Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky".

Transkript

1 Vyznačuje Roche/Hitachi analyzátory, na kterých lze soupravu použít Kat. č. Nádobka Obsahuje 902 MODULAR P D x 15 ml 2 2 x 15 ml Některé zobrazené analyzátory a soupravy nemusí být dostupné ve všech zemích. Pro další systémové aplikace kontaktujte místní zastoupení Roche Diagnostics. Česky Systémové informace Pro analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P: ACN 217. Použití Imunoturbidimetrická metoda Tina-quant je určena pro in vitro kvantitativní stanovení CRP v lidském séru a plazmě na automatizovaných analyzátorech klinické chemie Roche. Stanovení CRP je užíváno při detekci a hodnocení zánětlivých poruch a souvisejících onemocnění, infekcí a poškození tkání. Vysoce citlivé stanovení CRP může být rovněž použito při odhadu rizika příštích koronárních onemocnění srdce. Pokud se používá jako doplněk k ostatním prováděným laboratorním metodám u akutního koronárního syndromu, může představovat nezávislý indikátor prognózy návratu příhody u pacientů se stabilním koronárním onemocněním nebo akutním koronárním syndromem. Souhrn 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21 C-reaktivní protein je klasický protein akutní fáze odpovědi na zánětlivou reakci. Je syntetizován játry a skládá se z pěti identických polypeptidických řetězců, které vytvářejí pětičetný kruh s molekulovou hmotností daltonů. CRP patří k nejcitlivějším reaktantům akutní fáze a jeho koncentrace prudce roste při zánětlivých procesech. V souhrnu CRP uvádí v činnost systém komplementu, počínaje složkou C1q. CRP se podílí na opsonizaci a fagocytóze napadnutých buněk, ale jeho hlavní úloha spočívá ve vazbě a detoxikaci endogenních škodlivých sloučenin, které vznikají poškozením tkání. Stanovení CRP je používáno pro detekci systémových zánětlivých procesů (mimo jistých typů zánětů jako jsou SLE a Colitis ulcerosa), dále při sledování léčby bakteriální infekce antibiotiky, zjišťování intrauterinních infekcí, provázenou předčasnou amniorrhexií, pro odlišení aktivní a neaktivní formy onemocnění při souběžné infekci, např. u pacientů, trpících SLE nebo Colitis ulcerosa, k terapeutickému sledování průběhu revmatických onemocnění a sledování protizánětlivé léčby, k podchycení výskytu pooperačních komplikací, jako jsou infekce rány, trombóza a pneumonie, a rovněž pro odlišení infekce a rejekce transplantované kostní dřeně. Stanovení senzitivního CRP by mělo být používáno pro časnou detekci infekce u dětí a pro odhad rizika koronárních onemocnění srdce. Množství studií podpořilo závěry, že vysoce senzitivní stanovení CRP může být použito jako marker predikce rizika koronárního onemocnění srdce u zjevně zdravých jedinců a jako indikátor prognózy návratu příhody. Zvýšení hodnot CRP je nespecifické a nemůže být interpretováno bez úplného klinického vývoje. American Heart Association a Centers for Disease Control and Prevention vydaly několik doporučení týkající se použití vysoce senzitivního CRP (hscrp) pro odhad kardiovaskulárního rizika. 21 Stanovení pro odhad rizika nelze provádět, jestliže existuje podezření na infekci, systémový zánět nebo trauma. U pacientů s přetrvávající hladinou hscrp nad 10 mg/l (95.2 nmol/l) bez zjevné příčiny by měly být hledány příčiny mimo kardiovaskulární etiologii. Při použití hscrp pro odhad rizika koronárního onemocnění srdce by měly být výsledky stanoveny u metabolicky stabilního pacienta a porovnávány s předchozími hodnotami. Optimálně by pro odhad rizika měl být použitelný průměr výsledků hscrp, naměřených po dvou týdnech. Screening hscrp u celé dospělé populace není doporučován a hscrp nelze zařadit mezi tradiční faktory kardiovaskulárního