet naměřených vzorků: 30 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 35.0 až 451 mmol/l (98 až 1262 mg/dl) N močoviny. Odkazy 1 Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical Chemistry Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1976; Marshall EK Jr. A new method for the determination of urea in blood. J Biol Chem 1913;15: Berthelot MPE. Repert Chim Appl 1859; Gentzkow CJ. An accurate method for the determination of blood urea nitrogen by direct Nesslerization. J Biol Chem 1942;143: Fawcett JK, Scott JE. A rapid and precise method for the determination of urea. J Clin Path 1960;13: Chaney AL, Marbach EP. Modified reagents for determination of urea and ammonia. Clin Chem 1962;8: Talke H, Schubert GE. Enzymatische Harnstoffbestimmung im Blut und Serum im optischen Test nach Warburg. Klin Wschr 1965;43: Tietz NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders Company 1995; Neumann U, Ziegenhorn J. Scand J Clin Lab Invest 1977;37:Supplement 147: Abstract Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms, detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007;45(9): Löhr B, El-Samalouti V, Junge W, et al. Reference Range Study for Various Parameters on Roche Clinical Chemistry Analyzers. Clin Lab 2009;55: Wu AHB, ed. Tietz Clinical Guide to Laboratory Tests, 4th edition. St. Louis (MO): Saunders Elsevier 2006; Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Nastavení přístroje Uživatelé analyzátorů Roche/Hitachi MODULAR: Zadejte aplikační parametry prostřednictvím letáku s čárovým kódem. Analyzátor Roche/Hitachi 902 No. <Chemistry> 1 Test Name UREA 2 Assay Code (Mthd) 2 Point Kin. 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 5 5 Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wavelength (SUB) Wavelength (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Large 15 R2 Volume R2 Pos R2 Bottle Size Large 18 R3 Volume 0 19 R3 Pos R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos S1 ABS 0 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor / 5

5 41 A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit Abs. Limit (D/I) Pokles 51 Prozone Limit 0 52 Proz. Limit (Upp/Low) Lower 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) 1 57 Instr. Fact. (b) 0 58 Key setting Data vložená obsluhou Více informací je uvedeno v příslušném návodu k použití určeném pro analyzátor, v odpovídajících aplikačních letácích a metodických listech všech potřebných komponent. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO CONTENT Obsah soupravy Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo smíchání Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 5 / 5