Rapid-VIDITEST Adenovirus Resp. (Jednokrokový kazetový test pro in vitro diagnostiku Adenoviru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, 252 42 Jesenice u Prahy, Tel: 261 090 565, Fax: 261 090 566, E-mail: objednavky@vidia.cz, Web: www.vidia.cz POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST Adenovirus Resp. Card je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů adenoviru z nosních výtěrů, výplachů a aspirátů. Test slouží v diagnostice ke stanovení respirační infekce způsobené adenovirem. Pouze pro laboratorní použití. ÚVOD: Přestože infekce dolních cest dýchacích u dětí a dospělých může způsobit celá řada virů, jako jsou virus chřipky typu A a B, respirační syncytiální virus (RSV), viry parainfluenzy 1, 2 a 3, tak adenoviry patří k nejčastějším. Symptomy respiračního onemocnění způsobeného adenovirem se pohybují v rozmezí od příznaků běžného nachlazení po pneumonii, zánět hrtanu a bronchitidu. PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST Adenovirus Resp. Card je jednokrokový barevný imunochromatografický test pro kvalitativní stanovení antigenů adenoviru z nosních vzorků. Na testovacích zónách membrány kazety jsou navázány monoklonální protilátky proti virovým antigenům. V průběhu testování vzorek reaguje s barevným konjugátem (anti-adenovirus monoklonální protilátky), který byl imobilizovaný na membráně. Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými protilátkami, což se ve výsledkové zóně projeví jako barevná linka. Směs pak vzlíná dále po membráně k imobilizovaným protilátkám v kontrolní zóně, kde se vždy na konci testu objeví zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1) že se použil dostatečný objem vzorku, 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku, 3) interní kontrolu reagencií. 1
OBSAH SOUPRAVY: - Testovací kazety (obsahují jednorázové plastové pipety) - Návod k použití - Roztok na ředění vzorků - Odběrové tampony - Testovací zkumavky - Kontrolní tampony s adenovirem resp. - Certifikát kontroly balení POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU: - Nádoba pro sběr vzorků - Jednorázové rukavice - Třepačka nebo vortex - Stopky SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Metoda odběru z nosohltanu pomocí tamponu: - Ohněte tyčinku, aby sledovala křivku nosohltanu. - Vložte tampon nosní dírkou dozadu nosohltanu. - Otočte tamponem několikrát, abyste získali infikované buňky. - Pro získání optimálního vzorku opakujte postup pro druhou nosní dírku. Metoda odsátí z nosohltanu (pomocí odsávacího zařízení nebo sterilního odsávacího katétru): - Nakapejte několik kapek fyziologického roztoku do každé nosní dírky. - Vložte katétr nosní dírkou dozadu nosohltanu. - Jemně odsajte. Rotačním pohybem pomalu vytahujte katétr. - Pro získání optimálního vzorku opakujte postup pro druhou nosní dírku. Vzorek odešlete okamžitě do laboratoře (s narůstajícím časem dochází ke snížení citlivosti testu). Vzorek skladujte a přepravujte při 2 8 C po dobu 8 hodin před testováním. PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte testovací kazetu, vzorky nosního výtěru nebo výplachu a ředícího roztoku vytemperovat na laboratorní teplotu (15-30 C). Neotvírejte obal, dokud nejste připraveni provést test. Zpracování nosních výtěrů: Použijte novou testovací zkumavku nebo lahvičku pro každý vzorek (stěr). Přidejte ředící roztok (15 kapek) do testovací zkumavky nebo lahvičky, vložte tampon s nosním výtěrem a důkladně promíchejte, aby se a získalo co možná nejvíce tekutiny z tampónu. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a použijte ji, jakmile to bude možné. Použijte samostatnou kazetu pro každý vzorek. Dávkujte přesně 4 kapky do okénka pro vzorek (S). Zapněte stopky. Po 10 minutách od dávkování vzorku odečtěte výsledek. 2
Přidejte 15 kapek ředícího roztoku Vložte tampon Nakapejte 4 kapky směsi Zpracování vzorků nosních výplachů a aspirátů: Použijte novou pipetu a testovací zkumavku na každý vzorek. Přidejte vzorek nosního výplachu nebo aspirátu (6 kapek) do testovací zkumavky nebo lahvičky. Přidejte ředící roztok (9 kapek) a smíchejte na třepačce. Vyjměte testovací kazetu ze sáčku a použijte ji, jakmile to bude možné. Použijte samostatnou kazetu pro každý vzorek. Dávkujte přesně 4 kapky do okénka pro vzorek (S). Zapněte časovač. Po 10 minutách od dávkování vzorku odečtěte výsledek. Přidejte 6 kapek nasofaryngeální vzorky Přidejte 9 kapek ředícího roztoku a zamíchejte Nakapejte 4 kapky směsi INTERPRETACE VÝSLEDKŮ: Vzorky se aplikují do oválného okénka označeného S (sample vzorek), výsledky se odečítají v obdélníkovém okénku vprostřed kazety označeném písmenem C (kontrolní zóna) a T (výsledková zóna). Pozitivní Negativní Neplatný Neplatný 3
