A1C-2. Tina-quant Hemoglobin A1c 2. generace Informace pro objednání. Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít

Transkript

1 Informace pro objednání Tina quant Hemoglobin A1c Gen.2 (150 testů) Systémové ID C.f.a.s. HbA1c (3 2 ml) Kód HbA1c Control N (4 0.5 ml) Kód HbA1c Control P (4 0.5 ml) Kód PreciControl HbA1c norm (4 1 ml) Kód PreciControl HbA1c path (4 1 ml) Kód Hemolyzing Reagent Gen.2 (51 ml)* Systémové ID HbA1c Hemolyzing Reagent pro Tina-quant HbA1c Pouze pro Aplikaci (1000 ml) pro hemolyzát * Hodnota zakódovaná v nastavení přístroje je 45 ml pro započtení mrtvého objemu nádobky. Analyzátory, na kterých lze cobas c pack(y) použít Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/502 Česky Systémové informace Aplikace pro plnou krev - Standardizováno podle IFCC; převoditelné na DCCT/NGSP HB W2: ACN 870 Hemoglobin (Hb) A1 W2: ACN 880 Hemoglobin A1c (HbA1c) RWI2: ACN 890 Poměr ( IFCC; není doporučeno pro vykazování výsledků pacientů) A1CD2: ACN 952 Hemolyzing reagent Aplikace pro hemolyzát - Standardizováno podle IFCC; převoditelné na DCCT/NGSP HB H2: ACN 840 Hemoglobin (Hb) A1 H2: ACN 850 Hemoglobin A1c (HbA1c) RHI2: ACN 860 Poměr ( IFCC; není doporučeno pro vykazování výsledků pacientů) A1CD2: ACN 952 Hemolyzing reagent Použití In vitro test pro kvantitativní měření mmol/mol hemoglobinu A1c (IFCC) a % hemoglobinu A1c (DCCT/NGSP) v plné krvi nebo v hemolyzátu na systémech Roche/Hitachi cobas c. Měření HbA1c slouží k dlouhodobému monitorování glukózy v krvi u nemocných s diabetem mellitus. Tento test je navíc určen jako pomůcka při diagnostikovaném diabetu a rozpoznání pacientů s rizikem rozvoje diabetu. Souhrn 1,2,3,4,5,6,7,8,9 Hemoglobin (Hb) se skládá ze 4 proteinových subjednotek, každá obsahuje část hemu a je červeně zbarveným proteinem v erytrocytech. Jeho hlavní funkcí je transport kyslíku a oxidu uhličitého v krvi. Každá molekula Hb je schopna vázat 4 molekuly kyslíku. Hb se vyskytuje v rozmanitých podskupinách a derivátech. V této heterogenní skupině je HbA1c jedním z glykovaných hemoglobinů, které vznikají připojením různých cukrů na molekulu Hb. HbA1c je vytvářen ve 2 krocích neenzymovou reakcí glukózy s N terminální aminoskupinou β řetězce normálního Hb dospělých (HbA). První krok je reverzibilní a vzniká při něm labilní HbA1c. Toto je přeuspořádáno, aby v druhém reakčním kroku vytvořilo stabilní HbA1c. Relativní množství HbA, přeměněného na stabilní HbA1c, se v erytrocytech zvyšuje podle průměrné koncentrace glukózy v krvi. Přeměna na stabilní HbA1c je omezena životností erytrocytů tj. na přibližně 100 až 120 dnů. V důsledku toho odráží HbA1c průměrnou hodnotu glykemie v uplynulých 2 až 3 měsících. Měření HbA1c slouží k dlouhodobému monitorování glukózy v krvi u nemocných s diabetem mellitus. Hladiny glukózy bližší času mají větší vliv na hladinu HbA1c. 1 Vzájemný vztah mezi HbA1c a průměrnou hodnotou glykemie v uplynulých 2 až 3 měsících byl analyzován v několika studiích. Nedávná studie uvedla následující korelace: IFCC Standardizace (přepočítaná dle odkazu 8) Odhadovaná průměrná glukóza [mmol/l] = HbA1c (mmol/mol) nebo Odhadovaná průměrná glukóza [m] = 2.64 HbA1c (mmol/mol) Standardizace dle DCCT/NGSP 8 Odhadovaná průměrná glukóza [mmol/l] = 1.59 HbA1c (%) nebo Odhadovaná průměrná glukóza [m] = 28.7 HbA1c (%) Riziko diabetických komplikací, jako je diabetická nefropatie a retinopatie, vzrůstá, čím je horší metabolická kontrola. Ve shodě s funkcí indikátoru průměrné glykemie, lze podle HbA1c předpovídat rozvoj diabetických komplikací u diabetiků. 