rizika. Sledování akutního koronárního syndromu by nemělo být postaveno na jediném stanovení hscrp. Stejně tak použití sekundárních preventivních měření by mělo mít oporu v odhadu celkového rizika a ne se opírat o jediné stanovení hscrp. Řada stanovení hscrp by neměla být používána ke sledování léčby. Způsobů stanovení CRP je vícero a mezi ně patří nefelometrie a turbidimetrie. Metoda Roche CRP je založena na principu částicemi usnadněné imunologické aglutinace. Princip testu 22,23 Částicemi usnadněné imunoturbidimetrické stanovení Vzorek a přidání R1 Přidání R2 a zahájení reakce: Protilátka proti CRP, navázaná na latexových částicích, reaguje s antigenem ve vzorku a vytváří komplex antigen-protilátka. Následná aglutinace je stanovena turbidimetricky. Reagencie - pracovní roztoky R1 TRIS a pufr: 16 mmol/l, ph 7.4; konzervans R2 Latexové částice potažené monoklonální myší protilátkou proti CRP: 0.1 %; glycinový pufr: 50 mmol/l, ph 8.0; konzervans a) TRIS = Tris(hydroxymetyl)-aminometan Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Zacházení s reagenciemi R1: Připraveno pro použití R2: Připraveno k použití. Před umístěním na palubu přístroje musí být všechny nové nádobky promíchány. Nádobku několikrát promíchejte obracením, zabraňte vzniku pěny. Uskladnění a stabilita Součásti neotevřené soupravy: Do data exspirace při 2-8 C R1: 90 dní otevřená v chlazeném prostoru analyzátoru R2: 90 dní otevřená v chlazeném prostoru analyzátoru Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné: Sérum Plazma: Li-/Na-heparin, Na-/K 3 -EDTA nebo citrátová plazma. Uvedené druhy vzorků byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. Stabilita: dní při C 2 měsíce při 2-8 C 3 roky při (-15) (-25) C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Kalibrátory: Preciset Serum proteins, Kat. č , C.f.a.s. (Calibrator for automated systems) Proteins, Kat. č , (pro USA) Kontroly: CRP T Control N, Kat. č , Precinorm Protein, Kat. č , (pro USA); PreciControl ClinChem Multi 1, Kat. č , (pro USA) 0.9% NaCl Celkové vybavení laboratoře , V 19 Česky 1 / 5 Roche/Hitachi

2 Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny, uvedené v dokumentaci pro analyzátory. Instrukce, specifické pro jednotlivé analyzátory, vyhledejte v uživatelské příručce. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle CRM 470 (RPPHS - Reference Preparation for Proteins in Human Serum). S1: 0.9% NaCl S2: Preciset Serum proteins, Cal 2 Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P S1: 0.9% NaCl S2 S6: C.f.a.s. Proteins Vynásobte hodnotu, specifickou pro jednotlivé šarže kalibrátoru C.f.a.s Proteins, uvedenými faktory a získáte standardní koncentrace pro 2bodovou kalibrační křivku: S2: 0.10 Frekvence kalibrace 2bodová kalibrace je doporučena po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Kontrola kvality Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Potřebný materiál". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a limity by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek. Převodní faktory: mg/l x 0.1 = mg/dl mg/dl x 10 = mg/l mg/l x 9.52 = nmol/l mg/dl x 95.2 = nmol/l Omezení - interference Kritérium: Výtěžnost v rozmezí ±10 % počáteční hodnoty. Ikterus: 25 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 60 mg/dl nebo 1030 µmol/l). Hemolýza: 25 Bez významných interferencí do hodnoty H indexu 1000 (přibližná koncentrace hemoglobinu: 1000 mg/dl nebo 621 µmol/l). Lipémie (Intralipid): 25 Bez významných interferencí do hodnoty L indexu 1000 na hladině CRP >5 mg/l (47.6 nmol/l), do hodnoty L indexu 800 na hladině CRP okolo 4 mg/l (38.1 nmol/l) a do L indexu 500 na hladině CRP okolo 2 mg/l (19.0 nmol/l). Mezi L indexem (odpovídá zákalu) a koncentrací triglyceridů je slabá korelace. Revmatoidní faktory <1200 IU/mL neinterferují. