II 07212771 190 100 Česky Použití Test vazby pro in vitro kvantitativní zjištění vitaminu B12 v lidském séru a plazmě. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn, označovaný rovněž jako kobalamin, je komplexní organokovová sloučenina, ve které je atom kobaltu v rámci korinového kruhu. Jedná se o ve vodě rozpustný vitamin, který je syntetizován mikroorganismy. Nemůže být syntetizován v lidském těle a velmi vzácně se vyskytuje v produktech rostlinného původu. Hlavními zdroji vitaminu B12 jsou maso, ryby, vejce a mléčné výrobky. 1 Absorpce v gastrointestinálním traktu je závislá na vnitřním faktoru, který je syntetizován žaludečními parietálními buňkami, a na "cubam receptoru" v distálním ileu. Nejčastější příčinou vážného nedostatku vitaminu B12 je nedostatek vnitřního faktoru v důsledku autoimunitní atrofické gastritidy. Nemoc se historicky nazývá "perniciózní anémie", i když mnoho pacientů přichází s převážně neurologickými projevy. Příklady jiných příčin nedostatku vitaminu B12 jsou malabsorpce v důsledku gastrektomie, zánětlivé onemocnění střev nebo dietní nedostatek, např u přísných vegetariánů (vegani). 2 je kofaktorem dvou enzymů, methionin syntázy a methylmalonyl CoA mutázy. 2,3 Methionin syntáza, která se nachází v cytoplazmě, vyžaduje vitamin B12 ve formě methylcobalaminu a katalyzuje přeměnu homocysteinu na methionin, esenciální aminokyselinu. Během tohoto kroku je methylová skupina převedena z methyltetrahydrofolátu na aminokyselinu. 3 Tento enzym spojuje cestu methylace syntézou dárce methylu S adenosyl methioninu a cesty, ve které jsou purin a pyrimidin syntetizovány pomocí generace tetrahydrofolátu. 3 Ve formě 5 deoxyadenosylkobalaminu se vitamin B12 rovněž vyžaduje pro mitochondriální enzym methylmalonyl CoA mutázu, která proměňuje methylmalonyl CoA na sukcinyl CoA. Toto je krok při oxidaci mastných kyselin s lichým počtem uhlíků a katabolismu ketogenních aminokyselin. 3 je proto důležitý pro syntézu DNA, regenerační methionin pro syntézu proteinů a metylaci, jakož i pro rozvoj a počáteční myelinizaci centrálního nervového systému (CNS), a pro zachování normální funkce CNS. 2,3 Nedostatek vitaminu B12 je běžný ve vyspělých zemích, zejména u starších lidí, a největší prevalenci má v chudších populacích. Prevalence obecně narůstá s věkem. 4,5 Nedostatek vitaminu B12 ovlivňuje syntézu červených krvinek, což způsobuje megaloblastovou anémii kvůli abnormální syntéze DNA. 3 Navíc zhoršuje neurologickou funkci, zejména demyelinizaci nervových vláken, zčásti kvůli abnormální metylaci, což vede k periferní neuropatii, demenci, slabým kognitivním funkcím a depresi. 3 Dalšími následky nedostatku nebo vyčerpání vitaminu B12 jsou zvýšené riziko defektů neurální trubice, osteoporóza, cerebrovaskulární a kardiovaskulární onemocnění. 3 Časná diagnóza je kvůli latentní povaze této poruchy a riziku trvalého neurologického poškození zcela zásadní. 3,5 Obecně je primárním testem prováděným pro potvrzení diagnózy deficitu vitaminu B12 měření hladiny vitaminu B12 v séru. 2 Současné publikace naznačují, že k zlepšení specifičnosti diagnózy by se navíc měly stanovit následující biomarkery: foláty, kyselina metylmalonová (MMA), homocystein a holotranskobalamin. 2,5,6,7 Stanovení Elecsys II využívá kompetiční princip testu použitím vnitřního faktoru specifického pro vitamin B12. ve vzorku soutěží s přidaným vitaminem B12, značeným biotinem, o vazebná místa na vnitřním faktoru v komplexu s rutheniovou značkou a). a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Princip testu Princip kompetice. Celková doba stanovení: 27 minut. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 1. inkubace: Inkubací vzorku (15 µl) s předpřípravou 1 vitaminu B12 a předpřípravou 2 vitaminu B12 se vitamin B12 uvolňuje z vazby. 2. inkubace: Při inkubaci předpřipraveného vzorku s rutheniem značeným vnitřním faktorem se vytváří komplex vitamin B12-vazebný protein, jehož množství je závislé na koncentraci analytu ve vzorku. 3. inkubace: Po přidání streptavidinem potažených mikročástic a vitaminu B12, značeného biotinem, jsou obsazena dosud volná vazebná místa na vnitřním faktoru, značeném rutheniovým komplexem, za tvorby rutheniem značeného biotinového komplexu vnitřní faktorvitamin B12. Celý komplex se váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack (M, R1, R2) a přípravné reagencie (PT1, PT2) jsou označeny jako B12 II. PT1 Přípravná reagencie 1 (bílé víčko), 1 nádobka, 4 ml: Dithiotreitol 1.028 g/l; stabilizátor, ph 5.5. PT2 Přípravná reagencie 2 (šedé víčko), 1 nádobka, 4 ml: M R1 R2 Hydroxid sodný 40 g/l; kyanid sodný 2.205 g/l. Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/ml; konzervans. Vnitřní faktor~ru(bpy) (šedé víčko), 1 nádobka, 10 ml: Rutheniem značený rekombinantní vepřový vnitřní faktor 4 µg/l; kobinamid dikyanid 15 µg/l; stabilizátor; albumin lidského séra; fosfátový pufr, ph 5.5; konzervans. ~biotin (černé víčko), 1 nádobka, 8.5 ml: Biotinylovaný vitamin B12 25 µg/l; biotin 3 µg/l; fosfátový pufr, ph 7.0; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Tato souprava obsahuje složky klasifikované v souladu s nařízením (ES) č. 1272/2008 takto: Nebezpečí H290 Mùže být korozivní pro kovy. 1 / 5
II H314 H412 Prevence: P280 Reakce: P303 + P361 + P353 P304 + P340 + P310 P305 + P351 + P338 Způsobuje těžké poleptání kůže a poškození očí. Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky. Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ochranné brýle/obličejový štít. PŘI STYKU S KŮŽÍ (nebo s vlasy): Veškeré kontaminované části oděvu okamžitě svlékněte. Opláchněte kůži vodou/osprchujte. PŘI VDECHNUTÍ: Přeneste osobu na čerstvý vzduch a ponechte ji v klidu v poloze usnadňující dýchání. Okamžitě volejte TOXIKOLOGICKÉ INFORMAČNÍ STŘEDISKO nebo lékaře. PŘI ZASAŽENÍ OČÍ: Několik minut opatrně vyplachujte vodou. Vyjměte kontaktní čočky, jsou-li nasazeny a pokud je lze vyjmout snadno. Pokračujte ve vyplachování. Bezpečnostní značky výrobku se řídí primárně EU GHS. Kontaktní telefon: všechny země: +49-621-7590 Všechny lidské materiály je nutné považovat za potenciálně infekční. Všechny produkty jsou připraveny výhradně z krve dárců, která byla individuálně testována a nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. Použité testovací metody byly schváleny FDA nebo povoleny v souladu s evropskou směrnicí 98/79/ES, Příloha II, Seznam A. Žádné testovací metody však nemohou zcela vyloučit příp. riziko infekce, a proto je nutné s materiálem zacházet opatrně, stejným způsobem, jako se vzorky pacientů. V případě vystavení se riziku, dodržujte nařízení příslušných zdravotnických úřadů. 8,9 U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 84 dní (12 týdnů) 35 dní (5 týdnů) na palubě nebo 60 dní při střídavém skladování v chladničce a v analyzátoru, s celkovým časem na palubě analyzátoru nepřesahujícím 10 x 8 hodin Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Na heparinovaná, Li heparinovaná, K 2 EDTA a K 3 EDTA plazma. Lze použít zkumavky s Li heparinovanou plazmou obsahující separační gel. Kritérium: Sklon 0.9 1.1 + úsek na ose v rámci < ± 2x mez blanku (LoB) + korelační koeficient 0.95. Stabilní 2 hodiny při 15 25 C, 48 hodin při 2 8 C, 56 dní při ( 15) ( 25) C. Zmrazit jen jednou. Stabilita séra ve zkumavkách, obsahujících separační gel: 24 hodin při 2 8 C (viz údaje dodané výrobcem zkumavek). Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Zabraňte hemolýze. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Měření vitaminu B12 by mělo být prováděno na vzorcích séra nebo plazmy odebraných nalačno. Upozornění: Vzorky s extrémně vysokými koncentracemi celkové bílkoviny (např. pacienti trpící Waldenströmovou makroglobulinemií) nejsou pro tuto metodu vhodné, mohou totiž vést k rosolovatění bílkoviny v testovacím kalíšku. Zpracovávání zrosolovatělé bílkoviny může způsobit ukončení testování. Kritická koncentrace bílkovin je závislá na složení jednotlivých vzorků. Rosolovatění bílkoviny bylo pozorováno ve vzorcích (s přídavkem lidského IgG nebo lidského sérového albuminu) s koncentrací celkové bílkoviny > 160 g/l. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 20 25 C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) 07212780190, II CalSet, pro 4 x 1 ml 05618860190, PreciControl Varia, pro 2 x 3 ml každého z PreciControl Varia 1 a 2 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 ml diluentu vzorku nebo 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 ml diluentu vzorku Celkové vybavení laboratoře Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a analyzátory cobas e 411: 11662988122, ProCell, 6 x 380 ml systémový pufr 11662970122, CleanCell, 6 x 380 ml čistící roztok pro měřící celu 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 ml promývací přísada 11933159001, Adapter for SysClean 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakčních nádobek 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: 04880340190, ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu 03023141001, PC/CC Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií 03004899190, PreClean M, 5 x 600 ml systémový čistící roztok 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky 03023150001, WasteLiner, odpadní vaky 03027651001, SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: 2 / 5
II 11298500316, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. : Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle stanovení ( 04745736). Správnost dle standardu WHO 03/178: K posouzení správnosti stanovení Elecsys II byla provedena studie použitím mezinárodního standardu 03/178 Světové zdravotnické organizace pro vitamin B12. 10 Na 16 přístrojích byly použité 2 šarže reagencií. Průměrná výtěžnost cílové hodnoty WHO IS 03/178 (480 pg/ml) byla 102 %. Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Varia. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek (buď v pmol/l nebo pg/ml). Převodní faktory: pmol/l x 1.36 = pg/ml pg/ml x 0.738 = pmol/l Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikterem (bilirubin 1112 µmol/l nebo 65 mg/dl), hemolýzou (Hb 0.025 mmol/l nebo 0.04 g/dl), lipémií (triglyceridy 17.1 mmol/l nebo 1500 mg/dl), biotinem ( 205 nmol/l nebo 50 ng/ml), IgG 28 g/l, IgA 16 g/l a IgM 10 g/l. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty u vzorků > 200 pg/ml a ± 20 pg/ml u vzorků 200 pg/ml. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorována do koncentrace 1500 IU/mL. In vitro testy byly prováděny na 16 běžně užívaných lécích. Nebyla zjištěna žádná interference. Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Protože se vnitřní faktor běžně používá jako vazebný protein v séru stanovení vitaminu B12, mohou protilátky proti vnitřnímu faktoru (které jsou běžné v perniciozní anémii) vést ke zvýšeným naměřeným hodnotám vitaminu B12. 2,11,12 Stanovení Elecsys II slouží k zamezení interference kvůli protilátkám proti vnitřnímu faktoru. 13 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Upozornění: Přítomnost komplexů imunoglobulin-vitamin B12 může způsobit nečekaně vysoké hodnoty vitaminu B12. 