3,5 Pro monitorování dlouhodobé glykemické kontroly obecně stačí testování každé 3 až 4 měsíce. V určitých klinických stavech, jako např. u těhotné diabetičky, nebo při zásadní změně léčby, může být vhodné stanovovat HbA1c ve 2 až 4 týdenních intervalech. 7 Princip testu 10,11,12 Tato metoda používá TTAB* jako detergent v hemolyzační reagencii k eliminaci interference leukocytů (TTAB nelyzuje leukocyty). Předpříprava vzorku odstraňující labilní HbA1c není nutná. Všechny varianty hemoglobinu, které jsou glykované na N terminálním konci β řetězce, a které mají oblasti, rozpoznávané protilátkami, shodné s HbA1c, se měří tímto m. Metabolický stav pacienta s uremií nebo nejrozšířenějšími hemoglobinopatiemi (HbAS, HbAC, HbAE) lze tudíž měřit použitím tohoto. 13,14 *TTAB = Bromid tetradecyltrimetylamonný Hemoglobin A1c Zjištění HbA1c je založeno na turbidimetrickém inhibičním imuno (TINIA) pro hemolyzovanou plnou krev. Napipetování vzorku a přidání R1 (Reagencie s protilátkou) Glykohemoglobin (HbA1c) ve vzorku reaguje s protilátkou proti HbA1c za tvorby rozpustného komplexu antigen protilátka. Jestliže nejsou přítomna na molekule místa pro specifické protilátky proti HbA1c, komplex se nevytváří. Přidání R2 (Reagencie s polyhaptenem) a zahájení reakce: Polyhapteny reagují s nadbytkem protilátek proti HbA1c za tvorby nerozpustného komplexu protilátka polyhapten, který lze měřit turbidimetricky. Hemoglobin Uvolněný hemoglobin v hemolyzovaném vzorku se přemění na derivát s charakteristickým absorpčním spektrem, které se měří bichromaticky během preinkubační fáze (vzorek + R1) výše uvedené imunologické reakce. V důsledku toho není potřebná samostatná reagencie Hb. Definice poměru Konečný výsledek je vyjádřen jako mmol/mol HbA1c nebo a je vypočítaný z poměru HbA1c/Hb: Protokol 1 ( dle IFCC; není doporučeno pro vykazování výsledků pacientů): , V 13.0 Česky 1 / 8

2 HbA1c (%) = (HbA1c/Hb) 100 Protokol 2 ( dle DCCT/NGSP): HbA1c (%) = (HbA1c/Hb) Protokol 3 (mmol/mol HbA1c dle IFCC): HbA1c (mmol/mol) = (HbA1c/Hb) 1000 Reagencie pracovní roztoky R1 R2 Reagencie s protilátkou MES pufr: mol/l; TRIS pufr: mol/l, ph 6.2; protilátka proti HbA1c (ovčí sérum) 0.5 mg/ml; stabilizátory; konzervans (kapalný) Reagencie s polyhaptenem MES pufr: mol/l; TRIS pufr: mol/l, ph 6.2; HbA1c polyhapten: 8 µg/ml; stabilizátory, konzervans (kapalný) R1 je v pozici B a R2 je v pozici C. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Zacházení s reagenciemi Připravena k použití Uskladnění a stabilita A1C 2 Doba skladování při 2 8 C: V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: Hemolyzační reagencie Doba skladování při 2 8 C: Čtěte datum exspirace na štítku cobas c packu. 4 týdny Viz datum exspirace na štítku packu. Při skladování při teplotách pod 3 C může být reagencie zakalená. Zákal nemá vliv na funkci reagencie a zmizí při vyšších teplotách. Z tohoto důvodu se doporučuje vytemperovat reagencie při pokojové teplotě po dobu cca. 10 minut a před použitím řádně promíchat. V analyzátoru při použití a v chlazeném prostoru analyzátoru: 4 týdny Odběr vzorků a příprava Pro odběr a přípravu vzorků používejte pouze vhodné zkumavky nebo odběrové nádobky. Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Venózní nebo kapilární krev s antikoagulans. Jedinými vhodnými antikoagulanty jsou Li heparin, K 2 EDTA, K 3 EDTA a fluorid draselný/na 2 EDTA. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Stabilita: 15 3 dny při C 7 dní při 2 8 C 6 měsíců při (-15) (-25) C Zmrazte pouze jednou. Před použitím vzorky důkladně promíchejte. Příprava hemolyzátu pro Aplikaci pro hemolyzát 1. Ponechte vzorek krve a Hemolyzing Reagent pro Tina quant HbA1c, aby se před použitím vytemperovaly na pokojovou teplotu. 