Negativní: V kontrolní zóně C se objeví pouze jedna zelená linka. Výsledková zóna T zůstane čistá. Adenovirus pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví také červená linka ve výsledkové zóně T. Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně C neobjeví zelená linka bez ohledu na přítomnost červené linky ve výsledkové zóně T. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečná koncentrace vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a opakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. Poznámka k interpretaci výsledku: Intenzita červené barevné linky v místě označeném T závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně tímto testem nelze kvantitativně stanovit množství antigenu ani jeho nárůst v průběhu onemocnění. PLATNOST TESTU: Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka. V testu je použit interní standard. Zelená linka, která se objevuje v kontrolní zóně, je vnitřní kontrolou testu. Potvrzuje dostatečný objem vzorku a správný průběh testu. OMEZENÍ TESTU: - Rapid-VIDITEST Adeno Resp. test pouze indikuje přítomnost Adenoviru ve vzorku (kvalitativní detekci) a měl by být použit pouze pro detekci antigenů adenoviru ve vzorcích z nosohltanu (z výtěru, aspirátu nebo výplachu). Testem nelze stanovit kvantitativní hodnotu ani rychlost nárůstu koncentrace antigenů adenoviru. - Pokud je výsledek testu negativní a klinické symptomy přetrvávají, doporučuje se provedení dodatečného testu za použití jiných klinických metod. Negativní výsledek n nevylučuje možnost respirační infekce způsobené adenovirem. - Tento test slouží pouze k pravděpodobné diagnóze adenovirové infekce. Potvrzení infekce musí být provedeno lékařem poté, co byly vyhodnoceny všechny klinické a laboratorní nálezy. OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY: Adenovirová infekce je rizikem pro každou osobu, ale nejrizikovější je pro pacienty s oslabeným imunitním systémem nebo skrytým respiračním nebo srdečním onemocněním, kde by mohlo dojít k závažným komplikacím vlivem jakékoliv respirační infekce, včetně Adenovirové. 4
ÚČINNOST TESTU: Citlivost a specifita Při srovnání s výsledky imunochromatografického testu (CorisBioConcept) a inmunofluorescenčního testu (Remel) vzkazoval Rapid-VIDITEST Adeno Resp. test vysokou specifitu (> 99%) a také citlivost (> 99%). Křížová reaktivita Rapid-VIDITEST Adeno Resp. byl testován na stanovení křížové reaktivity. Nebyla nalezena žádná křížová reaktivita s běžnými respiračními patogeny, jinými organismy a látkami občas přítomnými ve vzorcích z nosohltanu: - Respirační syncytiální virus - Influenza A - Influenza B SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním uzavřeném obalu buď chlazené nebo při pokojové teplotě (2-30 C). Test je stabilní do data ekspirace uvedeného na obalu. Kazeta musí zůstat v uzavřeném obalu až do doby použití. Nezmrazujte. BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - Pouze pro in vitro diagnostiku - Nepoužívejte po uplynutí expirační doby - Test by měl zůstat v uzavřeném obalu až do doby použití. - Nepoužívejte test, pokud je sáček poškozen. - Dodržujte správnou laboratorní praxi, používejte ochranný oděv, ochranné rukavice, nejezte, nepijte a nekuřte během provádění testu. - Všechny vzorky by měly být považovány za potenciálně nebezpečné a mělo by s nimi být zacházeno stejným způsobem jako s infekčním materiálem. - Odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy. - Test musí být proveden do 2 hodin od otevření zapečetěných sáčků. REFERENCE: BARENFANGER et al., Clinical and Financial Benefits of Rapid Detection of Respiratory Viruses: an Outcomes Study. Journal of Clinical Microbiology. August 2000, Vol 38 No 8, p. 2824-2828. POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Datum expirace Číslo šarže (LOT) Výrobce Poslední revize tohoto návodu: 09/2014 5