14,15 Limity a rozmezí Měřící rozsah 50.0 2000 pg/ml nebo 36.9 1476 pmol/l (definováno mezí blanku a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí blanku jsou vykazovány jako < 50.0 pg/ml nebo < 36.9 pmol/l. Hodnoty nad měřícím rozsahem jsou vykazovány jako > 2000 pg/ml nebo > 1476 pmol/l. Dolní meze měření Mez blanku (LoB), mez detekce (LoD) a mez stanovitelnosti (LoQ) Mez blanku = 50 pg/ml (36.9 pmol/l) Mez detekce = 100 pg/ml (73.8 pmol/l) Mez stanovitelnosti = 150 pg/ml (111 pmol/l) s přípustnou nepřesností 20 % Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17 A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n 60 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95 %. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 %). Mez stanovitelnosti je definovaná jako nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze přesně kvantifikovat s přípustnou nepřesností 20 %. Měřena byla použitím vzorků vitaminu B12 s nízkými koncentracemi. Ředění Vzorky s koncentrací vitaminu B12 nad měřícím rozsahem lze naředit ručně 1:2 použitím Diluent Universal. Koncentrace ředěného vzorku musí být > 738 pmol/l nebo > 1000 pg/ml. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění 2. Upozornění: Po naředění se lze setkat s nelinearitou závislou na vzorcích u vzorků s hladinou analytu pod měřícím rozsahem. Jelikož Diluent Universal může obsahovat nízké hladiny endogenního vitaminu B12, doporučuje se provádět studie linearity použitím poolu séra se známou koncentrací analytu. Vzorky mimo měřící rozsah lze naředit v poměru 1:2 použitím Diluent Universal; vliv koncentrace endogenního vitaminu B12 je při těchto hladinách zanedbatelný. Očekávané hodnoty Jelikož se projevují odlišnosti s ohledem na populaci a způsob stravování, je doporučeno, aby si normální rozmezí stanovovala každá laboratoř po vhodné období a statisticky vyhodnotila signifikantní počet stanovení před zařazením klinického hodnocení k výsledku testu. Hodnoty zobrazené níže byly prováděny na vzorcích zdravé populace, použitím stanovení Elecsys II. Výpočet je založen na souboru 135 sér (68 mužů, 67 žen). Věkové rozmezí bylo mezi 20 až 78 lety. Těhotné ženy byly vyloučeny. Referenční populace byla vybrána podle normálních hodnot homocysteinu. N Medián Rozmezí (2.5.-97.5. percentil) pg/ml pmol/l pg/ml pmol/l 135 425 314 197-771 145-569 Tyto hodnoty by měly být brány jen jako vodítko. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. 3 / 5
II Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, poolovaného lidského séra a kontrol v protokolu (EP5 A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 pg/ml pg/ml % pg/ml % Lidské sérum 1 176 8.86 5.0 12.7 7.2 Lidské sérum 2 405 13.0 3.2 17.5 4.3 Lidské sérum 3 960 19.7 2.1 31.0 3.2 Lidské sérum 4 1230 27.4 2.2 46.4 3.8 Lidské sérum 5 1940 40.9 2.1 72.6 3.7 PreciControl Varia1 447 12.2 2.7 18.6 4.2 PreciControl Varia2 934 20.2 2.2 38.4 4.1 Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Lidské sérum 1 130 6.54 5.0 9.37 7.2 Lidské sérum 2 299 9.59 3.2 12.9 4.3 Lidské sérum 3 708 14.5 2.1 22.9 3.2 Lidské sérum 4 908 20.2 2.2 34.2 3.8 Lidské sérum 5 1432 30.2 2.1 53.6 3.7 PreciControl Varia1 330 9.00 2.7 13.7 4.2 PreciControl Varia2 689 14.9 2.2 28.3 4.1 pg/ml pg/ml % pg/ml % Lidské sérum 1 176 5.84 3.3 9.14 5.2 Lidské sérum 2 407 8.24 2.0 12.7 3.1 Lidské sérum 3 1010 13.2 1.3 21.1 2.1 Lidské sérum 4 1230 19.8 1.6 28.8 2.3 Lidské sérum 5 1890 29.8 1.6 41.5 2.2 PreciControl Varia1 448 7.16 1.6 15.3 3.4 PreciControl Varia2 917 12.0 1.3 27.8 3.0 Lidské sérum 1 130 4.31 3.3 6.75 5.2 Lidské sérum 2 300 6.08 2.0 9.37 3.1 Lidské sérum 3 745 9.74 1.3 15.6 