2. Mírně promíchejte vzorek ještě těsně před pipetováním, aby erytrocyty tvořily homogenní směs. Buďte opatrní, zabraňte vytvoření pěny. 3. nařeďte použitím Hemolyzing Reagent pro Tina quant HbA1c (Kat. č ) v poměru 1:101 (1+100) použitím jednoho z následujících pipetovacích schémat. Pipetujte do zkumavky: HbA1c Hemolyzing Reagent pro Tina quant HbA1c 500 µl 1000 µl 2000 µl (pacient nebo kontrola) 5 µl 10 µl 20 µl 4. Promíchejte třepačkou nebo opatrným mícháním. 5. Hemolyzát lze použít po změně barvy roztoku z červené na hnědo zelenou (přibl. 1 2 min). Stabilita hemolyzátu: 15 4 hodiny při C 24 hodin při 2 8 C 6 měsíců při (-15) (-25) C Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) Viz část "Informace pro objednání" Celkové vybavení laboratoře Stanovení Optimálního využití dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Provádění aplikací, které nejsou schváleny Roche, je bez záruky a musí být definováno uživatelem. Aplikace pro plnou krev pro Hb (HB-W2) a HbA1c (A1-W2) cobas c 311 definice testu Hb (HB W2) 1 Point 10 / /376 nm (hemolyzační reagencie) Běžné 5 µl 2 µl 180 µl Snížené 5 µl 2 µl 180 µl Zvýšené 5 µl 2 µl 180 µl cobas c 311 definice testu HbA1c (A1 W2) 2 Point End 10 / /340 nm 2 / , V 13.0 Česky

3 (hemolyzační reagencie) Běžné 5 µl 2 µl 180 µl Snížené 5 µl 2 µl 180 µl Zvýšené 5 µl 2 µl 180 µl cobas c 501/502 definice testu Hb (HB W2) 1 Point 10 / /376 nm (hemolyzační reagencie) Běžné 5 µl 2 µl 180 µl Snížené 5 µl 2 µl 180 µl Zvýšené 5 µl 2 µl 180 µl cobas c 501/502 definice testu HbA1c (A1 W2) 2 Point End 10 / /340 nm (hemolyzační reagencie) Běžné 5 µl 2 µl 180 µl , V 13.0 Česky 3 / 8 Snížené 5 µl 2 µl 180 µl Zvýšené 5 µl 2 µl 180 µl Definice poměru pro mmol/mol HbA1c a výpočet Protokol 1 ( dle IFCC; není doporučeno pro vykazování výsledků pacientů): Zkrácený název RWI2 (890) Rovnice (A1 W2/HB W2) 100 % Protokol 2 ( dle DCCT/NGSP): Zkrácený název RWD2 Rovnice (A1 W2/HB W2) % Protokol 1 je v aplikaci již implementován v aplikaci (ACN 890). Vykazování výsledků pacientů v jednotkách (IFCC) se však nedoporučuje. Běžné jednotky (DCCT/NGSP) lze dosáhnout úpravou aplikace dle protokolu 2. Vzorec (ACN 890) lze upravit patřičným použitím tlačítka Administrator Level/EDIT. Protokol 3 (mmol/mol HbA1c dle IFCC): Další výsledky mmol/mol HbA1c (IFCC) lze automaticky vypočítat z analyzátoru definováním dalšího vypočítaného testu: Typ vzorku měření Název záznamu ITEM Suprnt mm/m HbA1c Gen.2 IFCC RWM2 Rovnice (A1 W2/HB W2) 1000 Tato rovnice musí být v analyzátorech Roche/Hitachi cobas c 311 a Roche/Hitachi cobas c 501/502 zadána do Utility > Calculated Test. Poměr pro HbA1c (mmol/mol HbA1c dle IFCC a dle DCCT/NGSP) se vypočítává automaticky po dohotovení obou testů. Hodnoty se doporučuje vykazovat do jednoho desetinného místa a hodnoty mmol/mol HbA1c bez desetinné čárky, které lze zadat do editovatelného políčka "očekávané hodnoty". Aplikace pro hemolyzát pro Hb (HB H2) a HbA1c (A1 H2) cobas c 311 definice testu Hb (HB H2) 1 Point 10 / /376 nm Běžné 5 µl Snížené 5 µl Zvýšené 5 µl cobas c 311 definice testu HbA1c (A1 H2) 2 Point End 10 / 23 57