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro koncentrace CRP do 1000 mg/l (9520 nmol/l). Léky: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěna žádná interference. 26,27 Léčiva: U pacientů léčených karboxypeniciliny mohou mít získané výsledky významně snížené hodnoty CRP. Ve velmi vzácných případech může gamapatie, především u typu IgM (Waldenströmova makroglobulinémie), způsobit nespolehlivé výsledky. Ačkoliv je stanovení navrženo tak, aby minimalizovalo interference lidských protilátek proti myším protilátkám, mohou vzniknout chybné výsledky u pacientů léčených monoklonálními myšími protilátkami nebo pokud jim byly podány z diagnostických důvodů. Zvýšení hodnot CRP je nespecifické a nemůže být interpretováno bez úplného klinického vývoje. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů v analyzátorech Roche/Hitachi je nezbytné používat speciální mycí cykly. Pro další pokyny čtěte nejnovější verzi Seznamu zamezení přenosu (carry-over) a příručku pro obsluhu. Uživatelé z USA naleznou pokyny pro speciální mycí cykly v dokumentu Special Wash Programming (umístěném na stránce MyLabOnline) a v příručce pro obsluhu. Tam, kde je to vyžadováno, musí být před vydáním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry-over). Rozsah měření Rozsah měření: mg/l ( nmol/l) Je-li koncentrace CRP vyšší než rozsah měření, nařeďte ručně vzorek 0.9% roztokem NaCl nebo sérem bez CRP (např ). Výsledek vynásobte odpovídajícím faktorem ředění (např. 3). Analyzátory Roche/Hitachi MODULAR P Rozsah měření: mg/l ( nmol/l) Vzorky s vyššími koncentracemi se měří pomocí funkce rerun. Vzorky ředíme 1:15 pomocí funkce rerun. Výsledky ze vzorků, naředěných funkcí rerun, jsou automaticky vynásobeny faktorem 15. Očekávané hodnoty Konsenzuální referenční hodnoty pro dospělé: 28,29 IFCC/CRM 470 b Roche mg/dl mg/l nmol/l <0.5 <5.0 <47.6 CDC/AHA doporučují uvedené cut-off body pro hscrp (tercily) pro stanovení kardiovaskulárního rizika: 21,30 hscrp hladina (mg/l) Relat. riziko <1.0 nízké průměrné >3.0 vysoké Pacienti s vyšší koncentrací hscrp trpí častěji výskytem infarktu myokardu a závažnými poruchami krevního oběhu na periférii. 5 95% referenční intervaly pro novorozence a děti: 31 Novorozenci (0-3 týdny): mg/l ( nmol/l) Děti (2 měsíce-15 let): mg/l ( nmol/l) Roche nevyhodnocovalo referenční rozmezí v pediatrické populaci. Sledování koncentrace CRP v průběhu akutní fáze onemocnění je důležité. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Zvýšení hodnot CRP je nespecifické a nemůže být interpretováno bez úplného klinického vývoje. Při použití hscrp pro odhad rizika koronárního onemocnění srdce by měly být výsledky stanoveny u metabolicky stabilního pacienta a porovnávány s předchozími hodnotami. Optimálně by pro odhad rizika měl být použitelný průměr výsledků hscrp, naměřených po dvou týdnech. Stanovení by mělo být porovnáváno s předchozími výsledky. Při použití výsledků pro odhad rizika u pacientů s přetrvávající hladinou hscrp nad 10 mg/l (95.2 nmol/l) by měly být hledány příčiny mimo kardiovaskulární etiologii. Stanovení pro odhad rizika nelze provádět, jestliže existuje podezření na infekci, systémový zánět nebo trauma. 21 b) referenční hodnota v souvislosti se standardizaci podle CRM Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky, získané v různých laboratořích, se mohou lišit. Roche/Hitachi 2 / , V 19 Česky

