Kyselina myristová, poměr vybraných mastných kyselin a jejich význam pro diagnostiku sepse

Transkript

1 Kyselina myristová, poměr vybraných mastných kyselin a jejich význam pro diagnostiku sepse --- (průběžná data) Roman Zazula Miroslav Průcha František Pehal Martin Müller Michal Moravec Tomáš Freiberger Kseniya Dryahina Tomáš Nejtek ClinicalTrials.gov Identifier: NCT

2 Kyselina myristová, poměr vybraných mastných kyselin a jejich význam pro diagnostiku sepse O čem je řeč?

3 Proč? - východiska 6 metabolitů Kyselina myristová Sensitivita 1,0!! Specificita 0,95

4 Proč? - východiska United States Patent Patent Number: 5,780,237 Bursten et al. Date of Patent: Jul. 14, 1998 SEPSIS, ADULT RESPIRATORY DISTRESS SYNDROME, AND SYSTEMIC INFLAMMATORY RESPONSE SYNDROME DIAGNOSTIC Inventors: Stuart L. Bursten. Snoqualrnie: David A. F ederighi. Kirkland. both of Wash. Assignee: Cell Therapeutics, Inc.. Seattle. Wash. SE 0.75 SP 0.88 Quinlan et al.. Free Rad. Res vol. 20. No. 5. pp Linoleic Acid and Protein Thiol Changes Suggestive of Oxidative Damage in the Plasma of Patients with Adult Respiratory Distress Syndrome

5 Kazuistika - hledáme nové ukazatele sepse? senzitivita, specificita, statimová dostupnost a přijatelná cena

6 Cíl originální studie a metodika Pilotní studie korelace kyseliny myristové a poměru vybraných MK k diagnóze sepse, asociace sérových koncentrací s patogeny a ložisky infekce. Následná analýza prospektivně zařazovaných pacientů a jejich klinicko/laboratorních dat dle protokolu, stanovení kyselin během prvních 5 dnů po stanovení diagnózy sepse tandemem GC/MS orig. metodikou. Pracoviště: Anesteziologicko-resuscitační klinika 1. LF UK a Thomayerova nemocnice OKBHI Nemocnice Na Homolce Praha Genetická laboratoř CKTCH Brno Ústav fyzikální chemie J. Heyrovského AV ČR Praha ÚVI 1. lékařské fakulty Univerzita Karlova Podpořeno MZ ČR RVO Thomayerova nemocnice TN, ClinicalTrials.gov Identifier: NCT Etická komise

7 Průběžné výsledky pilotní studie popisná statistika myristate linoleate+oleate/palmitate Kontrolní skupina zdravých jedinců: poděkování: prof. MUDr. Josef Hyánek, DrSc.

8 Průběžné výsledky studie a závěr Kyselina myristová, CRP a PCT Závěr Kyselina myristová se aktuálně jeví jako nadějný další ukazatel v diagnostice sepse. Poměry dalších sledovaných MK v souboru odpovídají patentu. U septických pacientů převyšuje poměr stanovenou cut-off hodnotu 1.25, stejnou jsme zjistili v kontrolní skupině.

9 Diskuse Preanalytická fáze Stabilita nezamražených a zamražených vzorků? Nasycené a nenasycené MK Analytická fáze - původní metodika: - derivatizace ethyl-chloroformátem vlastní vypracovaný postup R 1 - COOH + Cl-COOC 2 H 5 R 1 -COOC 2 H 5 + HCl + CO 2 - validace - dva druhy uspořádání GC/MS: kvadrupolóvé a iontová past - validováno pro GC analýzu Hladiny v předchorobí pacientů Koncentrace v lipidech membrány erytrocytů? Původ a role kyseliny myristové LPS?, endogenní metabolit?, produkt MO? Součást biologických membrán? Hydrofobní kotva signálních proteinů v buněčných membránách Metabolismus MK v zánětlivá kaskádě? Význam lipidů v sepsi Nová metabolomická studie Cambiaghi et al., Scientific Reports 2017 Characterization of a metabolomic profile associated with responsiveness to therapy in the acute phase of septic shock Predikce klinického vývoje? J. L. García-Giménez et al., Scientific Reports 2017 A new mass spectrometry-based method for the quantifcation of histones in plasma from septic shock patients H2B, H3 další nové ukazatele s vysokou SE a SP?

10