4 660/340 nm Běžné 5 µl Snížené 5 µl Zvýšené 5 µl cobas c 501/502 definice testu Hb (HB H2) 1 Point 10 / /376 nm Běžné 5 µl Snížené 5 µl Zvýšené 5 µl cobas c 501/502 definice testu HbA1c (A1 H2) 2 Point End 10 / /340 nm Běžné 5 µl Snížené 5 µl Zvýšené 5 µl Definice poměru pro mmol/mol HbA1c a výpočet Protokol 1 ( dle IFCC; není doporučeno pro vykazování výsledků pacientů): Zkrácený název RHI2 (860) Rovnice (A1 H2/HB H2) 100 % Protokol 2 ( dle DCCT/NGSP): Zkrácený název RHD2 Rovnice (A1 H2/HB H2) % Protokol 1 je v aplikaci již implementován v aplikaci (ACN 860). Vykazování výsledků pacientů v jednotkách (IFCC) se však nedoporučuje. Běžné jednotky (DCCT/NGSP) lze dosáhnout úpravou aplikace dle protokolu 2. Vzorec (ACN 860) lze upravit patřičným použitím tlačítka Administrator Level/EDIT. Protokol 3 (mmol/mol HbA1c dle IFCC): Další výsledky mmol/mol HbA1c (IFCC) lze automaticky vypočítat z analyzátoru definováním dalšího vypočítaného testu: Typ vzorku měření Název záznamu ITEM Suprnt mm/m HbA1c Gen.2 IFCC RHM2 Rovnice (A1 H2/HB H2) 1000 Tato rovnice musí být v analyzátorech Roche/Hitachi cobas c 311 a Roche/Hitachi cobas c 501/502 zadána do Utility > Calculated Test. Poměr pro HbA1c (mmol/mol HbA1c dle IFCC a dle DCCT/NGSP) se vypočítává automaticky po dohotovení obou testů. Hodnoty se doporučuje vykazovat do jednoho desetinného místa a hodnoty mmol/mol HbA1c bez desetinné čárky, které lze zadat do editovatelného políčka "očekávané hodnoty". Kalibrace pro Aplikaci pro plnou krev a pro hemolyzát Zadejte vztažnou hodnotu kalibrátoru, závislou na šarži a na aplikaci. Používejte pouze příslušné C.f.a.s. HbA1c kalibrátory. cobas c Hemolyzing Reagent Gen.2 (51 ml, Kat. č ) musí být dostupná v analyzátoru. Jinak nemůže být kalibrace provedena. Hb Kalibrátory Mód kalibrace HbA1c Kalibrátory Mód kalibrace Frekvence kalibrace S1 S2: C.f.a.s. HbA1c Linear S1 S6: C.f.a.s. HbA1c RCM Hb a HbA1c: plná kalibrace se doporučuje po 29 dnech během skladovací doby po změně šarže reagencií jestliže to vyžaduje proces kontroly kvality Obě (Hb a HbA1c) kalibrujte souběžně. Automatická kalibrace by při selhání kontroly kvality měla být deaktivována. Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle schválené IFCC referenční metody pro zjištění HbA1c v lidské krvi 16,17 a může být převedena na výsledky s návazností na výpočet podle DCCT/NGSP. 4 / , V 13.0 Česky

5 Kontrola kvality pro Aplikaci s plnou krví a pro hemolyzát Ke kontrole kvality použijte kontrolní materiály uvedené v části "Informace pro objednání". Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků (doporučuje se kontrolní měření s každou kazetou) Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet pro Aplikaci s plnou krví a pro hemolyzát Stálý faktor (Instrument faktor) Pro přesnější nelineární HbA1c kalibrační křivku byla ke všem hodnotám kalibrátoru přidána konstanta a kompenzace 0.6 závislá na šarži. Tato kompenzace je již zahrnuta v cílových hodnotách kalibrátoru C.f.a.s. HbA1c pro analyzátor cobas c a na závěr musí být odečtena od výsledků analyzátoru. Zadejte stálý faktor (instrument faktor) absolutního HbA1c (A1 W2 nebo A1 H2) na analyzátorech Roche/Hitachi cobas c takto: Stálý faktor (instrument faktor) pro aplikaci s plnou krví Calibration => Status Screen => Instrument Factor => Instrument Factor Window => HbA1c (A1-W2) => a = 1.0; b = 0.6 => update => okay Stálý faktor (instrument faktor) pro Aplikaci pro hemolyzát Calibration => Status Screen => Instrument Factor => Instrument Factor Window => HbA1c (A1-H2) => a = 1.0; b = 0.6 => update => okay Hb, HbA1c Systémy Roche/Hitachi cobas c automaticky vypočítají koncentraci analytu každého vzorku. Výpočet poměru HbA1c Pro výpočet hodnoty mmol/mol HbA1c (IFCC) a hodnoty (DCCT/NGSP) čtěte, prosím, části Princip testu a Definice poměru pro mmol/mol HbA1c a výpočet v tomto metodickém listu. Omezení - interference pro Aplikaci pro plnou krev a pro hemolyzát 13,14,18,19,20,21,22,23,24 1. Pro diagnostické účely by měly být hodnoty mmol/mol HbA1c (IFCC) a hodnoty (DCCT/NGSP) používány ve spojení s informacemi z dalších diagnostických postupů a klinických nálezů. 