3 Preciznost Preciznost byla stanovena použitím lidských vzorků a kontrol podle interního postupu s opakovatelností* (n = 21) a mezilehlou precizností** (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Byly získány následující výsledky: Opakovatelnost* Vzorek Průměr SD VK mg/l nmol/l mg/l nmol/l % Control Level Control Level Lidský pool Lidský pool Mezilehlá preciznost** Vzorek Průměr SD VK mg/l nmol/l mg/l nmol/l % Control Level Control Level Lidský pool Lidský pool *opakovatelnost = preciznost v sérii **mezilehlá preciznost = celková preciznost / preciznost mezi sériemi / preciznost mezi dny Analytická senzitivita (spodní detekční limit) Detekční limit: 0.03 mg/l ( g/l) Detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítána jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard SD, opakovatelnost, n = 21). Funkční senzitivita Funkční senzitivita: 0.11 mg/l. Funkční senzitivita je nejnižší koncentrace CRP, která poskytuje opakovaně výsledky s variačním koeficientem mezi sériemi <10 %. Porovnání metod Porovnání stanovení Roche Tina-quant na analyzátoru Roche/Hitachi 917 (y) s komerční, částicemi usnadněnou nefelometrickou metodou (x), poskytlo následující korelaci v lidském séru (mg/l): Passing/Bablok 32 Lineární regrese y = 1.037x y = 1.058x τ = r = SD (md 95) = Sy.x = Počet naměřených vzorků: 51 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 0.11 až mg/l ( nmol/l). Odkazy 1. Henry JB, ed. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Vol II. Philadelphia, Pa: WB Saunders Co, Greiling H, Gressner AM, eds. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed. Stuttgart/New York: Schattauer, 1995: Thomas L, Messenger M. Pathobiochemie und Labordiagnostik der Entzündung. Lab med 1993;17: Young B, Gleeson M, Cripps AW. C-reactive protein: A critical review. Pathology 1991;23: Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, Pa: WB Saunders, Wasunna A, Whitelaw A, Gallimore R, et al. C-reactive protein and bacterial infection in preterm infants. Eur J Pediatr 1990;149: Liuzzo G, Biasucci LM, Gallimore JR, et al. The prognostic value of C-reactive protein and serum amyloid A protein in severe unstable angina. N Engl J Med 1994;331: Kuller LH, Tracy RP, Shaten J, et al. Relation of c-reactive protein and coronary heart disease in the MRFIT nested case control study. Am J Epidem 1996;144: Ridker PM, Glynn RJ, Hennekens CH, et al. C-Reactive Protein Adds to the Predictive Value of Total and HDL Cholesterol in Determining Risk of First Myocardial Infarction; Circulation 1998;97: Ridker PM, Cushman M, Stampfer MJ, et al. Plasma Concentration of C-Reactive Protein and Risk of Developing Peripheral Vascular Disease. Circulation 1998;97: Ridker PM, Cushman M, Stampfer MJ, et al. Inflammation, Aspirin, and the Risk of Cardiovascular Disease in Apparently Healthy Men. N Eng J Med 1997;336(14): Danesh J, Wheeler JG, Hirschfield GM, et al. C-Reactive Protein and Other Circulating Markers of Inflammation in the Prediction of Coronary Heart Disease. N Eng J Med 2004;350(14): Ridker PM, Hennekens CH, Buring JE, et al. C-Reactive Protein and Other Markers of Inflammation in the Prediction of Cardiovascular Disease in Women. N Engl J Med 2000;342(12): Tracy RP, Lemaitre RN, Psaty BM, et al. Relationship of C-Reactive Protein to Risk of Cardiovascular Disease in the Elderly. Arterioscler Thromb Vasc Biol 1997;17: Järvisalo MJ, Harmoinen A, Hakanen M, et al. Elevated Serum C-Reactive Protein Levels and Early Arterial Changes in Healthy Children. Arterioscler Thromb Vasc Biol; August 2002: Almagor M, Keren A, Banai S. Increased C-Reactive Protein Level after Coronary Stent Implantation in Patients with Stable Coronary Artery Disease. American Heart Journal 2003;145 (2): Katritsis D, Korovesis S, Giazitzoglou E, et al. C-Reactive Protein Concentrations and Angiographic Characteristics of Coronary Lesions. Clin Chem 2001;47(5): Beattie