2.1 Lidské sérum 4 908 14.6 1.6 21.3 2.3 Lidské sérum 5 1395 22.0 1.6 30.6 2.2 PreciControl Varia1 331 5.28 1.6 11.3 3.4 PreciControl Varia2 677 8.86 1.3 20.5 3.0 Porovnání metod a) Porovnání stanovení Elecsys (kalibrováno CalSet II; x) a stanovení Elecsys II (kalibrováno II CalSet; y) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (pg/ml): Počet naměřených vzorků: 100 y = 0.952x + 15.1 y = 0.957x + 11.6 τ = 0.977 r = 0.999 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 69 až 1890 pg/ml (51 až 1395 pmol/l). b) Porovnání stanovení Elecsys II (y) a komerčně dostupné metody (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (pg/ml): Počet naměřených vzorků: 106 y = 0.923x + 4.90 y = 0.881x + 27.6 τ = 0.952 r = 0.993 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 182 až 1797 pg/ml (134 až 1326 pmol/l). c) Porovnání stanovení Elecsys II na analyzátoru cobas e 601 (y) a stanovení Elecsys II na analyzátoru cobas e 411 (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (pg/ml): Počet naměřených vzorků: 117 y = 1.01x - 2.77 y = 1.01x + 3.22 τ = 0.933 r = 0.995 Koncentrace vzorků byly v rozmezí 56 až 1887 pg/ml (41 až 1393 pmol/l). Analytická specifičnost Byly zjištěny následující křížové reaktivity, testováno s koncentrací vitamin B12 129 pg/ml a 550 pg/ml. Křížový reaktant Max. testovaná koncentrace ng/ml Křížová reaktivita % Kobinamid dikyanid 210 0.003 Odkazy 1 Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and Assessment of Clinical Laboratory Results; 1st Edition, Frankfurt/Main: TH-Books- Verl.-Ges.,1998:424-431. 2 Stabler SP. deficiency. N Engl J Med 2013;368:149-160. 3 Allen LH. Vitamin B-12. Adv Nutr 2012;3(1):54-55. doi: 10.3945/an.111.001370. Epub 2012 Jan 5. 4 Allen LH. How common is vitamin B-12 deficiency? Am J Clin Nutr 2009;89(2):693S-696S. Epub 2008 Dec 30. 4 / 5
II 5 Chatthanawaree W. Biomarkers of cobalamin (vitamin B12) deficiency and its application. J Nutr Health Aging 2011 Mar;15(3):227-313. 6 Yetley EA, Pfeiffer CM, Phinney KW, et al., Biomarkers of vitamin B-12 status in NHANES: a roundtable summary. Am J Clin Nutr 2011 Jul;94(1):313S-321S. 7 Hvas AM, Nexo E. Diagnosis and treatment of vitamin B12 deficiency - an update. Haematologica 2006;91(11):1506-1512. 8 Occupational Safety and Health Standards: bloodborne pathogens. (29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register. 9 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 10 Thorpe SJ, Heath A, Blackmore S, et al. International Standard for serum vitamin B12 and serum folate: international collaborative study to evaluate a batch of lyophilised serum for B12 and folate content. Clin Chem Lab Med 2007;45(3):380-386. 11 Yang DT, Cook RJ. Spurious elevations of vitamin B12 with pernicious anemia. N Engl J Med 2012;366:1742-1743. 12 Carmel R, Agrawal YP. Failures of cobalamin assays in pernicious anemia. N Engl J Med 2012;367:385-386. [Erratum, N Engl J Med 2012;367:976.] 13 Schilling KA, Wiesgigl M. The Elecsys assay is not affected by anti-intrinsic factor antibodies. Clin Chem Lab Med 2013 Jun 29;51(11):e251-e252. 14 Jeffery J, Millar H, MacKenzie P, et al. An IgG complexed form of vitamin B12 is a common cause of elevated serum concentrations. Clin Biochem 2010 Jan;43(1-2):82-88. doi: 10.1016/j.clinbiochem.2009.08.022. Epub 2009 Sep 8. 15 Bowen RA, Drake SK, Vanjani R, et al. Markedly increased vitamin B12 concentrations attributable to IgG-IgM-vitamin B12 immune complexes. Clin Chem 2006;52(11):2107-2114. 16 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO 15223 1. GTIN Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. 2015, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com 5 / 5