2. Test slouží pouze pro precizní a správné mmol/mol HbA1c (IFCC) a ( Individuální výsledky pro koncentrace celkového Hb a HbA1c by se neměly vykazovat. 3. Ze zásady je nezbytné při interpretaci jakýchkoliv výsledků HbA1c od pacientů s variantami Hb dbát opatrnosti. Abnormální hemoglobiny mohou ovlivnit poločas červených krvinek nebo in vivo hodnoty glykace. V těchto případech nereflektují ani analyticky správné výsledky stejnou hladinu glykemické kontroly, která by byla očekávána u pacientů s normálním hemoglobinem. 23 HbA1c nesmí být použito pro diagnózu diabetes mellitus při jakémkoliv podezření na přítomnost varianty Hb (např. HbSS, HbCC nebo HbSC) mající vliv na korelaci mezi hodnotou HbA1c a glykemickou kontrolou. 4. Každá příčina zkrácení životnosti erytrocytů nebo pokles průměrného stáří erytrocytů snižuje dobu, po kterou je erytrocyt vystaven působení glukózy s následným poklesem hodnot mmol/mol HbA1c (IFCC) a (DCCT/NGSP), ačkoliv může dojít ke zvýšení průměrné hladiny glykémie v daném období. Příčinami zkrácení životnosti erytrocytů může být hemolytická anémie nebo jiná hemolytická onemocnění, homozygotní srpkovitá anémie, těhotenství, nedávná výrazná nebo chronická ztráta krve atd. Obdobně mohou nedávné transfúze krve změnit hodnoty mmol/mol HbA1c (IFCC) a ( Při interpretaci výsledků HbA1c u pacientů s těmito stavy je potřeba dbát opatrnosti. V těchto pacientů se HbA1c nesmí používat pro diagnostiku diabetu mellitus. 5. Glykosylovaný HbF není m detekován, jelikož neobsahuje glykosylovaný β řetězec, typický pro HbA1c. HbF se však měří ve celkového Hb, a jako důsledek mohou mít vzorky obsahující větší množství HbF (> 10 %) nižší než očekávané hodnoty mmol/mol HbA1c (IFCC) a ( 14,24 6. Hodnoty mmol/mol HbA1c (IFCC) a (DCCT/NGSP) nejsou vhodné k diagnostice gestačního diabetes Ve velmi vzácných případech rychle se rozvíjejícího diabetes 1. typu mohou být hodnoty HbA1c opožděné ve srovnání s akutním nárůstem v koncentraci glukózy. V takových případech musí být diabetes mellitus diagnostikován na základě koncentrace glukózy v plazmě anebo typických klinických symptomů. 25 Interferenční Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty při rozhodovací úrovni 42 mmol/mol HbA1c (IFCC). Ikterus: 22 Bez významných interferencí do hodnoty I indexu 60 pro konjugovaný a nekonjugovaný bilirubin (přibližná koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu: 1026 µmol/l nebo 60 m). Lipémie (Intralipid): 22 Bez významných interferencí do koncentrace intralipidu 500 m (analyzátory cobas c 501/502) a 400 m (analyzátor cobas c 311). Mezi koncentrací triglyceridů a zákalem je slabá korelace. Glykemie: Bez významných interferencí do hladiny glukózy 55.5 mmol/l (1000 m). Odběr nalačno není nutný. Revmatoidní faktory: Žádná interference revmatoidních faktorů do hladiny 750 IU/mL. Léčiva: Při terapeutických koncentracích nebyla při použití běžných panelů léků zjištěná žádná interference. 26,27 Ostatní: Pro protilátky proti HbA1c použité v této soupravě nebyly zaznamenány křížové reakce s HbA0, HbA1a, HbA1b, acetylovaným hemoglobinem, karbamylovaným hemoglobinem, glykovaným albuminem a labilním HbA1c. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. POTŘEBNÝ KROK Programování speciálního mytí: Při zpracovávání určitých kombinací testů na systémech Roche/Hitachi cobas c je použití speciálních mycích cyklů povinné. Nejnovější verzi seznamu zamezení přenosu mezi vzorky (carry over) lze rovněž nalézt v metodických listech NaOHD-SMS- SmpCln1+2-SCCS. Pro další pokyny čtěte uživatelskou příručku. Analyzátor cobas c 502: Veškeré programování speciálního mytí nezbytné pro zamezení carry over je dostupné přes cobas link, ruční zadávání není potřebné. Tam, kde se to vyžaduje, musí být před vykazováním výsledků provedeno programování speciálního mytí/zamezení přenosu mezi vzorky (carry over). Limity a rozmezí Měřící rozsah Hemoglobin: 4 35 HbA1c: Technická mez je v nastavení přístroje definovaná jako kvůli stálému faktoru (instrument factor) pro HbA1c (b = - 0.6; viz výše kapitolu Výpočet pro Aplikaci pro plnou krev a pro hemolyzát). To odpovídá rozsahu měření mmol/mol HbA1c při typické koncentraci hemoglobinu 13.2 (hodnoty IFCC, odpovídající hodnoty pro DCCT/NGSP: ). Ve vzácných případech označení >Test, které může nastat při použití aplikace pro plnou krev, znovu promíchejte vzorek plné krve a analýzu zopakujte se stejným nastavením. Dolní meze měření Mez detekce testu Hemoglobin: 0.5 HbA1c: 0.1 Typická mez detekce pro poměr HbA1c může být vypočítaná podle dané koncentrace Hb. Považujeme-li za obvyklou koncentraci Hb 13.2, je mez detekce pro poměr HbA1c 8 mmol/mol HbA1c (IFCC) nebo 2.9 % HbA1c ( Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 3 standardní odchylky nad nejnižším standardem (standard SD, opakovatelnost, n = 21). Očekávané hodnoty Protokol 1 (mmol/mol HbA1c dle IFCC): mmol/mol HbA1c , V 13.0 Česky 5 / 8

6 Protokol 2 ( dle DCCT/NGSP): Toto referenční rozmezí bylo získáno měřením 474 dobře popsaných zdravých jedinců bez diabetu mellitus. Hladiny HbA1c vyšší než horní hranice referenčního rozmezí indikují hyperglykémii v průběhu uplynulých 2 až 3 měsíců nebo déle. Podle doporučení American Diabetes Association jsou pro diagnostiku diabetu mellitus vhodné hodnoty nad 48 mmol/mol HbA1c (IFCC) nebo 6.5 ( 25,29 U pacientů s hodnotami HbA1c v rozmezí mmol/mol HbA1c (IFCC) nebo (DCCT/NGSP) existuje riziko rozvoje diabetu. 25,29 Hladiny HbA1c u špatně kontrolovaných diabetiků mohou dosáhnout 195 mmol/mol HbA1c (IFCC) nebo 20 (DCCT/NGSP) a více. Terapeutický zásah se doporučuje u hladin nad 64 mmol/mol HbA1c (IFCC) nebo 8 ( Diabetický pacient s hladinou HbA1c pod 53 mmol/mol HbA1c (IFCC) nebo 7 (DCCT/NGSP) splňuje cíle Americké asociace pro Diabetes. 21,20 Hladiny HbA1c nižší než stanovené referenční rozmezí mohou značit dřívější epizody hypoglykémie, přítomnost variantních Hb nebo zkrácení životnosti erytrocytů. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla zjištěná použitím lidských vzorků a kontrol podle interního protokolu s opakovatelností (n = 21) a mezilehlou precizností (3 alikvoty na sérii, 1 série denně, 21 dní). Získány byly následující výsledky (údaje dle hodnot DCCT/NGSP): Aplikace pro plnou krev: Opakovatelnost Průměr SD Kontrola hladina Kontrola hladina Lidský vzorek Lidský vzorek Mezilehlá preciznost Průměr SD Kontrola hladina Kontrola hladina Lidský vzorek Lidský vzorek Aplikace pro hemolyzát: Opakovatelnost Průměr SD Kontrola hladina Kontrola hladina Lidský vzorek Lidský vzorek Mezilehlá preciznost Průměr SD Kontrola hladina Kontrola hladina Lidský vzorek Lidský vzorek VK % VK % VK % VK % Porovnání metod Hodnoty (DCCT/NGSP) pro vzorky lidské krve, získané na analyzátoru Roche/Hitachi cobas c 501 (y), byly porovnané s hodnotami naměřenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru COBAS INTEGRA 800 (x) a na analyzátoru Roche/Hitachi MODULAR P (x). Aplikace pro plnou