MS, Shlipak MG, Liu H, et al. C-Reactive Protein and Ischemia in Users and Nonusers of β-blockers and Statins. Circulation 2003;107: Plenge JK, Hernandez TL, Weil KM, et al. Simvastatin Lowers C-Reactive Protein Within 14 Days. An Effect Independent of Low-Density Lipoprotein Cholesterol Reduction. Circulation 2002;106: Lindahl B, Toss H, Siegbahn A, et al. Markers of Myocardial Damage and Inflammation in Relation to Long-Term Mortality in Unstable Coronary Artery Disease. N Eng J Med 2000;343(16): Pearson TA, Mensah GA, Alexander RW, et al. Markers of Inflammation and Cardiovascular Disease. Application to Clinical and Public Health Practice. A Statement for Healthcare Professionals From the Centers for Disease Control and Prevention and the American Heart Association. Circulation 2003;107: Price CP, Trull AK, Berry D, et al. Development and validation of a particle-enhanced turbidimetric immunoassay for C-reactive protein. J Immunol Methods 1987;99: Eda S, Kaufmann J, Roos W, et al. Development of a new microparticle-enhanced turbidimetric assay for C-reactive protein with superior features in sensitivity and dynamic range. J Clin Lab Anal 1998;12: Use of Anticoagulants in Diagnostic Laboratory Investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB 99.1/Rev. 2 Jan Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Breuer J. Report on the Symposium Drug Effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Konsensuswerte der Deutschen Gesellschaft für Laboratoriumsmedizin, der Deutschen Gesellschaft für Klinische Chemie und des Verbandes der Diagnostica-Industrie e.v. (VDGH). Clin Lab 1995;26: Konsensuswerte der Deutschen Gesellschaft für Laboratoriumsmedizin, der Deutschen Gesellschaft für Klinische Chemie und des Verbandes der Diagnostica-Industrie e.v. (VDGH). Clin Lab 1995;41: Ridker PM. Clinical Application of C-Reactive Protein for Cardiovascular Disease Detection and Prevention. Circulation 2003;107: Schlebusch H, Liappis N, Kalina E, et al. High Sensitive CRP and Creatinine: Reference Intervals from Infancy to Childhood. J Lab Med 2002;26: , V 19 Česky 3 / 5 Roche/Hitachi

4 32. Passing H, Bablok W, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Nastavení přístroje Uživatelé z USA: Doplňující informace o ovládání vyhledejte v aplikačním letáku a dokumentu Special Wash Programming (umístěny na internetové stránce MyLabOnline). Uživatelé analyzátorů Roche/Hitachi MODULAR: Zadejte aplikační parametry prostřednictvím letáku s čárovým kódem. No. <Chemistry> 1 Test Name 2 Assay Code (Mthd) 2 Point End 3 Assay Code (2. Test) 0 4 Reaction Time 10 5 Assay Point Assay Point Assay Point Assay Point Wavelength (SUB) Wavelength (MAIN) Sample Volume R1 Volume R1 Pos R1 Bottle Size Small 15 R2 Volume 0 16 R2 Pos R2 Bottle Size Small 18 R3 Volume R3 Pos R3 Bottle Size Small 21 Calib. Type (Type) Linear 22 Calib. Type (Wght) 0 23 Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos Calib. Conc Calib. Pos S1 ABS 0 36 K Factor K2 Factor K3 Factor K4 Factor K5 Factor A Factor 0 42 B Factor 0 43 C Factor 0 44 SD Limit Duplicate Limit Sens. Limit S1 Abs. Limit (L) S1 Abs. Limit (H) Abs. Limit 0 50 Abs. Limit (D/I) Increase 51 Prozone Limit Proz. Limit (Upp/Low) Upper 53 Prozone (Endpoint) Expect. Value (L) Expect. Value (H) Instr. Fact. (a) Instr. Fact. (b) Key setting Data vložená obsluhou Roche/Hitachi 4 / , V 19 Česky

5 Další informace naleznete v odpovídajícím návodu k použití analyzátoru, v odpovídajících aplikačních letácích a metodických listech všech potřebných komponent. Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 2012, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim , V 19 Česky 5 / 5 Roche/Hitachi