krev: x = analyzátor COBAS INTEGRA 800, y = analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 109 y = 0.990x y = 1.003x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.04 až 12.6 % (hodnoty x = analyzátor Roche/Hitachi MODULAR P, y = analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 93 y = 0.984x y = 0.978x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.09 až 13.1 % (hodnoty Kromě toho bylo navíc provedeno porovnání s komerčně dostupnou HPLC metodou. Metoda HPLC byla standardizovaná v souladu s DCCT (Diabetes Control and Complications Trial). 3,4 Metoda HPLC Počet vzorků (n) = 40 y = 0.935x y = 0.924x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.25 až 11.9 % (hodnoty Aplikace pro hemolyzát: x = analyzátor COBAS INTEGRA 800, y = analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 109 y = 1.032x y = 1.027x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.15 až 13.1 % (hodnoty x = analyzátor Roche/Hitachi MODULAR P, y = analyzátor cobas c 501 Počet vzorků (n) = 94 y = 1.000x y = 1.000x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.09 až 13.1 % (hodnoty Kromě toho bylo navíc provedeno porovnání s komerčně dostupnou HPLC metodou. Metoda HPLC byla standardizovaná v souladu s DCCT (Diabetes Control and Complications Trial). 3,4 Metoda HPLC Počet vzorků (n) = 40 y = 0.949x y = 0.964x / , V 13.0 Česky

7 τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.25 až 11.9 % (hodnoty Analytická specifičnost Deriváty Hb Varianty Hb Labilní HbA1c (pre HbA1c), acetyl Hb a karbamyl Hb nemají vliv na výsledky. Vzorky s větším obsahem HbF (> 10 %) mohou poskytovat nižší než očekávané výsledky HbA1c. Upozornění Podle souhlasného stanoviska organizací American Diabetes Association (ADA), European Association for the Study of Diabetes (EASD), International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) a International Diabetes Federation (IDF) by mely být výsledky vykazovány paralelně, jak v mmol/mol HbA1c (IFCC), tak i ( 31 Kromě toho lze vykazovat i průměrnou koncentraci glukózy v krvi, odvozenou z HbA1c, kterou lze vypočítat podle rovnic uvedených v části "Souhrn" tohoto metodického listu. Dřívější hodnoty (IFCC) se nesmí používat kvůli riziku záměny / nesprávné interpretace s hodnotami ( Použití těchto hodnot (IFCC) v této aplikaci je pouze interní operandou. Zákazníky žádáme, aby aplikaci upravili podle souhlasného stanoviska a/nebo místních požadavků. Odkazy 1 Goldstein DE, Little RR, Lorenz RA, et al. Tests of glycemia in diabetes. Diabetes Care 1995;18: Goldstein DE, Little RR. More than you ever wanted to know (but need to know) about glycohemoglobin testing. Diabetes Care 1994;17: The Diabetes Control and Complications Trial Research Group. The effect of intensive treatment of diabetes on the development and progression of long-term complications in insulin-dependent diabetes mellitus. N Engl J Med 1993;329: Santiago JV. Lessons from the diabetes control and complications trial. Diabetes 1993;42: UK Prospective Diabetes Study (UKPDS) group. Intensive blood glucose control with sulfonylureas or insulin compared with conventional treatment and risk of complications in patients with type 2 diabetes (UKPDS 33). Lancet 1998;352: Flückiger R, Mortensen HB. Review: glycated haemoglobins. J Chromatogr 1988;429: Goldstein DE, Little RR, Wiedmeyer HM, et al. Glycated hemoglobin: methodologies and clinical applications. Clin Chem 1986;32:B64-B70. 8 Nathan DM, Kuenen J, Borg R, et al. Translating the A1C assay into estimated average glucose values. Diabetes Care 2008;31: Bunn HF, Gabbay KH, Gallop PM. The glycosylation of hemoglobin: relevance to diabetes mellitus. Science 1978;200: Zander R, Lang W, Wolf HU. Alkaline haematin D-575, a new tool for the determination of haemoglobin as an alternative to the cyanhaemiglobin method. I. Description of the method. Clin Chim Acta 1984;136: Wolf HU, Lang W, Zander R. Alkaline haematin D-575, a new tool for the determination of haemoglobin as an alternative to the cyanhaemiglobin method. II. Standardization of the method using pure chlorohaemin. Clin Chim Acta 1984;136: Little RR, Wiedmeyer HM, England JD, et al. Interlaboratory standardization of measurements of glycohemoglobins. Clin Chem 1992;38: Frank EL, Moulton L, Little RR, et al. Effects of hemoglobin C and S traits on seven glycated hemoglobin methods. Clin Chem 2000;46(6): Chang J, Hoke C, Ettinger B, et al. Evaluation and Interference Study of Hemoglobin A1c Measured by Turbidimetric Inhibition Immunoassay. Am J Clin Pathol 1998;109(3): Data on file at Roche Diagnostics. 16 Kobold U, Jeppsson JO, Duelffer T, et al. Candidate reference methods for hemoglobin A1c based on peptide mapping. Clin Chem 1997;43: Jeppsson JO, Kobold U, Finke A, et al. Approved IFCC reference method for the measurement of HbA1c in human blood. Clin Chem Lab Med 2002;40: Martina WV, Martijn EG, van der Molen M, et al. β-n-terminal glycohemoglobins in subjects with common hemoglobinopathies: relation with fructosamine and mean erythrocyte age. Clin Chem 1993;39: Weykamp CW, Penders TJ, Muskiet FAJ, et al. Influence of hemoglobin variants and derivatives on glycohemoglobin determinations, as investigated by 102 laboratories using 16 methods. Clin Chem 1993;39: American Diabetes Association. Standards of Medical Care for patients with diabetes mellitus. Diabetes Care [Suppl.] 1995;18(1): Sacks BW, Bruns DE, Goldstein DE, et al. Guidelines and recommendations for laboratory analysis in the diagnosis and management of diabetes mellitus. Clin Chem 2002;48: Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986;32: Miedema K. Influence of hemoglobin variants on the determination of glycated hemoglobin. Klin Lab 1993;39: Rohlfing C, Connolly J, England J, et al. Effect of Elevated Fetal Hemoglobin on HbA1c Measurements: Four Common Assay Methods compared to the IFCC Reference Method. Poster Abstract AACC Annual Meeting 2006, Chicago. Clin Chem 2006;52(6) Suppl A International Expert Committee Report on the Role of the A1C Assay in the Diagnosis of Diabetes. Diabetes Care 2009;32(7): Breuer J. Report on the Symposium Drug effects in Clinical Chemistry Methods. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34: Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38: Junge,W, Wilke B, Halabi A, et al. Determination of reference levels in adults for hemoglobin A1c (HbA1c). Poster presentation EUROMEDLAB, Barcelona Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Diabetes Care 2010;33(1): Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Consensus statement on the worldwide standardization of the hemoglobin A1c measurement. American Diabetes Association, European Association for the Study of Diabetes, International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine and International Diabetes Federation Consensus Committee. Diabetes Care 2007;30: Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO následující znaky: GTIN Obsah soupravy Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2016, Roche Diagnostics , V 13.0 Česky 7 / 8

8 Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim 8 / , V 13.0 Česky